全 文 ：人参四逆汤抗休克作用的有效组分成分分析
徐雅娟 1* ,宋风瑞 2 ,赵洪峰 1 ,王　勇2 ,司云珊1 ,徐东铭 1

( 1. 吉林省中医中药研究院 ,吉林 长春　 130021;　 2. 中国科学院长春应用化学研究所 ,吉林 长春　 130021)
摘　要: 目的　分析人参四逆汤抗失血性休克作用的提取组分 S-1和 S-7的组成成分。 方法　结合硅胶色谱柱分
离 ,利用 ESI /M Sn、 M ALDI-TOF /MS等技术分析鉴定 S-1和 S-7的化学成分。结果　从人参四逆汤水煎液的抗休
克作用的有效组分 S-7中分析和鉴定了人参皂苷 -Ra1、 -Ra2、 -Rb1、 -Rb2、 -Rb3、 -Rc、 -Rd、 -Re、 -Rg1、 -Rg2、 -Rg3、 -Rf
等 12种人参皂苷 ;从有效组分 S-1中检出下列二萜生物碱成分: 苯甲酰次乌头碱油酸酯 ( 14-benzoylh ypaconine-8-
linoleate, HAL )、苯甲酰去氧乌头碱油酸酯 ( 14-benzoy ldeoxyaconine-8-oleate, HAO )、苯甲酰次乌头碱棕榈酸酯
( 14-benzoy lhypaconine-8-pa lmitate, HAP)、苯甲酰中乌头碱 ( benzoylmesaconitine, BM )、苯甲酰乌头碱 ( benzoyla-
conitine , BA)、苯甲酰次乌头碱 ( benzoy lhypaconitine, BH)。 结论　首次分析鉴定了人参四逆汤水煎液抗失血性休
克作用的提取组分的化学成分。
关键词: 人参四逆汤 ;抗休克 ;人参皂苷
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0392 03
Studies on antishock effect of active constituents in GINSENG SINI TANG
*
XU Ya-juan1 , SONG Feng-rui2 , ZHAO Hong-feng1 , W ANG Yong2 , SI Yun-shan1 , XU Dong-ming1
( 1. Jilin Academy o f TCM , Changchun Jilin 130021, China; 2. Changchun Institute of Applied
Chemistry , Chinese Academy o f Sciences, Changch un Jilin 130021, China)
Abstract: Object　 To study the chemica l consti tuents of the ex t racts S-1 and S-7 in GIN SENG SINI
T AN G, which has the ef fect of antihemo rrhagic shock. Methods　 The consti tuents of S-1 and S-7 w ere
isolated and purified by silica g el co lumn chroma tog raphic methods and analy zed by ESI /M S
n
, M ALDI-
TO F/M S. Results　 The 12 compounds w ere identified as ginsenosides -Ra1 , -Ra2 , -Rb1 , -Rb2 , -Rb3 , -
Rc, -Rd, -Re, -Rg1 , -Rg2 , -Rg3 , -Rf f rom consti tuent S-7 in GIN SEN G SIN I T ANG. The six compounds
o f diterpenoid a lkaloid were identified as 14-benzoy lhypaconine-8-lino leate ( HAL) , 14-benzoyldeoxy-
aconine-8-oleate ( HAO) , 14-benzoy lhypaconine-8-palmi ta te ( HAP) , benzoy lmesaconi tine ( BM ) , benzoy-
laconi tine ( BA) , benzoy lhypaconi tine ( BH) f rom constituent S-1 in GIN SEN G SIN I T AN G. Conclusion　
All these compounds w ere obtained from GIN SENG SINI T ANG and identified for the first time.
Key words: GIN SENG SINI TANG; antishock; ginsenoside
*
GIN SEN G SIN I T ANG is Chinese herbal decoction w ith the function of recuperating depleted yang
and rescuing the patient f rom collapse.
　　我们研究了人参四逆汤药效的物质基础 ,曾报
道人参四逆汤中甘草和干姜对附子双酯型生物碱水
解的影响等论文 [1 ]。我们又发现人参四逆汤的提取
组分 S-1和 S-7能使失血性休克动物血压缓慢回
升 ,延长动物存活时间 ,给药后动物存活时间达 6 h
以上 ,达到长期存活 ,与盐水组比有明显差异 ,人参
四逆汤的提取组分 S-1和 S-7具有明显的抗失血性
休克的作用。 本实验结合硅胶色谱柱分离 ,利用
ESI /M S
n、 M ALDI-TO F /M S等技术分析鉴定人参
四逆汤的提取组分 S-7和 S-1的化学成分的结果。
1　试验部分
1. 1　仪器与材料: LCQ电喷雾质谱仪 (美国 Finni-
gan MAT公司 ) , LDI-1700型激光解析飞行时间质
谱仪 (美国 ) ,柱层析和薄层层析用硅胶 G(青岛海洋
化工厂 ) ,试剂均为分析纯。
红参 Panax ginseng C. A. M ey. ,甘草 Gly-
cyrrhiza ulalensis Fisch. , 干姜 Zingiber of f icinale
Rosc. 均购自长春市药材公司 ,附子 Aconitum
·392· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-08-06基金项目:国家攀登计划预选课题资助项目
* 通讯作者　 Tel: ( 0431) 5952241-5628
carmichaeli Debx. 购自四川省江油药材加工厂 ,经
长春中医学院邓明鲁教授鉴定 ,均符合 2000年版
《中华人民共和国药典》规定。
1. 2　实验方法和结果
1. 2. 1　人参四逆汤水煎剂的制备:根据人参四逆汤
配方比例附子-干姜 -甘草 -红参 ( 10∶ 4. 5∶ 6∶ 3) ,
分别取适量药材 ,加 10倍量水浸泡 0. 5 h,煎煮保持
微沸 1 h,过滤 ,收集滤液 ,滤渣加 8倍量水 ,煎煮保
持微沸 1 h ,过滤 ,收集滤液 ;滤渣加 6倍量水 ,煎煮
保持微沸 1 h,过滤 ,合并 3次滤液 ,浓缩 ,得浓缩液
( 1 g /mL)。
1. 2. 2　抗休克作用有效组织 S-1和 S-7的提取和
分离: 人参四逆汤水煎剂浓缩液用 65%乙醇沉淀 ,
滤过 ,回收乙醇 ,依次用乙醚和乙酸乙酯萃取 ,水层
Na2 CO3调 pH= 10,分别依次用氯仿和乙酸乙酯萃
取 ,水层盐酸调 pH= 6,用水饱和正丁醇萃取 ,各萃
取液回收溶剂 ,得 S-1～ S-7提取物。经药理实验 S-1
号和 S-7号提取物具有明显的抗失血型休克作用。
1. 2. 3　 S-1号提取物的 ESI /M Sn、 M ALDI-TO F /
M S分析: 人参四逆汤组方中的附子含有大量的生
物碱 ,目前已分离鉴定出多种二萜生物碱和双酯型
二萜生物碱 ,中国科学院长春应用化学所 [2, 3 ]利用质
谱新技术 ( MALDI-TO F/M S和 ESI-M S /M S)具有
的分离、定性及灵敏等方面的优势 ,进行了附子提取
物中生物碱组成、相对含量的分析和鉴定的研究 ,积
累了附子二萜类生物碱鉴定的数据 ,建立快速、灵
敏、可靠的分析方法。为人参四逆汤生物碱组分的分
析鉴定 ,提供了基础。
在附子二萜生物碱和脂肪酸酯型二萜生物碱分
析方法研究 [1, 2 ]的基础上 ,对人参四逆汤抗休克作用
的有效组分 S-1进行了 ESI /M Sn、 M ALDI-TO F /
M S分析 ,根据 ESI /M Sn 分析和多级串联技术
( M Sn , n < 10)提供的分子结构信息 ,分析结果如下:
有效组分 S-1主要有下列二萜生物碱成分组成:苯
甲酰次乌头碱油酸酯 ( 14-benzoy lhypaconine-8-
linoleate, HAL)、苯甲酰去氧乌头碱油酸酯 ( 14-
benzoyldeoxyaconine-8-o lea te, HAO)、苯甲酰次乌
头碱棕榈酸酯 ( 14-benzoylhypaconine-8-palmi ta te,
HAP)、苯甲酰中乌头碱 ( benzoylmesaconi tine,
BM )、苯甲酰乌头碱 ( benzoylaconitine, BA)、苯甲酰
次乌头碱 ( benzoylhypaconitine, BH)。
1. 2. 4　抗休克作用的有效组分 S-7的 ESI-M Sn和
LC /M S质谱分析: S-7具有明显的抗休克作用 ,直
接利用 ESI-M Sn和 LC /M S分析有一定的困难 ,经
硅胶干柱分离 ,分得 13-a～ h等组分。采用 ESI-M Sn
和 LC /M S质谱分析技术 ,利用 ESI可同时测定多
个化合物的相对分子质量 ,并通过多级串联功能选
择目标离子 ,进行多级碰撞 ,获得结构信息一次定性
多个化合物。各组分含有成分的分析和鉴定的依据
和结果如下:
13-a: 由一级谱图可知 ,该组分中含有 Rb2 ,
Rb3 , Rc,以及 Rd和 Re。由 m /z 1 077离子的二级质
谱可知 , 1 077离子即 [ Rb2 ( Rb3 , Rc) - H]-分别失去
1个葡萄糖 , 2个葡萄糖 ,生成 [ Rb2 ( Rb3 , Rc ) -
glc ]
-
( m /z 945)和 [ Rb2 ( Rb3 , Rc)- glc- g lc ]- ( m /z
783) ,由 m /z 945离子的三级质谱可知 , 945离子可
失去 1个葡萄糖或 2个葡萄糖生成 783和 621两个
离子 ,据此我们可推断 13-a中含有 Rb2 , Rb3 , Rc。由
945离子的二级质谱可知: 945可产生 783, 621两个
碎片离子 ,分别是失去 1个葡萄糖 , 2个葡萄糖得到
的离子 ,据此可推断该离子是 Rd, Re所产生的。 同
样方法可测定下列各组分的成分。分析结果表明
13-a可检出: 人参皂苷 Rd( MW= 946) , Re ( MW=
946) , Rb2 ( MW= 1 078) , Rb3 ( MW= 1 078) , Rc
( MW= 1 078)。
13-b:该组分中未测定到人参皂苷成分 ,主要是
多种寡糖。
13-c: 由 m /z 1 077离子的二级质谱可知 , 1 077
离子即 [Rb2 ( Rb3 , Rc) - H]-分别失去 1个葡萄糖 ,
2个葡萄糖 ,生成 [ Rb2 ( Rb3 , Rc) - glc ]- ( m /z 945)
和 [ Rb2 ( Rb3 , Rc ) - g lc- g lc ]- ( m /z 783) ,由 m /z
945离子的三级质谱可知 , 945离子可失去 1个葡萄
糖或 2个葡萄糖生成 783和 621两个离子 ,据此我
们可推断 13-c中含有 Rb2 , Rb3 , Rc。由 945离子 [Rd
( Re) - H ]
-的二级质谱可知: 945可产生 783, 621
两个碎片离子 ,分别是失去 1个葡萄糖 , 2个葡萄糖
得到的离子 ,据此可推断该离子是 Rd, Re所产
生的。
分析结果表明 13-c含有: 人参皂苷 Rd( MW=
946) , Re ( MW= 946) , Rb2 ( MW = 1 078) , Rb3
( MW= 1 078) , Rc( MW= 1 078) , Rg2 ( MW= 784) ,
Rf ( MW= 800) , Rg1 ( MW= 800) , Rg3 ( MW= 800)。
13-d: 对 13-d我们进行了液质联机表征 ,结果
发现 ,相对分子质量相同的两个 m /z 945离子有不
同的保留时间 ,表明是两种不同的物质 ,分别为 Re
[m /z 799离子是 945离子失去 1个鼠李糖 rha而产
生的 ]和 Rd [m /z 783离子是 945离子失去 1个葡
萄糖 g lc而产生的 ]。m /z 1 077表明 Rb3 , Rc, Rb2的
·393·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
存在 ,但由于三者结构极其相似 ,流动相选取的局限
性使得三种物质没有分开。 m /z 799离子及其进一
步碎裂产生的失去 2个葡萄糖的离子 m /z 476 [ Rf
( Rg1 , Rg3 ) - g lc- glc ]
-表明 Rf, Rg1 , Rg3的存在。
分析结果表明 13-d含有人参皂苷 Rd ( MW=
946) , Re ( MW = 946 ) , Rb2 ( MW = 1 078 ) , Rb3
( MW= 1 078) , Rc( MW= 1 078) , Rg2 ( MW= 784) ,
Rg1 ( MW= 800) , Rg2 ( MW= 784) , Rg3 ( MW=
800) , Rf ( MW= 800)。
13-e: 由质谱结果可知 ,该组分中含有 Rd、 Re、
Rb2、 Rb3、 Rc、 Rg2、 Ra1、 Ra2、 Rb1。 m /z 1 209的二级
质谱表明该离子可失去一个木糖产生 [ Ra1 ( Ra ) -
xyl ]
- ,根据一、二级质谱结果及文献结果可知 ,该组
分中含有 Ra1、 Ra2。其他离子的分析同前。分析结果
表明 13-e含有人参皂苷 Rd( MW= 946) , Re( MW=
946) , Rb2 ( MW= 1 078) , Rb3 ( MW= 1 078) , Rb1
( MW= 1 108) , Rc ( MW = 1 078) , Ra1 ( MW=
1 210) , Ra2 ( MW= 1 210) , Rg2 ( MW= 784)。
13-f: 分析结果表明含有人参皂苷 Rd ( MW=
946) , Re ( MW = 946 ) , Rb2 ( MW = 1 078 ) , Rb3
( MW= 1 078) , Rc( MW= 1 078) , Rg2 ( MW= 784) ,
Ra1 ( MW= 1 210) , Ra2 ( MW= 1 210) , Rb1 ( MW=
1 108)。离子的分析同前。
13-g:含有人参皂苷 Rd( MW= 946) , Re( MW=
946) , Rb2 ( MW= 1 078) , Rb3 ( MW= 1 078) , Rc
( MW= 1 078) , Ra2 ( MW= 1 210) , Rb1 ( MW=
1 108) , Rg2 ( MW= 784) , Ra1 ( MW= 1 210)。离子的
分析同前。
13-h: 含有人参皂苷 Rd ( MW = 946) , Re
( MW= 946 ) , Rb2 ( MW = 1 078 ) , Rb3 ( MW=
1 078) , Rc( MW= 1 078)。离子的分析同前。
综上分析表明:人参四逆汤的抗休克作用的有
效组分 S-7主要有人参皂苷 -Rb1 , -Rb2 , -Rb3 , -Rc, -
Rd, -Re, -Rg1 , -Rg2 , -Rg3 , -Rf , -Ra1 , -Ra2组成。
2　讨论
2. 1　利用 ESI /M Sn、 M ALDI-TO F /M S等技术 ,从
人参四逆汤煎液的抗休克作用的有效组分 S-7中分
析和鉴定了人参皂苷 Ra1、 Ra2、 Rb1、 Rb2、 Rb3、 Rc、
Rd、 Re、 Rg1、 Rg2、 Rg3、 Rf等 12种人参皂苷。
2. 2　利用 ESI /M Sn、 M ALDI-TO F /M S等技术 ,从
人参四逆汤水煎液的抗休克作用的有效组分 S-1中
检出下列二萜生物碱成分:苯甲酰次乌头碱油酸酯、
苯甲酰次乌头碱油酸酯、苯甲酰次乌头碱棕榈酸酯、
苯甲酰中乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱。
2. 3　利用 ESI /M Sn、 M ALDI-TO F /M S等技术 ,分
析鉴定人参四逆汤水煎液提取组分的组成成分 ,方
法简便 ,快捷 ,灵敏 ,准确。
参考文献:
[1 ]　吕　琳 ,司云珊 ,徐东铭 ,等 . 四逆汤中各药味对附子生物碱的
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[ 3]　 Sun W X, Liu X Y, Lui Z Q, et al . As tudy of aconi tum alka-
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矮大黄化学成分研究
康　晖 1, 2 ,向　兰 1 ,范国强 3 ,李青山 1, 2* ,王学臻 4 ,段豫萍3 ,秦　晨3 ,郑俊华 1 ,果德安 1

( 1. 北京大学药学院 ,北京　 100083;　 2. 山西医科大学药学院 ,山西 太原　 030001;　 3. 北京市中药科学研究
所 ,北京　 100011;　 4. 山东省沂南县人民医院 ,山东 沂南　 276300)
摘　要: 目的　对矮大黄根及根茎的化学成分进行研究。方法　采用常压、减压硅胶柱层析、 ODS反相硅胶柱层析、
Sephadex LH-20凝胶柱层析进行分离 ,通过理化和波谱分析方法鉴定化合物结构。结果　从其石油醚、氯仿部分及
正丁醇部分分离得到 14个化合物 ,鉴定了其中 9个化合物 ,分别为: 大黄酚 ( chry sophano l,Ⅰ )、大黄素甲醚
( physcion,Ⅱ )、大黄素 ( emodin,Ⅲ )、正二十六烷酸 ( n-hexacosnic acid,Ⅳ )、谷甾醇 ( sito stero l,Ⅴ )、谷甾醇葡萄糖
苷 ( sitoster ol-3-O-g luco side ,Ⅵ )、葡萄糖 ( g luco se ,Ⅶ )、大黄素 -龙胆二糖苷 ( emodin-gentiobio side,Ⅷ )和大黄酚 -8-
·394· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-06-27基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 39470849) ;北京市科技新星项目 ( 952871500)作者简介:康　晖 ,山西医科大学药学院药化专业 99级在读硕士研究生 ,与北京大学药学院生药学生物技术室联合培养研究生 ,主要研究方向为天然产物化学成分及其活性研究。
* 通讯作者