全 文 ：表 7　龟叶草对醋酸致小鼠扭体反应的影响
组　别 剂　量
( g /kg)
动物数 扭体数
(次 )
抑制率
(% )
龟叶草水煎液 2 10 23. 6± 5. 3 57. 0* *
0. 5 10 38. 6± 6. 0 29. 7* *
阿司匹林 0. 06 10 30. 9± 6. 6 43. 7* *
生理盐水 - 10 54. 9± 5. 3 　 -
　　与生理盐水比较: * * P < 0. 01
3. 1　龟叶草有较强的抗炎作用 ,包括巴豆油和角叉
菜胶引起的急性炎症和滤纸纤维所致的亚急性炎症。
3. 2　龟叶草对切除双侧肾上腺小鼠巴豆油致耳肿
胀仍有显著抑制作用 ,表明龟叶草的抗炎作用可能
与小鼠垂体 -肾上腺皮质功能无关 ,龟叶草水煎液的
抗炎成分可能为非甾体类。
3. 3　物理和化学性致痛试验证实 ,龟叶草能提高小
鼠热板所致痛阈值 ;对醋酸所致小鼠扭体反应有明
显对抗作用。
3. 4　龟叶草的 2种提取方法比较 ,水煎液的作用
高于醇提液。目前香茶菜属植物研究多集中于所含
的二萜类 ,由于二萜类水溶性较低 ,本实验结果提
示:二萜类可能不是抗炎作用的主要有效成分 ,其抗
炎作用有效成分有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ]　程培元 ,许美娟 .二萜类抗肿瘤活性成分的研究进展 [ J] . 中
草药 , 1985, 16( 7): 36-44.
[ 2 ]　赵振宇 ,张　阳 ,刘增琪 . 龟叶草免疫作用的初步实验研究
[ J] .中草药 , 2000, 31( 7): 535-538.
[ 3]　徐淑云 ,卞如濂 ,陈　修 . 药理实验方法学 [M ] .北京:人民卫
生出版社 , 1982.
[ 4 ]　徐淑云 ,卞如濂 ,陈　修 . 药理实验方法学 [M ] .第 2版 . 北
京:人民卫生出版社 , 1991.
地龙活性提取物的主要药效学试验
殷书梅1 ,储益平2 ,吴　鹏 3
( 1. 江苏南中医大药业有限责任公司 ,江苏 南京　 210029; 2. 南京生物工程与医药科技发展有限公司 ,江苏 南京　 210061;
3. 南京明空元医药制品有限公司 ,江苏 南京　 210061)
摘　要: 目的　研究鲜地龙水匀浆液提取物的活血化瘀药效学试验。 方法　通过对实验性大鼠脑梗死引起损伤的
影响 ;对麻醉犬脑血流量及脑血管阻力的影响及对大鼠血小板功能的影响等 5个方面进行了试验。 结果　地龙活
性提取物具有减少或修复因脑缺血引起的组织损伤和增加脑血流量、减少脑血管阻力、降低血小板粘附和延长动
物体内血栓形成等作用。 结论　地龙活性提取物不仅具有尿激酶的激活作用 ,溶解新鲜血栓 ,同时还能溶解陈旧
血栓。
关键词: 地龙 ;活性提取物 ;血栓
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 10 0926 03
Pharmacodynamic test of active extract of Lumbricus
Y IN Shu-mei
1 , CHU Yi-ping
2 , WU Peng
3
( 1. Jiang su Pharmaceutica l Co. , Ltd. , Nanjing Univ er sity of TCM , Nanjing 210029, China; 2. Nanjing Bioengineering
and Medicina l Science and Technolog y Development Co. , Ltd. , Nanjing 210061, China;
3. Nanjing Zhaoyuan Medicina l Product Co. , Ltd. , Nanjing 210061, China )
Key words: Lumbricus; activ e ex t ract; thrombus
　　地龙为钜蚓科动物参环毛蚓 Pheretima as-
pergil lum ( E. Perrier )、通俗环毛蚓 P. vulgaris
Chen、威廉环毛蚓 P. guillm i ( Michaelsen)或栉盲
环毛蚓 P. pect ini fers Michaelsen的干燥体。性咸
寒 ,归肝、脾、膀胱经。具有清热定惊 ,通络平喘 ,利尿
的功效。用于高热神昏、关节痹痛、半身不遂等症 [1 ]。
本实验为地龙活血化瘀作用提供了药理学依据。
1　材料
1. 1　药物:鲜地龙经过饥饿、清洗、沥干和冰冻处理
后 ,加等重量的水和 0. 1% 苯甲酸钠 ,在 37℃ 水浴
恒温搅拌匀浆 20 h, 6 000 r /min离心 30 min,微孔
膜过滤 ,超滤浓缩 ,冷冻干燥成粉 (得率 1. 5% ～
1. 9% ) ,备用。 维脑路通片 ,扬州制药厂生产 ,批号
981204; 肝素 ,上海 华美生物工程公司 , 批号
·926· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 10期
收稿日期: 2001-12-18作者简介:殷书梅 ( 1966-) ,女 ,江苏如皋人 ,主管中药师 ,学士学位 , 1988年 7月于南京中医药大学中药系毕业 ,现从事中药新药的研究与开发工作。 Tel: ( 025) 6798326
980502;凝血酶 ,珠海生化制药厂 ,批号 980312。
1. 2　动物:健康成年杂种犬 20只 ,雌雄兼用 ,体重
8. 2～ 12 kg。 SD大鼠 ,雌雄兼用 ,体重 200～ 250 g ,
家兔 24只 ,雌雄兼用 ,体重 2～ 3 kg ,昆明种小鼠 60
只 ,雌雄各半 ,体重 18～ 22 g ,由中国药科大学实验
动物中心提供 ,合格证号苏动质 98012。
1. 3　仪器: T P— 200T型压力换能器 , RM— 6000
多道生理记录仪 , M FV— 3200型电磁流量计 ( N I-
HON KOHDEN公司 ) , BT87— 2型实验性体内血
栓形成测定仪 (包头医学院研制 )。
2　方法与结果
2. 1　对实验性大鼠脑梗死损伤的影响 [2 ]:大鼠用戊
巴比妥钠 40 mg /kg麻醉 ,在右眼和右耳之间的中
点作 1. 5 cm长的切口 ,分开颞肌 ,暴露颧骨和颞
骨 ,在颧骨之头端 1～ 2 mm 处 ,钻开一直径为 2
mm的小孔 ,将脑组织轻轻移开 ,用微小双极电凝器
灼断大脑中动脉 ,然后将颞肌和皮肤分层缝合。取手
术成功的 32只大鼠 ,分成 4组连续用药 15 d后 ,处
死动物 ,取其大脑以均等间距横切三个断面 ,固定、
包埋、切片、 HE染色后 ,用显微测微尺量出每个标
本三个横断面的总面积 ,坏死灶面积 ,算出坏死面积
占脑组织总面积的百分比 ,结果见表 1。地龙活性提
取物对脑梗死动物的损伤有明显的修复作用 ,使病
灶面积缩小 ,减少因脑缺血引起的损伤。
2. 2　对麻醉犬脑血流量及脑血管阻力的影响 [2 ]: 犬
用戊巴比钠 30 mg /kg ( iv )麻醉 ,气管插管 ,分离股
动脉插心导管至腹主动脉 ,与 TP— 200T型压力换
能器相连再接于 RM— 6000型多道生理记录仪上 ,
表 1　对大鼠脑梗死病灶损伤修复的影响 (x± s, n= 8)
组　别 剂　量
( g /kg)
脑总面积
( mm ) 2
梗死面积
( mm2 )
梗死面积比
(% )
模型 - 192. 8± 22. 1 14. 4± 4. 9 7. 5
地龙组 0. 15 187. 5± 25. 0 8. 1± 5. 1* 4. 3
0. 45 190. 6± 31. 7 6. 6± 3. 7* * 3. 1
维脑路通 0. 30 189. 1± 18. 0 8. 6± 2. 6* 4. 5
　　与模型组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
记录血压波形并读取主动脉收缩压 ( SAP)、舒张压
( DAP)、平均动脉压 ( M AP)和心率 ( HR)。 同时 ,
记录标准 Ⅱ 导程心电图 ,分离颈总动脉和颈外动
脉 ,结扎颈外动脉 ,将内径 3 mm的电磁流量计探头
放置在颈总动脉上 ,以 M FV— 3200型电磁流量计
测定颈内动脉血流量 ( ICBF) ,颈内动脉血管阻力
( ICV R)= MAP /ICBF;手术后稳定 20～ 30 min,待
上述各项稳定后 ,测定正常值 ,然后进行十二指肠给
药 ,结果各给药点犬的血压、心电、心律均无明显改
变 ,但地龙活性提取物有增加脑血流量及降低脑内
血管阻力的作用 ,见表 2, 3。
表 2　对犬脑血流量的影响 (x± s , n= 5)
组　别 剂　量
( g /kg)
用药后时间 ( min) 脑血流量 ( m L /min 100 g)
0 5 10 30 60
对　照　 - 10. 0± 1. 2 10. 1± 1. 4 10. 1± 1. 6 10. 0± 1. 5 10. 2± 1. 4
地　龙　 0. 075 10. 5± 1. 4 11. 7± 1. 0 13. 4± 0. 9* * 12. 1± 0. 7* 11. 2± 0. 7
0. 225 10. 3± 0. 8 12. 5± 1. 0* 15. 6± 0. 8* * 13. 3± 1. 5* * 11. 2± 1. 3
维脑路通 0. 150 10. 2± 1. 0 13. 5± 2. 0* 15. 4± 1. 0* * 12. 5± 0. 6* * 10. 9± 0. 6
　　　　与对照组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
表 3　对犬脑血管阻力的影响 ( x± s , n= 5)
组　别 剂　量
( g /kg)
用药后时间 ( min) 脑血管阻力 ( k Pa /mL· min· 100 g)
0 5 10 30 60
对　照　 - 1. 79± 0. 32 1. 81± 0. 21 1. 82± 0. 21 1. 82± 0. 21 1. 83± 0. 22
地　龙　 0. 075 1. 78± 0. 25 1. 71± 0. 10 1. 53± 0. 11* 1. 67± 0. 07 1. 71± 0. 06
0. 225 1. 72± 0. 11 1. 65± 0. 10 1. 29± 0. 16* * 1. 55± 0. 11* 1. 67± 0. 08
维脑路通 0. 150 1. 75± 0. 24 1. 60± 0. 13 1. 47± 0. 15 1. 58± 0. 15 1. 74± 0. 05
　　　　与对照组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
2. 3　对大鼠血小板功能的影响 [3 ]: 40只大鼠随机
分成 5组 ,每组 8只 ,分别为空白对照组、地龙 3个
剂量组 ( 0. 15, 0. 3, 0. 45 g /kg )和维脑路通对照组
( 0. 3 g /kg ) , ig给药 ,连续 5 d,于末次给药后 1 h,
处死大鼠 ,采用玻球法测定大鼠的血小板粘附率及
进行血小板记数 ,结果见表 4。地龙活性提取物具有
明显的降低大鼠血小板粘附率作用 ,但对血小板的
个数无明显影响。
2. 4　对体内血栓作用
2. 4. 1　对大鼠体内血栓形成的影响:参照文献 [3 ] ,
戊巴比妥钠 40 mg /kg麻醉大鼠 ,切开颈部皮肤 ,分
离右侧动脉 ,在动脉近心端下放置刺激电极 ,远端下
放置连接仪器的温度探头。开通仪器 ,通过刺激电极
给予 1. 5mV直流电流刺激 7min ,以损伤动脉内
·927·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 10期
皮细胞 ,随着动脉管腔内血栓逐渐形成 ,血流逐渐被
阻断 ,温度突降 ,仪器报警 ,记录堵塞形成时间。结果
地龙活性提取物具有显著的延长动物体内血栓时
间 ,见表 5。
表 4　对大鼠血小板粘附率及血小板
数目的影响 ( x± s , n= 8)
组　别 剂　量 ( g /kg) 粘附率 (% ) 血小板数 (× 109 )
对　照　 - 32. 4± 4. 0 280± 24
地　龙　 0. 15 27. 8± 3. 2* * 275± 28
0. 30 25. 0± 2. 5* * 283± 27
0. 45 21. 6± 3. 3* * 271± 22
维脑路通 0. 30 27. 9± 4. 2* * 278± 21
　　与对照组比: * * P < 0. 01
表 5　对大鼠体内血栓形成时间的影响 (x± s, n= 8)
组　别 剂　量 ( g /kg) 堵塞形成时间 ( min)
对　照　 - 11. 3± 3. 7
地　龙　 0. 15 15. 7± 4. 3*
0. 30 18. 0± 5. 7* *
0. 45 20. 2± 6. 9* *
维脑路通 0. 30 14. 2± 5. 6*
肝　素　 1 250 24. 1± 4. 6* *
　　与对照组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
2. 4. 2　对抗兔肺动脉血栓作用:参照文献 [4 ]将家兔
用戊巴比妥钠 30 mg /kg麻醉 ,固定 ,分离一侧颈静
脉及另一侧颈动脉 ,将颈静脉的各分支结扎 ,从颈动
脉取血 1 mL和预先配制的 0. 6 mL凝血酶 ( 10 U /
m L)生理盐水溶液混合后 ,即从颈静脉向心端向静
脉内注射该混合液 ,每次 0. 4 mL,分 2次 ,间隔 10
min,造成肺动脉血栓 ,然后进行给药。 在给药后
10 h,用空气栓处死家兔 ,沿肺动脉向下寻找左右肺
动脉的栓子 (一般停留于肺动脉主干 )。将血栓子取
出 ,用滤纸吸干后称重。结果地龙活性提取物具有溶
解动物体内血栓的作用 ,见表 6。
2. 5　对小鼠凝血时间的影响: ig 60只小鼠随机分成
6组 ,每组 10只: 空白对照组、地龙 3个剂量组
( 0. 25, 0. 5, 0. 75 g /kg ) 维脑路通组 ( 0. 5 g /kg ) 和
肝素组 ( 2 000μ/kg ) ;地龙组及维脑路通组连续 ig 4
d,肝素组只进行 1次 iv给药 ,所有动物在末次给药后
1 h即用玻片法测定小鼠的凝血时间。结果地龙活性提
取物对正常动物的凝血功能无明显影响 ,见表 7。
表 6　对家兔实验性肺栓塞的溶栓作用 (x± s , n= 6)
组　别 剂　量 ( g /kg ) 血栓湿重 ( mg )
对　照　 - 85. 2± 24. 3
地　龙　 0. 1 61. 7± 18. 5*
0. 4 47. 6± 17. 4* *
维脑路通 0. 2 69. 3± 18. 1*
肝　素　 1 250 24. 1± 4. 6* *
　　与对照组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
表 7　对小鼠凝血时间的影响 (x± s , n= 10)
组　别 剂　量 ( g /kg ) 凝血时间 ( min)
对　照　 - 1. 03± 0. 18
地　龙　 0. 25 0. 90± 0. 13
0. 5 0. 95± 0. 14
0. 75 1. 01± 0. 19
维脑路通 0. 5 0. 98± 0. 17
肝　素　 2 000 2. 35± 0. 54* *
　　与对照组比: * * P < 0. 01
3　讨论
地龙活性提取物通过对实验性大鼠脑梗死引起
损伤的影响 ,对麻醉犬脑血流量及脑血管阻力的影
响及对大鼠血小板功能的影响等 5个方面的研究 ,
证明了其具有减少或修复因脑缺血引起的组织损伤
和增加脑血流量、减少脑血管阻力、降低血小板黏附
和延长动物体内血栓形成等方面作用。 上述实验结
果与地龙能用于治疗关节痹痛、半身不遂等症状的
传统中医理论相吻合 [5 ]。 本实验结果为地龙的活血
化瘀作用提供了理论依据。
参考文献:
[1 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
[2 ]　徐叔云 . 药理实验方法学 (第二版 ) [M ] . 北京:人民卫生出版
社 , 1990.
[ 3 ]　阮长耿 . 血小板—基础与临床 [M ]. 上海: 上海科技出版社 ,
1987.
[ 4 ]　陈　奇 . 中药药理研究方法学 [M ]. 北京: 人民卫生出版社 ,
1993.
[5 ]　李时珍 . 本草纲目 (校点本 )第四册 [M ] . 北京:人民卫生出版
社 , 1981.
　　 (上接第 908页 )
理等方法 ,但效果不佳。而选择病毒清液加酸后 ,用醋
酸乙酯提取制备供试品溶液 ,则可获得满意的效果。
3. 2　由于本品中含有皂苷类成分 ,在提取时易发生
乳化现象 ,故在提取过程中加入少量氯化钠可使乳
化减少 ;与此同时 ,利用氯化钠的盐析作用 ,在提取
过程中去除部分杂质 ,使绿原酸更易于提取。
3. 3　从病毒清液测定结果可以看出 ,绿原酸含量最
高的为 0. 434 4 mg /mL,最低为 0. 316 6mg /m L。因
此 ,考虑到工业生产过程中有一定的波动 ,我们建议
病毒清液中绿原酸含量每毫升应不低于 0. 30 mg。
参考文献:
[1 ]　张广强 ,梁生旺 ,姜玉凤 ,等 . 三波长分光光度法测定清热解毒
注射剂中绿原酸的含量 [ J ] . 中国中药杂志 , 1990, 15( 8): 33-
35.
[2 ]　刘　伟 ,杜天信 ,郑松波 ,等 . 小儿清热解毒口服液中绿原酸的
薄层扫描测定 [ J] .中成药 , 1989, 11( 8): 14-15.
[ 3 ]　李　宗 ,陈在敏 ,廖雷生 ,等 . 菊花中绿原酸的含量测定 [ J ].
中国中药杂志 , 1999, 24( 6): 329-330.
·928· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 10期