全 文 ：太白参中桃叶珊瑚苷的分离鉴定和提取工艺研究
李发荣 1, 2 ,杨建雄 2 ,李宝林 3 ,张尊听 3 ,李　伟 2⒇
( 1. 西安交通大学电信学院 ,陕西 西安　 710049; 2. 陕西师范大学生命科学学院 ,陕西 西安　 710062; 3. 陕西师范大学化
学与材料科学学院 ,陕西 西安　 710062)
　　太白参又称煤参、黑洋参 ,是玄参科马先蒿属植
物美观马先蒿 Pedicularis decora Franch.的根 ,是
我国特有植物药 ,在陕西、甘肃、四川、湖北等地分布
广泛 ,资源丰富。 太白参在民间药用历史悠久 ,有滋
阴补肾、健脾胃、消炎止痛、补中益气之功效 ,用于身
体虚弱、肾虚、骨蒸潮热、不思饮食等症 [1 ]。对太白参
的药效学研究表明 ,太白参有健脾、补肾、抗氧化等
生理活性 [2～ 4 ]。化学成分研究显示 ,太白参含有环烯
醚萜苷、酚酸、不饱和脂肪酸等多种生物活性物
质 [5～ 6 ]。 本文报道了太白参中桃叶珊瑚苷的分离鉴
定及其提取工艺的研究。
1　材料与试剂
太白参 (采于陕西长安县秦岭梁 ,由陕西师范大
学生命科学学院植物教研室田先华副教授鉴定 ) ;柱
色谱用硅胶 ( 160～ 200目 )为上海五四试剂厂生产 ,
提取用乙醇为工业乙醇 ,其余试剂均为国产分析纯。
2　方法与结果
2. 1　太白参中桃叶珊瑚苷的分离及鉴定
2. 1. 1　太白参中桃叶珊瑚苷的分离: 太白参 2 kg
粉碎 ,分别用 10倍量 95% , 70% , 60%乙醇冷浸 48
h后滤过 ,合并滤液 ,减压浓缩至无醇味。分别用乙
醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取 ,得正丁醇萃取物 120 g ,
正丁醇萃取物经硅胶柱色谱分离 ,氯仿 -甲醇 ( 9∶ 1)
洗脱 ,薄层色谱检查 ,收集相同组份洗脱液 ,浓缩 ,置
乙醇中重结晶 3次 ,可得白色针晶。
2. 1. 2　太白参中桃叶珊瑚苷的鉴定: 白色针晶 (乙
醇 ) mp: 181 ℃～ 182 ℃ ; 1 H-NMR ( 500 MHz,
CD3OD): 6. 31 ( 1H, dd, J = 6. 1, 1. 8 Hz ) , 5. 76
( 1H, s) , 5. 09 ( 1H, dd, J= 6. 1, 3. 9 Hz) , 4. 95 ( 1H,
d, J = 7. 2 Hz) , 4. 68 ( 1H, dd, J = 8. 0 Hz) , 4. 43
( 1H, dd, J= 3. 3, 1. 7 Hz) , 4. 35, 4. 18 (各 1H, AB,
J = 15. 4 Hz) , 3. 86 ( 1H, dd, J = 12. 8, 1. 5 Hz) ,
3. 64 ( 1H, dd, J= 12. 8, 5. 3 Hz) , 3. 37 ( 1H, t , J=
8. 5 Hz) , 3. 30 ( 1H, m ) , 3. 20 ( 1H, dd,J= 8. 5, 8. 0
Hz ) , 2. 89 ( 1H, t, J = 7. 2 Hz) , 2. 65 ( 1H, m )。
13
C-NM R ( CD3OD): 148. 0 ( s) , 141. 6 ( d) , 130. 2
( d) , 99. 9 ( d) , 97. 7 ( d) , 82. 8 ( d) , 78. 2 ( d) , 77. 8
( d ) , 74. 9 ( d) , 71. 5 ( d) , 62. 6 ( t ) , 61. 4 ( t ) , 47. 9
( d) , 46. 2 (d)。 IRgKBrmax cm- 1∶ 3 450, 2 880, 1 690,
1 458, 1 351。根据以上数据确定为桃叶珊瑚苷 ( au-
cubin)。
2. 2　太白参中桃叶珊瑚苷的提取工艺研究
2. 2. 1　试验方案设计:预试验显示 ,乙醇、水作为溶
剂皆可以提取出桃叶珊瑚苷。 由于桃叶珊瑚苷在加
热、有酸或碱存在条件下不稳定 ,易分解为苷元 ,苷
元易反应生成黑色不溶聚合物而影响其得率 ,同时
考虑到经济因素 ,我们以桃叶珊瑚苷提取量为指标 ,
用正交试验设计法对水提取工艺和乙醇提取工艺进
行分析 ,因素水平见表 1, 2。
表 1　乙醇提取工艺因素水平表
Table 1　 Factors and levels of EtOH extract ing process
水平 因　　素
A乙醇浓度 /% B提取时间 /min C提取次数
1 100 45 1
2 70 90 2
3 60 120 3
表 2　水提取工艺因素水平表
Table 2　 Factors and levels of H2O extracting process
水平 因　　素
A乙醇浓度 /% B提取时间 /min C提取次数
1 60 45 1
2 80 90 2
3 100 120 3
2. 2. 2　标准曲线的制备:精密称取桃叶珊瑚苷对照
品 (自制 ,经色谱峰归一化法测得纯度大于 98. 5% )
15 mg ,用甲醇溶解后定容至 50 mL。分别精确取 1,
2, 3, 4, 5, 6 mL置 10 mL容量瓶中 ,定容 ,比色法测
定 [7 ] ,以吸光度 A对浓度 C做标准曲线 ,得回归方
·802· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 9期 2003年 9月
⒇ 收稿日期: 2002-12-16基金项目:陕西省自然科学基金项目 (2000SM20)作者简介:李发荣 ( 1972— ) ,男 ,陕西白水人 ,讲师 ,西安交通大学在读博士 ,主要从事中药活性组份药理研究 ,发表论文 10余篇。
Tel: ( 029) 5308451　 E-mai l: Lifarong 12@ sohu. com
程为 C= 0. 469 88A- 0. 088 28, r= 0. 999 8。
2. 2. 3　样品液中桃叶珊瑚苷的测定:精确称取药材
粉末 5. 000 g ,置烧瓶中加热回流提取 ,每次试验的
提取液滤过后 ,混合 ,定容至 250 mL,按“标准曲线
的制备”方法测定桃叶珊瑚苷的含量。
2. 2. 4　乙醇提取工艺: 结果见表 3, 4。直观分析可
以看出 ,试验因素的主次顺序为提取次数> 提取时
间> 乙醇浓度 ,最优水平为 A3 B3 C3。 方差分析说明
提取次数对试验影响差异达到显著水平。
表 3　乙醇提取工艺正交试验方案和结果
Table 3 Orthogonal test of EtOH extracting process
试验号 A B C 桃叶珊瑚苷含量 /%
1 1 1 1 0. 413
2 2 1 2 0. 538
3 3 1 3 0. 706
4 1 2 2 0. 659
5 2 2 3 0. 689
6 3 2 1 0. 514
7 1 3 3 0. 728
8 2 3 1 0. 543
9 3 3 2 0. 692
K 1 1. 800 1. 657 1. 470
K 2 1. 770 1. 862 1. 889
K 3 1. 912 1. 963 2. 123
R 0. 142 0. 306 0. 653
表 4　乙醇提取工艺方差分析表
Table 4　Variance analysis of EtOH extracting process
方差来源 方差平方和 自由度 均方 F值 显著性
A 0. 003 734 2 0. 001 867　 1. 13
B 0. 016 210 2 0. 008 105 4. 93
C 0. 072 970 2 0. 036 480 22. 02 P < 0. 05
误差 0. 003 286 2 0. 001 643
　　F 0. 05( 2, 2)= 19. 0　F 0. 01 ( 2, 2)= 99. 0
表 5　水提取工艺正交试验方案和结果
Table 5　 Orthogonal test of H2O extracting process
试验号 A B C 桃叶珊瑚苷含量 /%
1 1 1 1 0. 417
2 2 2 2 0. 572
3 3 3 3 0. 477
4 1 2 3 0. 617
5 2 3 1 0. 402
6 3 1 2 0. 502
7 1 3 2 0. 430
8 2 1 3 0. 582
9 3 2 1 0. 467
K 1 1. 464 1. 501 1. 286
K 2 1. 556 1. 656 1. 504
K 3 1. 446 1. 309 1. 676
R 0. 110 0. 347 0. 390
2. 2. 5　水提取工艺:结果见表 5, 6。 直观分析可以
看出 ,试验因素的主次顺序为: 提取次数> 提取温
度> 提取时间 ,最优水平为 A2 B2 C3。 方差分析说明
提取次数、提取温度对试验影响差异达到显著水平。
表 6　水提取工艺方差分析表
Table 6　 Variance analysis of H2O extracting process
方差来源 方差平方和 自由度 均方 F值 显著性
A 0. 020 140 2 0. 010 070　 36. 56 P < 0. 05
B 0. 002 321 2 0. 001 160 4. 21
C 0. 025 470 2 0. 012 740 46. 22 P < 0. 05
误差 0. 000 551 2 0. 000 276
　　 F0. 05 ( 2, 2)= 19. 0　 F0. 01 ( 2, 2)= 99. 0
3　讨论
3. 1　桃叶珊瑚苷具有止痛、抗炎、抗病毒、保肝等多
种生理活性 [ 8] ,在杜仲、车前、地黄等中药中广泛存
在 ,是其中的药效成分。本研究首次从太白参中分离
得到了桃叶珊瑚苷 ,有助于进一步了解太白参的药
理作用机制 ,也有助于太白参药材质量标准的制定。
3. 2　桃叶珊瑚苷属环烯醚萜苷类化合物 ,化学性质
活泼 ,在加热、有酸或碱存在的条件下不稳定。本实验
结果显示在水提取工艺条件下 ,提取温度对结果影响
较大 ,差异具有显著性 ,可能是因为太白参中含有的
酸性物质溶出 ,使桃叶珊瑚苷在长时间加热分解所
致。建议在用水提取溶剂时 ,采用 A2 B2 C3 ;乙醇提取
工艺试验中 ,提取次数是最主要因素 ,试验中最优水
平为 A3 B3 C3 ,但在实际提取中 ,考虑到经济因素 ,建
议采用 A3 B2 C3或 A3 B2 C2。在采用 60%乙醇提取时 ,
可避免用水作溶剂时提取杂质多 ,过滤操作困难等不
利因素 ,也可提取出较多的水溶组份 ,保证药效物质
的充分溶出 ,是一种比较适合大量提取的方法。
References:
[1 ]　 Jiangsu New Medical College. Dictionary of Chinese Materia
Medica (中药大辞典 ) [M ] . Sh angh ai: Shanghai Science and
Tech nology Publis hers, 1976.
[2 ]　 Li F R, Xu W Y, Cao Y X. Effect of Taibai-gins en on the
mice path ology model of “ kidney yin def iciency” induced by
excessiv e th roxine [ J ]. J Ch in Mater Med (中药材 ) , 2001,
24( 3): 190-191.
[3 ]　 Yang JX, Gao M L, Li F R. Effect s of Taibai-ginsen ext ract
on an ti-oxidat ion damnif ication of mice [ J] . J Ch in Mater Med
(中药材 ) , 2002, 25( 1): 37-39.
[4 ]　 Li F R, Song J D, Xu W Y, et al . Ef fects of Taibai-gins en on
the mice pathology model of s pleen def iciency induced by
hunger-cure [ J ]. Shaan xi J Tra dit Chin Med (陕西中医 ) ,
2002, 23( 2): 180-181.
[5 ]　 Li C, Zhang C Z. No r-monoterpene g lucosides f rom small
w oodbetony root ( Ped icularis decora ) [ J ]. Chin Trad it Herb
Drugs (中草药 ) , 1999, 30( 7): 482-484.
[6 ]　 Li C, Tao B Q, Zhang C Z, et al . Iridoid glycosides f rom
Ped icularis decora [ J] . China J Ch in Mater Med (中国中药杂
志 ) 1999, 24( 1): 40-41.
[7 ]　 Xun L C, Sh a S Y. Analysis Methods of Chemical Components
in Ch inese Trad it ional Drugs (中草药有效成分分析法 ) [M ].
Bei jing: People s M edical Publi shing House, 1984.
[8 ]　 Lee D H, Ch o I G, Park M S, et al . Studies on th e possible
mechanisms of protective activi ty agains t alpha-amani tin poi-
soning by aucubin [ J] . Arch Pharm Res, 2001, 24( 1): 55-
63.
·803·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 9期 2003年 9月