全 文 ：草问荆总生物碱对小鼠脑单胺氧化酶-B活性的影响
季宇彬 ,高世勇
(哈尔滨商业大学药物研究所 博士后科研工作站 ,黑龙江 哈尔滨　 150076)
摘　要: 目的　研究草问荆总生物碱 ( TAEP)对小鼠脑单胺氧化酶-B ( M AO-B)活性的影响 ,揭示 T AEP对中枢
神经系统抑制作用的机制。方法　采用紫外分光光度法测定 M AO-B的活性。结果　 T AEP对小鼠脑 M AO-B具
有明显的激活作用 ,并具有对抗烟肼酰胺抑制小鼠脑 M AO-B活性的作用。结论　 TAEP是 M AO-B的激动药 ,有
单胺代谢作用 ,这可能是 TAE P中枢抑制作用的作用机制之一。
关键词: 草问荆总生物碱 ; 单胺氧化酶 -B; 中枢抑制
中图分类号: R286. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 08 0728 00
Effect of total alkaloids inEquisetum pratense on activity of MAO-B in mice brain
JI Yu-bin, G AO Shi-yong
( Postdocto ral Resear ch Sta tion, Institute o f Materia Medica, Ha rbin Commercial Univ ersity , Harbin 150076, China)
Abstract: Object　 To study the effects o f to tal alkaloids in Equisetum pratense Ehrh. ( T AEP) on the
activi ty of monoamine oxida se B ( MAO-B) in mice brain, to rev eal the mechanism of i ts inhibi to ry action
on the central nerv ous system ( CN S) . Methods　 The activi ty of M AO-B was determined by UV spec-
trophotometry. Results　 TAEP can markedly activ ate M AO-B in cerebrum and antagonise the inhibition
o f MAO-B activi ty by nialamide. Conclusion　 T AEP is a M AO-B agonist wi th an action for the evacuation
o f monoamine, this may be considered as one o f the mechanisms o f T AEP sedativ e and tranqui li zing action
on CNS.
Key words: to tal alkaloids of Equistum pratense Ehrh. ( TAEP) ; monoamine ox idase B ( MAO-B) ;
inhibi tory action on CN S
　　草问荆 Equisetum pratense Ehrh. 系木贼科问
荆属多年生草本植物。 问荆 E. arvense L. 的药用
价值在我国古本草多有记载 ,《本草拾遗》记载: “问
荆有止血 ,利尿之功” ;《本草纲目》记载: “问荆性味
苦 ,平 ,功能活血化瘀 ,清热利尿” ,“主结气瘤痛 ,上
气气急”。草问荆总生物碱 ( TAEP)是从草问荆中
提取的生物碱类化合物 ,占总生物碱的 95%。 本研
究室对其进行了药理作用研究 ,发现 TAEP对中枢
神经系统具有显著的安定作用 [1 ]。为探讨 TAEP对
中枢神经系统抑制作用的机制 ,本实验观察 T AEP
对小鼠脑单胺氧化酶 -B ( M AO-B)活性的影响。
1　材料
1. 1　药品:草问荆总生物碱系从草问荆中提取出来
的总生物碱 (简称 T AEP) ,由本所药物化学教研室
从草问荆中提取 ,并进行分离纯化 ,经黑龙江省药品
检 验 所 鉴 定 , 其 主 要 成 分 为 犬 问 荆 碱
( palust rine)
[2 ] ,绝对构型是 ( 13R , 17S , 1′S ) -( 1-羟
丙基 ) -1, 5, 10-三氮杂二环 [ 11. 4. 0 ]十七碳-15烯-
11-酮 [3 ] ,占总生物碱的 95% 。 Na2-ATP,上海生物
化学研究所 ;胎牛血清 , HYCLONE产品 ; T ris、
NaN3、硫脲、硫酸亚铁铵、钼酸胺均为国产分析纯。
1. 2　动物:昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,体重 ( 20± 2) g,
由哈尔滨医科大学实验动物学部提供。
1. 3　主要实验仪器: 2O PD-53D低温高速离心机 ,
日本日立公司 ; M SE-50低温超速离心机 ,英国 ;
751-G紫外分光光度仪 ,上海分析仪器厂。
2　方法
　　取实验用小鼠 ,雌雄兼用 ,随机分为生理盐水对
照组、 T AEP不同剂量 ( 15, 30, 45, 60 mg /kg )组、
TAEP+ 烟肼酰胺组、烟肼酰胺组。 ip给药 ,给药 30
min后 ,立即颈椎脱臼处死小鼠。冰台上迅速取出脑
组织 ,酶液按文献方法制备 ,酶活性测定采用紫外分
光光度法 ,按文献方法进行。酶液蛋白质含量测定采
用 Low ery法进行。以小牛血清白蛋白为标准蛋白。
·728· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-10-12基金项目:黑龙江省科委自然科学基金资助项目 ( D01-05)作者简介:季宇彬 ( 1958— ) ,男 ,博士 ,教授 ,博士生导师 ,多年来一直致力于中药药理、肿瘤药理、分子药理学研究 , 1999年进入哈尔滨医科大学博士后工作流动站工作。
以 3 h产生 0. 01个吸光度改变为一个活性单位 ,酶
活性以 U /( mg· h )表示。
3　结果
3. 1　 TAEP对小鼠脑 MAO-B活性的影响: 见
表 1。实验结果表明 , T AEP对小鼠脑 MAO-B具有
明显的激活作用 ,其激活作用呈剂量依赖性 ,线性回
归方程为 Y= 75. 63 X- 81. 79, r= 0. 868 0, ED50为
55. 27 mg /kg。
表 1　 TAEP对小鼠脑 MAO-B活性的影响 (n= 10)
Table 1　 Ef fect of TAEP on act ivity of MAO-B
in mice brain ( n= 10)
组　别
剂　量
/( mg· kg- 1)
脑 M AO-B活性
/( U· mg- 1· h- 1)
M AO-B相对
活性 /%
M AO-B活性提
高百分率 /%
生理盐水 - 　 13. 74± 0. 81 　 100. 00 　　 -
TAEP 15 15. 57± 1. 14* 113. 35 　 13. 35
30 16. 78± 1. 10* * * 122. 13 22. 13
45 18. 16± 0. 50* * * 132. 15 32. 15
60 22. 72± 1. 26* * * 165. 36 65. 36
　　与生理盐水组比较: * P < 0. 05　* * * P < 0. 001
　　* P < 0. 05　* * * P < 0. 001 vs N S group
3. 2　 T AEP对烟肼酰胺抑制小鼠脑 M AO-B活性
的影响:见表 2。 结果表明 , TAEP可对抗烟肼酰胺
抑制小鼠脑 M AO-B活性作用 , 45 mg /kg TAEP可
完全对抗烟肼酰胺抑制作用 , 60 mg /kg T AEP则可
将其抑制作用翻转为激活作用 ( P < 0. 001)。
表 2　 TAEP对烟肼酰胺抑制小鼠脑
MAO-B活性的影响 (n= 10)
Table 2　 Ef fect of TAEP on activity of MAO-B in mice
brain inhibited by nialamide (n= 10)
组　别 剂　量
/ (mg· kg- 1)
酶活力
/ ( U· mg- 1· h- 1)
酶相对
活力 /%
酶活力抑制
百分率 /%
生理盐水 - 　 13. 74± 0. 81 　 100 　　 -
烟肼酰胺 20 8. 92± 1. 13 64. 63 　 35. 37
烟肼酰胺+ TAEP 20+ 15 8. 52± 0. 90 61. 80 38. 20
20+ 30 10. 31± 0. 43* 74. 76 25. 24
20+ 45 14. 43± 0. 34* * * 104. 62 - 4. 62
20+ 60 25. 54± 1. 42* * * 177. 92 - 77. 92
　　与烟肼酰胺组比较: * P < 0. 05　* * * P < 0. 001
　　* P < 0. 05　* * * P < 0. 001 vs nialamide group
4　讨论
　　单胺代谢酶有合成代谢酶和分解代谢酶两类 ,
在分解代谢酶中主要有两种 ,一种是单胺氧化酶
( M AO) ,存于线粒体的外膜上 ,主要代谢中枢的单
胺类递质 [4 ];另一种是儿茶酚胺氧位甲基转移酶 ,主
要代谢分解循环中的单胺类递质。 MAO根据性质
又可分为两个亚型 ,即 MAO-A和 MAO-B。在中枢
内 M AO-A, MAO-B同时存在 , M AO-A优先将去
甲肾上腺素 ( N A) , 5-羟色胺 ( 5-HT) 作为底物 ,可
以被氯吉灵 ( Clorg yline ) 选择性抑制 [5 ] ; M AO-B
优先将多巴胺 ( DA)作为底物 ,可被 Deprenyl选择
性抑制 [6 ]。单胺氧化酶抑制剂 ( M AO I)可使 M AO
的活性受到抑制 ,进而使脑内神经原的单胺类递质
含量上升。根据忧郁症的生物胺学说 [ 7] ,脑内 NA水
平因 M AO I应用而提高时 ,会有更多的 NA释放
以激动受体 ,增加中枢的兴奋性 ,进而减轻忧郁症
状。反之当脑内 M AO活性增加时 ,可使脑内神经元
的单胺类递质含量下降。脑内 DA水平因 M AO兴
奋剂的应用而降低时 ,使其提供释放的 DA减少。
而使受体的激动减弱 ,中枢的兴奋性下降 ,因而产生
镇静、安定作用 ,缓解精神病的过度兴奋状态。本研
究结果表明 , TAEP可显著提高小鼠脑 M AO-B的
活性 ,能够对抗烟肼酰胺 ( MAO I)抑制 MAO-B
的作用。 大剂量 TAEP ( 60 mg /kg )可将烟肼酰胺
对 MAO-B的抑制作用翻转为激活作用。因此 ,可以
认为 T AEP是 MAO-B的激动药 , TAEP对 M AO-
B的激动作用是其中枢抑制作用的机制之一。
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