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草问荆总生物碱对大鼠脑内氨基酸类神经递质含量
和纹状体内乙酰胆碱含量的影响
季宇彬 1 ,高世勇 2
( 1. 哈尔滨商业大学药物研究所 博士后科研工作站 , 黑龙江 哈尔滨　 150076; 2. 哈尔滨商业大学 制药工程系 ,黑龙江 哈尔
滨　 150076)
摘　要:目的　研究草问荆总生物碱 ( TAEP)对大鼠脑内氨基酸类神经递质含量和纹状体内乙酰胆碱 ( Ach )含
量的影响 ,揭示其对中枢神经系统抑制作用的作用机制。 方法　采用双波长扫描定量法和豚鼠回肠生物测定法观
察大鼠脑内氨基酸类神经递质的含量和纹状体内 Ach含量。结果　 TAEP对大鼠脑内 4种氨基酸类神经递质 (谷
氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸、天冬氨酸 )的含量均无影响 ,但可显著降低大鼠纹状体内 Ach的含量。结论　 TAEP对
中枢神经系统的抑制作用与脑内 4种氨基酸类神经递质 (谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸、天冬氨酸 )的含量无关 ,而
是通过降低 Ach 的含量 ,进而影响多巴胺 -2 ( DA-2)受体达到的。
关键词: 草问荆总生物碱 ;氨基酸类神经递质 ;乙酰胆碱
中图分类号: R286. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 04 0338 03
Effect of total alkaloids of Equisetum pratense on amino acid
neurotransmitters and Ach of striatum in rat brain
JI Yu-bin, G AO Shi-yong
( 1. Postdocto ral Research Sta tion, Institute o f Materia Medica, Ha rbin Commercial Unive rsity , Harbin 150076, China;
2. Depa r tment o f Pha rmaceutical Engineering , Ha rbin Commercial Univ ersity , Harbin 150076, China )
Abstract: Object　 To study the effect of to tal alkaloids of Equisetum pratense Ehrh. ( TAEP) on the
contents o f amino acid neuro t ransmi t ters and Ach in rat brain to rev eal the mechanism o f T AEP inhibitory
action on the central nerv ous sy stem ( CN S) . Methods　 Contents o f amino acid neuro transmi tters and Ach
in rat brain w ere determined by double-w avelengh scan and GPI mensuration. Results　 T AEP could no t
influence four kinds of content of amino acid neurot ransmi tter ( glutamic acid, gly cin,γ-aminobuty ric acid,
aspar tic acid) , but TAEP could signi ficant ly lower the content of Ach in st ria tum of rat. Conclusion　 The
inhibi tion of T AEP to CN S is at tained by low ering the content of Ach in st riatum to affect DA-2 receptor,
and i t i s ir relev ant to the amino acid neurot ransmit ters ( g lutamic acid, g lycin,γ-aminobuty ric acid, aspa r-
tic acid) .
Key words: to tal alkaloids o f Equisetum pratense Ehrh. ( TAEP) ; amino acid neuro t ransmi t ters; Ach
·338· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 4期 2003年 4月
收稿日期: 2002-10-19基金项目:黑龙江省科委自然科学基金资助项目 ( D01-05)作者简介:季宇彬 ( 1956— ) ,男 ,博士 ,教授 ,博士研究生导师 ,多年来一直致力于中药药理、肿瘤药理、分子药理学研究 , 1999年进入哈尔滨医科大学博士后科研流动站工作。
　　草问荆 Equisetum pratense Ehrh. 系木贼科问
荆属多年生草本植物。 关于问荆 E. arvense L. 的
药用价值在我国古本草多有记载 ,《本草拾遗》记载:
“问荆有止血 ,利尿之功” ;《本草纲目》记载: “问荆性
味苦 ,平 ,功能活血化瘀 ,清热利尿” ;“主结气瘤痛 ,
上气气急”。 但是对于同属植物草问荆的药用价值 ,
国内外尚无报道。草问荆总生物碱 ( T AEP)是从草
问荆中提取的生物碱类化合物 ,主要成分为犬问荆
碱 ( palust rine) [1 ] ,占总生物碱的 95% 。我研究室对
其进行药理作用研究发现 , TAEP具有显著的安定
作用。为了探讨 T AEP对中枢神经系统抑制作用的
机制 ,本研究主要观察了 TAEP对大鼠脑内氨基酸
类神经递质含量和纹状体内 Ach含量的影响。
1　材料
1. 1　药品: TAEP系从草问荆中提取出来的总生
物碱 ,由我研究所药物化学教研室从草问荆中提取 ,
并进行分离纯化 ,经黑龙江省药品检验所鉴定 ,主要
成分为犬问荆碱 ( palust rine) ,其绝对构型是 ( 13R ,
17S , 1′S) )-( 1-羟丙基 ) -1, 5, 10-三氮杂二环 [11, 4,
0]十七碳-15烯 -11-酮 [2 ] ,占总生物碱的 95%。
1. 2　动物: Wistar大鼠由哈尔滨医科大学实验动
物学部提供 ,雌雄各半 ,体重 ( 210± 50) g。
1. 3　主要仪器: 2OPD-53D低温高速离心机 (日本
日立公司 ) ; M SE-50低温超速离心机 (英国 ) ; G-
910双波长薄层扫描仪 (日本岛津 )。
2　方法
2. 1　 T AEP对大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的
影响
2. 1. 1　样品的提取 [3 ]:取实验用大鼠 ,断头处死 ,迅
速在冰台上取出脑组织 ,称重。在冰浴下加 10% 三
氯乙酸制成 1∶ 10的脑匀浆 , 3 000 r /min离心 10
min。取一定量的上清液加 2倍正丁醇、 4倍石油醚
振摇 10 min,静置后取出水层 ,低温干燥至 0. 5 mL
(相当 1 g脑组织 ) 做为样品 ,低温放置待测。标准
品配成 1 mg /mL,用上述方法处理。
2. 1. 2　样品的含量测定: 采用双波长扫描定量法。
实验条件: 谷氨酸、天冬氨酸的 λmax为 500 nm,γ-氨
基丁酸甘氨酸的 λmax为 490 nm,参比波长为 700
nm; T LC采用青岛硅胶厂出品的硅胶 G薄层板 ,显
色剂为 20% 三酮乙醇液 ,点样量为 1. 5μL。展开剂
为正丙醇-氨水 ( 6∶ 4) ,采用双波长锯齿扫描反射
法 ,积分跨度为 7～ 97,狭缝 12. 5 mm× 1. 25 mm,
扫描速度 20 mm /min。
2. 2　 TAEP对大鼠纹状体内 Ach含量的影响: 实
验用大鼠 ,分为 TAEP组及对照组。 将大鼠断头处
死 ,在冰台上迅速分离出两侧纹状体 ,称重。 用冰冷
的匀浆液 (每毫升含毒扁豆碱 1× 10- 9、吗啡 1×
10
- 5、扑尔敏 1× 10- 6、 NaCl 9× 10- 3 g )在冰浴下匀
浆 ,超声波匀浆 ( 12 kHz) 2次 ,每次 20 s。将匀浆液
300 r /min离心 ,弃沉淀 ,取上清液为供试品。 含量
测定采用高效液相色谱法测定 [4 ]。
3　结果
3. 1　 TAEP对大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的
影响:见表 1。实验结果表明 , TAEP对大鼠脑内 4
种氨基酸类神经递质 (谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁
酸、天冬氨酸 )的含量均无影响 ( P> 0. 05)。
表 1　 TAEP对大鼠脑内 4种氨基酸递质含量的影响 μg· g- 1
Table 1　Ef fect of TAEP on four kinds of amino acid neurotransmitter in rat brain μg· g- 1
组　别 动物数 剂量 / ( mg· kg- 1) 谷氨酸 γ-氨基丁酸 甘氨酸 天冬氨酸
T AEP 8 60 104. 46± 173. 26 219. 75± 47. 05 119. 23± 13. 65 153. 83± 43. 47
N S对照 8 - 103. 85± 220. 20 232. 50± 27. 00 118. 87± 23. 65 164. 93± 63. 92
3. 2　 T AEP对大鼠纹状体内 Ach含量的影响:见
表 2。 结果表明 , TAEP可显著降低大鼠纹状体内
Ach的含量 ( P < 0. 05)。TAEP 60 mg /kg可使纹状
体内的 Ach含量下降 48. 04% 。
表 2　 TAEP对大鼠纹状体内 Ach含量的影响
Table 2　 Ef fect of TAEP on Ach in striatum of rat
组　别 动物数 剂　量
/ ( mg· kg- 1 )
纹状体 Ach含量
/ (μg· g- 1)
含量降低率
/%
TAEP 10 60 　 10. 22± 0. 45* 48. 04
对照 10 - 19. 67± 7. 40 -
　　与对照组比较: * P < 0. 05
　　 * P < 0. 05 vs cont rol g roup
4　讨论
　　 TAEP使纹状体内 Ach含量显著降低 ,这符合
安定剂阻滞 DA突触后受体功能的作用原理。因为
纹状体内胆碱能神经元是黑质-纹状体 DA通路的
跟随神经元。有 DA突触后受体位于胆碱能神经元
上 ,并通过受体施予紧张性抑制作用 ,当安定剂阻滞
DA受体的功能后 ,胆碱能神经元脱抑制 ,活动增
强 , Ach释放随之增加 ,贮存的 Ach含量减少。这是
TAEP可能影响 DA受体的证据。
有人认为 DA减少是产生帕金森氏症的主要
原因 ,主要由于黑质 -纹状体内 DA减少 ,而在纹状
·339·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 4期 2003年 4月
体内 DA神经与 Ach神经相互拮抗 ,当 DA功能降
低时 ,势必导致 Ach神经元活动加强 , Ach释放增
多。而当 M受体兴奋时 ,可发生肌肉震颤 ,肌紧张增
加 ,从这一点推测 , TAEP在发挥中枢安定作用的同
时也会产生一定的锥体外系副作用。 大鼠、小鼠在注
射 T AEP后则可出现全身颤抖 ,以及僵直症状。
DA受体 ,按其定位有突触前 ,突触后以及自身
DA 受体 ( presynaptic, postsynaptic, auto-recep-
to rs)之分 ,按其生理功能与 DA受体的相关性可分
为 DA-1和 DA-2亚型受体。DA-2型受体的功能与
动物的致吐 ,定型活动、旋转活动、安定效应、催乳素
的分泌等有良好的相关性。 DA-1型受体仅激活腺
苷酸环化酶 ( AC)的活力 ,与上述生理效应缺乏相
关性。最近有人提出 ,精神分裂症患者的一系列躁狂
症状是由于 DA-2型受体增加所致。 有报道精神分
裂症患者的尾核、壳核、伏膈核中 DA-2型受体增加
50%～ 200%。 同时受体的敏感性加强即 DA受体
产生超敏现象。而安定剂之所以对精神分裂症有较
好的疗效主要是阻断了 DA-2受体的原故。根据上
述观点推测 , TAEP的中枢镇静、安定作用可能与
DA-2型受体有关 ,同时也表明 TAEP对精神分裂
症可能具有一定的治疗作用。
γ-氨基丁酸、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸是神经
药理中常涉及到的 4种递质 ,脑内氨基酸神经递质
按其功能主要分为两类: 兴奋性和抑制性 ,酸性氨基
酸谷氨酸 ( Glu)和天冬氨酸 ( Asp)为兴奋性氨基
酸 ,中性氨基酸 γ-氨基丁酸 ( GABA) 和甘氨酸
( Gly)为抑制性递质 [5 ]。实验结果表明: T AEP对这
4种氨基酸含量均无影响 ,因此可以推断 , TAEP对
中枢神经系统的抑制作用与 4种递质无关 ,而是通
过降低 Ach的含量 ,进而影响 DA-2受体达到的。
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天一止咳糖浆的祛痰平喘作用研究
吕圭源 ,来平凡 ,范春雷 ,沈康克 ,石森林 ,葛卫红
(浙江中医学院 ,浙江 杭州　 310053)
摘　要: 目的　观察天一止咳糖浆的祛痰、平喘作用。 方法　采用小鼠酚红法和大鼠毛细管法祛痰试验、喷雾致喘
法和气管螺旋条法平喘试验 ,观察天一止咳糖浆不同剂量组相应作用。 结果　天一止咳糖浆能明显增加小鼠的酚
红排出量和大鼠的排痰量 ,增加豚鼠的哮喘潜伏期和显著扩张支气管平滑肌。 结论　天一止咳糖浆具有显著的祛
痰、平喘作用。
关键词: 天一止咳糖浆 ;祛痰 ;平喘
中图分类号: R286. 4　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 04 0340 03
Effect of Tianyizhike Syrup on dispelling phlegm and relieving asthma
LU
　 ¨ Gui-yuan, LAI Ping-fan, FAN Chun-lei, SHEN Kang-ke, SHI Sen-lin, GE Wei-hong
( Zhejiang Co llege o f TCM , Hang zhou 310053, China)
Abstract: Object　 To observ e the ef fect of Tianyizhike Sy rup on dispel ling phlegm and relieving asth-
ma. Methods　 The phenol red secreting tests in mice, capil la ry method in ra ts, asthma induced by spray-
ing and trachea screw y st rip method on guinea pig were adopted fo r observing the related pha rmacolo gical
ef fect in di fferent do ses of Tianyizhike Syrup. Results　 Tianyizhike Syrup could obv iously increase the
·340· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 4期 2003年 4月
收稿日期: 2002-07-21作者简介:吕圭源 ( 1954— ) ,男 ,浙江中医学院药学系主任 ,教授 ,博导 ,国家新药评审专家 ,全国优秀科技工作者 ,全国优秀教师 ,研究方向为中药药理及新产品开发。 Tel: ( 0571) 86613601