全 文 ：溪黄草离体培养和快速繁殖
贺 红, 冼建春,肖省娥,徐鸿华
(广州中医药大学中药学院, 广东 广州 510405)
摘 要:目的 探讨溪黄草 I sodon ser ra ( Maxim. ) Kudo 离体培养的过程, 为优良品种的快速繁殖奠定基础。
方法 以溪黄草无菌苗的带节茎为外植体, 采用 MT 基本培养基,附加不同植物激素进行试验。结果 培养基中附
加激素 BA 有利于芽的发生;适宜的 BA 浓度为 1 m g/ L ,出芽率高达 100% , 且出芽数量多;基本培养基以完全的
MT 成分为好; 生根培养基选择M T+ 0. 2 mg / L NAA ,生根率为 100% ;试管苗移栽, 成活率为 90% 。结论 通过溪
黄草离体培养的研究, 获得了较高的植株再生频率,建立了有效的组织培养再生体系。
关键词: 溪黄草;离体培养; 快速繁殖
中图分类号: S 567 文献标识码: B 文章编号: 0253 2670( 2001) 03 0255 02
In vitro culture and rapid propagation of Isodon serra
HE Hong , XIAN Jian-chun, XIAO Sheng-e, XU Hong-hua
( Co llege o f Chinese M ateria Medica, Guang zhou Univer sity of T CM , Guang zhou Guangdong 510405, China)
Abstract: Object T o study the in v itro cul ture o f Isodon serra ( M ax im . ) Kudo, so as to lay a foun-
dat ion for the rapid propagat ion of it s improved br eeds. Methods The explants used for culture w ere stem
segments w ith node f rom I . ser ra. T he media w ere M T basal media containing dif ferent plant hormones.
Results T he media containing BA were ef fect ive to induce shoot format ion. Opt imal BA concentr at ion for
shoo t format ion and g row th w as 1mg/ L. M T basal medium was bet ter than 1/ 2 MT . T he opt imal root ing
medium fo r reg enerated shoots w as M T basal medium supplemented w ith 0. 2 mg/ L NAA, a roo t induc-
tion rate of 100% was achiev ed. The surv ival r ate of plant let w as 90% after t ransplant ing under suitable
condit ion. Conclusion A n ef fective plant regenerat ion system has been established for I . serr a on the ba-
sis of factors af fect ing the culture in vi tro.
Key words : I sodon serr a ( M ax im. ) Kudo ; in vit ro culture; rapid propagat ion
溪黄草 Isodon serra ( Max im. ) Kudo 为唇形科
香茶菜属植物, 民间习用草药, 常用清热利湿、凉血
散瘀,治急性黄疸型肝炎, 急性胆囊炎等疾病[ 1]。溪
黄草通常以种子或扦插繁殖[ 2]。由于种子繁殖后代
性状分离大, 扦插繁殖诱导生根困难及繁殖数低等,
难以得到迅速的推广和发展。利用组织培养快繁技
术,既可保持优良品种的种性,又可在短期内使优良
品种迅速推广种植 [ 3]。我们试用植物组织培养技术
进行溪黄草无菌试管苗快速繁殖研究,为工厂化育
苗提供技术依据。
1 材料与方法
1. 1 植物材料:供试材料取自广州中医药大学药
圃,采取溪黄草顶芽或侧芽作为外植体, 用 70%乙
醇消毒 30 s,再用 0. 1%的升汞浸泡 10～15 min,无
菌水清洗 4～5次,接种于 MT 培养基上生长。待苗
茎长有 3～4个节段时, 切取 1 cm 长的带节茎段,接
种在多芽形成的不同培养基上进行离体培养。
1. 2 采用 MT ( M urashig e and Tucker 1969) [ 4]基
本培养基,根据试验要求附加不同浓度的 BA、NAA
等,每天光照 16 h,温度为( 26±1) ℃。
2 结果与分析
2. 1 植物激素对出芽的影响:以带节茎为材料, 接
种于含不同激素的 MT 培养基上, 外植体接种 1 周
左右,开始变绿膨大, 2周后陆续分化形成不定芽, 1
个月后统计结果(表 1)。5培养基均能诱导 80%以
上的出芽率,尤以 2, 4号培养基效果最好,出芽率达
100%。单个外植体诱导芽的数量,以 2号培养基上
最多,出芽数为 6个以上,其次为 4号培养基。因此
在进行溪黄草的离体培养和快速繁殖时,带节茎是
较好的材料, M T 基本培养基附加 BA 能提高成芽
率,并能增加外植体出芽的数量。
2. 2 BA 浓度对出芽的影响:表 2可见,在无 BA 的
·255·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2001 年第 32卷第 3期
收稿日期: 2000-03-27;修回日期: 2000-09-16作者简介:贺 红( 1967-) ,女, 1997年毕业于华南师范大学生物系,获理学博士学位,现为广州中医药大学中药资源室副研究员。主要从事中药生物工程方面的研究工作,目前正在主持国家自然科学基金及广东省自然科学基金等课题的研究,发表论文 30余篇。
表 1 不同激素对出芽的影响
编号 培养基
( mg /L )
外植体数
(个)
出芽率
( % )
单个外植体诱导
芽的数量(个)
1 M T 41 82. 9 2～3
2 MT + BA1 38 100 6个以上
3 M T+ ZT 1 38 92. 1 2～3
4 MT + BA0. 5+ ZT 0. 5 40 100 3～4
5 MT + KT1 42 90. 5 2～3
MT 培养基上,出芽率为80. 0% ,随着BA 浓度的升
高,出芽率增加, BA 为 1 mg/ L 以上时,出芽率均为
100%。单个外植体诱导芽的数量与 BA 浓度有关,
不加 BA 时, 芽数为 2～3个,附加 BA 能增加成芽
数量, BA 1 mg / L 时, 芽数达 6 个以上, 但 BA 浓度
继续增加,出芽数反而下降。同时试验还观察到, BA
为 2 mg/ L 时, 长出的芽矮小, 叶色淡绿,生长受抑
制, BA 为4 mg/ L 时,抑制作用更为明显。因此, M T
附加低浓度的 BA( 1 mg / L )对芽的诱导与生长较为
适宜。
表 2 不同 BA 浓度对出芽的影响
BA 浓度
(m g/ L)
外植体数
(个)
出芽率
( % )
单个外植体诱导芽的数量
(个)
0 35 80. 0 2～3
0. 5 38 94. 7 3～4
1. 0 40 100 6个以上
2. 0 36 100 4～5
4. 0 42 100 2～3
2. 3 基本培养基对芽生长的影响:各选取 35个外
植体, 分别培养在附加 BA 1 mg/ L 的 MT 和1/ 2
M T 培养基上, 培养 1 个月,从产生芽数、苗高度、苗
健壮程度及叶色等方面观察, 发现 MT 明显优于
1/ 2 MT。在 1/ 2 MT 上, 不仅芽数少、苗小, 而且叶
色发黄, 茎细弱,培养一段时间后,部分苗顶出现发
黄、萎缩现象。说明矿质元素减半不利用芽生长, 故
基本培养基以完全的 MT 成分为好。
2. 4 根的诱导:溪黄草外植体培养诱导形成的芽,
生成丛生苗(图 1) , 待苗生长至 2 cm 长时, 切下转
入生根培养基, 转瓶后一般 1个月左右开始形成根,
获得完整植株(图 2)。本试验以 MT 及 MT + 0. 2
mg/ L NAA 为诱导培养基,分别接入 30 及 35个无
根苗,结果表明,溪黄草组培苗较易生根,在无激素
的 MT 培养基上, 生根率为 86%, 附加 0. 2 mg/ L
NA A,生根率可达 100%。
2. 5 幼苗移栽:试管苗移栽能否成活, 是用组培法
进行快繁的重要一环。只有生根试管苗经过移栽后,
根能长出新根和根尖,并能从土壤中或其它栽培介
质中吸取水分及养分,才能成活。方法是选取已生根
的健壮的溪黄草试管苗, 揭开瓶塞,让幼苗在自然光
下或培养室光照下锻炼 2 d,然后取出转入已消毒的
细沙中沙培炼苗,添加 1/ 2 M T 培养液作养分,待生
长稳定,长出新叶后移栽于露天种植, 在移栽的 32
株苗中, 90%获得成活(图 3)。
图 1 带节茎培养诱导出丛生芽 图 2 已长出根的试管苗 图 3 试管苗移栽成活
参考文献:
[ 1 ] 赖小平,陈建南, 陈林姣,等 . 中药资源开发利用研究论文集
[ C] . 广东:广东科技出版社, 1996.
[ 2] 陈建南,赖小平, 刘 念 . 广东溪黄草药材的原植物调查及商
品鉴定[ J] . 中药材, 1996, 19( 2) : 45-47.
[3] 杨世林,张本刚,陈 君,等 . 药材栽培在中药资源可持续利用
中的作用及发展战略[ J] . 中草药, 1999, 30( 11) : 870-873.
[4] Mu rashige T , T uck er D P H. Grow th factor requirem ents of
Ci trus t iss ue cu lture[ J] . Proc firs t Int Cit rus Symp, 1969, 3:
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关键词的标引
据文献报道[陈浩元,郑进保,李兴昌 . 科技书刊标准化 18 讲[ M ] , 北京: 北京师范大学出版社, 1998. ] , 关键词包括两类
词: 1)叙词(正式主题词) ,指收入《汉语主题词表》(叙词表)中可用于标引文献主题概念的即经过规范化的词和词组; 2)直接从
文章的题名、摘要、层次标题或文章其它内容中抽出来的,能反映该文主题概念的自然语言(词或词组) ,即汉语主题词表中的
上位词、下位词、替代词等非正式主题词和词表中找不到的自由词。 (张光华)
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