全 文 ：高表 明左室舒张功能下降 , 同时由于心肌 收
缩力减弱 , L V S P 降低 ,心缩期每搏输 出量减
少 , 心缩末期存 留在心室 内的血量增多 ,加之
静脉 回流量 , 导致 心舒末 期血量 增多 , 也使
L V E D P 升高 。 上述指标变化持续到药后 20
m in 尚 未 恢 复 正 常 。 表 明五味子对心肌收
缩 性能有 直 接 抑 制 作 用 , 且决 非是一 过性
的 。
上述结果可能由于五味矛直接阻断心肌
细胞膜上 p , 受体 ,使心肌细胞膜对 C a Z+ 通透
性降低 。 C Z十是兴奋 一收缩祸联 的媒介 ,心肌细
胞 兴奋 时 C a +2 内流减 少 , 致 使兴奋一收缩 祸
联作用减弱 , 心肌收缩力则减弱 `6 〕 , 因而在本
实验中出现心肌收缩力减弱的一系列力学指
标的变化 。 此外 , C a +2 内流减少 , 可使慢反应
自律 细胞特 别是窦 房结 自律 细胞 自律性 降
低 〔6 〕 , 因而心率减慢 ·
五味子临床常用剂量为每 日 2 ~ 6 9 , 特
别是重用五味子的方剂 中 , 每 日用量达 1 。。 g
之多 , 应警惕剂量过大而出现 中毒现象 〔 7〕 ,尤
其注意对心脏的抑制作用 。 另外 ,诸多因六引
起的心肌收缩过强 ,心动过速 ,导致心肌耗能
量 、 耗氧量过多时 ,适量的五味子可能改善心
肌收缩性能 , 减少耗能量及耗氧量 ,有利于恢
复心肌的正常功能 。
参 考 文 献
l 颜正华 , 等 . 临床实用 中药学 . 北京 : 人 民卫 生出版社 ,
1 98 4
:
5 0 3
2 李 广勋 , 等 . 中药药理 与临床 . 天津 : 天津科技 翻译 出
版公 司 , 19 9 2 : 3 2 7
3 湖北 中医学院主编 . 药剂学 . 上海 : 上海科学技术 出版
社 , 1 9 7 9 : 3 5 1
4 陈 修 , 等 . 药学学报 , 1 9 8 0 , 1 5 ( 2 ) : 7 1
5 周衍椒 , 等 . 生 理学方法 与技术 . 第 二集 . 北京 : 科 学
技术 出版社 , 1 9 8 4 : 3 4
6 施雪 摘 , 等 . 生 理学 . 上 海 : 上海 科 学 技 术 出版 社 ,
1 9 9 5
:
5 7
、
8 5
7 赵桂 兰 . 中医药学 报 , 1 9 96 , ( 4) : 2 0
( 1 9 9 8
一
0 8
一
2 5 收稿 )
茶芍多糖的提取及其免疫活性研究 △
江西 中医学 院 (南 昌 3 3 0 0 0 6) 罗永明 么 余 日跃 朱 英
伞 形 科 植 物 茶 芍 L i g u s t i c u m 、 i n e n s己 O l iv
vc
.
C ha ix on g 是江西特产中药之一 , 具有 行气活 血 、
祛风止痛之功效 。 我们先后从中分离了 21 个化学成
分 〔`一 3〕 , 并进行了心血管 、 抗惊厥等方面 的系统药理
研究 〔` , 5〕 。 民间将茶芍与茶 叶一起泡水饮用 , 有 防病 、
健身 、 强壮作用 , 我们 又对茶芍中含量较高的水溶性
成分茶芍多糖进行了提取分离 和免疫活性 的研究 。
1 实验材料
1
.
1 药材 : 茶芍药材购 自江西省瑞 昌市 医药公 司 ,
由我院 中药 鉴定教研室张 治针老师鉴定 品种 。
1
.
2 动 物 : B al b / 。 小鼠由江西省 医学实验动物 中心
提供 。
1
.
3 试剂和药 品 : “ H 一 T d R 为中 国原子能 研究所 出
品 , R PM I一 1 6 4 0 培养 基 为 G I B C O 产 品 , 环 磷 酞 胺
(C y )为上海第十二制药 厂产 品 , 植物凝集素为 中国
医学科学院出品 , 所用 化学试剂均为分析纯 。
1
.
4 仪器 : F J一 2 1O I G 双道液体闪烁计数器 ,二氧化
碳孵箱 ; 72 1 型分光光度计 。
2 方法与结果
2
.
1 茶芍 多糖的提取分离 : 将茶芍药 材切成薄片后
加 9 5% 乙醇回流提取 , 药 渣挥千 溶剂后用沸水提取
3 次 ,每次 3 0 m in , 合并 3 次滤液 , 浓缩 至相 当于 生
药量 1 : 1 的流浸 膏 , 加 3 倍量 的 95 % 乙醇沉淀 , 放
置 12 h 后离 心 , 滤 出沉淀 , 干燥后 加水溶解 , 用 S e -
va g 法除去蛋 白质 , 除至苟三酮反 应呈阴性 。 加 95 %
乙 醇 至含醇量 为 80 % , 放置过夜 , 将析 出的沉淀过
, 罗永 明 1 9 8: 年咖于江西 中医学院药学系药学专 业 , 1 。8 8 年中药学专业研究生毕业并获得硕士学位 。 现任 江西 中医学 院药学系教授 。 一直从事 中草药活性成分的研究 。 主持 国家 自然 科学 基金课 题 2 项和卫 生部 青年科 学研究 基金 及江 西省 自然科学 基金课题多项 。 参加 了国家医药科技攻关计划 “ 1 0 3 5 工程 ” 项 目等重大课题的研究工作 。 近年主要研 究成果 “ 中药 茶芍化学成分及拮抗谷 氨酸神经毒性的研究 ” 获 江西省科技 进步三等奖 。 发表学术论文 30 余篇 。△ 国家 自然科学基金 资助项 目
.
1 2 4
.
滤抽干 , 并依次用 乙醇 , 丙酮 、 乙醚洗涤多次 ,将沉淀 2 . 3 茶芍多糖对小 鼠溶 血素 、 胸腺和脾脏重量 的影
于 s o C 干燥 , 即得黄 褐色粉末状的茶芍多糖 ( L P ) 。 响 : B al b c/ 小 鼠 4 0 只 ,体重 14 ~ 17 9 , 雌 雄兼 用 , 随
2
.
2 茶芍多 糖 的初步分析 :称取 L P 0 . 1 9 溶于 10 机分成 4 组 。 每 鼠 iP S% 生理盐水鸡红细胞悬液 0 . 2
m l
, 蒸馏 水中 ,加 6 m ol / L H lC lo m L 进行水解 s h , m L 进行免疫 , 同 日按表 l ig L P 或生理盐水 ( N )S ,
水解 液用 10 % N a O H 液中和 , 过滤 , 滤 液浓 缩后 点 连续 s d , C y 组和 L P + C y 组同时 iP 环磷酞胺 (C y ) ,
于层 析滤纸 上 , 另取葡 萄糖等多 种对 照液点 于 同一 连续 3 d , 末次 19 给药 24 h 后 , 摘 眼取血 , 离心取 血
张 层析滤纸上 ,分别用正 丁醇 一醋酸 一水 (4 : 3 : 5) 上 清 , 按文献方法印以光密度 (O D )读数作为血清溶血
层 、 正丁 醇一 乙醇一水 (4 : 3 : 3) 和 正 丁醇一 毗吮一水 (6 素的指标 , 测 定各组溶血素抗体水平 ;剖取小 鼠胸腺
: 4 : 3 )3 种不 同展 开剂展 开后 , 晾干 , 喷苯胺 一邻苯 和脾脏称重 , 比较各组差异 ,结果见表 1 。
二 甲酸试剂 , 于 1肠 C显 色 10 m in , 结果水解液 呈现 结果 表明 : L P 能 非常显 著地拮抗 C y 所致 的体
的斑点与葡萄糖 、 半乳糖 、 果糖 的 R f 值 和颜色相 同 。 液免疫抑 制 ,使其恢复正 常 ,说明 L P 能提高机体体
表 明 L P 是 由葡萄糖 、 半乳糖 、 果糖组成的杂多糖 。 液免疫能力 。 表 1 结果还显示 , L P 能显著或非常显
精密称取 L P 10 0 m g , 按苯酚 一浓硫酸法 测定 〔 6〕 著地增加 正常或 C y 组小 鼠的脾脏 和胸腺 的重 量 ,
L P 含量 为 1 . 95 % 。 说明 L P 能提高机体的非特异免疫功能 。
表 1 L P 对小鼠溶血案 、 胸腺 、 脾脏互 t 的影响任士 s)
组别 鼠数 、m黯 . d。 给药途经 OD 值 严熏k】】19 尹 胸腺重( m g )
19
.
prN S
C y
I
J
P
L P 十 C y
l O
10
l 0
l 0
4 0
50 0
5 0 0+ 4 0
l g
19 + ip
0
.
3 0 6士 0 . 0 8
0
.
1 3 2士 0 . 0 4
0
.
3 4 9士 0 . 1 0
0
.
2 8 7士 0 . 0 7
8 0
.
5士 1 1 1
5 8
.
6士 15 . 4
1 00
.
3士 1 7 . 2△△
7 2
.
7士 1 2 . 6 伪
4 3
.
8士 1 5 . 3
1 5
.
0士 4 . 1
6 2
.
1土 1 8 . 4△△
4 1
.
9士 1 3 . 7 . 份 书
与 N S 组 比较 : △△尸 < 。 . 0 1 ; 与 C y 组 比较 : ` 尸 < 0 . 05 ` . 尸 < 。 . 01 ’ ` “ 尸 < 0 . 0 01
2
.
4 茶弯多糖对小 鼠 T 淋 巴细胞转化率的影响 , 3
只 aB lb / 。 小 鼠于 无菌状态 下取脾 , 并 置人含 5 %小
牛血 清的 H a n k , s 液中 , 剪碎 , 离 心 ( 1 0 0 0 r /m i n ) l
m in
,取细胞悬液用 R PM I一 1 6 4 0 培养液离 心 ( 2 0 0 0
r
/m in )
,洗涤 2 次 , 配成 1了 个细胞 /毫升 ,在 96 孔培
养板中 , 每孔加人 1 0 0 拼L , 每组 3 孔 , 另设不给药组 ,
逐项加人 L P 和植物凝集 素 ( P H A )各 50 拌L , 使各组
浓度符合表 2 所示浓度 。 于含 5 % C O : 孵箱中 , 3 7℃
依表 2 中时 间培养 , 于培养结束前加人 “ H 一T d R 0 . 25
cu i/ 孔 。 培养结束后取各孔细胞 于 69 号玻璃纤维滤
纸上过滤 并依 次用 蒸馏水 Z m L 、 10 % 三抓醋酸 2
m L 和无水 乙 醇 l m L 洗 涤 , 滤 纸 80 ℃ 干燥 30 m in
后放人 s m L 闪烁液中 , 过夜测试 , 并按下式计算淋
巴细胞转化指数 ( A ) 〔7” , 结果见表 2 。
组别 L P (滩 / m L ) P H A
(拌g /m L )
t ( h ) e p m 转化指数 A
0uJCOōhL9 a曰01直,dq自Q…1, .11
空 白组
优化组
l 6
3 2
6 3
1 2 5
2 50
5 0 0
5 0 0
3 1 60 0
2 7 6 94
2 9 6 5 2
3 6 3 9 0
3 3 2 8 5
5 1 3 2 5
2 6 3 4 0
4 8 5 3 3
1,曰勺O月4亡Jùh
1
.飞8
nJ几0.0ōb11,曰Qùn乙ōbQé10巴J工50nJA人户3叮山八jA通匕ló
淋 巴 细胞转化指数 一 实验组 c pm对照组 c pm
将结果用计算机进行逐步 回归 ,求得 回归方程 :
A = 1
.
0 6 3+ 0
.
0 0 1 6 L P ( r = 0
.
9 2 2 1
,
F ~ 2 2
.
7 1 )
结果表咀 , L P 浓度越 高 , c pm 值就越高 , 转化指数越
高 , 即能提高 T 淋 巴 细胞转化率 。 提示 L P 具有促进
细胞免疫的作用 ,并具 良好的量效关系 。
3 讨论
以往茶夸的研究常局 限于挥发油或苯酞类等脂
注 : 表 中 L P 、 P H A 、 t 值是通过均匀设计法优选而确定
溶性成分的研究 , 而对于水溶性成分 的研究甚少 , 通
过对茶芍多糖及其免疫 活性 的研究 , 将 为茶芍 的研
究提供一种新 的思路 , 另外 , 茶芍多糖是 用醇提后 的
药 渣来进行提取的 , 且含量 较高 , 提 取分离 方 法简
便 , 这为茶芍的进 一步开 发和综合利 用开辟 了一条
新 的途 径 。
参 考 文 献
1 罗永 明 ,等 . 中国药学杂志 , 1 9 9 4 , 2 9 ( 1 2 ) : 7 1 4
2 罗永 明 ,等 . 中国中药杂志 , 1 9 95 , 2 0 ( 1) : 39
3 罗永 明 ,等 . 中草药 , 1 9 9 6 , 2 7 ( 8 ) : 4 5 6
4 陈 奇 , 等 · 、中药 通报 , 1 9 8 5 , 1 0 ( 5 ) : 4 4
5 潘 家枯 , 等 . 神经科学 , 1 9 95 , (增刊 ) : 19 3
6 唐晓玲 , 等 . 中成药 , 19 9 5 , 17( 7) : 7
7 李仪奎 . 中药药理实 验方法 学 . 上海 : 上 海科技 出版
社 , 1 9 9 1 : 1 5 5 、 1 6 5
( 1 9 9 8
一
0 3一 1 5 收稿 )
《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 2 期 . 1 2 5 .