全 文 ：AB-8树脂对苦参总黄酮的吸附 ,以 3 BV /h的流速
为最佳。
3. 2　 AB-8树脂的脱附性能
3. 2. 1　洗脱液的选择:树脂吸附苦参总黄酮以后 ,
从吸附效率、节能、省时等角度考虑 ,洗脱液以醇类
较佳 [10 ]。 取浓度为 0. 285 mg /mL苦参微滤液 ,调
pH= 4,在 3 BV /h的流速下吸附后 ,比较用不同浓
度的乙醇液洗脱 ,用紫外检测 ,结果表明 ,用 50%乙
醇做洗脱剂效果较好。
3. 2. 2　解吸曲线: 用 50%乙醇 洗脱 ,流速为
3 BV /h,解吸曲线见图 5,可见 ,用 4倍树脂床体积
的洗脱液即可将苦参总黄酮基本上解吸下来。
图 5　 AB-8树脂的解吸曲线
解吸操作自下而上 (逆向洗脱 )为佳 ,解吸后的
树脂用水洗后进行下次吸附操作 (正向吸附 ) ,反复
使用。
4　结论与讨论
4. 1　 AB-8树脂精制苦参总黄酮是可行的。当原液
浓度 0. 285 mg /mL、 pH值为 4、流速为 3 BV /h时 ,
AB-8树脂对苦参总黄酮的吸附效果良好。 用 50%
的乙醇能将所试样品中已吸附的苦参总黄酮基本上
洗脱下来。
4. 2　上柱前 ,苦参药液应经滤过 ,以免污染堵塞树
脂。 本文要用陶瓷膜错流过滤法对药液直接进行澄
清处理 ,有效地去除了提取液中的悬浮物质 ,为大孔
吸附树脂提供了可靠的预处理。
　　致谢:感谢南京中医药大学 97级中药制药专业
单进军同学和 98级海洋药学专业陈爱萍同学在本
文中所做的部分实验工作。
参考文献:
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609.
RP-HPLC-ELSD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的含量
沈　岚 ,朱沪平 ,宋　崎 ,陈　明 ,范广平⒇
(上海中医药大学 ,上海　 200032)
摘　要: 目的　阐明 ELSD对于检测菝葜皂苷元等不含发色团的化合物是一种优越的检测器 ,为知母药材及含知
母制剂提供了一种可靠的质检手段。 方法　采用 RP-HPLC-ELSD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的
含量。 结果　分离完全的色谱峰 ,有良好的线性关系 , r= 0. 999 0,对药材及制剂测定的回收率分别为 100. 5% 、
91. 38%。 结论　该方法先进 、可靠、简便 ,可广泛用于知母药材及含知母制剂的质量监控。
关键词: RP-HPLC-ELSD;知母 ;菝葜皂苷元
中国分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 10 0889 03
·889·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 10期
⒇ 收稿日期: 2000-12-28作者简介:沈　岚 ( 1975-) ,女 ,上海人 ,助教 ,药剂学硕士 ,工作于上海中医药大学中药学院中心实验室 ,研究方向为中药药剂及质量分析 ,通讯方法: Te: ( 021) 54231923　 E-mail: alan 7598@ online. sh . cn
Determination of sarsasapogenin in crude Anemarrhena asphodeloides and
its preparation by RP-HPLC-ELSD
SHEN Lan, ZHU Hu-ping , SONG Qi, CHEN Ming , FAN Guang-ping
　　 ( Shanghai Univ ersity of TCM , Shanghai 200032, China)
Abstract: Object　 To show tha t ELSD is an excellent detector fo r the detection of chemical com-
pounds devoid of ch romopho re, such as sarsasapogenin. Methods　 Sarsasapogenin in crude Anemar-rhena
asphodeloides Bunge and i ts preparation w as determinated by RP-HPLC-ELSD. Results　 The w ell sepa-
ra ted chroma tog raphic peaks show linea ri ty wi th recovery of the added sample o f 100. 5% in crude medici-
nal material and 91. 38% in its preparation, r= 0. 999 0. Conclusion　 The method was advanced, reli-
able, simple and can be used fo r quality cont rol of crude A. asphodeloides and its preparations.
Key words: RP-HPLC-ELSD; Anemarrhena asphadeloides Bunge; sa rsasapogenin
　　知母 Anemarrhena asphodeloides Bunge为常
用中药 ,现代药理研究表明知母皂苷及皂苷元为其
清热泻火、生津润燥的主要活性成分 [1 ] ,其中菝葜皂
苷元作为指标成分用于知母药材及含知母制剂的质
量监控。
有文献报道 ,采用 RP-HPLC-RI法可分离测定
知母药材中菝葜皂苷元 [2 ]。 由于菝葜皂苷元在紫外
区内几乎无吸收 ,仅在近紫外区有末端吸收 ,因此用
UV检测器时将由于溶剂的干扰而无法测定。 本文
采用蒸发光散射 ( ELSD)检测器 ,流动相溶剂喷雾
气化 ,进入加热管后溶剂挥发 ,而被分析检测的物质
颗粒经镭射光产生散射 ,散射光由光电倍增管收集
得到响应 ,由被分析物质的颗粒数量和大小决定光
散射检测器的响应大小 ,不受流动相溶剂的干扰。经
对知母药材及制剂样品中的菝葜皂苷元进行含量测
定 ,结果表明 , RP-HPLC-ELSD方法先进 ,操作简
单 ,结果可靠 ,灵敏度、重现性均能满足分析要求 ,是
一种良好的菝葜皂苷元的测定方法 ,可广泛应用于
知母及含知母制剂的质量监控。 该法应用于含知母
制剂的含量测定尚属首次报道。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪: HP1100液相系统 (惠普公
司 ) ;检测器: PL-ELSD1000(英国 Polymer labora-
to ries) ;超声波清洗机: 2200型。
菝葜皂苷元对照品 (中国药品生物制品检定所 ,
批号 744-9904,含量测定用 ) ;知母药材对照品 (中
国药品生物制品检定所 ,批号 1090-9901) ;知母药
材 (上海市药材公司 ) ;含知母制剂样品 (自制 ) ;大补
阴丸 (杭州胡庆余堂制药厂 ) ;阴性样品 (自制 ) ;甲醇
为色谱纯 ;用水均为重蒸馏水 ;试剂均为分析纯。
2　色谱条件
色谱柱: LUN A　 5μm C18 250 mm× 4. 6 mm
S /No 373896 (迪马公司 ) ;流动相: 甲醇 ,流速:
1. 5 mL /min;柱温:室温 ,蒸发温度: 100℃ ,雾化温
度: 80℃ ,气体流速比: 1. 5。
3　方法和结果
3. 1　对照品溶液的制备:精密称取菝葜皂苷元对照
品 ,用甲醇配制成约 0. 5 mg /mL的溶液。
3. 2　供试品溶液的制备: 分别取知母药材、知母对
照药材、制剂样品及阴性样品粉碎 ,干燥至恒重 ,精
密称取适量置锥形瓶中 ,加乙醇 20 mL浸泡 1 h,超
声处理 20 min,移至离心管中 ,离心 5 min,吸取上清
液 ;残渣再用乙醇超声处理两次 ,每次 20 min并离
心 ;合并 3次上清液 ,加盐酸 4 mL,置水浴上用蒸气
缓慢回流 1 h移至蒸发皿中浓缩至适量 ,用苯振摇提
取两次 ,合并提取液并蒸干 ;残渣用甲醇溶解并转移
至 5 mL容量瓶中 ,稀释至刻度 ,摇匀 ,作为供试品溶
液。
3. 3　标准曲线的建立: 精密吸取对照品溶液
( 0. 46 mg /mL) 5, 10, 15, 20, 25μL,按上述色谱条
件测定峰面积 A (见图 1) ;溶剂无干扰。 以 lgA为纵
坐标 , lgM为横坐标绘制标准曲线。计算得回归方程
为: lgA= 3. 571 7+ 1. 364 0 lgM , r= 0. 999 0,表明
菝葜皂苷元在 2. 3～ 11. 5μg范围内呈线性关系。
3. 4　精密度试验:精密吸取上述对照品溶液 5μL重
复进样 5次 ,RSD为 0. 76%。
3. 5　重现性试验
3. 5. 1　药材的重现性试验:精密称取 5份知母药材
粉末 (产地:吉林 ) ,按上述方法测定 ,结果 ,药材色谱
图见图 1。 菝葜皂苷元含量为 10. 21 mg /g , RSD=
3. 61%。
3. 5. 2　制剂的重现性试验: 精密称取 5份制剂样
品 ,按上述方法测定 ,结果菝葜皂苷元含量为
2. 95 mg /g , RSD= 0. 58% 。阴性样品的测试表明无
干扰。
3. 6　加样回收试验
·890· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 10期
3. 6. 1　药材的加样回收试验:精密称取 5份知母药
材粉末 ,分别加入一定量的对照品溶液 ,按上述方法
测定 ,计算回收率 ,结果为 100. 5% , RSD= 1. 5%。
3. 6. 2　制剂的加样回收试验:精密称取 5份制剂样
品 , 每 份 1 g , 分 别 加 入 2 mL对 照 品 溶 液
( 1. 1 mg /m L) ,按上述方法测定 ,计算回收率 ,结果
1-菝葜皂苷元　　　　 2-知母药材　　　　 3-制剂样品
图 1　样品色谱图
为 91. 38% , RSD= 0. 71%
3. 7　样品含量测定
3. 7. 1　药材的含量测定:对知母不同产地药材及对
照药材按上述方法测定 ,结果见表 1。
表 1　药材的含量测定 (n= 3)
名称 产地 菝葜皂苷元 ( mg /g) R SD (% )
知母对照药材 检定所 19. 68 1. 15
知母药材 (盐炒 ) 吉林 10. 21 3. 61
知母肉 安国 10. 10 1. 40
知母肉 安国 12. 19 1. 07
知母 长春 15. 42 0. 60
3. 7. 2　制剂的含量测定:对自制的 3批制剂样品及
市售大补阴丸按上述方法测定 ,结果见表 2。
表 2　制剂的含量测定 (n= 3)
批号 菝葜皂苷元 ( mg /g) RSD (% )
自制 0101 3. 58 5. 03
自制 0102 2. 95 0. 58
自制 0103 2. 63 1. 54
大补阴丸 2. 40 3. 79
4　讨论
4. 1　前处理方法的优选: 由于 ELSD检测器是一
种通用型检测器 ,因此样品前处理对分离结果至关
重要。本文曾选用石油醚-正丁醇、乙醚 -正丁醇等提
取系统对制剂进行前处理 ,结果均不理想。采用本文
确定的方法 ,经对乙醇提取次数及苯提取次数的考
察 ,确定为乙醇提取 3次 ,水解后 ,苯提取 2次最佳。
4. 2　流动相的优选: 根据文献的溶剂系统 ,采用甲
醇为流动相。曾试用甲醇 -水、甲醇-乙腈、甲醇-乙腈
-水及甲醇 -四氢呋喃等系统为流动相 ,均可达到一
定的分离 ,但效果不够理想。由于 ELSD检测的信
号是溶剂挥发后的溶质粒子 ,因此流动相浓度的变
化不会引起基线的明显漂移 ,所以对于复杂难分离
成分的检测可以考虑采用上述溶剂系统梯度洗脱方
式加以测定。
参考文献:
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安神补心胶囊的 X射线衍射 Fourier谱分析
赵　斌 1 ,张惠燕 2 ,李兰燕 1 ,郑启泰 1 ,吕　扬 1⒇
( 1. 中国医学科学院 中国协和医科大学药物研究所 ,北京　 100050;　 2. 国家药典委员会 ,北京　 100061)
摘　要: 目的　鉴定和控制安神补心胶囊的质量和标准。 方法　采用粉末 X射线衍射 Fourier图谱分析方法 ,给出
安神补心胶囊的 X射线衍射 Fourier图谱的几何拓扑图形及其衍射特征标记峰值。 结果　对 2个厂家生产的各 3
批样品粉末 X射线衍射 Fourier图谱分析能够表示中成药中全部成分的整体结构信息。 结论　以此可以对安神补
心胶囊实现质量的微观鉴定和控制。
关键词: 中成药 ;安神补心胶囊 ; X射线衍射
·891·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 10期
⒇ 收稿日期: 2001-03-06基金项目:国家教委博士点项目基金资助。作者简介:吕　扬 ( 1959-) ,女 ,研究员 ,研究方向为药物 (大分子与小分子 )单晶 X射线衍射结构分析、粉末 X射线衍射分析和计算机辅助药物设计。先后承担 8项国家和部委级研究课题。在国内外学术刊物上已发表研究论文 118篇。获得部、省级等科研奖励 6项。通讯联系: Tel: ( 010) 63165212　 E-mai l: luyang_ imm@ sohu. com