全 文 ：·药剂与工艺·
丙肝康颗粒剂质量标准的研究
彭　勃,袁　珂, 胡润淮,黄朝阳,孙　伟
a
,张晓明*
(河南中医学院,河南 郑州　450008)
摘　要: 目的　研究丙肝康颗粒剂的质量控制标准。方法　采用薄层色谱法对制剂中的女贞子、黄芪、虎杖、板蓝根
和五味子进行定性鉴别, 并用薄层扫描法对制剂中的主药西洋参进行含量测定。结果　线性范围 2. 08～10. 40 Lg ,
平均回收率为 97. 64% , RS D 为 1. 74%。结论　该法灵敏、简便、准确和重现性好, 可作为该制剂的质量控制标准。
关键词: 丙肝康颗粒剂;质量标准; 薄层色谱法;人参皂苷 Rg1
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0019 03
Studies on standard for quality control of BINGGANKANGGRANULE
( A compound herbal preparation for treatment of hepatitis C)
PENG Bo, YUAN Ke, HU Run-huai, HUANG Chao-yang , SUN Wei, ZHANG Xiao-ming
　　( Henan Co lleg e of T CM , Zhengzhou Henan 450008, China)
Abstract: Object　 T he formulation o f a standard for the quality cont rol o f BINGGANKANG
GRANU LE was studied. Methods　T he presence o f Fructus L igust ri L ucidi, Radix Astr agahi, Rhiz oma
Polygoni Cusp id ati , Rad ix Isat idis and Fructus S chisandrae Chinensis wer e ident if ied by TLC. The content
of ginsenoside Rg 1, the main act iv e principle in the g ranule derived from Panax quinquef ol ius L. w as
assayed by T LCS. Results　Linearity w as found in the range from 2. 08～10. 40 Lg o f g insenoside Rg1 , the
average recover y w as 97. 64% and RSD = 1. 74%. Conclusion　The method w as found to be highly
sensit ive, simple, pr ecise and r eproducible and may be used for the quality cont rol of the granule.
Key words : BINGGANKANG GRANU LE; quality cont rol standard; TLC; ginseno side Rg 1
　　丙肝康颗粒剂为我院研制的一种中药新药,由
西洋参、女贞子、黄芪、五味子、板蓝根、虎杖、山豆
根、甘草、生苡仁和紫河车 10 味中药组成, 具有解
毒、保肝、降酶和增强机体免疫功能等方面的作用。
该制剂在我院一、二附院进行了临床观察, 证明对
急、慢性丙型肝炎具有很好的疗效。为了控制该产品
的质量,保证临床用药效果,我们对丙肝颗粒剂的质
量标准进行了研究。根据处方中各药材的理化性质,
采用薄层色谱法对制剂中的女贞子、黄芪、五味子、
板蓝根及虎杖进行了定性鉴别, 而该制剂中的君药
为西洋参,因本品为多味中药的大复方,群药对测定
西洋参所含皂苷成分有干扰, 故本文参照文献[ 1]采
用双波长薄层扫描法测定丙肝康颗粒中人参皂苷
Rg 1 的含量, 方法简便易行, 能排除其它成分的干
扰,结果满意,可作为控制该制剂质量的方法。
1　仪器及材料
1. 1　仪器: CS-9301 双波长薄层扫描仪 (日本岛
津) ;三用紫外线分析仪(江苏省江阴市申港电光仪
器厂生产) ; 点样定量毛细管( Dr ummond Scientif ic
CO U SA) ; BPQI 型薄板自动铺板器(重庆南岸新力
实验电器厂)。
1. 2　材料: 薄层层析用硅胶 G 及硅胶 GF254 (青岛
海洋化工厂生产) ;丙肝康颗粒剂(自制)。处方中药
材购自河南省药材公司, 经河南省药检所鉴定,符合
药典规定。人参皂苷Rg1、齐墩果酸、黄芪甲苷、大黄
素、靛蓝及五味子甲素对照品由中国药品生物制品
检定所提供;实验所用试剂均为分析纯。
2　定性鉴别
2. 1　女贞子的鉴别:取本品 10 g, 置索氏提取器中,
加氯仿 60 mL 提取 2 h,回收氯仿液, 残渣加氯仿-
甲醇( 1∶1)溶解定容至 5 mL 作为供试品溶液。另
取女贞子对照药材 5 g 和去女贞子的阴性样品 10
g ,同法制成对照药材溶液和阴性对照品溶液。再取
齐墩果酸对照品,加甲醇溶解配成每 1 mL 含 1 mg
·19·中草药　Chinese T raditional and Herbal Drug s　2001 年第 32卷第 1期
a 收稿日期: 2000-02-14基金项目:河南省科技攻关资助课题,第 981170643号
* 本院中药系毕业实习生
的溶液,作为对照品溶液。吸取对照品溶液 2 LL,其
它 3 种溶液 8 LL, 分别点于同一硅胶 G 板上,以环
己烷-丙酮-乙酸乙酯( 4∶2∶1)为展开剂展开, 取出
晾干, 喷以 20%硫酸乙醇液显色,电吹风加热至斑
点清晰,供试品色谱中,在与对照品色谱及对照药材
色谱的相应位置上显相同的樱红色斑点,阴性对照
无干扰(图 1-A )。
2. 2　黄芪的鉴别 [ 2] :取本品20g , 加甲醇适量浸泡
图 1　样品中药材的 TLC图
过夜, 然后索氏提取 6 h, 回收甲醇至干。残渣加水
50 mL 溶解,用氯仿萃取 3 次( 30, 30, 20 mL) , 弃去
氯仿层, 再用水饱和的正丁醇萃取 3 次( 30, 20, 20
mL) ,收集正丁醇液,用正丁醇饱和的 5%NaOH 水
溶液洗 3 次( 30, 30, 20 mL) ,再用正丁醇饱和的水
液洗 3次( 30, 30, 30 mL)至中性。收集正丁醇液在
水浴上蒸干, 残渣用甲醇溶解至 5 mL 作为供试品
溶液。另取黄芪对照药材 5 g 及去黄芪的阴性样品
20 g ,同法制备,作为对照药材溶液和阴性对照品溶
液。再取黄芪甲苷对照品, 用甲醇溶解配成每 1 mL
含 1 mg 的溶液,作为对照品溶液。分别吸取上述 4
种溶液各 6 LL 点于同一硅胶 G板上,以氯仿-甲醇-
水( 65∶35∶10)下层为展开剂展开, 取出晾干, 喷以
20%硫酸乙醇液,在 105 ℃烘约 5 min,供试品色谱
中,在与对照品色谱及对照药材色谱的相应位置上
显示相同的棕褐色斑点,阴性对照无干扰(图 1-B)。
2. 3　五味子的鉴别:取本品 10 g 置索氏提取器中,
加入 60 mL 氯仿提取 2 h, 挥去氯仿,残渣用甲醇-
氯仿( 1∶1)溶解定容 5 mL 作为供试品溶液。另取
五味子对照药材 5 g 及去五味子的阴性对照品 10
g ,同法制成对照药材溶液和阴性对照品溶液。再取
五味子甲素对照品, 用甲醇溶解配成每 1 mL 含 1
mg 的溶液,作为对照品溶液。吸取上述对照品溶液
4 LL, 其它 3 种溶液 10 LL, 分别点于同一硅胶
GF254板上, 以苯-乙酸乙酯( 9∶1)为展开剂展开,取
出晾干,在紫外灯( 254 nm )下观察, 供试品色谱中,
在与对照品及对照药材色谱的相应位置上显相同的
蓝色斑点,阴性对照无干扰(图 1-C)。
2. 4　虎杖的鉴别:取本品 10 g 置带塞三角瓶中, 加
入 30 mL 甲醇浸泡 1 h,过滤,挥去甲醇, 残渣用甲
醇溶解,定容至 5 mL 作为供试品溶液。另取虎杖对
照药材5 g ,加甲醇 30 mL,回流提取 2 h,过滤,滤液
蒸干,残渣加入甲醇溶解,定容至 5 mL 作为对照药
材溶液。取去虎杖的阴性对照品,照供试品溶液的制
备方法制成阴性对照品溶液。再取大黄素对照品, 用
甲醇溶解, 配成每 1 mL 含 0. 2 mg 的对照品溶液。
分别吸取上述溶液各 6 LL, 点于同一硅胶 G 板上,
以石油醚-乙酸乙酯-甲酸 ( 15∶5∶1)为展开剂展
开,取出晾干,可见光下观察, 供试品色谱中, 在与对
照品色谱及对照药材色谱的相应位置上显相同的黄
色斑点,阴性对照无干扰(图 1-D)。
2. 5　板蓝根的鉴别[ 3] : 取本品 20 g , 加 5 mL 氯仿
回流提取 2 h,将提取液浓缩至适量,定容至 1 mL
作为供试品溶液。另取板蓝根对照药材 5 g 及去板
蓝根的阴性对照品 20 g, 同法制成对照药材溶液和
阴性对照品溶液。再取靛蓝对照品,用氯仿溶解配成
每 1 mL 含 1 mg 的溶液,作为对照品溶液。吸取上
述供试品溶液和阴性对照品溶液各 20 LL, 对照品
溶液和对照药材溶液各 4 LL,点于同一硅胶 G薄层
板上,先用展开剂 A:四氢呋喃-三乙胺( 20∶1)上行
·20· 中草药　Chinese T raditional and Herbal Drug s　2001 年第 32卷第 1期
展开, 待条状斑点上移 1 cm 时取出,晾干后将薄层
板置展开剂 B 中: 苯-氯仿-丙酮( 5∶4∶1)上行展
开,可见光下观察, 供试品色谱中, 在与对照品色谱
及对照药材色谱的相应位置上显相同的蓝色斑点,
阴性对照无干扰(图 1-E)。
3　含量测定
3. 1　薄层层析及薄层扫描条件: 吸附剂: 硅胶 G-
0. 3%CMC-Na 搅拌均匀后涂布于玻璃板( 10 cm×
20 cm)上, 厚度为 0. 5 mm ,室温阴干后于 105 ℃活
化 1 h 后置干燥器中备用。展开剂: 氯仿-甲醇-水
( 65∶35∶10)下层, 展开方式: 上行展开, 显色剂:
20%硫酸乙醇液,用电吹风加热至斑点清晰。
采用反射法双波长锯齿扫描法, 狭缝 1. 2
mm×1. 2 mm ,线性参数 Sx = 3, 灵敏度中等,测定
样品波长 KS= 525 nm , KR= 700 nm。
3. 2　对照品溶液及样品溶液的制备[ 4] :精密称取人
参皂苷 Rg 1 5. 20 mg ,置 5 mL 容量瓶中, 加甲醇溶
解并稀释至刻度, 为 1. 04 mg / mL。
精密称取丙肝康颗粒剂 10. 02 g ,研细后置索氏
提取器中,以甲醇提取4 h。回收甲醇至干,残渣用50
mL 水溶解, 置分液漏斗中用乙醚提 4 次( 40, 30, 20,
20 mL) ,弃去乙醚层, 水层再用水饱和的正丁醇萃取
4 次( 40, 30, 20, 20 mL) ,合并正丁醇液,用正丁醇饱
和的5% NaOH 水溶液洗 4 次( 30, 20, 20, 20 mL) ,
弃去碱水层, 再用正丁醇饱和水溶液洗 4 次至中性
( 30, 30, 30, 30 mL) ,弃去水液,正丁醇液置水浴上蒸
干, 残渣加甲醇溶解,定容至 5 mL 容量瓶中备用。
3. 3　线性化范围试验:用定量毛细管吸取上述对照
品溶液 2. 0, 4. 0, 6. 0, 8. 0, 10. 0 LL 点于同一硅胶 G
薄层板上,以上述展开剂展开, 取出晾干后, 喷以上
述显色剂,用电吹风加热至斑点清晰,放凉后进行扫
描测定。以对照品量( Lg )为横坐标,以斑点峰面积
值为纵坐标绘制标准曲线, 求得人参皂苷 Rg 1的回
归方程 Y= 523. 01X- 115. 37, r= 0. 999( n= 5)。结
果表明人参皂苷 Rg1 在 2. 04～10. 40 Lg 之间点样
量与峰面积积分值呈一不通过原点的直线, 故用外
标两点法定量。
3. 4　稳定性试验: 在硅胶 G 薄板上, 点人参皂苷
Rg 1对照品溶液 4 LL,展开, 显色后, 分别于 30, 60,
90, 120 min进行扫描测定, 测定的峰面积积分值平
均 值 分 别 为 2 136. 374, 2 176. 832, 2 197. 613,
2 114. 975, RSD 为1. 74%。结果表明在 2 h 内斑点
峰面积积分值基本稳定。
3. 5　精密度及重现性试验:吸取 5个相同浓度的对
照品溶液分别点于同一硅胶 G 薄层板上, 按上述条
件展开、显色、测定。结果斑点峰面积值的 RSD =
1. 65%。按上述测定方法对同一批样品重复测定 5
次,其平均量为 12. 16 mg / 100 g , RSD为 2. 17%。
3. 6　加样回收率试验: 取本品适量, 精密加入人参
皂苷 Rg 1适量,按上述测定条件进行5 次回收试验,
结果平均回收率为 97. 63% , RSD= 1. 64% ( n= 5)。
3. 7　样品含量测定:分别精密吸取对照品溶液 2和
10 LL,样品溶液 12和 14 LL, 点于同一硅胶 G薄层
板上, 依法测定 3 批样品, 人参皂苷 Rg 1 量分别为
12. 06, 12. 28 和 12. 44 mg / 100 g , RSD 分别为
2. 14%, 2. 37%和 1. 76%。
4　讨论
4. 1　对女贞子进行定性鉴别时, 通过对比实验, 选
用环己烷-丙酮-乙酸乙酯( 4∶2∶1)展开剂展开, 效
果最好,能排除其它成分的干扰。
4. 2　鉴别黄芪时,由于黄芪甲苷含量较低,且干扰
成分复杂; 使用硫酸显色剂,灵敏度高, 显色背景干
扰较大。样品经纯化后, 黄芪甲苷斑点清晰, 且干扰
小,鉴别效果好。
4. 3　在板蓝根的定性鉴别中,采用二次同向展开技
术。这是由于硅胶对靛蓝有强烈的吸附作用, 用展开
剂 A 展开时, 原点会残留有大量靛蓝; 曾用氨水饱
和的硅胶板展开,虽然能使原点的靛蓝残留量降低,
但靛蓝斑点褪色较快。因此采用二次展开法, 可使靛
蓝斑点的被吸附消除,且样品中各组分均能得到较
好的分离。
参考文献:
[ 1]　苏　键 . 薄层扫描法测定三七片中人参皂苷 Rg1 的含量[ J ] .
中国中药杂志, 1999, 24( 4) : 220-221.
[ 2]　徐丽华,何心亮,赵渤年 . 薄层扫描法测定玉屏风散中黄芪甲
苷的含量[ J] . 中草药, 1996, 27( 2) : 86-87.
[3]　梁文法,闭业范,陈　通,等 . 薄层扫描法测定菘蓝根和叶中靛
玉红与靛蓝的含量[ J] . 中草药, 1990, 21( 4) : 11-12.
[ 4]　任世禾 . 反相高效液相色谱法测定三七片中人参皂苷 Rg1 的
含量[ J] . 中成药, 1996, 18( 4) : 14-15.
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