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心复康对大鼠实验性心肌梗死形态学及体外培养乳鼠心肌细胞超微结构的影响



全 文 :g / k g ) 组 、 田 七 洋参 冲剂 o · 7 5 及 1 · 5 9 / k g
组 , 19 给药 ,体积为 s m L / k g ,每 日 1 次 ,连续
给药 7 d , 于末次给药 3 0 m in 后 , iv 10 %右旋
糖配 50 0 溶液 4 m L / k g (对照组除外 ) , l h 后
股动脉取血 , 放于备有烘干肝素的抗凝试管
中 ,测定其血液流变学指标— 聚集指数 ,结果经 t 检验 , 见表 8 。 田七洋参 冲剂可降低大
鼠在实验性微循环 障碍下 的红细胞聚集度 ,
对改善微循环障碍具有一定的作用 。
衰 7 对小眼实脸性心伸失常的作用
组别 剂 t 动物 死亡数 存活数
对 照组 一 18 16 2
复方丹参片 2· 2 5 9 / k g 1 8 1 1 7
田七洋参 3 . 7 5 9 / k g 1 9 1 0 9 .
7
·
5 唇/ k弓 1 9 1 0 9 .
与对照组相 比 : 尸 < 0 . 05
裹 8 对血液系统的作用
组别 剂量 动物 聚集指数
对照组 一 1 3 1 . 4 6 6士 0 . 0 7 2 “
右旋糖醉模型 一 15 1 . 6 58 士 0 . 13 9
复方丹参 片 0 . 4 5 9 / k g 1 4 1 . 7 0 3士 0 . 0 5 3
田七洋参 0 . 7 5 9 / k g 1 2 1 . 6 9 4士 0 . 0 9 8
. … l · 5 9 / k g 1 0 1
·
5 3 1士 o · 1 1 4 “
与模型组相 比 : ’ 尸 < 0 . 05 二 尸 < 0 . 05
3 讨论
现代研究表明 ,西洋参含多种人参皂昔 ,
具有显著的抗疲劳 、 抗缺氧能力 〔 5〕 。 田七含人
参皂昔 、 三七皂昔 、 黄酮等 , 其 中三七黄酮能
对抗垂体后 叶素引起 的 T 波改变 , 三七根总
皂昔对心律失常有保护作用 〔`几 西洋参和 田
七均具有滋补强壮作用 。 而 田七常用于止血
及活血 , 不常用作补益药 。 本实验表明 , 田七
与西洋参合 用 ,具有提高机体抗应激能力和
免疫功能的滋补强壮功能 , 同时 , 由于田七的
活血化淤功能 , 对心血管疾病亦有防治作用 。
参 考 文 献
1 颇 正 华主编 . 中药学 . 北京 : 人 民卫生 出版社 , 1 9 9 1 :
5 0 0

5 0 3

7 2 9
2 卫 生部药政 局 . 新 药 (西药 )临床前研 究指导原测 汇编 .
1 9 9 3
:
1 3 1

13 2
3 卫生部药政 局 . 中药 新药 研究指南 . 1 9 93 : 1 36
4 徐叔云 ,等 . 药 理实验方 法学 . 北京 : 人 民卫生出版社 ,
1 9 9 1
:
1 0 1 7
5 陆钦尧 , 等 . 益寿中草药选解 . 北京 :人 民卫生出版社 ,
1 9 8 7
:
1 2 0
( 1 9 9 8

0 6

1 9 收稿 )
心复康对大鼠实验性心肌梗死形态学及体外
培养乳鼠心肌细胞超微结构的影响△
天津中医学院 ( 3 0 0 1 9 3) 冯 学瑞 . 张艳军 陆一竹 陆 融 范英 昌
摘 要 用结扎大鼠左冠状动脉前降支 的方法造成 心肌梗死病变模型 , 给予 中药心复康后对其病
理形态 的改变进行观测 , 结果显示可使实验性 心肌梗死大 鼠梗死程度减轻 ,梗死后修复增快 。 采用
体外培养的大 鼠乳 鼠心肌细胞 ,通过暂时停止供应心肌细胞 生存必需 的糖和氧 , 造成心肌细胞缺
氧样损伤 ,从细胞水平观察心复康的作用 , 结果表明可明显改善心肌细胞结构缺血样损伤 。 提示心
复康对心肌梗死具有防治作 用 。
关健词 心复康 心肌梗死 心肌细胞 病理形态学 超微结构
心肌梗死是 由于突发持续性心肌缺血引 起的心肌坏死 ,是缺血性心脏病中较为严重
A d d r e s s
:
F e n g X u e r u i
,
T i a n ji n C o lle g e o f T r a d i t io n a l C h in e s e M e d i e in e
,
T ia n ji n
冯学瑞 男 副教授 , 1 9 7 0 年毕业于 天津 医科大学 ,长 期中事病理学 教学 和中医基础理论脏腑 相关学说的研究 ,研制多种脏腑病症模型 ,并进行中药复方治疗病症 的实验研究 , 对中医脏腑理论关于肺与大肠相 表里学说做 了深人 的探讨 ,研制
阳明腑实症 (大肠不完全 梗阻 )模型 , 观察肺脏等脏器 的病 变 , 论证了该学说的客观性 、科学性 、 内在联系和作用机制 ,相继发表了一系列关于肺 与大 肠相表里实验研究 的论文 。
△天津市 自然科学基金资助项 目 N o 9 2 4 0 0 7。。 8
.
2 0 4
.
的一个类型 。根据 中医学辨证施治 , 运用具有
益气养阴 、 活血化窟作用的中药心复康 治疗
冠心病患者 6 0 余例 , 取得 了明显 的临床效
果 , 为 了进一步探讨其防治心肌梗 死的作用
机制 , 我们将心复康用于动物实验和细胞培
养 , 观察对实验性心肌梗死大 鼠病理形态学
及体外培养乳 鼠心肌细胞超微结构的影响 。
1 材料
1
.
1 动物 : 成熟 S D 大 鼠 , 2一 3 d 龄 SD 大
鼠 ,天津药物研究院动物室提供 。
1
.
2 药物及试剂 : 心复康 由西洋参 、 白术 、 构
祀 子 、 女 贞子 、 功劳 叶 、 土 鳖虫 、 鹿 衔草 等组
成 , 天津中医学院第一附属 医院制剂室提供 。
心痛康 (江苏靖江制药厂 ,批号 2一 0 2 ) 。 德脉
宁 ( i s o s o r b id e 一 5一 m o n o n it r a t e , 德 国 M e r e h l e
G m b h 生产 ) 。 D 一 M E M / F 一 12 培养基 和新生
牛血清 ( G ib e o B R L 公司 ) 。
1
.
3 仪器 : 美 国产 2 3 2 3 型 C O : 培养 箱 , 荷
兰菲利浦 4 0 0一 S T 透射 电镜 。
2 方法
2
.
1 动物实验性心肌梗死模型制作及分组 :
健康 成熟的 S D 大 鼠 85 只 , 雌雄 各半 , 体 重
20 。一 25 0 9 , 随机分为正常对照组 , 自然恢复
组 , 心复康组 , 心痛康对照组 , 德脉宁对照组
及假手术组 。
动物造膜 〔1〕 : 大鼠在乙 醚麻醉下 ,手术开
胸 , 挤出心脏 , 在动脉圆锥与左心耳冠状动脉
处结扎冠状动脉后 ,把心脏放 回胸腔 , 缝合胸
壁 , 待大鼠清醒后 ,连接心 电图机描记肢体 l
导联心 电图 , 有心肌缺血表现者视造膜成功 。
正常对照组大 鼠不予任何处理 ; 假手术
组 开胸挤 出心脏后不结扎冠状动脉 ; 自然恢
复组大 鼠造膜后不予任何药物 , 每 日 19 3 m L
清水 i 次 ; 心复康组按生药 6 0 9八 k g · d ) 19
心复康水煎液 6 m L ;心痛康组按成药 1 . 2 9 /
( k g
·
d ) 19 心痛康 冲剂 3 m L ; 德 脉 宁组 按
1 5 m g 八 k g · d ) 19 德脉宁 3 m L (以上药物均
为成人药量 20 倍 ) 。 所有动物均 自由进水 ,各
组均于术前 3 d 给水或给药至实验结束 。
2
.
2 心肌细胞培养 `幻及分组 : 取 2一 3 d 龄
《中草药 》 19 9 9 年第 3 0 卷第 3 期
的 S D 大 鼠 50 只 , 以无菌手术取下 心脏 , 放
人无菌 D 一 H a n ks 溶液 中反复冲洗去除血液 ,
将 心肌组织 剪碎 , 用 0 . 1 25 %胰蛋 白酶溶液
消化多 次 , 离心 , 加入 少量含 20 %新生牛血
清 D 一M E M / F 12 培养液 , 收集各次消化离心
后的细胞悬液 , 通过 14 0 目尼龙网过滤 , 制成
I X I护 细胞 /m L 心肌细胞 悬液作培养 , 其接
种细胞 74 瓶 , 37 ℃静置培养 , 每 3 天换液 1
次 。 2 周后 ,细胞连接成网状 。 形成同步收缩 ,
将其随机分为正常对照组 (n 一 34 ) , 心复康组
(
n 一 4 0 ) ,按每 1 0 0 m L 正常培养液加人心复
康无菌提取液 ( 3 0 0 拌g / m L ) 30 拌L 的 比例培
养 。 3 d 后从正常对照组中抽取 20 瓶细胞标
本换人缺糖培养液 ;从心复康组 中抽取 20 瓶
换人加有心复康无菌提取液的缺糖培养液 ,
开盖置于 C O : 培养箱 中 ,并迅速抽吸箱 中空
气 ,置换以高纯氮气 , 37 ℃密闭培养 ,分别成
为缺氧缺糖对照组和缺氧缺糖心复康组 。
2
.
3 病 理形态学观察 : 造膜 72 h 后处死动
物 , 取出心脏 , 用生理盐水 冲洗 ,沿冠状沟切
除心房 ,顺房室沟从心尖到心底部平行将大
鼠心室切为均等的 3 块心肌 , 经 10 %中性福
尔马林溶液固定后 , 常规石蜡包埋 ,每片心肌
切取 2 张切片 , 每例心肌共切取 6 张切片 ,常
规 H E 染色 ,镜下观察 , 按表 1 将心肌梗死后
的整体病变程度及恢复程度分为轻 、 中 、 重三
度 。 以 目镜显微测微网 , 一个大网格为面积计
数单位 , 计数成纤维细胞数 日 。
表 1 心肌梗死程度分级
项 目 + 十 + + + +
梗死面积 < 14/ < 2 3/ > 23/
成纤维细 胞 密集 较稀疏
死何梗任装无
疏无胞复片内稀中细大灶修
呈 地 图 样 分
梗死形态 霭摺瘩急肌细胞
, 梗死灶
成 纤 维
增生
呈 地 图 样 分
布 , 其 间存活心肌细胞 性反应
梗死部位 仅 限 于 内 膜 局 部 心 肌 梗下 死 全层梗死
综合上述病变 , “ + ” < 5 个者为轻度 ; 5簇
“ 十 ” < 10 者为中度 ; “ + ” ) 10 个者为重度 。
2
.
4 心肌细胞超微结构的观察 : 培养的大鼠
乳 鼠心肌细胞在分组处理 6 h 后 , 各组随机

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