全 文 ：一
9 4 4
· 中草药 Ch in e seT r ai dt in o al an H de rb aD l r u g s20 0 0 年第1 3 卷第1 2 期
珍稀中草药金线莲的R A P D 研究△
厦门市药品检验所 (厦门3 611 0 2 )
厦门大学生命科学学院
胡珊梅 `
周 涵韬
张启 国
周兴 旺
袁文杰
陈鹭真
摘 要 为 了鉴 别金线莲的品种 , 探索同属植物之间 的亲缘关系及同种植物不同产地 的遗传变 异 , 并制定正 品金
线莲的 D N A 指纹图谱 , 采用随机扩增多态 D N A ( R A P D )技术对兰科开唇兰属植物花叶开唇兰 A n oe ct oc h ; lu , or x -
bu gr hl 八w a n . ) . iL n id . 、 台湾开唇 兰 A . j价m os a n u : H a y . 进行了鉴定 ,结果选择的 7 个引物对 3 个品种共扩增 出
98 个位点 , 其中 3 个引物为高特异性引物 。 结论 R A P D 技术不仅能鉴别种间差异 , 而且能揭示同种不同产地植物
的遗传变异 。
关键词 R A P D 标记 金线莲 遗传变 异
S t u d i e s o n V a l u a b l e a n d R a r e C h i n e s e H e r b s A n o
e e t o e h il u s or x bu gr h i b y
D N A F i n g e r P r i n t i n g s U s i n g R A P D
X i a m e n In s t i t u t e f o r D r u g C o n t r o l (X ia m e n 3 6 1 0 1 2 ) H u S h a n m e i
,
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A b s t r a c t I n o r d e r t o e x p l o r e t h e e o n s a n g u i n i t y o f P l a n t s o f g e n u s A n o
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.
( O cr h i d a e e a e )
,
a n d t o d i s t i n g u is h A n o e c t o c h i l u s r o x b u塔 h i i ( W a l l . ) L i n d l . f r o m t w o d i f f e r e n t l o e a l i t i e s , F u j ia n a n d
G u a n g x i P r o v i n e e
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o s a 护珍巧 H a y a s t o t h e i r g e n e t ie v a r i a n e e , D N A f i n g e r p r i n t i n g s w e r e a n a l y s e d
w i t h t h e a id o f R A P D
.
R e s u l t s s h o w e d t h a t 7 p r im e r s a m p l i f i e d a t o t a l o f 9 8 s it e s f o r t h e 3 s p e e ie s
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a e e o r d i n g t o t h e b o n d i n g p a t t e r n o f t h e i r a m p l i f i e d D N A o n a g a r o s e g e l
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I t w a s e o n e l u d e d t h a t t h e m e t h o d
m a y b e o f v a l u e f o r t h e a u t h e n t i e a t i o n o f d if f e r e n t s p e e i e s a n d s a m e s P e e i e s o f A n oe
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K e y w o r d s R A P D m a r k e r A n o e c t a c h i l u s or x b u cr h i i (W
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( J i n X i a n L i a n ) g e n e t i e v a r i
-
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金线莲 为兰科开唇兰属植物 , 是福建和台湾 民
间常用的多年生珍稀草药 。 其性平 、 味甘 , 具有清热
凉血 、 祛风利湿等功效 。 广泛用于治疗肝炎 、 肾炎 、 肺
炎 、 小儿惊风高热 、糖尿病 、 风湿病等 。 近年来金线莲
的神奇功效倍受人们的关注 , 享有 “ 药之王 ” 、 “ 金草 ”
等美称 。 主要药用 品种为花叶开唇兰 (福建产者习称
福建金线莲 、 广西产者称为广西金线莲 ) 和台湾开唇
兰 (药材称为台湾金线莲 ) 。 福建是我国野生金线莲
分布区域之一 。 由于近年来的大量采集 ,天然资源 日
趋枯 竭 , 已 列 为 濒危 药 用植 物 , 目前 栽培 获 得 成
功 .l[ 2 〕。 另据化学成分初步分析报道 ,金线莲主要 含
有多糖 、 微量元素川 、 强心昔类闭及氨基酸等多种 成
分 〔 5 ] 。 台 湾 的 C h e n g 等 曾 对 A n o e c t o c h i l u s fo -r
m o s a n u s 及 A · k o s h u n e n s i s 进行 了 R A P D 鉴 定 研
究 s[] , 并进行 了二者的杂交 ,用了 8 个引物 , 获得 19
种 R A P D 标记 。 其中 9 种为 A .而 r 明 os an us 的特异
位 点 , 10 种 为 A . k os h u en sn is 的特 异 位点 。 有 关
.A or x bu gr ht’ i 与 A · fo mr os a n us 亲缘关系的分子标
记方面的研究及金线莲同种不同产地的遗传变异的
研究未见报道 。金线莲药材为无花的全草 , 药材为干
品 ,性状上难以鉴别 。郑纯等曾做过福建金线莲和广
西金线莲的生药鉴定 ,但用传统 的形态组织学无法
区别二者遗传上的差异闭 ,香港的 Zh an g 等成功 的
应用分子标记技术对不同产地的党参进行 了鉴定 ,
结 果证明 R A P D 技术 是鉴 定地道药材 的有效方
法川 。 近年来随着分子标记技术的发展 , 中药鉴定的
水平逐步从形态组织学 、化学水平提高到分子水平 ,
因为后者更能代表基因多态性的变异类型的遗传标
A d d r e s s
:
H u S h a n m e i
,
X i a m e n I n s t i t u t e f o r D r u g
胡珊梅 女 , 1 9 5 7 年生 。 副主任药师 ,药学硕 士 。 l , 8 2
C o n t r o l
,
X i a n m e n
年江西 中医学院中药专业本科毕业 , 1 9 9 1 年江西中医学院药学系天然药物资源鉴定与开发专业获硕士学位 。 从事天然药物的鉴定与开发研究多年 , 着重进行 了江西地道药材江香落的生药学研究 ,并对其他香蕾类一并进行 了全面系统的比较鉴定 , 1 9 9 4 年获国家中医药管理局中医药科技进步三等奖 。 自 1 9 9 7 年 以来 , 主要应用分子生物学技术对名贵中药材及地道药材进行鉴定 , 发表论文 10 余篇 。
△厦 门市卫 生局 医学科学技术进步基金科研资助项 目

·
4 9 6
. 中草药 C h in es e Tra d it in oa la nd He rba lD r ug S 2 0 0 0年第 1 3卷第 1 2期
的比 “ 〕 ,但用 同一种引物对二者扩增 出的位 点有差
异 ,并且遗传距离不为零 , 说明二者长期受不同地区
的气候 、 土壤等多种生态环境的影响 , 已经产生 了遗
传变异 ,在栽培或组织培养选苗种时 , 可优先选广西
金线莲 , 以提高产量 。 台湾金线莲与福建金线莲 的遗
传距离为 0 . 45 , 而与广西金线莲则为 0 . 95 , 表明遗
传关系的远近与地理距离的远近有密切关系 。 引物
O P H 1 5
、
O P H 1 7
、
O P H 1 9 可作为这 3 个品种 的高特
异性引物 ,用这几种鉴别 引物对样 品的 D N A 进行
P C R 反应 , 经琼脂糖凝胶 电泳 , 与标准指纹 图谱对
照 ,就可准确鉴别样品的品种及真伪 。
参 考 文 献
1 陈 裕 ,林 坤瑞 , 管其宽 , 等 . 亚热带植物通讯 , 19 94 , 2 3 ( 1 ) : 46
2 江海燕 , 王 建 . 中医药研究 , 1 9 9 7 , 1 3 ( 2 ) : 5 1
3 赖应辉 ,昊锦忠 . 中药材 , 1 99 7 , 2 0 ( 2 ) : 84
4 郑 纯 , 黄以 忠 ,潘 馨 , 等 . 中药材 1 9 9 7 , 2 0 ( 1 1 ) : 5 5 2
5 王振登 . 福建中医学 院学报 , 1 9 9 3 , 3 ( 2 ) : 1 0 0
6 C h e n g K T
,
F u L C
.
P l a n t a M e d
, 1 9 98 , 64 : 4 6
7 Z h a n g Y B
,
N g a n F G
.
P l a n t a M e d
.
1 9 9 9 , 6 5
:
1 5 7
8 曹 辉 ,刘玉 萍 . 中国药学杂志 , 1 9 9 8 , 3 3 ( 5 ) : 2 6 9
( 2 0 0 0
一
0 3
一
1 2 收稿 )
广金钱草栽培品与野生品的质量比较
湛江市药品检验所 ( 5 2 4 0 3 7)
湛江吉民药业股份有限公司
王其新 ’
林振 洪 林海青
摘 要 比较广金线草栽培品与野生品的质量 。 用 薄层色谱法和紫外分光光度法对其主要质量指标进行定性与定
量的研究 ,结果两者无明显差异 。
关键词 广金钱草 栽培品 野生 品 质量 比较
C o m P a r i s o n o f Q u a l i t y B e t w e e n C u l t i v a t e d a n d W i l d S P e c i e s o f
D ` s m o d i u m s yt r a c ifo l i u m
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A b s t r a e t T o e o m p a r e t h e q u a l i t y o f e u l t iv a t e d s p e e i e s w i t h w i ld s p e e ie s o f eD
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u m ( O s b e e k ) M e r r
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T L C a n d U V w e r e u s e d t o s t u d y t h e i r q u a l i t ie s
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R e s u l t s s h o w e d t h a t t h e r e w a s n o o b
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v i o u s d i f f e r e n e e b e t w e e n t h e m
.
K e y w o r d s eD
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r a c i f b l i u m ( O s b e e k ) M e r r
.
e u l t i v a t e d s p e e i e s w i l d s p e e i e s q u a l i t y
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广金钱草 eD s m o d i u m : yt r a c ifo l i u m ( O s b e e k
.
)
M e r r
. 是传统的常用 中药之一 ,具有清热除湿 ,利尿
通淋的功效 。过去使用的广金钱草都是野生品 ,随着
用药量的不断增大 ,药源 日趋贫缺 , 自 70 年代起 已
广泛开始人工栽培 ,现以雷州半岛的产量最大 ,成为
商品药材的主要来源 。 至于栽培品与野生 品的质量
有无差异 , 目前 尚无报道 。 为此 ,我们通过薄层色谱
法和紫外分光光度法对其主要质量指标进行定性与
定量的研究 ,为临床使用和质量标准 的制订提供 了
依据 。
1 实验材料
1
.
1 样品来源 : 广金钱草栽培品和野生品药材分别
由徐闻 、 海康 、 遂溪 、 廉江等市县药检所提供 ,有的样
品采 自湛江市郊 , 经作者鉴定为豆科植物广金钱草
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u m s yt ar c l’fo l i u m ( O s b e e k . ) M e r r . 的干燥
全草 。
1
.
2 仪 器 、 试 剂 : 紫外分光光度计为 日本 岛津 产
U V 2 65 型 ;硅胶 G 是青岛海洋化工厂生产 ; 芦丁对
照品购于中国药品生物制 品检定所 ;其他所用试剂
均为分析纯 。
2 方法与结果
2
.
1 薄层色谱 :称取样品粗粉 2 9 ,加 50 % 乙醇 50
m L
, 加热 回流 3 0 m i n , 放冷 , 滤过 , 滤液蒸 至约 2 0
m L
, 放冷 , 用水饱和正 丁醇 振摇 提取 2 次 (2 。 , 20
A d d r e s
s :
W a n g Q i x i n
,
Z h
a n ii a n王其新 男 , 19 7 3 年毕业于 中山大
9 In s t i t u t e f o r D r u g C o n t r o l
,
Z h a n j i a n g
学药用植物学专业 。 现任湛江市药 品检验所中药室主任 ,主任 中药 师 。 擅长生药学 、 中药鉴定学和植物
化学
采用
。 连续参加三版 中国药典部分药 品标准 的起草和修订工作 ,对草 豆范 的薄层 色谱鉴别进行了 系统 的研究 。 所建立 的薄层色谱法被 中国药典。 编著著作 1 本 , 获广东药学院科技进步二等奖 1 项 , 发表科学论文 28 篇 ,取得 “ 壮骨 口服液 ” 发明专利 1 项 。