全 文 ：· 有效成分 ·
河套大黄非蕙醒类成分研究
军事医学科学院放射 医学研 究所 (1 0 0 8 5 0)
北京中医药大学 中药学 院
中 国医学科学院药物研究所
李军林 .
李家实
贺文义
王爱芹
孑乙 漫
摘 要 从河套大黄 干燥 根与根茎 的甲醇提取物中分得 8 个非 葱醒类成分 。 经化学和 波谱方法 ,
确定 它们 的结构分别 为 :件谷 幽醇 (件s it o s te r o l , I ) 、土 大黄昔 元 (rh a p o n tig e n in , l )、 没食子 酸
(g a llie a e id
,
l )
、
3
一
(3
‘ ,
5
‘一二 经 基一反 式 一 肉桂酞基 卜 5 一经基一△ 5 一 a 一毗 喃 酮 〔3 一 (3 ‘ , 5 ‘一dih yd r o x yl-
tra
n s 一e in n a m o y l卜 5 一h yd r o x yl一△ 5 一 a 一p yr a n o n e , IV 〕、 胡萝 卜昔 (d a u e o s te r o l , V )、 p iee a ta n n o l一 3气O -
件D 一g lu c o p y r a n o s id e ( VI ) 、土大黄昔 (rh a p o n tiein , 姗 )和 蔗糖 (姗 ) 。 其中 w 为一新化合物 , 命名为波
叶素 (rh e u m in ) 。 I 、 l 、 V 、 砚 和珊系首次从该植物中获得 。
关键词 要科 大黄属 波叶素 河套大黄
河套 大黄系萝科大 黄属 波叶组 R he u m
h o ta o e n se C
·
Y
·
C he n g e t C
.
T
.
K a o 的干燥根
与根茎 , 味苦 、性寒 。 河套大黄曾作为健胃剂
及缓泻剂使用 , 后因泻下作用微弱及服后腹
痛而不用 , 现又作为原料药用于有关制剂和
药品生产 。为充分利用药源 , 作者对其成分进
行了系统研究 , 从中得到 8 个非蕙醒类成分 ,
其 中 IV 为一新 化合物 , 命 名为 r he u m in ; I 、
l
、
V
、
VI
、 珊系首次从该植物中分得 。
作者从河套大黄的甲醇提取物中 , 经硅
胶柱层析分离得到 8 个非蕙醒类成分 , 经化
学和波谱方法 , 分别鉴定为 p一 s it o s t e r o l( I ) ,
r h a p o n tig e n in ( l )
,
g a llie a e id ( l )
,
3
一
(3
‘ ,
5 ‘
一
d ih yd r o x yl
一
tra n s
一 e in n a m o y l)
一
5
一
hy d r o x y l
-
△ 5 一 a 一p yr a n o n e ( IV ) , d a u e o s te r o l ( v ) ,
p ie e a ta n n o l
一
3 ‘
一
O
一俘一D 一 g lu e o p y r a n o s id e ( 班 ) ,
r ha Po n t ie in ( VI )
, s u e r o s e (姗 ) 。
结晶 w 为一淡 黄 绿色 针状 结 晶 (丙酮 -
水 ) , m p 2 4 5 ‘C 一 2 4 8 C 。 H R E I 给 出 分 子 式
C
14
H
1 2
O
。
(M + ) 2 7 6
.
0 6 3 4
。
D E PT 谱给出 6 个
季 碳 、 1 个 亚 甲 基 和 7 个 次 甲 基 信 号 。
‘
H N M R 己p p rn (a e e t o n e 一d 6 )谱给出一对反式
烯质子 7 . 0 4 ·(I H , d , J = 1 6 . 6 H z ) 、 7 . 1 0 (1
H
,
d
,
J一 1 6 . 6 H z ) ; 3 个芳 质子呈对称 1 , 3 ,
5
一三 取 代 模 式 6 . 3 6 (I H , t , J = 2 . 0 H z ) 、
6
.
5 9 (Z H
,
d
,
J一 2 . 0 H z )和 1 个孤立烯质子
6
.
1 5 (IH
, s ) ; 另一组偶合质子峰形与 d 一 e a t e -
ch in 川 中 H 一 3 、H 一 4 偶合相似 , 唯稍移向低场
2
.
5 2 (IH
,
d d
,
J = 9
.
1
,
1 6
.
7H z )
、
3
.
1 5 (IH
,
d d
,
J一 3 . 0 , 1 6 . 7H z ) 、 5 . 6 5 (IH , d d , J= 2 . 8 ,
9
.
3H z )
。 ‘3
C N M R 己p p m (a e e t o n e 一d ‘)谱显示
2 个淡基信号 1 72 . 9 、 1 71 . 2 , 2 个脂肪碳信号
7 9. 1
、
3 9. 3 ;其余碳均为烯碳或芳碳信号 。 由
以 上数据结 合 ‘H 一 13 C O S Y 谱推断 晶 W 为 3 -
( 3
, , 5 ‘
一
d ih yd r o x yl
一
tra n s
一 e in n a m o yl )
一
5
一
h y
-
d r o x yl
一△ 5 一 a 一 p y r a n o n e , 命 名 为 r h e u m in , 结
构见图 1 。
1 仪器与试剂
熔 点测定用 B o e t iu s PH M K 0 5 熔 点测
定仪 , 温度计未校正 , 核磁 共振谱 用 B R U K -
,
A d d r e s s
:
L i Ju n lin
,
In s t it u t e o f R a d ia t io n M e d ie in e
,
A e a d e m y o fM ilit a r y M e d ie a l S e ie n e e s
,
B eijin g李军林 , 男 , 医学博士 , 助理研究员 。 1 9 8 2 年 9 月一 1 9 8 6 年 7 月山东 中医药 大学 中药系 , 医学学士 ; 1 9 8 7 年 9 月 ~ 19 90
年 7 月山东 中医 药大学天然药物化学 专业 , 医 学硕士 ; 1 9 94 年 9 月 ~ 1 9 9 7 年 7 月 , 北京 中医药大 学中药学 专业 , 医学博 士 。
本人一直从事 中药学及天然药物活性成分研究 , 发表论文 20 余篇 ;参加编者《中药化学 习题与解 》、《中药现代研究与应用 》,任副主编 。 1 9 9 7 年 7 月进人军事医 学科学博 士后流动站 以来 , 主药从 事天然药物活性成分 的筛选 与动物体内分布代谢 的研
究 。
《中草药》1 9 98 年第 2 9 卷第 1 期 一 7 2 1 .
E R A M
一
50 0 型 核 磁 共 振 仪 测 定 , 质 谱 用
V G za bs pec 高分辨磁质谱仪测定 。 柱层析和
薄 层层 析 用硅 胶 为青 岛 海洋化工 厂产 品 ,
柱 层析用聚酞胺 为江苏无锡 生化制 品厂产
口口口 。
图 1 化合物 W 的化学 结构式
2 提取和分离
将河套大黄 Z k g , 粉碎 , 加 6 L 甲醇浸提
4 次 , 甲醇提取液减压浓缩 , 得到淡黄色固体
M (1 0 3 9 )
, 母 液浓缩至适量 , 以 1 k g 粗粒硅
胶 (6 0 ~ 10 0 目 )拌和 , 干燥 。 干燥后的粗粒硅
胶 , 分别以氯仿 、 乙酸乙酷 、 乙酸乙醋 一 甲醇 (4
,
1)
、 甲醇洗脱 , 回收溶 剂后得到 A 12 g 、 B
2 4 6 9
、
C 1 6 3 9
、
D 14 2 9
。
A 经硅胶柱层析得
I
、
l
,
B 经硅柱 层析得 l 、 l 、 w 、 v 、 矶 ; C
经硅胶柱层析得 VI , 固体 M 主要为 VI 。 D 经
聚酞胺柱层析得姗 、 皿 。
3 鉴定
化合物 I : 无色针 晶 (石油 醚 ) , m p 1 36
℃一 1 3 8 ℃ 。 L ie be r m a n n 一B u r e h a r d 反应 阳
』性 。 E l一M S m / z : 4 1 4 峰 。 ’H N MR 、 ‘“C N M R
数据与文献〔。报道的 件谷 街醇一致 。
化合物 l : 白色块晶 (乙 酸 乙醋 一丙酮 ) ,
m p 1 8 0 ℃一 1 8 2 ℃ 。 紫外灯光下呈蓝紫色荧
光 。 ‘H N M R 数据与文献 〔2〕报道的土大黄昔
元一致 。 ‘3C N MR (a e e t o n e 一d 6 )6 PPm : 1 5 9 · 5
(C
3
.
5
)
,
1 4 8
.
3 (C
4
,
)
,
1 4 7
.
5 (C
s
,
)
,
1 4 0
.
7 (C
,
)
,
1 3 1
.
7 (C
l
)
,
1 2 9
.
1 (C 。) , 1 2 7
.
6 (C
。
)
,
1 1 9
.
7
(C
6 ,
)
,
1 1 3
.
3 (C
s
)
,
1 1 2
.
4 (C
Z
,
)
,
1 0 5
.
8 (C
Z
,
6
)
,
1 0 2
.
7 (C
、
)
,
5 6
.
2 C O C H
3
)
。 因此 , 确定化合物
l 为土大黄昔元 。
化 合物 l : 淡黄色棒状结 晶 (乙酸 乙醋 -
丙酮 ) , m p 2 3 6 ℃ ~ 2 3 8 ℃ 。 F e C 13 反应阳性 。
,
H N MR (a e e t o n e
一
d
。
) 己 p p m : 8 . 2 1 (3 H , br s ,
A r
一
O H )
,
7
.
1 5 (ZH
, s , C
Z 一
H ) ;
‘3
C N M R (a e e
-
to n e
一
d
6
) 己p p m : 1 6 8 . 1 (一C O O 一 ) , 1 4 5 . 9 (C 3 ) ,
一
7 2 2
.
1 3 8
.
7 (C
4
)
,
1 2 1
.
9 (C
l
)
,
1 1 0
.
2 (C
Z
)
。 经与没食
子酸样品对照 , 混合熔点不下降 。 因此确定化
合物 l 为没食子酸 。
化合物 w :淡黄绿色针晶(丙酮 一水 ) , m p
2 4 5 ℃ ~ 2 4 8 ℃ 。 H R E I一MS 给出分子离子峰
〔M + 〕2 7 6 . 0 6 3 4 , 分子式 C 14 H 1 2O 6 。 E l一M S m /
z : 2 7 6 〔M + 〕, 2 5 8 〔M 一 H ZO 〕+ , 2 4 8 〔M 一
CO 〕+ , 2 3 2〔M 一 CO Z〕+ , 18 9 , 1 7 3 , 1 6 1 , 1 4 3 ,
1 3 1
,
1 1 5
,
1 0 3
,
9 1
,
7 7
,
6 3
。 ‘
H NM R (a e e to n e
-
d
。
) 台 PPm : 7 . 1 0 (I H , d , J= 1 6 . 6 H z , C 。-
H )
,
7
.
0 4 (I H
,
d
,
J= 1 6
.
6 H z
,
C
s 一
H )
,
6
.
5 9
(Z H
,
d
,
J= 2
.
0 H z
,
C
Z
, ,
6
, 一
H )
,
6
.
3 6 (I H
, t
,
J
= 2 0 H z
,
C
4 , 一
H )
,
6
.
1 5 (IH
, s , C
6 一
H )
,
5
.
6 5
(IH
,
d d
,
J= 2
.
8
,
9
.
3 H z
,
C
3 一
H )
,
3
.
1 5 (I H
,
d d
,
J一 3 . 0 , 1 6 . 7 H z , C 4 一H ) , 2 . 5 2 (I H , d d , J
= 9
.
1
,
1 6
.
7 H z
,
C
4 一
H )
, ‘3
C N MR (a e e t o n
-
d
6
) 占 PPm : 1 7 2 . 9 (C 7 ) , 1 7 1 . 2 (C Z ) , 1 6 5 . 6
(C
S
)
,
1 5 9
.
7 (C
3
, ,
5
,
)
,
1 3 9
.
8 (C
g
)
,
1 3 6
.
2 (C
l
,
)
,
1 1 8
.
5 (C
S
)
,
1 1 5
.
8 (C
6
)
, 1 0 6
.
7 (C
Z,
,
6 ,
)
,
1 0 5
.
0
(C
4
,
)
,
7 9
.
1 (C
3
)
,
3 9
.
3 (C
4
)
。 由以上数据结合
D E P T 和 ‘H 一‘3C O SY 谱 , 推断化合物 IV 为 3 -
(3
‘ , 5 ,
一二轻基 一反式 一肉桂酞基卜5 一经基 一△ 5 -
a 一毗喃酮 , 命名为 r h e u m in 。
化合物 v : 白色粉末 (甲醇) , m p 2 86 ℃
~ 2 8 9 ℃ , L ieb e r m a n 一B u r eh a r d 反 应 阳性 ,
M o lish 反 应 阳性 , 其 ‘H , ‘3 C N M R 数据与文
献 〔“ , 4〕胡萝 卜昔数据一致 , 故推断 V 为胡萝 卜
昔 。
化合 物 砚 : 白色针 晶 (稀 丙酮 ) , m p 2 2
℃一 2 2 4 ℃ , M ol is h 反应 阳性 , 紫外光下呈蓝
紫色荧光 。 ’H , ‘3H N M R 数据与文献 〔2〕报道的
p ie e a t a n n o l
一
s‘
一
O
一月一D 一 g lu e o p yr a n o s记e 一致 。
化合 物 呱 : 无色棱 晶 (稀 甲醇 ) , m p 2 28
℃一 2 3 0 ℃ , M o lis h 反应阳性 , 紫外灯下呈蓝
色荧光 。 ‘H , ‘3CN M R 数据与文献‘2〕报道的土
大黄贰一致 , 故推断姗 为土大黄昔 。
致谢 : 甘 肃中医学院李成义副教授提供
河套大黄原料 ; 中国 医 学科学院 药物研究所
代测核磁共振谱 ; 军事医学科 学院仪 器测试
中心代侧质语 。
参 考 文 献
封士兰 , 等 . 中国中药杂志 , 1 9 9 4 ; 1 9 (1 0 ) : 6 1 1
Y o s hik im K a s hiw a d a
, e t a l
.
C h e m Ph a r m B u ll
,
1 9 8 4
3 2 (9 )
:
3 5 0 1
3
4
陈英杰 , 等 . 药学学 报 , 1 9 8 7 ; 2 2 (9 ) : 68 5
张宏桂 , 等 . 中国中药杂志 , 1 99 3 ; 1 8 (2 ) : 1 04
2 (1 9 9 8
一
0 3
一
2 3 收稿 )
Stu d ie S o n
L i Ju n lin
,
L i Ji
a s h i
th e N o n 一a n thr a q u in o n es o f H o ta o R h u b a r b (R he u m h o ta o e n s e )
H e W
e n yi
, ‘ , e t a l
.
(In s tit u t e o f R a dia tio n M
ed ie in e
,
A e a d e m y o fM ilit
a r y M
e d ie a l
S e ie n ee s
,
B ie jin g 1 0 0 8 5 0 ;
M
a te ria M
e d ie a
,
C h in e s e
’
B e ijin g U n i
v e r s ity o f T r a dit io n a l C h in e s e M
e d ie in e
,
B e ijin g 1 0 0 0 2 9 ;
任 .
In s tit u te o f
A e a d e m y o f M
e d ie a l Se ie n ee s
A bs tr a C t F
r o m th e m e t h a n o lie e x t r a e t o f s te m
,
B e ijin g 1 0 0 0 5 0 )
a n d r o o t o f R h e u m h o ta o e n se C
.
Y
.
C h e n g e t C
.
T
.
K a o
e ig h t n o n
一 a n t h r a q u in o n e s w e r e is o la te d
.
T h e ir s t r u e tu r e s w e r e id e n tifie d b y e he m ie a l a n d s p e e tr o se o p ie m e
-
t h o d s
, a s :
p
一 sit o s te r o l( I )
, r h a p o n tig e n in ( l )
,
g a lli。 a e id ( 皿 ) , 3 一 (3 ‘ , 5 , 一 dihyd r o x y一t ra n s 一e in n a m o yl)一5 一h y-
d r o x y
一△ 5 一a 一 py r a n o n e ( IV ) , d a u e o s te r o l( V ) , p iee a t a n n o l一 3 , 一O 一件D 一g lu e o py r a n o s id e ( VI ) , r ha p o n t ie in ( 城 )
a n d s u e r o s e (姗 ) . 1 、 班 、 V 、 VI 、姗 w e r e o b ta in e d fr o m t h is Pla n t fo r t h e fir s t tim e a n d IV 15 a n e w e o m p o u n d
a n d n a m ed r h e u m in
.
K e y w o r d s P o ly g
o n a c e a e r h e u m in R he u m ho t a o e n s e C
.
Y
.
C h e n g e t C
.
T
.
K a o
S te r o l C o m Po sitio n a n d B io s yn th e s is in H a ir y R o o t
C u ltu r e s o f C a ss ia o bt u sifo li
a
C h a n g Z h e n z h a n
,
G u o D e a n
朱 ,
N o r t o n R A
‘ ’ a n d Z h e n g Ju n h u a
S e h o o l o f P ha r m a e e u tie a l Se ie n e e s
,
B e ijin g M
e d ie a l U n iv e r s it y (1 0 0 0 8 3 )
A b str a亡t H a iry r o o t 。u ltu r e s o f Ca ssia o bt u sifo lia in d u e e d b y A g r ib a c ter u m r h iz o g en : w e re
e st a blis he d to in v e s tig a te th e e o m p o sitio n a n d b io s yn th e s is o f ph y to s t e r o ls
.
E ffe e ts o f ra r e e a r th
e le m e n t E u o n th e g r o w th o f ha iry r o o t w e r e a ls o in v e s tig a te d
.
T w e lv e d iffe r e n t ste r o ls w e re 15 0
-
la t e d fr o m th e ha ir y r o o ts
.
T h e y w e r e id e n t ifie d b y e h r o m a t o g r a p h ie (T L C
,
G LC a n d H P L C ) a n d
s p e e t r a l m e th o d s (M S )
.
T he bio s yn th e tie p a t hw a y s le ad in g to th e p r o d u e tio n o f m a j
o r s te r o ls
w e r e p r o p o s e d b a s ed o n th e r e s u lts o f th is s t u d y
.
K e y w o r d s Ca ssia o b tu s i人〕lia h a iry r o o t e u ltu r e s te r o l b io sy n th e s is
E x t e n s iv e in v e s t ig a t io n s o n th e p r o d u e
-
t io n o f s e e o n d a r y m e t a b o lit e s by ha ir y r o o t
e u lt u r e s ( t r a n sfo r m e d b y A g ro ba c te r iu m
r h iz o g e n s ) w e r e e o n d u e t e d in a r r a ys o f Pla n t
s p e e ie s 〔‘一 8〕 . It w a s fo u n d th a t th e m a io r ity
o f h a ir y r o o t e lo n e s g e n e r a t e d s a m e o r s im i
-
la r eh e m ie a l e o n s tit u e n t p r o file s w he n e o m
-
Pa r e d w ith th e in t a e t Pla n ts
.
T he r e fo r e
h a ir y r o o t e u lt u r e s a r e v ie w e d a s a p r o m is
-
in g p o te n t ia l s o u r e e to p r o d u e e a e t iv e s e e
-
o n d a r y m e ta b o lit e s w ith o u t g r o w in g the o
-
r ig in a l p la n t in the fie ld
.
R e e e n tly
,
K y u n g
果德安 , 男 , 1 9 6 2 年出生 , 北京 医科大学药学 院教授 , 现任药学 院院长助理 , 生药生物技术研究室主任 。 1 9 9 0 年毕业于
北京医科大学药学院 , 从 师生药学家楼之岑 院士 , 获博士学位 。 19 9 3 年到 1 9 9 6 年在美 国得州理工大学化学 系做博士后 , 从事
天然产物的生物 合成研究 。 先后获吴阶平保罗杨森奖和北京优秀青年科技论文奖等多 项奖励 。 获卫生部优 秀青年人才基金
和第六届霍英东 教育基金会青年教师基金等两项人才基金 。 共发表论文 60 余篇 , 撰写专著两部 , 有 14 篇论 文被 SC I收录 ,共被 SC I引用 4 0 余 次 。
签 备
U S D A A g r ie u lt u
r a l R e s e a r e h S e r v ie e 18 2 5 N
.
U n ive r s ity
,
P e o r ia IL 6 1 6 0 4
,
U SA
《中草药》1 99 8 年第 2 9 卷第 n 期 一 7 2 3 .