全 文 ：· 药理实验与临床观察 ·
察香保心丸对心肌一氧化氮合酶及左室功能的影响△
上海 医科大学华 山医院 (2 。。。4的 罗心 平 . 曾治 宇 施海明 范维琉 载瑞鸿
摘 要 观察 了察香保心丸对心肌组织 内皮 型一氧化氮合酶 (e N O S) 的表达 及左室 功能 的影 响 。
在大 鼠心梗模型上治疗组给予察香保心丸 3 m g /d 2 或 6 周 , 用心导管测定心脏功 能 , 免疫组织化
学法 测定心肌 e N O S 水平 , 结果表明 : 察香保心丸 可同时增加心肌 e N O S 的表 达水平 、李善心梗后
左室 收缩及舒张功能 。
关健词 康香保心丸 心肌梗死 一氧化氮 心功能
内皮型一氧化氮合酶 (e N O S )是心肌组
织内的主要存在形式 ;一氧化氮 (N O )对心功
能 的影 响是 目前研 究 的热 点 , 至今 仍 未 阐
明〔‘一 3〕 。 Pa u lu S 报道 N O 有负性肌力作用 〔2〕 ,
C ry st al 等则认 为 N O 不改变心肌 收缩力及
心肌氧耗量〔3〕。 察香保心丸作 为一种有效的
急救 中成药 , 其减少实验性心肌梗死面积 , 增
加冠心病患者缺血区的血流灌注等作用已被
证实 〔‘一 3〕 , 还发 现其有增 加血管壁 eN O S 表
达的作用 。 笔者就它对心梗后左室功能及心
肌 eN O S 表达的影响进行了探讨 。
1 材料与方法
1
.
1 动物分组及心肌梗死模型 的建立 : 选用
2 5 0一 3 0 0 9 雄性 S D 大 鼠 6 0 只 (中科院上海
分 院实验动物中心提供 ) , 参照文献 〔‘〕的方法
结 扎冠脉 形成 心肌梗死动物模型 ;结扎部位
位于左侧冠状动脉起源点下 1一 Z m m 处 。 动
物 随 机分为 5 组 : ¹ 假手术对 照组 ( S h a m )
12 只 , 开胸打开心包后立即缝合 , 常规饲养 2
周 。 º 心肌梗死对照组 (A M IZ 和 A M I 6) 各
1 5 只 , 心梗 造 模后 分 别 常规饲 养 2 周 或 6
周 。 » 庸香保心丸 2 周组 ( H M P2) 及 6 周组
( H M P 6) 各 12 只 , 心梗造模后立 即用察香保
心丸 3 m g /d (上海 中药一厂 , 批号 96 10 29)
十生理盐水 l m L ig Z 或 6 周 。 2 周及 6 周时
分别称重并处死动物 , 进行下列指标测定 。共
49 只大 鼠完成实验 。
1
.
2 心功能测定 : 大 鼠 10 %水合氯醛麻醉
固定后分离右侧颈总动脉 , 插人内充 37 ℃肝
素生理盐水 l m m 径 的塑料管至左室腔 , 用
N IH O N K O H O E N R M
一 6 0 18 型多道生理记
录仪描记左室收缩末压 (L V E SP ) 、左室舒张
末压 (L V E D P ) 以及左室最大收缩 、舒张期压
力 微 分 ( d p / d tm a x 、 dP / d t而 。 ) , 以 反 映左 室功
能 。 所有 电信号均用 SM U P 计算机软件分析
处理 (上海医科大学生理教研室提供 ) 。
1
.
3 免疫组织化学技术测量左室非梗死区
(含梗死周边区 )心肌组织内皮型一氧化氮合
酶 (e N O S ) 的表 达量 : 取材心 肌后 冰冻切片
(厚度 5一 8 拌m ) , 按标准技术进行免疫组化
切 片 染色操 作 (大 鼠 e N O S 单抗 购 自 G e ne
公司 ; BA 一 40 0 0 A BC 试剂盒购 自美国 V e e t o r
L a b o r a t o r i e s 公 司 ) , 染 色后在 L E ICA 图象
分析仪上.进行 e N O S 的表达量的定量分析 。
主要步骤为 : 每 张切 片在非梗死区左室壁采
样测量 3 处 , 读取测量 总面积 ( V i e w a r e a ) 、
e N O S 阳性染色区域面积 (A re a) 及平均光亮
度 (li g h t ) ;平均计值后分别计算每只大 鼠单
. A d d r e s s : L o u X in p in g , H u a s h a n H o s p i ta l , S ha n g ha i U n iv e r s it y o f M e d ic a lSc ie n ce s
, S h a馆ha i _ _ _ _ ‘罗心平 男 , 35 岁 , 医学 博士 , 主治 医师 , 主要研究方 向 , 中西 医结合治 疗冠心病 , 参 加过《临床心律失常学 》、《心血管疾病临床 流行病学实践 》等专著 的编写 ; 发表论文 20 余篇 。 近年来主要从事 中草药 对冠状动 脉内皮 功能影 响方 面的研 究 , 19 9 8
年在 国家一级刊物上发表论文 5 篇 。
△本课题受上 海市科委基金资助
· 110 -
位面积下 年m Z )e N O S 平均光亮度 , 后进行组 能的影响 : 见表 1 。 与 A M I组相 比 , 2 周时察
间 比较 。 公式一 A re a X h g h t / V ie w ar ea 香保心丸可轻度升高 L V E S P , 但 6 周时不明
1
.
4 统计处理 : 所有计量资源均以均数士标 显 。 2 周 及 6 周 时 , 察香 保 心 丸 均 可 降低
准差 (牙士 s )表示 , 用 S A S 软件分 析数据 、进 L V E D P (P < 0 . 0 5 ) ; d p / d t。。二 、 d p / d t m :。 值 与
行两两均数的比较 。 A M I组相 比均有增加 (尸 < 0 . 0 5 ) , 提示它可
2 结果 改善左室收缩及舒张功能 。
2
.
1 康香保心丸对心梗大 鼠早期 、晚期心功 2 . 2 康香保心丸对心梗大 鼠左室非梗死区
表 1 醉香保心丸对心梗大 鼠早期及远期心功能的影响‘士 s)
组别
S ha m
例数 (m m H (m m H 又/ s ) (m m H R / s )
1 0
1 2
1 2 3
.
6 7士 1 0 . 3 3
1 0 3
,
0 0 士 9 9 4△
1 1 6
.
5 7士 1 3 . 5 5 否
1 0 6
,
3 8土 1 0 . 2 6 △
1 0 9
.
5 6士 1 1 . 2 9
一 3 . 0 0士 5 . 3 6
1 2
.
2 5士 7 . 9 4△
5
.
7 1士 3 . 0 9 资
9
.
4 6士 8 . 4 5△
2
.
0 0士 7 . 5 5 份 价
与 sh am 组相 比 : △尸< 0 . 05 , 与 A M I组相 比 : . 尸< O , 05
心肌组织 e N O S ’表达量的影响 : 显微镜下见
eN O S 阳性染 色区 域主要分布 于心肌 间质 ;
与 A M I组相 比 , 早期 (2 周 )及 6 周时 , 察香
保心丸均增加 了心肌组织 e N O S 的表 达 , 见
表 2 。
裹 2 康香保心丸对心梗大 鼠左室非梗死 区
心肌 eN O S 平 均光亮度的影响‘士 : )
组别 例数 e N O S 平均光亮度 /( 拜m “)
A M IZ 1 2 1 3
.
8 9士 8 . 8 3
HM PZ : 9 5 1
.
9 4士 6 . 7 9 苍
A M I6 1 1 1 9
.
3 6 士 1 1 . 0 7
H MP 6 7 6 6
.
2 1士 1 3 . 8 2 ,
与相应 A M I组相 比 : “ 尸< 。. 05
3 讨论
文献报道心脏中的一氧化氮合酶主要为
e N O S
, 它主要分布于心肌 间动脉 、静脉及毛
细血管网 , 其作用是催化 L 一精氨酸产生 N O ,
N O 可快速地 扩散 至邻近的心肌细胞 , 它对
心肌收缩性的影响是 目前的研究热点 〔1〕。 多
数研究认为 N O 的急性效果是增加心肌细胞
内的 c G M P 浓度 , 进而抑制心肌 收缩力 、改
善心肌 的舒张期顺应性 〔2〕 ;但也有作者认 为
N O 对心肌收缩力无明显影响〔3〕。
察香保 心丸作 为一种常 用的急 救 中成
药 , 已用于冠 心病的治疗中〔, 一 7〕 , 它对心梗后
左室功能有何影响却不清楚 。 我们的研究表
明 : 赓香保心丸对心梗后 的左室收缩及舒张
《中草药 》1 9 9 9 年第 30 卷第 2 期
4 2 92
.
6 3士 6 3 7 . 9 9
2 5 7 2
.
6 9士 5 7 3 . 1 4△
3 4 9 0
.
1 5士 4 8 5 . 9 3 锌 .
2 6 5 7
.
7 7士 4 7 6 . 0 4 △
3 3 5 1
.
4 8 士 4 2 4 . 8 9 补
带 甘
P < 0
.
0 1
4 3 2 1
.
2 4士 5 9 7 . 5 0
2 4 4 4
.
3 8士 3 9 6 . 8 8△
3 1 4 7
.
2 9士 5 9 1 . 2 9 苦
2 5 0 0
.
2 7士 1 4 9 . 3 8 △
2 9 8 1
.
8 3 士 5 0 2 5 6 香
功能都有不同程度的改善 。 同时与心梗对照
组 相 比 , 寮 香 保 心 丸 还 能 增 加 心 肌 组 织
e N O S 的表达 ; 推 断 eN O S 的表达增加会增
加心肌 内 N O 的产量 , 而 N O 的增加会 引起
心肌 收缩 性能的降低 〔幻 ; 但本文结果却同时
出现 了左室功 能的改善和 eN O S 表达 的增
加 , 提示 : 1 )N O 长期作用的效果可能有改善
心功能的作用 ; 2) N O 对心功能也可能无明
显影响 , 本文心功能的改善可能是其他原因
所致 ; 阐明这些问题都有待于进一步的研究 。
赓香保心丸对左室功能影响除了 N O 的
可能作用以外 , 还可能与下列因素有关 。文献
报道该药 的作用主要在 以下几个方面 : 1) 扩
张血管 , 增加缺血区 的血流灌注 , 减少心肌梗
死面积 ; 2) 增加血浆超氧歧化酶的水平 , 减少
氧 自由基的产生 ; 3) 增加血浆前列环素 I: 的
浓度 〔5一卜这些都有助 于改善左室功能 。 另
外 , 察香保心丸组分中的人参 、蟾酥等均有正
性肌力作用〔的 , 也可能有助于改善心功能 。但
赓香保心丸增加心肌组织 e N O S 的表达的机
制 尚无法推断 , 有待于更深人的研究 。
察香保心丸可同时增加左室非心梗区心
肌组织 e N O S 的表达及 改善左室功能 , 对心
梗后的心功能恢复可产生有益的影响 。
参 考 文 献
1 K e lly R A
, e t a l
.
C ir e R e s
,
1 9 9 6
, 7 9 : 3 6 3
2 P a u lu s W J
, e t a l
,
C ir e u la t io n
, 1 9 9 5 , 9 2
:
2 1 1 9
一
1 1 1
-
C r y s t a l G
, e t a l
,
A m J Physio l
,
1 9 9 6
,
2 70
:
H 1 5 6 8
Fishb e in M C
, e t a l
,
A m J P a th el
,
1 9 7 8
,
9 0
:
5 7
王智慧 , 等 ‘ 上海医药 , 19 96 , 8 : 21
储 敏 , 等 . 中成药 , 1 9 96 , 18 : 3。
罗海明 , 等 . 中国 中西 医结合杂志 , 1 99 6 , 1 6 : 3 23
王 浴生 主编 . 中药药理与 临床 . 北京 : 人 民卫生 出版
社 , 19 9 3 : 1 2 5 8
(1 9 9 8
一
0 9
一
0 9 收稿 )
叮沙R†
4
po
6
E f fe e t s o f H e a r t
一
Pr o te c tin g M u s k Pill o n th e E x Pr e s s io n o f M yo e a r d ia l E n d o th e lia l
N i tr i e O x id e S yn th a s e a n d L e ft V e n t r ie u la r F u n c t io n a ft e r M yo c a r d ia l I n fa r e t io n in R a t s
L u o X i n p i n g
,
Z e n g Z h iy u
,
S h i H a im in g
, e t a l
.
(D e p a r tm e n t o f C a r d io lo g y
,
H u a s h a n H o s p it a l
,
S h a n g ha i
U n i v e r s ity o f M
e d ie a l S e ie n e e s
,
S h a n g h a i 2 0 0 0 4 0 )
A bs tr a c t E ff e e t s o f he a r t p r o t e e t in g m u s k p ill ( H MP )
, a t r a d it i o n a l m e d ie a l p r e p a r a t io n fo r th e
t r e a t m e n t o f m y o e a r d i a l i n fa r e t io n
, o n th e e x Pr e s s io n o f m y o e a r d ia l e n d o th e li a lN O s y n t h a s e ( e N O S ) a n d le ft
v e n t r ie u la r fu n e t io n o f a e u t e m y o e a r d ia l i n fa r e i t io n ( A M I ) r a t m o d e l w e r e s t u d ie d
.
A M I
r a t m o d e ls w e r e p r e
-
p a r e d by e o r o n a ry a r t e r y lig a t i o n a n d r a n d o m i z e d in t o 4 g r o u p s : T w o g r o u p s o f A M I
一
2 a n d A M I
一 6 w e r e ke p t
a s e o n t r o ls
, a n d th e o t h e r tw o
,
w e r e t r e a t e d w i th H M p 3 3 m g / d b y in t u b
a t i o n fo r 2 w e e k s (H MP
一
2 ) o r 6
w e e ks (H M P
一
6 )
.
C a r d i a e fu n e t io n s ( LV E SP
, L V E D P
,
d p / d t
。一二 , d p / d t‘ 。 ) w e r e m e a s u r e d a t th e e n d o f Zn d
a n d s i x t h w e e k o f t r e a tm e n t w i th le ft v e n t r ie u la r e a t he t e r i n s e r t io n
.
T h e le v e l o f m y o e a r d ia l e N O S w e r e m e a
-
s u r e d b y im m u n o h is t o e he m ie a l s t a i n in g a n d im a g e a n a ly s is
.
R e s u lt s s h o w e d th a t th e 2 H MP t
r e a t e d g r o u p s
r e s u lt e d i n a n in e r e a s e o f e x p r e s s io n o f m y o e a r d ia l e N O S ( P< 0
.
0 5 ) a n d a n im p r o v e d sy s t o lie
, a n d d i a st o lie
fu n e t io n s o f le ft ve n t r ic u la r a t th e e n d o f Z n d a n d s ix th w e e k o f t r e a tm e n t a s e o m Pa r e d w i th t he e o n t r o l (P <
0
.
0 5 )
.
I t m a y be e o n e lu d e d th a t H MP
e a n in e r e a s e th e le v e l o f m y o e a r d i a l e N O S a n d im P r o v e e a rd ia e fu n e
-
t io n s a ft e r m y o e a r d ia l in fa r e t i o n a t t he sa m e t im e
.
K e y w o r d s h e a r t
一
p r o t e e t in g m u s k p ill ( H MP )
e n d o t h e li a l n t r i e o x id e s yn th a e s ( e N O S )
当归醇沉物对体外小鼠脾 、胸腺淋巴细胞增殖的影响△
湖北 医科大学药理教研室 (武汉 4 3。。7 1 ) 夏雪雁 来 彭仁诱
摘 要 体外试验 中 , 采用 MT T 比色法测定当归醇沉物对小 鼠脾及胸腺淋巴细胞增殖功能的影
响 。 结果显示 , 0 . 16 ~ 2 . 50 m g / m L 范 围内的当归醇沉物能单独或协同 C o n A / L PS 发挥促进小鼠
脾脏及胸腺 T 、B 淋 巴细胞增殖 的作用 。 当归醇沉物 尚可 对抗氢化泼尼松 (H P )对 C o n A 诱导 的脾
脏及胸腺 T 淋巴 细胞的增殖反应的抑制作用 。
关健词 当归醉沉物 淋巴细胞增殖 M T T 比色法 氢化泼尼松
当归 A n g e lica s i n e n s is D i e ls 是我国传统
中药 , 除具有补血和血 、调经止痛 、扶正固本及
活血化痕等功效外 , 近年来研究 已显示 , 当归
及其提取物的多种组分均有免疫活性 〔‘, 幻 。 而
在制备当归注射液的过程中 , 其醇沉物为废弃
部分 。 为更全面认识当归的作用 , 我们选用当
归醇沉物 , 通过体外试验观察其对小鼠脾脏及
胸腺淋 巴细胞增殖反应的影响 。同时观察它对
氢化泼尼松 (H P )所致小 鼠脾脏及胸腺淋巴细
胞增殖反应抑制状态的调节作用 。
A d d r e s s
:
X ia X u e y a n
,
De p
a r t m e n t o f Pha r m a e o lo g y , H u b e i U n iv e r s it y o f M e d ie a l Sc i
e n e e s , W u ha n夏雪雁 1 9 9 4 年毕业于湖北 医科大学临床医学专业 , 获医学学士学位 。 19 94 ~ 1 9 9 7 年攻读湖北医科大学生化药理专业硕士 , 并 获得硕士学位 。 1 9 9 7 年参加第 六届全国生化药理学术讨论会青年优秀论文评选并获得三等奖 。 1 9 9 7 年至今任湖北医科大学药理教研室助教 。△湖北省 教委 资助项 目 , 本文获第六 届全国生化药理学术讨论会青年优秀论文三等奖
.
1 1 2
,