免费文献传递   相关文献

测定植物提取物对细菌MIC的一种敏感快速的微量反应板法



全 文 :· 信息与文摘 ·
大锥香茶菜中新的细胞毒二菇
大锥香茶菜 Ico L do nm eg a t hyr su s采 自云南省 福
贡县 。 以 前曾从该植物 中分离 出 4 种有细胞 毒作 用
的对映 一贝壳杉烯 (e n t一 ku ar e n e )型二菇 , 现又从 中分
离出一种新的细胞毒 二菇 , 命 名为 m e ga ht yr in B 。 现
报道它的分离 、 结构 及细 胞毒性 。
干燥 叶 ( 2 3 0 9 )磨 碎 , 用 甲醇 ( 。 . 5 1一 火 3) 回 流提
取 , 真 空浓 缩 。 残余物 (3 g )行硅 胶 ( 7 0 9 )柱 色谱 , 先
用石油醚 (4 L ) , 后用 甲醇抓仿 液 ( 10 % , S L ; 20 % , 4
1 )
, 最后用 甲醇 ( 2 . S L )分 别洗脱 , 氯仿 一甲醇 ( 8 : 2)
部位 用氧仿 一丙酮 ( 8 : 2 , Z L )上 硅胶 ( 2 0 0 9 )柱进 一
步 分 离 , 获得一 种 由化合物 I ( m e g a t h y r in B ) 和化
合物 l ( m e g a t h y r in A ) 组 成 的 复 合 晶 , 命 名 为
D C IM ( 2 5 m g )
。 将 I) C IM ( 2 2 m g ) 溶解在沸 甲醇 中 ,
放置 冷却过 夜 , 使之 结 晶 , 获得 化 合物 工针 晶 ( 3 . 5
m g )
, 即 m e g a t h y r in B , 随后作 X 一线结晶分析 。 I 的
分 子式 为 C Z。 H 3。 0 5 , m p 2 2 4 C ~ 22 6 ( 、 。 经 I D 和
ZD

N M R 及 X 一射线作 立体化学分 析 , 其结 构为 la ,
7俘, 1 1俘, 1 5p一四 经 基 一 e nt 一 7a , 20 一环 氧 一贝 壳 杉 一 1 6 一烯
( 图 l ) 。
测定植物提取物对细菌 M IC 的
一种敏感快速的微 t 反应板法
图 1 m e g a t h y r i n B
的结构
实验结 果表明 , m ge a t h -
y r i n B 在 K B 和 K B 一 V ( 士
V L B ) 细胞 株 中显 示潜在 细
胞 毒作 用 , E D )分 别为 0 . 9 ,
1
.
6 和 1 . 3 1, g / n l l 。 到 目 前
为 止 , 从 大锥 香茶 菜分 得 的
5 种 二 枯 ( 包 括 m e g a t h y r l n
B )均具有 细胞 毒活性 。
(沈 东杰摘译
〔Q l u S X , e z a l . P l a n t a M e d ,
陈泽乃 校 )
1 9 9 8
,
6 4
:
7 2 8〕
琼 脂扩散技术虽被广泛用来测定植物提取物的
抗菌活性 , 但仍存 在不少 问题 , 包括 琼脂的种类 、 盐
浓度 、 孵育温度 , 以及抗菌组分的分子大小都会影响
所得到 的结果 。 一种 用 96 一孔微量反 应板 和四噢 ( t e -
tr az ol iu m )盐 来指 示细菌生 长的微 量稀释法得到 了
应用 。 此法快速且效果好 , 使用 金葡球菌 、 粪肠道球
菌等 以 及 来 自许多 不 同品种 植物 的非水溶性 提取
物 , 这种技术均 能给出重复结果 , 只需 10 一 25 产L 提
取物即可测定最小抑制浓度 , 区分 杀菌和抑菌效果 ,
并提供一个永久性的结果记录 。 使用金葡球菌和一
种风车子属植物 毛风车子 oC m b er ut m m ol le 提取物
进行测 试 . 这 一技术 比 琼脂扩 散技术敏感 32 倍 , 且
对培养期达 2 4 h 的受测菌体并不敏感 。 金葡球菌培
养物可 在冷库 内储存 至 10 d 而对 测试结 果几 乎没
有一影响 。 这种方法对筛选具抗菌活性的植物很有用 ,
并可用作生物导 向以 分离植物中的抗菌化合物 。 用
此法对磺胺异哇 , 诺氟 沙星 , 庆大霉素及吠喃妥因等
所测 得最小 抑菌浓 度 ( M IC ) 值与文献报 道值相 似 ,
但用甲氧节吮和 氨节西林对某些细菌所得到的值则
较高 。
实验表 明 , 常用 以 显 示细菌 生物活性 的四 哇盐
类中 , 经上述 几种菌和 3 。 种以 上不 同植物 测试 所得
结果 , 发现 P 一 io d o n it r o t e t r a z o li u m ( I N T )所 生 成的
甲胳 ( fu r m a z a )衍 生物最稳定 , I N T 最低有 效浓 度为
0
.
2 m g / m l
_ , 而 其 他 四 哇 盐 如 t e t r a z o li u m r e d
( T T C ) 和 t h i a z o l y l b l u e (M T T ) 的 甲腊 衍生物 在
溶液干后均会褪色 。
( 陈晓鸥摘译 陈泽乃校 )
〔E l o f f J N . P l a n t a M e d , 1 9 9 8 , 6 4 : 7 1 1二
6 钟国跃 . 中药材 , 19 9 8 , 2 1 ( 3 ) : 1 5 5
7 胡世林 . 中国道地药材论丛 . 北京 : 中国古籍 出版社 ,
1 9 9 7 : 7
8 马雪梅 , 等 . 中草药 , 1 9 9 9 , 3 0 (增刊 ) : 1 8 0
9 马雪梅 , 等 . 中草药 , 1 99 0 , 2 1 ( 9 ) : 1 9
10 周荣汉 . 国外医 药 一植物药分册 , 19 9 8 , 1 3 ( 6 ) : 2 5 4
1 1 段 金魔 , 等 . 中草药 , 1 9 9 9 , 3 0 (增刊 ) : 1 7
l 2
l 3
l 4
l 5
程 惠珍 ,等 . 中国 医药情报 , 1 9 6 , 2 (4 ) : 2 5
肖培根 . 中国药学杂志 , 1 9 9 7 , 3 2 ( 1 1 ) : 67 1
刘铁成 . 中国药学杂志 , 1 9 9 3 . 2 8 ( 1 0 ) : 5 79
程 惠珍 ,等 . 中国医药情报 , 19 9 8 , 4 ( 2 ) : 109
刘振武 ,等 . 天津药学 , 19 99 , 1 1 ( 3 ) : 32
( 1 9 9 9

0 8

0 9 收稿 )
附 8