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Determination of Chlorogenic Acid in Taraxacum Herb by HPLC

HPLC法测定蒲公英中氯原酸的含量



全 文 :H PL C法测定蒲公英中氯原酸的含量△
中国人民解放军海军总医院药剂科 (北京 10 0 0 3 7 )凌 云 寮 范国强 ` ’ 蔡少青 ” ’ 郑俊华 ” ’
摘 要 用H L P C法测定蒲公英中氯原酸的含量 。 采用H pHy pe r si。 C8 ;柱 , 2 0 0 m m x Z . z m m , 流
动相甲醇一磷酸缓冲液 (2 3 : 7 7 ) ,流速 1 , o m L / m in ,检测波长 323 n m 。 测定结果平均回收率为
9 9
.
5 4 %
,
R S D 一 2 . 8 5 % 。
关祖词 蒲公英 氯原酸 高效液相色谱法 含量测定
蒲公英为常用的清热解毒中草药 , 具有
广谱抗菌 和利胆保肝 的作用 〔 1〕 。 中国药典
( 1 9 9 5 版 ) 规 定 本 品 为 菊 科 植 物 蒲公 英
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x a c u m m o n g o l i c u m H a n d

M a z z
. 、 碱地
蒲公英 T . is in cu m iK t ag . 或同属 数种植物
的干燥全草 。 商品调查发现在我国不 同地区
有蒲公英属 27 种植物作为药用 , 它们是否有
同样的疗效 目前尚不清楚 ,蒲公英药材亦缺
乏含量测定标准 。
作者首次从蒲公英中分得氯原酸 〔2 〕 。 氯
原酸具有抗菌和利胆的活性 〔3 , ` 〕 。 测定蒲公英
中氯原酸的含量可以作为评价蒲公英品质的
依据 。 我们首次建立了 H P L C 法测定蒲公英
主流品种和药材中氯原酸的含量 ,可用于蒲
公英药材及其中成药制剂的质量控制 。
1 仪器与试剂
美国 H P 1 0 9 o M 型 H P L C 仪 , 自动进样
器 , 二阶阵列检测器 , 3 0 系列微处理机 。 氯
原酸对照 品 由中国药品生物制品检定所提
供 , 甲醇为色谱纯 ,其它试剂均 为分析纯 。 蒲
公英药材均由作者采集 、 采购并鉴定 ,药材通
常是蒲公英属 1种一 4 种植物的混合物 。
2 色谱条件
色谱柱 H P H y p e r s i e C 1 8 , 2 0 0 m m X Z· 1
m m
,
5 拌m , 柱 温 4 0 ℃ , 流 动相 甲醇一p H 4 · 2
磷酸盐缓冲液 ( 23 : 7 7 ) , 检测波长 3 23 n m ,
流速 1 . 0 m l J /m in , 氯原酸在此色谱条件下
的 t ; = 1 2 · 0 1 m in 。 对照品溶液色谱图 、纯种
色谱图和药材色谱图见图 1 。上 止
1
一氯原酸 2一纯种蒲公英 3一蒲公英药材
图 1 样品 H P L C 图
3 线性关系
精密吸取对照 品 甲醇 液 (0 . s m g /m L )
1

2

3

4

5 拌L 进样 , 测定峰面积 , 将峰面积
对应的氯原酸含量进行回归 ,绘制标准曲线 ,
得方程 Y = 一 6 . 2 6 1 + 3 8 1 7 . ZX , r = 0 . 9 9 9 9 ,
氯原 酸含 量 在 .0 25 m g /m L 一 2 . s m g /m L
之间线性关系良好 。
4 精密度试验
取氯原酸对照品 ,重复进样 5 次 , 由实验
结果计算精密度 , R S D 一 0 . 1 8 % 。
5 含量测定
5
.
1 蒲公英主流品种中氯原酸的测定 : 纯种
蒲公英 , 60 ℃干燥后粉成细粉 ,过 1 0 目筛 。
取过筛的粉末 .0 5 9 ,精密称量 ,置 10 m L 具
塞试管 中 , 精密 加 入 5 % 甲酸的 甲醇 液 5
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A d d r e s s
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` “ 北京中药研究所 “ ’ ` 北京医科大学药学院凌 云 男 , 3 岁 , 1 9 9 6 年毕业于北京医科大学药学院 , 获医学博士学位 。作 ,任主管药师 ,主要从事夭然药物化学和医院制剂开发应用的科研工质量研究 ” 蒲公英专题 , 并承担海军科研任务 ,现已发表论文 10 余篇 。△ 国家八五攻关课题第 8 5一 9 2 0一 0 1一 。 l b 号
现在中国人民解放军海军总 医院药剂科工作 , 曾参加八五攻关课题 “ 常用中药材的品种整理和
《中草药 》 1 9 9 8 年第 29 卷第 8 期 5 2 1
mL
, 超声提取 30 m in ,用脂溶性微孔滤膜过 原酸的含量 , 8 种蒲公英的测定结果见表 1 。
滤 ,取 5 拼L 进样 。 在上述色谱条件下测定氯 5 . 2 蒲公英药材中氯原酸的测定 : 按 5 . 1 的
表 1 蒲公英主流品种的氛原酸含里
编号 植物名称 学名 氯原酸含量 (肠 , n 一 3) R S D ( % )
1 蒲公英 7 ,a r a x a c u m m o n g ol i c u m 0 . 9 1 3 1 . 7 3
2 碱地蒲公英 7 ’ . 、 i n i c u m 0 . 6 3 6 1 . 4 1
3 东北蒲公英 T . o h w i a n u m 0 . 4 4 0 1 . 9 6
4 白缘蒲公英 T . P za勺沪 e c i d u切 3 . 7 8 2 1 . 5 5
5 反苞蒲公英 T . g 护) 沪 os on .0 4 18 2 . 14
6 兴安蒲公英 了’ . 介 zc i zo今u二 0 . 2 5 1 1 . 1 8
7 亚洲蒲公英 T . h e t e r o l eP i s 2 . 0 3 3 1 . 5 9
8 芥叶蒲公英 T . a s i a t i c u从 o · 6 6 1 1 · 6 3
方法对 8 种来源的蒲公英药材中氯原酸的含
量进行测定 ,结果见表 2 。
表 2 蒲公英药材的抓原酸含量 ( % )
编号 来源 氯原酸含量 (n 一 3) 尺S D (% )
1 河北安国 0 . 5 3 4 1 . 1 6
2 哈尔滨 0 . 4 9 5 2 . 0 5
3 西藏昌都 0 . 8 6 7 1 . 3 7
4 宁夏银川 0 . 3 7 7 1 . 5 8
5 四川甘孜 0 . 9 0 4 1 . 8 8
6 广州 0 . 2 9 4 1 . 3 2
7 内蒙巴盟 0 . 2 5 .1 65
8
, 陕西宝鸡 0 . 1 9 9 1 · 2 6
6 重现性试验
精密称取蒲公英样品 6 份各 .0 5 9 , 同法
处理 ,按上述色谱条件进行测定 ,考察方法的
重 现性 , R S D 一 0 . 72 3% , 表 明该法重现性
好 。
7 回收率试验
精密称取 已知含量的蒲公英样品 , 添加
一定量的氯原酸 , 平行测 定 4 份 , 计算 回收
率 ,平均回率 9 9 . 5 4% , R S D = 2 . 6 9% 。
8 小结与讨论
8
.
1 作者应用 H P L C 法测定蒲公英抗菌的
主要有效成分氯原酸含量 ,分离 良好 ,快速准
确 ,重现性好 ,可在 30 m in 内完成测定 。 方法
稳定可靠 ,可作为蒲公英药材及其制剂的质
量控制 。
8
,
2 蒲公英中氯原酸含量较高 ,如在白缘蒲
公英中高达 3 . 78 % , 但不同种蒲公英含量相
差很大 。 药典未作入药说明 。 氯原酸含量低
的蒲公英能否作为药用 , 尚得进一步探讨 。
参 考 文 献
1 王浴生 . 中药药理与应用 . 北京 : 人 民卫生出版社 ,
1 9 8 3
: 1 1 7 6
2 凌 云 ,等 . 中国药学杂志 , 1 9 97 ; 32 ( 10 ) : 5 8 4
3 国家医药管理局 中草药情报中心站 . 中草药有效成分
手册 . 北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 9 3 : 9 5
4 肖崇厚 . 中药化学 . 上海 : 上海科学技术出版社 , 19 9 1 :
3 9 6
( 1 9 9 8

0 3

3 0 收稿 )
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