全 文 ：生态因子对绞股蓝总皂试含量影响的研究
湖北大学 生命科学系( 武汉4 30 0 62 )
武汉 市医学科学研究所
王万 贤 奋 杨 毅 邓 铭 柯文 山 定明芹
戴为苹
摘 要 设计以不同光照强度和 pH值等生态因子栽培绞股蓝 ,当相对照度为 39 · 85 % ~ 80 · 39 %
时 ,为绞股蓝生长发育适宜光照 ,尤以相对照度为 64 . 93 % ~ 74 . 51 肠时 ,干物质积累最多 , 总皂贰
含量最高 ,果实和种子量最大 ;当相对照度> 80 %或 < 40 %时 ,干物质积累量大幅度下降 , 总皂贰
含量较低 ,且当年不能开花结果 。 在 p H 值为 5 . 5~ 8 . 0 的完全培养液 (M )S 中 ,绞股蓝茎段均能成
活 ,而以 p H 值为 6 . 5 ~ 7 . 0 时生长发育最佳 ,并于秋天开花结果 , 总皂贰含量较高 ;而在 p H 值 <
.5 5或 > 8 . 0 时 ,其插条先后枯黄而死 。
关键词 绞股蓝总皂贰 光照强度 p H 值
绞 股 蓝 伪 n o s t e m m a P e n t a P勺 zzu m
( T h u n b
.
)M ak
. 为葫芦科绞股蓝属植物 。 目
前 , 国内外学者 已从该植物中分离出 84 种总
皂贰 , 总皂贰含量高者达 13 . 6% , 其中 6 种
与人参皂贰相 同 , 还有许多绞股蓝皂贰水解
产生的次级贰 、 贰元和次级贰元与人参皂贰
水解产物相 同 ,并 已证 明其优 良株系中人参
皂贰的含量高于人参中的对应成分 〔 , 〕 , 是迄
今为止在五加科以外发现含人参皂贰的唯一
植物 , 被誉为 “ 南方人参 ” 。经药理和临床试验
显示其具有类似人参抗疲劳 、 抗衰老等作用 ,
对治疗多种癌症有一定疗效 〔2〕 , 并且副作用
小 , 作用缓和等优点 〔3 〕 , 其新产品层出不穷 。
为了保证原料供应 ,许多地区都在进行人工
栽培 。为了掌握绞股蓝生长发育的最适条件 ,
探讨人工栽培绞股 蓝的质量 , 本文将我们进
行生态因子中的光照强度与 p H 值对绞股蓝
影响的初步研究结果报道如下 。
1 材料和方法
.1 1 光照强度对绞股蓝总皂贰含量影响的
供试材料的培育 : 选取长势一致的绞股蓝扦
插苗 , 植入高 20 c m , 直径 3 c0 m 的花钵 (盛有
等量 、混合均匀的菜园土和渣肥 ,两者 比例为
7 : 3) 中 , 每钵植入绞股蓝苗 4 株 (早3 , 舍l ) ,
重复 2 组 。 用厚 白布 、 薄白布 、 白纱布 、 白色尼
龙窗纱和镀锌粗 、 细铁丝网罩住花钵 ,造成 9
种不同光照强度 。 按全光照为 1 0 %光强折
算 ,罩 内相对照度依次为 (% ) : 5 5 . 2 7 、 5 0 . 3 9 、
7 4
.
5 1
、
6 4
.
9 3
、
4 9
.
9 2
、
3 9
.
8 5
、
2 4
.
8 4
、
1 1
.
3 5 和
.7 98 (用 S T 一 8 0 B 照度计测定 ) 。 晴天 ,每 日傍
晚用喷壶浇水一次 。从遮光后 3 个月起 ,每隔
一个月取样测茎粗 、 节间长 、 中叶长 、 中叶宽 、
总叶柄长和干重 。 于 n 月上旬收割全部地上
部分 , 并观察记载长势 、 开花 、 结果情况 , 并用
红墨水染色法测定种子发芽率 , 用全株干重
为基数测定总皂贰含量 。
L Z p H 值对绞股蓝总皂贰含量 影响的供
试材料的培育 : 选取长势一致的藤蔓 ,截取其
中段 , 每段 3 节 ,分别扦插于培养缸中进行液
体培养 , 每缸 3段 (早2 , 舍1 ) ,两组重复 ,置网
房的水泥台上 。 用 H ZS O ; 和 N a 0 H 调整完全
培养液 (M )S 的酸碱度 ,使之形成从 p H 3 . 5一
1 0
.
5 的等差系列 ,定期更换培养液和观察记
载 。 于 n 月上旬收取成活植株 ,用全株干重
为基数测定总皂贰含量 。
1
.
3 绞股蓝总皂贰含量的测定方法 : 供试材
料中绞股蓝总皂贰的鉴定及含量测定参照文
献〔` , 5 〕分析人参皂贰的方法 。 将同一时间收获
的全株 ,分别称鲜重 ,在 80 ℃烘箱中烤干 h4 ,
研磨 , 过 60 目标准筛 ,制成粗粉 。 精密称取粗
,
A d d
r e s s :
W
a n g W
a n x i a n
,
D e p a r t m e n t o f L i f e cS i
e n e e s
H
u
b
e i U n iv e r s i t y
,
W
u h a n
《中草药 》 1 9 9 6 年第 2 7 卷第 9 期 · 5 5 9 ·
粉 . 09 5, 置 SOm l 磨口 具塞圆底烧瓶中 ,精确
加入甲醇 25 m l ,摇匀 ,称重 , 冷浸过液后在恒
温水浴加热微沸 h6 。 滴加甲醇至原重 ,离心 ,
吸取上清液置磨 口具塞刻度试管中备用 。 绞
股蓝总皂贰的分离采用 D 型大孔树脂 吸附
法 。 吸附柱直径为 1。 m 。用微量进样器吸取上
述供试绞股蓝粗粉 的 甲醇提取 液 2 0 0川 , 加
入 吸附柱顶端 , 用 Z om l 蒸馏水从上端冲洗
吸附柱 ,然后改用 2 0m l 70 %的乙醇洗脱 ,洗
脱液全部收集至具刻度试管 中 , 挥干乙醇 。加
5%香英 兰 醛一冰 醋 酸 试 剂 0 . 2m l , 高 氯 酸
o
·
s m l
,于 6 0℃恒温水浴中加热 1 5m i n , 立即
冷 却 , 加 5m l 冰醋 酸稀释 , 摇 匀 , 于 波 长
5 6 0 n m 处 比色测定 。 由人参二醇的微克数
( A )
,利用下式计算含量 :
生药中总皂贰含量 ( % ) - A X 2
.
S X 10 0
W
其中 : W :点样量相当于生药微克数 。 2. 5 : R b组
皂贰平均分子量与人参二醉分子量之比
标准曲线制作方法和条件同测定总皂贰
的方法和条件 。 人参二醇标准品购 自卫生部
药品生物制 品检定所 ,绞股蓝总皂贰标准 品
由湖南省中医药研究院李若存同志提供 。
2 结果与讨论
.2 1 生态因子中光照强度对绞股蓝生长发
育 的影 响 : 试验结果表 明 , 当相对照度 为
4 0 %一 8 0%时 ,绞股蓝生长发育较好 ,而以相
对照度在 65 %左右时绞股蓝的干物质积累
最多 。 当相对照度低于 40 %时 ,干物质积累
量大幅度下降 ; 当相对照度高于 85 %时 , 绞
股蓝生长缓慢 , 干物质积累量也呈明显下降
趋势 ,且茎蔓纤细 , 叶片小而多毛 。 当相对照
度在 40 %一 8 0%之间时 ,绞股蓝地上茎的节
间长 、 中叶长与宽 、 总叶柄长 , 随光照强度的
增强而递减 ,呈负相关 , 而茎粗则随光照强度
的加强而递增 , 呈正相关 (表 1 ) ,且角质化 、
木质化程度也呈增强趋势 (横切面观 ) 。
表 1 光照强度对绞股蓝生长发育和总试含 l 的影响
相对照 干物质累积量 茎均粗 节间均长 中叶均长 中叶均宽 总叶柄均长 果实数 种子数 种子发芽 总贰含量
度 ( % ) ( g /株 ) ( m m ) ( e m ) ( e m ) ( e m ) ( e m ) (个 /株 ) (粒 /株 ) 率 ( % ) ( % )
8 5
.
2 7 3 9
.
1 3 2
.
1 4 2
.
3 4 3
.
9 1 1
.
4 2 3
.
8 7 1 5 4 3 0 1 9 4 3
.
2 2
8 0
.
3 9 5 1
.
4 2 2
.
8 9 2
.
7 1 4
.
2 4 1
.
5 9 4
.
2 9 1 5 7 3 0 9 9 5 3
.
3 1
7 4
.
5 1 9 3
.
6 0 2 8 7 3
.
1 0 4
.
3 5 1
.
6 2 4
.
3 1 1 6 3 3 1 7 1 0 0 3
.
8 7
6 4
.
9 3 1 1 4
.
5 6 2
.
8 5 3
.
2 8 4
.
8 1 1
.
9 6 4
.
9 6 15 9 3 15 1 0 0 3
.
9 2
4 9
.
9 2 8 5
.
7 1 2
.
2 0 3
.
4 0 5
.
2 7 2
.
0 5 5
.
5 8 11 8 2 18 9 3 3
.
1 8
3 9
.
8 5 5 2
.
5 7 1
。
5 1 4
.
1 2 5
.
7 8 2
.
2 4 5
.
9 2 3 1 5 3 8 1 2
.
9 7
2 4
.
8 4 3 1
.
6 2 1
.
2 8 4
.
4 3 6
.
0 1 2
.
3 9 6
.
1 7 0 0 0 2
,
5 1
1 1
.
3 5 1 1
.
1 3 1
.
19 5
.
0 8 6
.
2 1 2
。
5 9 6
.
5 1 0 0 0 2
.
3 2
7
.
98 8
.
5 8 1
.
0 3 5
.
4 8 6
.
3 9 2
.
60 7
.
3 6 0 0 0 2
.
1 1
当相对照度 ) 39 . 85 %时 , 当年栽培的绞 养液中的生长发育最好 ,扦插后 27 d 检查 ,生
股蓝均能开花结果 ,形成发育完全的种子 ,而 不定根 23 一 29 根 /株 ,分枝 1一 3条 /株 ,展新
以相对照度在 6 4 . 9 3%一 74 . 51 %之间时 , 结 叶 3一 n 片 /株 ; 继续培养 ,均于秋天开花结
果最多 ,种子量最大 , 发芽率最高 ; 当相对照 果 。 当 p H < 5 . 5 或> 8 时 , 其插条则先后枯黄
度 ) 64 . 93 %时 ,不同光照梯度下绞股蓝的果 而死 (表 2 ) 。绞股蓝适生于 p H 6 . 5一 7 . 0 的中
实和 种子量以及种子发芽率虽显示一定差 性或微酸性生境 , 人工栽培繁育绞股蓝时 ,其
异 ,但却相互接近 ; 当相对照度 ( 24 . 84 %时 , 栽培基质的酸碱度不可 < 5 . 5 或 > 8 。 这与我
则当年均未开花结果 。 们对 自然分布 的绞股蓝生境 中土壤 p H 值
.2 2 生态因子中 p H 值对绞股蓝生长发育 的调查 、 测定情况相吻合 。
的影 响 : 绞股蓝茎段扦插在 p H 值为 5 . 5一 8 2 . 3 供试材料中绞股蓝总皂贰的定性分析 :
的培 养液 中均 能成 活 ,但 以 p H 6 . 5一 7 . 0 培 通过薄层层析 , 发现所有供试绞股蓝总皂贰
·
5 6 0
·
均与对照品呈现 明显而等 R f值的 7 个斑点
( 图 ) 。说 明生态因子中无论光照强度的变化 ,
还是 p H 值的改变对绞股蓝总皂贰的成分均
未产生大的影响 。
表 2 p H 值对绞股蓝生长发育和总皂试含量的影响
p H 值 根长 根数 株高 分枝数 叶数 总贰含量
(
e
m / d ) (根 / d ) ( e m / d ) (条 / d ) ( 片 / d ) (% )
:
.
;: :
.
;: :
.
:: :
.
:{ ;
.
::
:{ :
.
:{ :: :
.
;{
q人月了产n乙
00
.…0
0 0
. ;: ;
.
);
:
.
::
O
.
O
.
O
.
0
.
0 1 0
.
0 1 0
. ;: ::
注 : 当 p H < 5 . 5 或> 8 时插 条逐渐死亡 , 所测数据未列
0 0 0 三 0 0 0曹君 g 名忿名 g
0 0 0 D 0 0 0
。 宫了言了兮宕兮
口 0 0 0 0 0 0
! 2 3 4 5 6 7 8
图 薄层层析图谱
1一人参二醇标准品 2一绞股蓝总皂贰 3一 7 . 98 %光
照 品 4一 6 4 . 9 3%光照 品 5一 85 . 27 %光 照品 6 -
p H S
.
5 品 7一 p H 7 品 8一 p H S . 0 品
薄层吸附剂 : 硅胶 G ,湿法铺板 , 10 5℃烤 3 0而 n
展开剂 : 正丁醇 一醋酸一水 (4 : 1 : 5)
显色剂 : 饱和碘蒸气
2
.
4 生态因子对绞股蓝总皂贰含量的影响 :
从表 1 可知 , 当相对照度在 65 %左右时 ,绞
胶 蓝总皂贰含量最高 , 而 当相对 照度 低于
5 0 %或高于 85 %时 ,绞股蓝总皂贰含量均呈
降低趋势 。 但由于相对照度高于 85 %时绞股
蓝生长缓慢 , 低于 40 %时 ,干物质积累量大
幅度下降 , 而在 “ %左右 时 , 干物质积 累量
最多 。 由此推论 ,单位面积上收得较多总皂贰
产量的最宜光照为 65 %一 75 % 。 又从表 2 可
知 , 当培养基 p H 值为 6 . 5一 7 . 0时 , 绞股蓝
总皂贰含量较高 ,低于 6 . 5 或高于 7 . 0 时 ,其
含量均呈下降趋势 ;而在 p H 6 . 5一 .7 0 时 ,植
株最长 ,分枝数最多 , 叶片数最大 , 因此 ,在栽
培以收获地上部分 为产 品的多年 生绞股 蓝
时 , 土壤 p H 值应调 整到 6 . 5 一 7 . 0 之间 为
宜 。
3 小结
3
.
1 绞股蓝属阴性植物 ,适于林下栽培和高
秆农作物间作 。林下栽培或间作时 ,其相对照
度应稳定在 40 % ~ 80 %之间 ,并应尽可能造
成相对照度为 65 %一 75 %的光照条件 , 以获
得高产 、 优质的绞股蓝生药材和种子 ,从而可
大大提高立体栽培的综合经济效益和生态效
益 、 社会效益 。
3
.
2 绞股蓝对生境 p H 的适应范围较宽 。 人
工栽培绞股蓝时 ,土壤最适 p H 为 .6 5一 .7 0 ,
也可在 p H S . 5一 8 的生境中生长 , 但土壤和
p H 不应 < 5 . 5 或 > 8 。 这与文献报道大致吻
Z生 〔6 , 8〕
〔 习 。
3
.
3 生态因子中的光照强度 、 p H 值变化对
绞股蓝总皂贰成分未发现其影响 ;但对绞股
蓝的生长发育 、 干物质的积累和总皂贰含量
的影响较大 。 因此 ,人工栽培绞股蓝时 ,尽可
能地选择与造就最宜生态条件是完全必要
的 。
致谢 : 湖北大学生命科 学系郭 文 源 、 杨
毅 、 陈建平等同志参加部分试验工作 。
参 考 文 献
1 覃章铮 ,等 . 天然产物研究与开发 , 1 9 2 ( 1 ) : 83
2 公开特许公报 ( 日 ) 昭 58一 5 9 9 2 1
3 U S P a t e n t l 9 8 2
.
4 3 3 9 44 2
4 王慕邹 ,等 . 药学学报 , 一9 7 9 , 1 4 ( 5 ) : 3 1 1
5 章观德 , 等 . 药学学报 , 1 9 80 , 1 5 ( 3 ) 门 7 5
6 邢泽 田 . 陕西 中次学学报 , 19 8 5 , 8( 1 ) 3 9
7 方涌泉 , 等 . 中药材 , 1 98 7 ( 4 ) : 6
8 阎善行 . 农村科学 , 1 9 8 7 ( 3 ) : 14
( 1 9 9 5
一
0 3
一
2 3 收稿 )
嚣 欢 迎 订 阅 1 9 9 7 年 《 中 草 药 》 杂 志 幸
米 来
米 半 来 米 来 来 米 来 来 来 来 来 来 米 半 米 米 米 米 米 来 来 来 来 来 半 米 米 米 半 来 半 米 来 半 来 来 来 半 来 来
《中草药 》 1 9 96 年第 27 卷第 9 期