全 文 ：。 药材 。
南方红豆杉温室扦插育苗试验研究
陕西师范大学生物系 (西安 7 1 0 0 62)
西安植物园
西北大学植物研究所
王豁之 帝
白荣华 王 农
孙 拮 胡正海
摘 要 南方红豆杉 1年生萌草条插穗生根率最高 ,而 l 年生侧枝插穗来源易 ,数量多 。 以 N A A
50 陀 n/ ` L + BI A 50 雌 / m L ,处理 1 年生侧枝插穗 s h ,在善土一蜓石 (1 , l) 的苗床上 ,插穗成苗率达
6 0 % 以上 。
关锐词 南方红豆杉 扦插 育苗
红豆杉属植物 , 由于其体内含有多种具
有抗肿瘤活性的二菇类化合物而成为当今世
界上植物药研究的热点之一 。 随着实验及临
床试验的不断深入 , 人们发现其主要成分紫
杉醇 (t a x ol ) 不仅具有极好的作用方式和独
特的抗癌机理 ,且对卵巢癌 、 乳腺癌等疗效显
著 , 表现出十分喜人的应用前景 , 因而导致其
需求量也日益增大〔`一 ` , 。 然而红豆杉属植物
在我国各地均 为零星分布 ,资源很少 。 加之其
生长缓慢 , 自然繁殖率低 ,取材时又需毁树剥
皮 , 在当前人工合成 、 基因工程及组织培养等
技术 尚不能解决问题时 , 红豆杉的人下繁殖
及栽培研究就显得格外重要 ,并 已引起了人
们广泛的注意 。 美国于 1 9 9 0 年前后 已大力开
展资源研究 , 先后开辟了数个几百万至上千
万秧苗的红豆杉种植园〔 5 , `〕 。 南韩 〔7 〕 、 俄国 `的
等许多国家也先后开展了红豆杉扦插繁殖的
研究 。 我国马小军等 〔9〕 、任步均等 〔, 。 ,对东北
红豆杉的扦插条件及繁殖方法 已进行了许多
研究 , 而对南方红 豆杉的研究仍较少〔 , `〕 。 本
文报道了南方红豆杉的不同插穗 , 以及不同
苗床基质和植物生长调节剂等对其生根的影
响较系统的研究结果 , 旨在为人工快速繁殖
南方红豆杉提供资料 。
1 材料和方法
1
.
1 材料及修剪 : 南方红 豆杉 aT x “ , he i -
en sn is va
r m al’ er i 插穗采自陕西师范大学 生
物园南方红豆杉种植园内 。 于晚秋季节 , 即
10 月中 、 下旬至 1 1 月上旬分别采取 15 年龄
母树的 1 年生萌萦条 、 1年生侧枝 、 2 年生枝
条及 3 年生枝条 , 分别将其剪成 10 ~ 1 5 Cm
长的插穗 ,作为试验材料 。 修剪插穗时 , 对 1
年生材料 ,剪去下部针叶 ;对 2~ 3 年生材料 ,
剪去 ;I’ 部的针一叶及小枝 , 中 、 上部小枝及针叶
全部保 留 。 随剪随处理 , 随扦插 , 以利成活 。
1
.
2 插 条处理 : 各种插穗剪修后 , 分别捆扎
成把 , 以 一不同浓度的 N A A 、 N A A + BI A 处理
插穗 卜端 。 处理时间分别为 8 、 1 2 、 24 h 不等 ,
以水浸为对照 ,观察各处理对南方红豆杉插
穗生根的影响 。
1
.
3 苗床处理 : 本实验在玻璃温室中进行 。
苗床底部铺设地热线 , 电子控温仪维持苗床
地温 15 ℃土 2℃ 。 扦插前 , 整细整平苗床后灌
透水 , 待水落下时立即将预先准备好 的插穗
插入苗床 ,深度为插穗的 2 / 3 ,株距 3 c m , 行
距 1 0 c m 。 插入好后搭弓棚以塑料薄膜覆盖 ,
两头留有通风 口 ,每 1 周左右喷雾浇水 1 次 。
霜冻后将通风 口封闭 。 第 2 年春天打开通风
.
A d er s
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W an g Z he hz i
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S ha n ix N or m al U in ve sr it y
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王品之 男 , 1 9 8 8 年毕业于陕西师范大学 生物系植物生理学 专业 ,获理学硕士学位 。 现任陕酉帅范大字生初 条每卿鞘胞工程研究室主任 , 教授 . 1 9 8 7 年至今 ,一直从事植物生物技术方面的 _f 作 , 先后在 《 lP an t P h ys id 》 , 《植物学报 》 , 《买验生物学报 》 , 《科学通报 》等刊物上发表论文 80 余篇 。
《中草药 ” 9 9 7 年第 2 5 卷第 2 1期 · 6 7 9 .
口 , 勤加灌溉 , 经常保持土壤湿润 , 1 个月后 后再相继抽出新梢和针叶 。 次年 5一 6 月份
全部去掉塑料薄膜 ,关闭地热线 。 6 月份搭一 时 ,有的新梢可伸长达 3一 4 。 m 。 8一 9 月份 ,
简易荫棚 ,并随时除草松土 , 以利苗木生长 。 整个植株发育健壮 ,根系发育良好 , 一般每株
床土分别以善土 、 细河沙 、 蛙石和锯末按 可产生不定根 5一 10 条 ,根长约 3 ~ 5 。 m ,较
一定 比例搭配而成 , 调配时混匀 、整细 ,床土 长者可达 8一 10 c m 。 植株地上部也生长旺
层厚 20 。m 。 盛 , 此时 ,应及时除去遮荫棚 ,在全光下育苗 ,
2 结果与分析 以利种苗发育健壮 。
南方红豆杉发育健壮的近成熟枝插穗 , 对不同播穗生根能力及长势的研究表明
经 N A A 50 拼g /m L + BI A 50 “ g /m L 处理 8 (表 1 ) : 1 年生萌萦条的生根率最高 , 长势也
h 后 ,插入苗床生长 1 个月左右 , 部分插穗基 最强 。 其成苗数达 90 . 38 % 。 同时 , 1 年生萌
部开始膨大 , 2一 3 个月后 ,形成明显可见的 萦条插穗的愈伤组织形成时期和生根时期均
愈伤组织块 。起初的愈伤组织块形似拳头状 , 较其它 1一 3年生枝条的提早 1个月左右 。 1
结构致密 ,进而 由其上产生不定根 。 南方红豆 年生侧枝插穗及 2 年生枝条插穗的成苗率较
杉插穗形成的不定根早期呈灰白色 ,透明多 低 , 3 年生枝条的最差 。在所试条件下 , 3年生
分枝 , 多汁易碎 ,进而转化为红褐色 。 在不定 枝条插穗的成苗率只有 29 . 41 % 。
根产生的同时 , 插穗上部各类芽开始萌动 , 随
表 1 南方红豆杉不同类插德生根及长势间的差异△
插穆种类
1 年生萌雍条
1 年生侧枝
2 年生枝条
3 年生枝条
` 苗床基质为善土一蛙石 (l
扦插数量 (支 ) 成活苗数 (株 )
1 0 4 0 9 4 0
2 6 5 5 1 6 8 1
2 1 2 7 1 1 0 7
15 3 7 4 5 2
1) 各类枝条均用 N A A 50 陀 /m L + BI A
成活率 (% ) 苗长势
强
较弱
较强
弱
8
. .1ù毖介J,04.…0几JdgùO甘OJ.b亡Z
5。阳 / m l J 处理 s h ;成活苗数为次年 9 月份的统训
值 。
由于萌粟条不仅生根率高 , 愈伤组织及
不定根发生早 , 且再生植株生长旺盛 , 因此是
南方红豆杉繁殖的最佳材料 。 一般苗木繁殖
中 ,可通过修剪或断枝 , 以促进萌葵条的产
生 。 但在实际生产中 ,萌桑条的数量相对很
少 , 2一 3 年生枝条数量也有限 , 难以满足在
短期内进行大规模繁殖的需要 。 而在短期内
能够供大规模生产用的枝条为 1 年生侧枝 。
一般一株 10 年以上生健壮生长的南方红豆
杉可提供此类枝条上千枝 。 因此 ,本实验重点
对此类枝条的生根技术进行了研究 。
表 2 显示 : 在不同的苗床上 , 1 年生侧枝
表 2 不同苗床基质对南方红豆杉 1年生侧枝插穗成苗率的影响△
1C甘OùōbOQ曰,d连儿OùOJǎb4tIQ臼…,40内匕8只ù占O眨J八1 j)任尸n0口4匕J内O81310457656278 911049
苗床基质
善土
善土 一河沙 (1 : 1)
善土 一河沙 ( 1 : 2)
善土 一河沙一锯末 ( 1 : 1 : 1)
河沙一蛙石 (l : l)
河沙一锯末 (l : 1)
善上 一河沙 一蚝石 (1 : 1 : 1)
善土一蛙石 ( 1 : l)
插穗数量 (支 ) 成苗数 (株 ) 成苗率 ( % )
△各插穗均用 N A A 50 陀 /m l 十 IB A 50 雌 /m L 处理 s h ;成活苗数为次年 9 月份的统计值 。
.
6 8 0
.
插穗的成苗率受苗床基质的影响 。 在善土一蛙
石为 1 : 1 的苗床上 , 1年生侧枝插穗的成苗
率最高 , 达 63 . 93 % ,是在纯善土基质中的
4
.
4 4 倍 。 其次在善土一河沙为 l( : 2) 、 善土 -
河沙一蛙石 (为 1 : 1 : 1 ) : 的基质中 , 1 年生
侧枝插穗的成苗率也较高 。 这 3 种基质组成
的共同特点一是有善土存在 , 二是其中含有
较多的蛙石或河沙 。 由此组成的苗床基质 ,其
土壤结构既有一定的粘度 , 同时透水保墒能
力又好 。在纯善土苗床中 ,插穗基部在培育早
期土壤以下部分易烂皮死苗 , 而在纯河沙 ,纯
蛙石或河沙与蛙石的苗床基质中 , 当温度稍
升高或管理不当 ,易缺水旱死 ,特别是在次年
5 ~ 6 月温度回升时 ,极易因高温及干旱而死
苗 。 因此 ,在善土中增加一定量的河沙或蛙石
而组成的苗床较好 。
不同浓度及时间的植物生长调节剂处理
均提高了南方红豆杉 1 年生侧枝插穗的生根
率 (表 3 ) 。 当 N A A 浓度为 50 1侣 /m L 时 ,随
处理时间的延长 ,插穗生根率不断增加 ,但增
幅较小 ; 提高 N A A 浓度至 1 0 拜g /m L ,则明
显提高了插穗的 生根率 , 分别是 N A A 50
拌g / m L 处理及对照 的 1 . 85 及 2 . 4 倍 , 但进
一步提高 N A A 的浓度 , 则抑制了插穗的生
根率 , 在 N A A 处理 液 中 , 附加 一 定 量 的
IB A
, 进一步提高了插穗的生根率 , 而 又 以
N A A 5 0 拼g / m L + I B A 5 0 拼g /m L 处理 s h
为佳 。
表 3 植物生长调节剂不同处理对南方红豆杉 l 年生侧枝擂穗生根的影响。
浓度印 g /m L ) 时间 ( h) 插穗数 (支 ) 生根数 (支 ) 生根率 (% )
N A A 5 0 8 2 1 6 6 7 3 1
.
0 2
N A A 5 0 12 2 0 5 6 6 3 2
.
19
N A A 5 0 2 4 2 2 0 7 5 3 4
.
0 9
N A A 1 0 0 8 2 2 0 1 2 6 5 7
.
2 7
N A A 2 0 0 8 2 0 8 1 0 2 4 9
.
0 4
N A A 5 0士 IB A 5 0 8 2 3 2 1 4 9 64 . 2 2
N A A 1 0 0士 IB A 10 0 8 1 9 9 1 17 58 . 7 9
对照 2 0 1 4 8 2 3 . 8 8
△苗床基质为善土 一蚝石 ( 1 : 1 ) ;生根数为次年 6 月份的统计值
综上所述 , 南方红豆杉扦插成苗率最高 仍很重要 , 加强管理将可大大提高插穗的成
的插穗来 自 1 年生萌秦条 ,但生产中采用 1 苗率 。
年生侧枝则可在短期内获得大量的再生植 参 考 文 献
株 ,其处理的较佳植物生长调节 hlJ 浓度 、 比例 ` c r a “ 9 G M · e , a l · A n n a l“ o f ’ h e M i , ` o u r i OB , a ` , i c a l O a 卜
及 时间为 : N A A 50 拜g /m L + BI A 50 林g /
m L
, s h ;而苗床基质以善土一蛙石 ( l , 1 ) 、 善
土一河沙 (l : 2) 或善土一河沙一蛙石 (l , 1 , l)
为较好 。 至于南方红豆杉在所试条件下愈伤
组织的产 生 、 根的发生均较东北红豆杉为
晚〔” ,其原因可能是本实验为晚秋插之故 。 南
方红豆杉虽为常绿植物 ,但晚秋时受 自身生
物钟的调节 , 体内同样可能 已积累了较多的
抑制物质 ,延缓了生根时间 ,对此尚需做进一
步的研究 。此外 , 利用 1 年生侧枝在晚秋季节
扦插虽不完全等同于嫩枝扦插 , 但管理措施
d e n
,
1 9 95
,
8 2 ( 1 )
: 4 7
2 D i e r g a r t e n K
, e t a l
.
O n k o lo g i吧 , 1 9 9 8 , 1 6 ( 5 ) : 3 2 9
3 陈未名 . 药学学报 , 1 9 9 0 , 2 5 ( 3 ) : 2 2 7
4 陈毓享 ,等 . 国外沃药 : 药学分册 , 1 9 9 4 , 2 1 ( z ) : 3 6
5 B o r m a n S
.
N e w s F o c u s
.
eS P t
e m be r Z
,
1 1 9 1
,
C 邑 E N l l
6 胡润生 . 国外以药 : 植物药分册 , 19 93 , 3 (z ) : 54
7 G o o G H
, e t a l
.
K o r e a n f o r s o e
,
1 99 0
,
7 9 ( 4 )
:
3 5 9
8 I v a n o v a Z Y
.
F i z o l R a s t ( n 1 O s e )
,
1 9 7 9
,
2 6 ( 2 )
:
3 6 4
9 马小军 , 等 . 中草药 , 1 9 9 4 , 2 5 ( 8 ) : 4 2 9
1 0 任步钓 , 等 , 植物杂志 , 1 9 9 2 ( 2 ) : 8
1 1 聂东伶 , 等 , 湖南林业科技 , 1 9 9 4 , 2 1 ( 3 ) : 3 7
( 1 9 9 6
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一
0 4 收稿)
6 8 1
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.
m a i即 i , b u t t h i s k i n d o f s h o o t w a s t o o s e a n t y t o b e u s e d a s a s o u r e e o f e u t t i n g fo r r a P i d P r o p a g a t io n . ( ) n t h e
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.
雪莲花组织培养的初步研究△
中国科学院植物研究所 (北京 1 0 0 0 9 3 ) 赵德修 牵
搞 要 雪莲花种子在 1/ 2M S 培养基上萌发出幼苗 。 以不同条件研究了雪莲花愈伤组织诱导及
培养 。 应用高压液相色谱法对培养物中的具有抗癌作用的黄酮 Jac eo is id n 进行了分析 。
关键词 雪莲花 组织培养 黄酮 抗癌活性
雪莲 花 S a u s s u er a i n v o l u c ar t a K a r . e t
iK
r
. , 又名雪莲 , 是我国三类珍稀植物 , 民间
用于治疗风湿性关节炎 ,妇科病等 。 经药理实
验证明 ,雪莲具有抗癌 、扩张血管 、 降血压 、 抗
疲劳等作用 。 其中雪莲中黄酮 jac eo s id n 对
治疗腹水型肿瘤具有显著疗效 〔 , · “ 〕 。 由于雪莲
生长环境特异 , 人工栽培困难 ,致使 目前雪莲
资源日益匾乏 ,雪莲物种濒临灭绝 。 因此 ,试
图通过雪莲组织细胞培养 ,来探索生产有效
成分的可能性 。 本实验室以不同条件研究了
雪莲愈伤组织诱导及培养 ,并以高压液相色
谱法测定培养物的有效成分 。
1 材料与方法
雪莲种子经 7 0 %酒精消毒 1 0 5 ~ 1 m i n ,
0
.
1%升汞消毒 4 一 1 5 m i n , 无菌水洗 3 ~ 4
次 ,每次 2一 3 m i n , 消毒后接种于 1 / ZM S 无
激素培养基上 , 一周后萌发出幼苗 。 用得到的
幼苗在 M S 附加不同浓度的激素 ,蔗糖 3 % 、
琼脂 0 . 6% 、 p H 值 5 . 8 的培养基上作愈伤组
织诱导 。 用 M S , A G 一 7 , B 。 3 种基本培养基作
愈伤组织培养比较实验 。培养条件 : 50 m I J 三
角瓶内含 20 m L 固体培养基 ,每瓶接种量为
0
.
2士 0 . 0 5 9 鲜重 , 温度 为 25 ℃ 士 1℃ , 每隔
Z o d 继代一次 。
2 结果与讨论
2
.
1 雪莲种子萌发及愈伤组织诱导 :雪莲种
子在 1 2/ M S 无激素培养基上萌发 ,酒精消毒
时间 4 0一 5 0 5 , 升汞消毒为 7一 8 m i n 为宜 。
雪莲幼苗作外植体 ,在 M S 附加 B A 0 . 2 m g /
L
,
N A A 2 m g / L 诱导率最高 。 结果 (表 1) 表
明 : 愈伤组织在 M S + B A 0 . 2 m g / L + N A A Z
m g L/ 的培养基上生长 良好 。
2
.
2 不同基本培养基及 N A A 浓度对愈伤
组织生长的影 响 : 愈伤组 织同上 , 分别选用
M S
,
A G
一
7 , B
5 3 种基本培养基 , 并各以 B A
0
.
2 与 N A A 0 . 5 , 1 . 0 , 1 . 5 , 2 ` o 组成 4 种组
, Ad d r e s s : Z h a o D e x i u
,
I n s t i t u t e (〕门污o t a n y , C h 一n o s o A e a d e m y o f S e ie n e e 、 , B e ij i n g
心国家 自然科学基金和国家教委回国留学 人员掸优支持草金 资助项日唐定台研究员参加 部分工作
.
6 8 2
·