全 文 ：高效液相色谱法测定发酵虫草菌粉和金水宝
胶囊中腺昔的含量
江西国药厂 ( 南昌 3 3。。。 2)张敏如 半 洪 亮 郭 群
摘要 采用高效液相色谱法测定发醉虫草菌粉和金水宝胶囊中腺昔的含量 。 并探讨了采用超声 波
振荡法代替回流法提取腺普的可行性 。 方法简便 、 快速 , 回收率在 97 %以上 , 结果满意 。
关键词 金水宝胶囊 发酵虫草菌粉 腺并 高效液相色谱法
金水宝是我国实行 《新药审批办法 》 以后审批的一类新药 。 该品系采用青海产新鲜冬虫
夏草分离所得虫草菌— 蝙蝠蛾拟青霉 C s一 4菌株 , 经纯化 , 人工 发酵培养 , 加工 而 成的浅褐色粉末 。 其主要成分之 - -— 腺昔 , 是一种 内源性膘吟核昔 , 具有舒张血管 、 降低血压 、减慢心率 , 增加 c A M P 、 刺激肾上腺生成街体激素 、 抑制血小板聚集 、 松驰血管 平 滑 肌 、
镇静和抗惊厥等多种生理 活性 。 部颁标准 ( W s : 一 C l一 0 0 1一 90 , 1 989 . 12 ) 把腺营定 为 发酵
虫草菌粉和金水宝胶囊的含量测定项 目 。 部标法步骤繁杂 , 耗时过多 。 本文试用超声波振荡
提取 , 液相色谱分离 、 定量测定 , 结果较为满意 。
1 仪器与试剂
】 . 1 仪粼 : 岛津 L C 一 g A 液相色谱仪 , S P D 一 6 A V 紫外检测器 , C 一 R 4 A 色谱数据处理机 ,
C Q 一么50 超声波清洗僻 。
1
.
2 试剂 : 乙晴 ( H P L C淋洗 剂 ) , 乙醇 ( A R级 ) , 腺昔 ( 层析纯 ) , 二次蒸馏水 。
2 色谱条件
分析柱 : S h i m 一 P o e k C L C 一 O D S 小6m m 义 1 5 e m 5卜m ; 保护柱 : C L C G 一 O D S
小4m m 又 2 e m s件m 。 流动相 : 7% 乙睛水溶液 , 流速 : l m 一/ m i n 。 检测波长 : 2 6 o n m , 记录
灵敏度 : o . 12 8 A U F S 。
3 标准曲线绘制
分别配制浓度为含腺昔 87 . 。 、 6 : . 2 、 43 . 5 、 32 . 6 、 2 .1 7 、 l o . S G件g / m l的标准溶液及 空
白液 。 在上述色谱条件下 准确进样 5时 , 记录腺昔峰面积 ( 图 1 ) 。
以腺昔浓度对峰面积作图 , 其直线回归方程为 Y 二 2 2 3 7 . 邹 X 一 3 0 . 6 , 相关系数 ; 二
0
.
G 9 9 9
。
4 超声提取和 回流提取方法的比较
发酵虫草菌粉和金水宝 胶 囊 各 取一批
号 , 每批分别 准 确 称 取药 粉 4 份 , 每份约
。 . 59 , 置于 50 m l三角瓶中并准确加入 5。% 乙
醇 Z o m l , 其中一份按部标法回流提取 Z h ,
其它 3 份密塞后置超声波水 槽中分别超声提
取 x o 、 1 5 、 Z o m i n 。 上述提取 液 经 0 . 4 5协m
微孔 滤膜过 滤 , 在前述色谱条件下 准确进样
5时 , 测定腺营含量 。 测定结果见表 1 。
由表可 见超声提取 15 m in 以上 与回流提
取 Z h结果基 本一致 , 可认为二者 效果相同 。
一玉习匕
几 2
.
5 5 7
.
5 1 0
一 - - 一一一 ~ ”一一* A d d r e s s : Z h a n g M i n r u , J i a n g x i T r a d i t i o n a l C h i n e s e心中草药 》 1 9 9 4年第 2 5卷第 2期 图 1 腺曹标准色谱图M e d i e i n e F a e t o r y , N a n e h a n g . 7 7
表1
方法 (m i n )
回流 (1 2 )
超声提取 (下。 )
超声提取 (15 )
超声提取 ( 2。 )
回流 (1 0 )
超声提取 (1 0 )
超声提取 (15 )
超声提取 ( 2。 )
提取方法的比较
腺营含量 (卜g / g )R .S . D。 (% )
1 85 4 0
。
5 0
1 3 8 4 0
。
23
1 8 4 8 0
。
0 4
1 5 5 8 0
。
5 7
1吕7 3 0。 19
1 83 1 0
。
0 4
1 7 8 6 0
.
1 1
1 7 9 8 0
。
1 4
发酵虫菌草金粉水宝胶囊
5 回收率实验
称取同批号发酵虫 一草菌粉 3 份 , 每份准
确称量约 0 . 5 9 , 分别加入 5 0 0 、 8 0 0 、 1 0 0 0 一`g
腺昔及 20 m 1 50 % 乙醇 ; 另取同批号 金水宝
胶囊内容物 2 份 , 每份 准确称量约 0 . 59 , 分
别加入 8 0 0卜g及 10 0件g 腺 昔 及 Z o m l 5 0% 乙
醇 ,超声波提取 20 m i n ,按上述 方法测定腺背
量 (加入量折算成每克药粉加入标准量 )及回
收结果 。 测定结果发酵虫草菌粉平均回收率
为 9 7 . 6% ; 金水宝胶囊平均回收率 9 8 . 6% 。
6 样品测定
取本厂发酵虫草菌粉和金水宝胶囊各 3 批 ,
5 0% 乙醇 , 超声提取 20 m i n , 按同样方法测定 ,
每份札确称取菌粉约 0 . 59 , 准确加 入 20 m l
色谱图见图 2 , 测定结果见表 2 。
表 2 样品测定结果
匕 号 液相色谱法 R . S . D . ( % ) 部标法
9 3 0 1 0 0 1
9 3 0 3 0 0 6
试验小样
0
。
1 9 4%
0
。
18 4%
1
。
1 4 1%
l
。 0 1
1
。
5 5
] 。 2 0
0
。
18%
0
。
2 0%
0
。
12%
酵发虫菌草粉
9 3 0 40 42
9 3 0 4 0 4 5
9 3 0 42 5 4
o 。 5凌卜 g /粒
0
.
6 3 p g /粒
0
.
G7协g /粒
0
。
8 2
0
。
3 4
0
。
9 9
0
.
5 0协g /拉
o 。 6 3卜 g / 位
0
。
6 0卜g /粒
了 讨论
7
.
1 标准曲线近乎通过原 点 , 故实测样品
可用单标准外标法 。
7
.
2 本实验对照品腺背含量 系 采 用紫外分
光光度法测定 , 按吸收系数部颁标准方法计
算 , 含量为 98 % 。
7
.
3 采用超声提取法比回流方法提取简便 ,
快捷 , 可 免除 回 流 前 后称重 、 补足溶剂的
手续 。 实测样品可定超声提取 20 m i n 。
7
.
4 本 色讲 系统以腺昔峰计算 , 理论塔板数可达 4 2 0 ,
金水宝胶囊
图 2 样品色谱图
与有关物质的分离度为 2 . 7 。
( 19 9 3一 0 5一 x 3收稿 )
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