全 文 ：浓 度 进 行线 性 回 归 得 回 归 方 程 : A 一 34 9 8 0 0 C一
23 27 34
, r = 0
.
9 9 9 3
,懈皮素在 1 0 拌g /m L ~ 5 0 料g /m L
范围 内具有 良好的线性关系 。
2
.
4 精密 度试验 : 取 同一浓度对照 品溶液 , 在 上述
色 谱 条件 下 测 定 , 求 出 懈 皮 素 峰 面 积 , R S D ~
1
.
2 2 %
。
2
.
5 样 品测定 :取 杜仲叶粉约 2 9 ,精密称定 , 按样
品供试液的制备方法 进行提取 ,水解 ,照 上述色谱条
件 , 每次准确吸取供试 品液 20 拌L 注人液相 色谱仪 ,
平行测 定 3 次 , 得棚皮素的 峰 面积 , 由回 归方程计
算 , 结果见表 1 。
表 1 样品测定 结果
样品来源
陕西略阳
陕西略阳
陕西略阳
贵州遵义
批 号 杜仲叶粉中栅皮素含量
( “ g / g , n = 3 )
9 6 0 9 1 4
9 6 0 8 0 7
9 6 0 10 9
9 6 0 8 11
1 5 0
1 5 7
1 7 6
2 6 9
加 样 回收实验 :按样 品测 定方 法进行 测定 ,计
算 加 样 回 收率 , 结果 回 收率 为 9 7 . 4 3 % , R S D -
1
.
36% (
n = 6 )
。
3 讨论
3
.
1 懈皮素在杜仲叶中以懈皮素昔 的形式存在 ,所
以样 品须酸水解处理方能测定 , 水解是否 完全可用
薄层色谱鉴别得知 。
3
.
2 从样品测定结果看 , 由于两个 厂家生产 杜仲叶
粉的工艺条件不一 致 , 测 定结果懈皮素含 量相差 较
大 ,但同一厂家陕西生产 的杜仲叶粉 ,榭皮素含量较
均匀 , 且搬皮素在杜仲叶粉中不受存放时间与贮存
条件的影 响 , 比较稳定 。
致谢 : 中国杜仲 综合开发协会对 工作 的支持 。
参 考 文 献
1 周荣汉主编 . 中药资源学 . 北京 : 中国医药科技 出版社 ,
1 9 9 3
:
2 4 8
2 刘诗平 ,等 . 中草药 , 1 9 9 1 ; 2 2 ( 4 ) : 1 8 2
3 夏运岳 ,等 . 中草药 , 1 9 9 7 , 2 8 ( 4 ) : 2 0 7
( 1 9 9 8
一
1一 3 0 收稿 )
薄层扫描法测定化痪降脂茶主要有效成分的含量
天津中医学院 ( 3 0 0 1 9 3) 林翠英 张春喜 吴泽莲
临床实践证 明化癖降脂 茶对 血液有 降脂 、 降粘
作 用 , 可 预防心脑血管疾病 。 郁金 、 丹参是其 中的主
要组分 , 姜黄素 、 原儿茶醛分别是二者的 主要 有效成
分 。 为保证该茶 的有效 性 , 以此二 成分为指标 , 制定
了定性检识郁金 、 丹参 的薄层层 析法 。 在此基础 上 ,
又经实验研究建 立了用薄层扫描仪对原儿茶 醛测定
含量的方法 。
1 仪器与试剂
C S
一
9 3 0 薄层 扫 描 仪 ( 日本岛 津 ) ; 定 量 毛细 管
( D r u m m o n d 美 国 ) ; 硅胶 G F 25 ;板 ; 原 儿茶 醛 (市售 )
试剂 经重结 晶精制 (三种 展开剂 的薄层 色谱均为 一
个斑点 ) ;其它试 剂均为分析纯 。
2 实验条件
2
.
1 薄层 分离条件 : 为适应 定量 分析 , 改善原儿茶
醛与其 它斑点 的分离 度及 简化定 位方法 , 将原定性
分析 的条件 改 为用硅 胶 G F 二 ;板 , 展开剂 为苯 一 乙 酸
乙 酷一 甲酸 (4 . 5 : 9 . 5 : 1 ) , 饱和 2 0 m in , 展开 距离
1 2 。m , 在紫外分析仪 ( 2 5 4 n m )下定 位 。
2
.
2 薄层扫描条件 : 单波 长荧光锯齿 扫描 , 入一 2 8 0
《中草药》 1 99 8 年第 29 卷第 n 期
n m
,
S
x = 3
, 狭缝 1 . 2 5 m m 只 1 . 2 5m m , 扫描 速度 2 0
m m / m i n
, 灵敏 度 火 1 。
3 供试液制备
3
.
1 样 品液制备与定性分析 相同 。
3
.
2 对 照 品溶液制备 : 精密称取 原儿茶醛 对 照 品
4
.
8 8 m g
, 置 10 m L 容量瓶中 , 用乙醇 溶解 定容 , 摇
匀备用 。 浓度为 .0 4 8 8 m g / m L 。
4 稳定性考察
取原儿茶醛对照 品液一定 量点样 , 展 开定位后 ,
立 即测定并于室温下每隔 20 m in 扫描 一次 , 12 h 内
吸收峰面积积分值基本不变 。
5 实验方法可行性考察
5
.
1 线性关系 考察 : 精密 吸取对 照 品溶液 0 . 5 、 1 、
1
.
5
、
2
、
2
.
5
、
3 拜L 点在同一块硅 胶 G F 25`板上 , 展开 、
定位 、 扫描 ,将点样量与峰面积值经 线性 回归 处理 ,
得 回归方程 Y一 一 1 8 9 4 7+ 1 5 1 1 5X , r 一 0 . 9 9 8 2 ( n =
6)
。 说明在 0 . 24 拜g ~ 1 . 5 阳 范围内线性关系 良好 。
5
.
2 回收率试验 : 同法 制备 8 份样 品供试液 , 于同
一薄层板上各点 1 拜L , 其中 4 个斑点分别加点对照
·
7 4 5
-
品溶液 1 拜 L ,再另点 1 个对照 品液 1 拌L 斑 点 ,依法
展开 ,定位 , 扫描 测定 ,计算 回收率为 98 . 75 % , R S D
一 2 . 7 8 % ,说明本法 准确度较高 。
5
.
3 重现性考察 : 同一批样 品连续 测定 5 次 , 变异
系数 R S D 一 2 . 78 % ,说明样 品处理及 测定方法 重现
性好 。
6 样品分析结果
对 3 批丹参 原 料药材制备 的化癖降脂茶供试
液 , 以外标两点 法扫描 定量分析各 3 次 , 取平均值 ,
结果见表 1 。
7 讨论
7
.
1 定 量分析样品处理与定性 时的差别有 二 , 一是
用水 煮提 3 次 , 二是浓缩液酸化后加人适 量 N a CI 再
用 乙 醚萃取 4 次 , 以保证样品中原儿茶醛提取完全 .
裹 1 样品分析结果
批 号 1 2 3
平均含量 (% ) 0 . 4 3 0 . 64 0 . 1 2
7
.
2 从样 品分析结果可见 , 不同批次原料对有效成
分含量影响较大 ,应 首先对原料药材进行含量测定 ,
对有效成分含量不 同的原料药材适 当调 配混合后投
料 , 以保产品质量相对稳定 。
参 考 文 献
1 林翠英 , 等 . 中草药 , 1 9 9 5 ; 2 6 ( 1 2 ) : 65 6
2 杨树德 , 等 . 药学学报 , 1 9 8 1 ; 1 6 ( 7 ) : 5 3 0
3 竺叶青 ,等 . 中成药研究 , 19 8 4 ; ( 1 2 ) : 1 1
( 1 9 9 8
一
0 1
一
1 2 收稿 )
杜仲叶中黄酮类化合物的研究
华 中农业大学食 品科技系 (武汉 4 3。。 7 0) 叶 力 谢笔钧 胡慰望
杜仲是我国特产 。 近年来 , 杜仲树 已广泛栽培 。
为了开发 利用杜 仲叶 , 对其有效成分进行分析是 很
必要的 。 目前各 国科学工 作者的研究着重 于木脂素
类 、 环烯 醚掂类 、 苯丙 素类 、 菇类 、 多糖以及 杜仲胶等
有机 化合物 , 杜仲叶中黄酮 类化合物 的研究尚未见
报道 。 我们 通过 R P一 H P L C 法对杜 仲叶 中黄酮类 化
合物 的含量 及昔 元的种类进行 了研究 。
1 仪器 、 试剂和材料
杜仲叶采自华中农业大学校 园 , 千燥备 用 , 岛津
SI
J
C
一
6A H P L C 仪 , X 一型树脂 , 芦 丁标准 品购 自中国
药品生物制品检定所 ; 其它均为 A R 级试剂 。
2 实验方法与结果
2
.
1 杜仲叶中黄酮昔 元的 H P L C 分析法 : 取适量杜
仲叶加适量水浸提数次 , 过滤 , 合并滤液 , 上 X 一型树
脂柱 ,洗脱 , 浓缩 , 冷冻干燥得杜仲叶提取物 。 取适量
杜仲 叶提取物 , 用 35 m L 甲醇溶解 , 加 5 m L 25 % 盐
酸于 9 0 ℃水浴 水解 8 0 m in , 冷却 , 然 后用 甲醇定容
至 5 0 m L ,取 1 0 拌L 进样 。
色 谱 条件 : C L C 一O D S 色 谱柱 ( 1 5 0 m m 只 6 . 0
m m
,
C
l 。 ) , 流 动相 : 甲醇 一 0 . 4%磷酸水 ~ 58 : 42 , 流
速 : 1 . 0 m L / m i n , 检测波长 : 3 6 0 n m , 0 . 0 4 A U F S 。
结果如图 1 。 根据保 留时间定性 , 在杜仲叶提取
物水解液中检 测 出懈皮素 (1 号峰 )和茨菲醇 (2 号
峰 )两种昔元 。
。
7 4 6
。
2
.
2 杜仲 叶中黄酮昔 的 H P L C 分析 :取适量上述制
备的提取物 ,溶解进样 。
色谱条件 : Y W G 一 C , 。色谱柱 ( 1 0 拌m ) , 2 5 0 m m 又
4
.
6 m m
, 流动相 : 甲醇一 乙睛 一水 (3 O : 10 : 6 0) , 流速 :
1
.
0 m L / m i
n , 检测波长 3 3 0 n m ,灵敏度 o · 0 8 拌V 。
2
.
3 总 黄酮 含量 的测 定 : 如图 1 , 根据 峰面积 以芦
丁 标 样 为 基 准 计算 出 杜仲 叶 中 总 黄 酮 含 量 为
0
.
7 %
, 杜仲叶提取物中总黄酮总量为 6 . 64 % 。
2
.
4 杜仲叶黄酮糖昔 的分析 : 如 图 1 中 3 号 峰为
乃
`
(
“ ’ 一土一
A
一叶提取物水解后 B一芦丁 C 一杜仲提取物
D
一加芦 丁杜仲提取物
图 1 杜仲样品 H P L C 图
芦 丁标准峰 , 根据 H P L C 内标法确证杜 仲叶提取物
中未知 的懈皮素糖昔不是芦丁 。
3 讨论