全 文 ：碘化物 一罗丹明 一聚乙烯醇光度法测定
中成药中微量汞的研究
中国药科大学 南京 程光忻 ‘ 王莉华 倪冲仅 郑朝华 王 笑梅”
摘要 研究了在表面活性剂聚乙烯醇 存在下 , 硝酸介质中 , 汞与碘化物形成络阴离子后
与罗丹明 形成可溶性多元离子缔合物 , 在 处有最大吸收 , 。一 ’ 范围
内服从比耳定律 , 其表观摩尔系数为 护 , 桑德尔灵敏度 为 『 , 。 , 回收率为
一 , 。
关键词 汞 王 氏保赤丸 碘化物 一罗丹明 一聚乙烯醇光度法
中成药方剂 中 尤其在小儿用药中常见含有朱砂 。朱砂主含硫化汞 具清心镇静 , 安神解毒
之功效 。 按国际卫生组织及 国际食品和农业组织的规定 , 重金属汞属于有毒元素 , 每周允许摄
入量在 以下 , 所以有必要测定中成药中汞的含量 , 确保用药安全 厂’〕。
中成药成分复杂 , 测定干扰较多 , 通常采用的测定方法为原子吸收光谱法〔〕或用测汞仪测
定〔〕。 本文采用 ’ 一碘化物 一罗丹明 一 , 光度法对中成药王氏保赤丸进行汞总量测定及
可溶性汞含量测定的初步研究 〔‘〕。 处理后 , 在表面活性剂聚乙烯醇存在的硝酸介质中 , 与
碘化物形成络阴离子再与罗丹明 形成蓝紫色的可溶性多元离子缔合物 , 在 处有最大
吸收 , 终 范围内服从比耳定律 , 二 , 表观摩尔系数 。一 又 , 具有
灵敏度高 、 简便 、快速的特点 , 反应具有高的选择性和灵敏性 , 回收率为 。一 , 适
用于中成药中微量汞的测定 。
仪器与试药
日本岛津 型分光光度计 , 型分光光度计 上海第三分析仪器厂 。
试 药 汞标准液 将 置 量瓶 中并定容 , 溶液为 十
。 高用时稀释成 乒 。
碘化钾 一抗坏血酸溶液 精密称取 碘化钾 与 抗坏血酸 溶于水 , 定
容至 量瓶中 。
硝 酸 , , 聚乙烯 醇 罗丹明
硫酸 硝酸 高锰酸钾 写 盐酸轻胺
。
人工 胃液 取 盐酸 以水 稀释 至 , 即得 盐 酸 , 吸取 上述溶 液
加水稀释至 , 测其 值为 一 。
几种离子水溶液 只 一 , 只 一 一 一
’ 又 一 十 又 一 ’ 又 一 ’ 又 一 刁
一 义 一 ‘ 溶液 。
分析条件试验
, ! , !∀ #
∃ % % & 届毕业生
·
6 3 2
·
,1 绘制吸收曲线
2.1.1 H g Z九 I 一R h B 的吸收曲线 :精密吸取 H g ’+ 溶液 (相当于 2.50 9 )置 25 m l量瓶中 , 依次
加入 0.sm ol/L , H N o 3 1 . s m l , K l 溶液 2.sm l, 摇匀 , 静置 3m in ;再加 0.5 % P v A 2. Om l , 0 . 0 5 %
R h B 2
.
s m l
, 摇匀 , 定容后摇匀 , 放置 Zom sn ;以试剂空白为参比 , 用 lem 的吸收池在 u v ZIOO 型
分光光度计上从 52 0一70 0n m 进行扫描 , 得吸收曲线 , 如图中 I所示 。
2
.
1
.
2 1 一R h B 的吸收曲线 :操 作同 2:I 1 ,
但不加 H g ’+ 溶液 ;用稀释 25 倍上述溶液 , 以水
为参 比 , 得吸收曲线 。 见图中 l 。
2
.
1
.
3 H g
Z气R hB 的吸收曲线 :操作同 2. 1. 1 ,
但不加 K l溶液 , 以水为参 比 , 得吸收曲线 。 见
图中 l 。
2
.
1
.
4 R h B 的吸收曲线 :操作同 2. 1.3 , 但 不
加 H g Z+ 及 K l 溶液 , 以水为参 比 , 得吸收曲线 。
见图中 Iv 。 由图可知: l 、 皿 、 Iv 的吸收曲线基本
重合 , 少ma、 = 5 5 5 n m , 而 x (缔合物 )的 2。a、 =
5 9 5 n m
, 、*一 40nm , 故此用以测定 。
2
.
2 酸度的影响:操作同 2. 1. 1 , 仅改变H N o 3
560 600
波长 人 (n m )
图 l 显色体系的吸收光谱
工 :H g Z一 工一R hB 溶液(试剂 空日为参比 )
n : 工一R hB 溶液 (水为参 比 )
班 :H g Z + 一 R h B 溶液 (水为参 比 )
w :R hB 溶液(水为参比 )
的用量 , 以相应的试剂 空白为参比 , 用 Icm 吸收池在 721 型分光光度计 (以下均 用此仪器测
定 )于 5 95n m 处测其吸光度 。 实验结果表明 :酸度在 0. Olm ol /L 一0. 05 m ol /L 之间吸光度较稳
定 .即 1.sm l 0.sm o一/ L H N o 3 为宜 。
2
.
3 K l 用量影响 :操作同 2. 1. 1 , 仅改变 K l用量 , 以相应的试剂空 白为参比 , 于 59 5n m 处测
其 吸光度 。 实验结果表明 :K l 用量在 2.25 m l~ 2.75 m l 之间 A 值较稳定 , 为便于操作故选用
2.SOm l。
2
.
4 P V A 用量影响:操作同 2. 1. 1 , 仅改变 Pv A 121用量 , 以相应的试剂空白为参比 .于 595nm
处测其吸光度 。 实验结果表明 :P v A 」2 」用量在 1.0一 2.om l之间吸光度最大且较稳定 , 故选用
2.0:一: l 。
2
.
5 R h B 用量的影响 :操作同 2.1.1 , 仅改变 R hB 用量 , 于 595。m 处测其吸光度 。 实验结果表
明 :R h B 用量在 2. 35一 2 .SOm l之间吸光度最大且稳定 , 过高或过 低缔合物均不稳定 , 故选用
2. SOm l。
2
.
6 温度的影响 :操 作同 2. 1. }.溶液配 置完毕 后 .分别置于 15 C 、 Z O C 、 25 C 、 30 C 、 4 o C 、
5 0 C 水浴中恒温 1Om ln 后进行测定 。 实验结果表明 :温度对吸光度影响较大 , 在 15 一 25 C 之间
吸光度基本稳定 .高于 25 C 吸光度降低 , 且出现缔合物沉淀 。 如温度过高 .需加冰水降温 。
2
.
7 稳定性实验 :操作同 2. 1. 1 , 以试剂空白为参比 , 于 59 5nm 处测其不同时间点的吸光度 。
实验结果表明 :缔合物在 45m in 内稳定 , 4 5 m i n 后吸光度逐渐下降 。
2
.
8 共同离子 的影响 :操作同 2.!.1.加入常见干扰离子的量如表 , 以试剂空 白为参 比 , 于
59 5nm 处测吸光度 , 结果 见表 1。 实验结果表明 :保赤丸若含主要共存离子 , 除 caZ十影响较大
外 .其它对测定无干扰 , 因而毋需掩蔽排除 。
综上所述 , 该缔合物的测定最佳条件 , 酸度在 0.sm 。川L H N 0 3 1.51川 ;K l 2. sm l;0. 5 %
P v A 2.Om l;0.05夕石R h B 2.SOm l;室温 (25 C )以下静置 2(Jn:in 后进行测定 。
《中草药》19 9 5 年第 26 卷 第 12 期 · 6 3 3 ·
·9 标准曲线的绘制 :精密吸取标准汞液 (10、g / m l ) 0 . 1 , 0 . 2 , 0 . 3 , 0 . 4 , 0 . s m l , 分别置 25m l
量瓶中 , 依次加入 0.sm o一/ L H N o 3 1 . s m 一, K l 液 2.50m l , 摇匀 , 静置 3m in ;再加入 0.5 % p V A
2.0m l;0.05 % R hB 2.5 0m l, 摇匀后稀释至刻
度 , 摇匀 , 放置 20 m in ;以试剂 空白为参 比 , 用
Ic m 吸收池 , 在 595 n m 处进行测定 , 经直线 回
归 , 得 方 程 式 A = 0. 099 2C + 0. 0099 4 (r =
0.9996 ) , 在 。~ 5尽9 H g ’+ / 2 5 m l 浓度 范围 内
线性良好 , 且重现性亦好 。
2
.
10 络合比的测定 :本文采取等摩尔连续变
化法测定 H g ’+ 一 I 一R h B 体系的络合比 , 由实
验结果表 明 , R h B 与 H g ’+ 的络合 比为 2 : 1。
表 i 常见干扰离子对测定结果的影响
千扰 加人量
离子 (。g )
A
F e 3 +
A 13十
Z n Z +
M n Z +
C r 3 +
C a z +
5 0 0 0
5 0 0 0
5 0 0 0
5 0 0
5 0 0
1 0
5 5 0 0
对照
0.276
0.274
0 。 2 7 0
0
.
2 7 3
0
。
2 7 0
0
。
2 7 0
0
.
2 7 0
加 E D T A 不加 E D T A
不千扰
倍数
0.272
0.273
0.271
0.270
0 。 2 6 7
0
。
2 6 7
0
.
2 6 8
0
.
2 7 3
0
.
2 7 3
0
.
2 7 3
0
.
2 7 2
0
.
2 6 8
0
.
2 6 8
0
.
2 6 7
2 0 0 0
2 0 0 0
2 0 0 0
2 0 0
2 0 0
4
2 2 0 0
2
.
1 红外吸收光谱 :按实际方法(不加 P v A )制备缔合物晶体 , 将缔合物晶体与纯 R hB 分别
以 K B : 压片各自作红外吸收光谱 。 图谱表明 :1100c m 一 ’以上缔合物和染料的红外光谱完全一
致 , 反 映 了 R h B 十 阳离 子结 构 的特 征 ;15 9 0c m 一’吸 收峰说明苯 环 存在;R hB 的 碳基 峰 在
1690c m 一 ‘ , 由于形成缔合物后 , 碳基峰位移至 17 20c m 一 ’左右;R hB 在 800c m 一 ‘以下有吸收 , 但
形成缔合物后则 80 0c m 一 ’以下吸收峰减少 。 缔合物中仍保留了 R h B + 阳离子的结构特征 , 缔合
物的生成不影响染料结构 , 缔合物中阴阳离子籍离子键缔合 。
3 样品测定
3. 1 汞的总量测定
3. 1. 1 样品预处理 :王氏保赤丸 (南通中药厂):研成细粉 , 装瓶待用 。
取上述样 品约 0. 19 , 精密称定 , 置 10 m l锥形瓶 中 , 加 2. 09 K N 0 3 , I O m l 浓硫酸 , 浸泡过
夜 ;置于 12 0 C 沙浴 中消化至澄 清透 明 , 冷 却 , 加入 l% 硝酸 溶液 25 m l , 振摇 , 冷 却 , 过 滤至
10om l 量瓶中 , 以 一% H N o 3 2 5 m l 洗涤(分 4 次)漏斗和锥形瓶 , 合并滤液 , 放冷 , 加 5% K M n o ;
溶液至粉红色 (Zm in 不消失为度) , 再滴加 10 % 盐酸轻胺至红色消失 , 以水定容 。 精密吸取
2.5m l上述消化液至 50m l量瓶中 , 以水定容后摇匀 , 得供试品液 。
3
.
1
.
2 测定 :精密吸取供试品液 1.0 m l , 按标准曲线项下方法操作 , 以空白消化液作空白 , 测
定吸光度 、 计算含量 , 同时与药典法〔5〕进行比较 , 结果见表 2 。
实验结果表 明 :本法与药典法测定结果吻合并经过 t检验 , 两方法无显著差异 。
3 一 3 加样 回收率 :取 0.059 王 氏保赤丸 , 精称 , 加入 月. o 6 m g H g e 12(相当于 3· o m g H g Z + ) 。
按 3.1.1样品预处理方法消化及测 定 , 计算回收率 。 结果为 9 .9 写 , R s D 一 2 % 。
3
.
2 可溶性汞的含量测定〔6〕
3
.
2
.
1 样品预处理 :a)王氏保赤丸 :研成细粉 , 装瓶待用 。 b) 浸取与消化 :精密称取王氏保赤丸
细粉 0.39 , 置于 10 m l烧杯中 , 加 20 m l人工 胃液于 37 C 沙浴中浸取 4h , 每隔 15m in 平行旋摇
10 5 , 滤 出上清液于 10 m l锥形瓶中 , 残渣以人工 胃液 15m l洗 3 次 , 合并滤液 , 置于 160 C 沙浴
中蒸至体积为 5m l 时 , 加入浓 H Zso ; 5.om l , 1 . 0 9 K N o 3 于 12 0℃沙浴中消化至颜色透明;取
出放冷 .转移至 50 m l量瓶中 , 以水稀释至约为 4Om l 时 , 加 5% K M n o , 至呈粉红色 (2 m in 不消
失) , 再加 10 % 盐酸轻胺至恰好褪色 , 定容 , 待测 。
3
.
2
.
2 测定:吸取上述消化液 5.0m l于 25 m l 量瓶中 , 按标准曲线项下操作进行测定 , 结果见
表 3 。
·
6 3 4
·
表 2 本法与药典法测定保赤丸中汞总t 结果的比较
本 法
样品 川一95370:0(g)
计算量
(m g )
5.899
5.879
5.879
5.960
6.020
6.054
5.995
5。 9 5 6
6
.
0 5 4
5
.
9 7 6
5
.
8 5 9
5
.
9 5 6
6
.
0 0 0
6
.
0 2 0
6
.
1 8 1
6
.
1 0 1
5
.
9 6 0
6
。
0 0 0
含量 R So ( % )n一 6
计算量
(m g )
含量
(% )
R SD (% )n = 6
批号
0.4984 29.79 5.98
5.98 0. 7 0.4934
0.5012
29.38
30.20 :
.
: :
5.98 0.6
勺5UJ内b一卜h9 2 1 1 0 2
9 2 1 1 0 5
0
.
0 9 9 2
0
.
0 9 9 1
0
.
0 9 8 5
0
.
0 9 8 4
0
.
1 0 0 3
0
.
1 0 0 2
0
.
1 0 0 4
0
.
1 0 0 6
0
.
1 0 1 1
0
.
1 0 0 0
0
.
1 0 0 1
0
.
0 9 9 8
0
.
1 0 0 5
0
.
0 9 9 4
0
.
1 0 0 9
0
.
1 0 1 2
0
. 飞00 4
0 . 1 00 4
0 . 3 0 2
0 . 30 1
0 ‘ 3 0 1
0 3 0 5
0
.
3 0 8
0
.
3 1 0
0
.
3 0 7
0
.
3 0 5
0
.
3 1 0
0
.
3 0 6
0
。
3 0 0
0
.
3 0 5
0
.
3 0 7
0
.
3 0 8
0
.
3 1 6
0 3 1 2
0
.
3 0 5
0
.
3 0 7
5 9 7
.
9 2
。
9 9 5
.
9 4 0
.
8 5
.
9 5
S
C刁
9 2 1 1 0 4
5 。 9 8
5
.
8 5
5
.
9 8
5
。
9 8
0
.
4 9 8 6
0
.
4 9 8 7
0
.
5 0 1 6
2 9
.
5 8
2 9
.
7 9
2 9
.
7 9
5
.
9 3
5
.
9 7
5
.
9 4
6
.
0 1
口d,一勺J叮才nU1.LCO.…八bhs勺
表 3 可溶性汞含里测定的结果
编号批号 样品重(g )
测得汞量
(x 10一 49 )
R S D
( % )
9 2 1 1 0 2
9 2 1 1 0 5
1 0
.
2 9 9 6
2 0
. 3 0 0 3
3 0
. 2 9 9 3
4 0
.
2 9 9 3
5 0 . 2 9 9 4
6 0 . 2 9 9 9
1 0
. 3 0 0 2
2 0 . 3 0 1 1
3 0
. 3 0 0 8
4 0 . 3 0 0 1
5 0 . 3 0 0 4
6 0
.
2 9 9 8
0 . 3 5 8 9
0
.
3 4 9 8
0
. 3 5 1 9
0 . 3 6 5 0
0
. 3 5 7 9
0 . 3 5 2 9
0
.
3 5 8 9
0 . 3 5 4 9
0 . 3 5 8 9
0
.
3 5 2 9
0 . 3 4 7 8
0 . 3 4 6 8
0 ‘ 1 2 0
0
.
1 1 7
0
.
1 1 8
0
.
1 2 2
0
.
1 2 0
0
.
1 1 8
0
.
1 2 0
0
.
1 1 8
0
.
1 2 0
0
.
] 1 8
0
.
1 1 6
0
.
1 1 6
.
1 1 9
.
1 1 8
3
.
2
.
3 可溶性汞加样 回收率测定:吸取消化
液 2.sm l于 25 m l量瓶 中 , 加汞标准液 (相当
1.80 9 H g ’+ ) 按标准曲线项下方法操作 , 计算
回收率 。 测得结果 92 1102批 为 99.魂5 % (n 二
6 ) , R S D = 1 . 0 % ; 9 2 1 1 0 5 批 为 99 . 17 % (n =
6) , R S n = 1 . 0 % 。
4 讨论
4.1 本实验体系生成的缔合物为三元缔合物
H g (I , ) ’一 R hB 一 1 : 2 , 为使缔合物充分形成
且稳定 , 加硝酸及 P V A , 2 ; 后分别放置 3m in 及
20m in 。
4
.
2 H g
Z 十标准液放置时间太长浓度会降低 ·
故应临用配制 。
4
.
3 碘离子浓度对络合物的形成及其稳定性影响较大 , 因而须严格控制条件 。
4
.
4 本实验中 Pv A 124起增溶作用 , 若配制不当 , 会造成溶液浑浊 , 且吸光度下降。
4
.
5 本法是测微量汞 , 试剂 、仪器均要纯净 , 操作应严格遵循平行原则 。
参 考 文 献
l 田舍改 , 等 . 分析试验室 , 1 9 93 , 1 2 ( 4 ) : 81 5 中国药典 . 一部 . (1990 年版).47 8
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《中草药 》19 9 5 年第 26 卷第 12 期 · 6 3 5 ·
月e”长盆即a em 目仑昭is )
ShiYaqin , Z h a n g
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S e v e n e o n s t i t u e n t s w e r e i s o l a t e d fr o m t h e s t e m
a n d r o o t o f A 护冬“o lo e h 名口 t . bj l o 了 a D u n n
·
T h e y w
e r e i d
e n t i f i
e
d a s P a l m
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( I )
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a u r a n t i a m i d
e a e e t a t e
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( 0 r i s i n a l a r t i e l e o
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S t u d y o n t h e Q
u a l i t y S t a n d a r d o f S h i x i a n g z h i t o n g P i l l
X u R e n l i u , N i n g T o n g
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Y a n g fo r R e e u p e r a tio n , , ( D I C ) a s t h e m a i n i n s r e d i e n t w h i e h i n v i g o r a t e s Q i a n d p r o m o t e s b l o o d e i r e u l a t i o n . B u t i n e l i n i e s , d o 、-
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