全 文 ：第 Z t卷 第 1 期
1 9 9 0年 3 月
东 北 农 学 院 学 报
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2 1
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1 9 9 0
树 锦 鸡 儿 的 组 织 培 养
及 快 速 繁 殖
张尔荣 陈 峰
(东北农学院 植物教研室 ) (黑龙江省经济信 息中心 预 测处 )
T H E R A P I D P R O P A G A T IO N O N T I S S U E C U L T U R E
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C h G n F e n
( H e i l o n g ji a n g P r o v i n e e E e o n o m i e In f o r m a t i o n C e n t r e
,
F o r e e a s t i n g D e p a r t m e n t
,
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n a )
树锦鸡儿 ( C a r a g a n a a b o r g e e ) 在 生
产上以种子繁殖苗木 , 速度慢 , 后代长势参
差不齐 , 直接影响苗木产量和质量 。 扦插成
活率低 , 繁殖慢 , 苗木质量欠佳 ` ” , 利用组
织培养进行无性繁殖 , 速度快 , 质量好 , 短
期内可提供大量苗木 , 值得大力推广 。
1 材料与方法
春秋两季 , 将未发芽的树锦鸡儿枝条剪
下 , 在室内水插 。 一个月后发出较嫩的叶片
剪下 , 清水洗净 , 70 % 的乙醇消毒半分钟 ,
再用 0 . 2%升汞消毒 8 分钟 , 无菌水洗 4 ~ 5
次 , 滤纸吸干 。 在无菌条件下 , 将复叶上的
小叶切下 , 接种到 M S 基本培养基上 , 为产
生诱导愈伤组织 , 在 M S 基本培养基上分别
以。 . 2一 3二 g / L不同的配比加入 : 6一节基氨
基嘿岭 (6 一 B A ) 、 赤霉素 ( G A ) 、 茶 乙酸
( N A A )
、 激动素 ( K t ) 及 2 , 4一 D 等 。 外
植体接种后 , 培养于 25 士 1℃的培养 室内 ,
用 4 0 瓦 日光灯为光源 , 每 日光照 10 一 12 小
时 。
本文于 1 9 8 9一 0 2一 I G 收到
2 试验结果
2
.
1 愈伤组织的诱导
叶片外植 体 培 养 于含不 同组合激素的
第 1 期 张尔荣等 :树锦鸡 儿的组织培养及快 速繁殖
培养基上 , 6 天叶片普遍膨大 , 呈 凸凹不平 种类不同 , 所诱导产生的愈伤组织量及颜色
的肿胀状 , 并于外植体边缘或切 口 表 面 形 有显著差异 。 有的生长十分旺盛 , 呈浅绿色
成零星分布或连续成片的愈伤组织 。 依激素 (如表 1 中 3 号培养基 ) , 有的为黄 褐 色 ;
表 1 不同植物激素组合对树棉鸡 儿叶外植体愈伤组 织诱 导的影响
单位 : 毫克 /升 ( 、 g / L )
T a b l e 1 E f f e e t o f d i f f e r e n t h o r m o n e e o m b i n a t i o n o n e a l l u s i n d u e i n g o f l e a f l e t s
培养基号 * ` 二 接种外植体个数 愈伤组织诱导频率 培养时 间 * ,* , 。 ; 卜 , ` , 。组 , r 坐 7 处 理 巩下 r 八一侣 汁 ’ 从 心 脚 祖 砂 ” 哟下叭竿 小 , 卜 目” ’卜 ” 愈伤 组织生长状况
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m e d i u m T r e a t m e n t i n o e u l
a t e d i n d u e e d o f e u r t u r e G r o w i o g s t a t e o f e a ll u s
1 M S 3 0 0 3 0天
2 M S + 6 一 B A 3 + G A I . 5 3 0 0 0% 3 0天 黄褐色 , 愈伤 组织少
L
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M S + 6
一
B A Z + N A A O
.
2 3 0 1 0 0% 3。天 浅绿色愈伤组织 , 多松 散
M o r e 10 0 , e e a l l u s
,
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4 M S + K t Z + 2
.
4 一 D i 1 0 0% 3 。天 黄白色愈伤组织 , 多松 散
M o r e l o o s e e a l l u s
,
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M S + 6 一 B A 3 + 2 , 4 一 D Z 1 00 % 30 夭 褐色愈伤组织 , 多松散
M o r e l o o s e e a l lu s
,
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r o w n
M S + 6 一 B A 3 + 2 , 4 一 D Z
+ N A A O
.
4
1 0 0% 30 天 浅褐色 , 粒状愈伤 组织多
M o r e e a l l u s
,
l i gh t b r o 育 n ,
~
`— 一— _ _一 g r塑里里—_ _有的黄白色 、 浅褐色粒状 (如表 1 中 4 号 、 如表 2 。 培养 10 天后 ,观察愈伤组织在 4 种分5 号 、 6 号培养基 ) , 呈分散状 、 大 团 块 。 化培养基上分化结果如表 2 所示 : 1 号和 220 天后 , 外植体的扩大和愈伤组织的增殖趋 号分化培养基对愈伤组织的分化均有作用 ,于稳定 。 2 号培养基叶面积 的 扩 大 最 为明 但 1 号较 2 号分化速度慢 , 在 2 号分化培养显 , 几乎为接种时的几十倍 , 但愈伤组织数 基中加入生物素 , 提高了分化率 , 促进了芽目较少 。 3 , 4 , 5和 6 号培养基叶片外 植体 的分化 , 形成丛生芽 (如 图 2 ) 。 在 3 号 培则几乎愈伤组织化 , 原来的叶都被愈伤组织 养基中只生长愈伤组织 , 未见芽的分化 , 而包围起来 。 经继代培养 , 2 号培养基上的愈 在 4 号培养基中只 分化出少量芽 , 又未见长伤组织开始转绿 , 边缘出现小突起 , 解剖镜 大 , 这表明激动素 1一 Zm ; / l , 对树锦鸡儿叶观察 , 不是芽 , 继续培养 , 可从其边缘分化 愈伤组织分化没有明显作用 。出可辨识的小叶片 , 其内部 已经开始器官分 2 . 3 扩大繁殖率
化 , 其它组织的愈伤组织均无器宫的分化 。 愈伤组织在 M S + 6 一 B A I + N A A O . 2 十
2
.
2 愈伤组织的分化 生物素 矛的分化培养基上 , 通常 30 ~ 45 天 ,
把经过两次继代培养的愈伤组织 (表 1 一块愈伤组织可分化出 10 ~ 20 个芽 (据 20 瓶
中 2 号 ) 如图 1 , 将其切成。 . sc m 小块 ,接种 的调查 ) , 每瓶 3 块愈伤组织 , 以此 推 算 ,
到分化培养基上 , 4 种分化培养基激素组合 每年增殖率为 12 x 1 0 3~ 1 2 x l沪 。
96 东 北 农 学 院 学 报 第 2工卷
表 2 培养基中不 同物质对分化苗的影响
T ab l ef f E e et of d if f er en t h r o mn n o e o of f sp r in g sp l it t in g
培养基号
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转移愈伤组织个数
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分化愈伤组织个数
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分化频 率
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sp l it t in g
nó,曰n曰ù几ù,ù自心
M S + 6 一 B A 3 + G A Z + N A A O
.
2
M S + 6 一 B A I + N A A O
.
2 + 生 物素 5
M S + K t Z
+ N A A O
.
2
M S + K t l + N A A O
.
2
2 0 1 4 7 0%
2 0 18 9 0 ,石
5 %
图版 树锦鸡儿 的组织培养
P l a t e T i s s u e C u l t u r e o f C a r a g a n a a r b o r ,q e e
第 1期 张尔荣等 : .树锦鸡 儿的组织培养及快速繁殖 9 7
图版说明 : Ex pl a nat i o nf : oF i gr u e s
1一树锦鸡儿叶诱导产生 的愈伤组织 ,
C
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u s o
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f l
e t s i n d u e e d
,
3一树锦鸡 儿叶在分化培养基上形成 的试管苗 ,
T u b e
一 o f f s p r i n g o f Ie a f l e t s i n s p l￡t t i n g m e d i o m ,
2一愈伤组织 在分化培养基上产生的丛 生芽 ,
M u t t i b u d o f Ie a f l e t s i n d u o e d ,
4一试管苗栽入花盒成活生长的植株 。
V i g o r p la n t o f t o b e
一 o ff s p r i n g t r a n s p l a n t e d
.
将分化出的无根苗 (如图 3 ) , 转 入 大
量元素减半的 M S 附加 BI A l m g /L 、 蔗 糖
2 %的生根培养基中 , 10 天后开始生根 , 20 天
后可移栽至花盆中 (草碳土 : 园田土 l : 1) 。
保持适宜的温度和湿度 , 小苗移栽成活率在
9 0% 以上 , 移栽苗如图 4 。
参 考 文 献
1 陈正华 . 木本植物组织培养 及快速 繁殖 . 北京高等
教育 出版社 , 1 9 8 6
2 王怀智 . 无性林业与无性育 种 . 湖南林业 科 技 ,
1 9 8 3 ( 3 )
吴克贤 。 黄 波罗组织培养 的 研 究 , 林业 科 技 ,
1 98 2 ( 2 )
中泽庆久著 , 徐妙珍译 . 以组织培养 快速紧殖麻
栋苗木 . 国外林业 , 1 9 8 3 (3 )
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A m e r J B o t
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5 7 ( 6 ) : 9 0 4~ 9 0 ,
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