全 文 ：商陆属植物根有效成分含量比较
第二军医大学药学院 ( 上海 2 0 04 3 3 ) 张剑春 . 王 欢. 郑汉 巨
陈志强 易杨华 陈海生
摘要 采用 比色法测定并比较了国产4种商陆属尸 hy to la c c a 植物根中主要有效成分商 陆 总皂 试
和商陆多糖的含量 , 结果表明多药商陆尸 . P 。了y 翻 d ra B t a . 总皂试含量 最 高 , 达 6 . 24 % ; 多 糖
以商陆尸 . 。口、。 : 。 R o x b . 最高 , 达 1 0 . 57 % 。 本实验结果为开发本属植物资源提供了依据。
关键词 商陆 商陆皂试 商陆多糖 垂序商陆 浙江商陆 多药商陆
商陆为一味少常用传统中药 , 始载于 《神农本草经 》〔0 , 用于 治 疗 水 肿满胀 , 二便不
通 , 外治痈肿疮毒 。 据报道商陆的主要有效成分商陆皂贰〔2一 4〕和商陆多糖〔5 〕, 具有显著的抗
炎及免疫活性〔6一8 〕。 商陆属尸h y to lac ca 植物在中国 分 布 有 4一 5种 , 其 中 商 陆 尸 . ac ￡n os a
R ox b
. 和垂序商陆尸 . 。。。: 艺c 。。。 L . 为 19 9 0年版 《中国药典 》所收载 , 经作者调 查发 现 多药
商 陆尸 . 力ol y o n d r o B at . 和浙江商陆尸 .动 e]’沁 n g en : 沁 W . T . E a n 在产地由于种种原 因 均 不
同程度作为商陆入药 。 本文用比色法首次测定了这4种商陆属植物根中总皂贰 及 多 糖 的 含
量 , 回收率结果较好 。
1 仪器试剂
72 1型分光光度计 , 商陆皂贰甲对照品 ( 本院植化教研室易杨华副教授提供 ) ; 葡 萄 糖
标准品 ( 重庆市北磅试剂厂 ) ; 所用试剂均为A R 级 。
2 药材样品
样本来源见表 。 所有材料切制晒干后捣成粉末 , 过 40 目筛 , 于 60 ℃烘千 Zh , 置于千燥器
中备用 。
3 实验方法
3
.
1 商陆总皂贰的含量测定
3
.
1
.
1 标准曲线的制备 : 取商陆皂贰甲对照品 10 m g , 用甲醇溶 解 并 移至 10 m l容量瓶中 ,
稀释至刻度 。 取此液 0 . 1 、 0 . 2 、 。 . 3 、 。. 4 、 o . s m l , 分别置于带塞试管中并加水至溶液体 积
均为 o . s m l , 将试管置于冰水浴中 , 加。 . 5m 1 8 %香草醛 乙醇溶液 ( 用 前临配 ) 和 5m 1 7 %硫
酸〔取去离子水2 3m l , 然后加 7 7m l 9 5 % ( w / w ) 硫酸 , 混匀 , 冷却〕, 摇匀。 混合物 置 6 0℃
水浴中加热 1 0m i n , 然后立即在冰水浴中冷却 15m in , 取出效至室温 , 测得最 大 吸 收 波 长
久m a x = 45 o n m 。 以空 白为对照 , 测定各管的吸收度 , 求得标准曲线 :
A = 4 ; 0 16 又 1 0 一 3 + 3 . 0 9 8 、 C ( 件g / m l ) , r = 0
.
9 9 9 9 0 ( n = 5 )
。
3 . 1
.
2 样品的制备及含量测定 : 取样品2g , 用65 m l甲醇于索氏提取器中提取至无皂贰反 应
( 约 6 . 5 h ) , 回收甲醇 , 残渣用适量水溶解 , 过滤 , 滤液用等量正 丁 醇 ( 水 饱 和 ) 萃 取 3
次 , 合并萃取液 , 用少量水洗涤 2次 , 回收正丁醇 , 残渣用少量甲 醇 溶 解 , 过 滤 , 滤 液置
10 m l容量瓶中 , 用甲醇稀释至刻度 , 取出此液50 妇按上述对照品测定步骤测定 吸 收 度 , 根
据标准曲线求算含量 。
* A d d r e s s : Z h a n g J i a n c h u n , S e h o o l o f P h a r m a c y , S e e o n d 入I i l i t a r y M e d i e a l U n i v e r s i t y ,
S h a n g h ai 现在北京军事医学科学院六所
* . 现在 北京国防科工委医学研究所
1 2 6
样品总皂贰百分含量 ( % ) = C x 6 x ( 10 / 0 . 0 5 ) / ( Z x l 0 0 0 x l 0 0 0 ) x l o o %
二 0 . 0 6 x C
3
.
1
.
3 加样回收率 : 取提取后的样品残渣 2g , 精密加入总皂贰对照品2 0m g , 按样品测定步
骤测定吸收度 , 计算回收率 , 结果 回收率为9 7 . 2 2 % ( n = 3 ) 。
3
.
2 商陆多糖的含量测定
3 . 2 . 1 标准曲线的制备 : 取葡萄糖标准品0 . 29 , 水溶解并移至 l o o om l容量瓶中 , 稀释至 刻
度 , 取此液0 . 20 、 0 . 1 5 、 0 . 2 0 、 0 . 2 5 、 0 . 3 0 、 o . 3 5m l置带塞试管中 , 分别均加水至 2 m l 、 加
5 %苯酚 ( V / V ) l m l 、 浓硫酸 5m l , 振摇后放置 sm in , 再置沸水浴 中 15 m in , 冷 却至 室
温 , 以 空 白为对照 , 于波长 4 90 n m 测吸收度A , 作图 , 求得标准曲线 : A 二 3 . 3 2 5 又 1。一 3 +
0 . 0 3 4 1 、 C , r = 0 . 9 9 9 5 ( n = 6 )
。
3 . 2 . 2 样品制备及含量测定: 取样品2g , 用甲醇按总皂贰提取方法将皂贰提尽 , 残 渣加适
量蒸馏水回流提取 3次 , 每次 l h , 合并提取液并移至 l 0 0 0m l容量瓶中 , 用蒸馏水加至 刻度 。
精取此液0 . 2 m l按对照品测定步骤测定其吸收度 , 根据标准曲线求算含量 。
样品多糖百分含量 ( % ) = ( C 、 8 义 1 0 0 0 / 0 . 2 ) / ( 2 、 l 0 0 0 x l 0 0 0 ) x l o o % 二 2 ” C
3 . 2 . 3 加样回收率 : 取提取后的样品残渣2g , 精密加入商 陆多 糖 I ( P E P 一 I ) 及 H ( P E P -
1 ) 混合物 ( 1 : 1 ) : om g , 按样品测定步骤测定吸收度 , 计算回收率 , 结果平均 ( n 二 3 ) 为
10 0 . 6 5 %
。
4 结果与讨论
4 . 1 王祝举〔”〕报道用薄层扫描法测定垂序商陆中商陆毒素 ( 商陆 皂贰甲 ) 的含量 。 作者经
薄层层析实验发现 , 商陆和垂序商陆中皂贰甲在所含总皂贰中占较高比例 ; 而浙江商陆和多
药商陆中皂贰甲所占比例较低 , 因此若仅以贰皂 甲的含量来比较 4种商陆中总皂贰含量 显 然
不妥 。 本实验采用提取纯化后硫酸一香草醛比色法测定总皂贰含量 , 结果表明 , 本方法简单
易行 , 可暑性好 , 适用于绝大多数医院药局 , 可用于药材的质量控制 。
4 . 2 关于中药材中多糖含量的测定 , 一般多采用苯酚一浓硫酸比色法 。 李满飞 等 〔10 〕采用测
定换算因子来校正 以葡萄糖为标准品 , 苯酚一浓硫酸比色法测定的石解多糖含量 , 但没有解
决如何消除药材中可能存在的低聚糖对多糖含量测定的影响 。 一般药材中单糖含 量 往 往 较
高 , 对 测定结果影响较大 , 本实验采用甲醇提取以除去单糖 , 经薄层层析检查 , 无葡萄糖斑
点 。
4 . 3 王著禄等〔5〕从商陆中分离得到 2 种多糖 , 分别为P E P 一 I和 P E P 一1 1 , 均由半乳糖醛酸 、
半乳糖 、阿拉伯糖和 鼠李糖所组成 , 前者的摩尔比为 1 : 0 . 8 : 0 . 3 2 : 0 . 16 , 后 者为 1 : 0 . 07 :
。. 1 2 : 。 . 15 , 经计算 , 每个单糖的平均分子量与标准品葡萄糖的分子量 之 比分别为 1 . 0 13 和
1 . 04 1 , 考虑到本实验是作为4种商陆多糖的
含量 比较 , 故未作校正 。
4
.
4 4种商陆属植物根中总皂贰和多糖含量
见 表 。 实 验 结果表明 , 多药商陆总皂贰含
量较高 , 达 6 %左右 ; 而多糖含量则 以商陆
为最高 , 达 1 0 . 57 % , 这和其药材 粉 性大 ,
含淀粉多相符 。
裹 4 种商陆属植物根总皂俄及多辖的含且
样品 采集地点 采集
时间
总皂贰
含量 ( % )
多糖含
量 ( % )
商 陆
垂序商陆
浙江商陆
多药商陆
陕西旬邑县
本院 药圃
浙江临安县
四川平武县
1 9 9 1
。
9
1 9 9 2
。 2
1 9 9 1
.
7
1 9 9 2
。
8
2
。 6 1
2
。 1 6
;:
1 0
。
5 7
4 。 2 0
6 。 48
5 一 3 1
(下转第1 2 9 页)
《中草药 》 1 9 9d年第25 卷第 3期 12 7
用硫酸蕙酮试剂检查呈无糖反应为止 。 再将残渣用热水反复多次浸提 , 水浴温度80 ℃左右 ,
至热水 浸出液用硫酸葱酮试剂检查呈无糖反应为止 。 合并所有的热水浸提液 , 在 80 ℃ 水 浴
上真空浓缩至适当浓度 , 加 l %活性炭脱色 , 过滤 。 滤液定容配制成样品的待测分析液 。 采
用硫酸葱酮试剂比色法测定其多糖的含量 ( 以相当于葡萄糖的量表示 ) 川 。 使用 7 21 分 光光
度计 , 葡萄糖标准样品作对照测定标准曲线 。 同时测定样品的含水量 , 多糖的含量 以绝对千
物质计 。
美花石解D . lo d di g o s i R ol fe , 兜石解D . o P h 少1 “In 以同样的方法测定其多糖的含量 。
3 结果与讨论
3 . 1 铁皮石解多糖的理化性质 : 呈灰白色粉末 , 易溶于水 , 不溶于甲醇、 乙醇 、 丙酮 和 乙
酸 乙醋等有机溶剂 。 本品在水解前与裴休 ( F比 l in g ) 试剂呈负反应 , 水解后与裴林试剂呈
正反应 。 取本品 l %的水溶液微量 , 点于滤纸上 , 用高碘酸一希夫 ( Sc h i f f ) 试剂染色 呈 红
紫色斑点 。 红外光谱显示典型的多糖的特征吸收 。
3 . 2 铁皮石解多糖的单糖组分分析样品以 2 个不同的展开剂系统进行薄层层析均显 示 3 个
斑点 , 其R , 值分别同D 一木糖 、 L 一阿拉伯糖和D 一葡萄糖 的标准样品一致 。 高压液相 色 谱 分
析得到 3 个单糖组分的峰 , 在相同的色谱条件下 , 其保留时间分别同标准的D 一木糖 , L 一 阿拉
伯糖和 D 一葡萄糖一致 。 3 个单糖组分的相对百分含量分别为D 一木糖 工5 . 9 % , L 一阿 拉 伯 糖
29
. 4 % , D e葡萄糖 64 . 7 % 。
3 . 3 铁皮石解水溶性多糖的含量高达 2 . 7 % , 同时测定的其它2种石解属植物 的水 溶 性多
糖含量如下 : 美花石解 12 . 9 % , 兜石解 19 . 2 % 。 由此可见铁皮石解多糖的含量相 对 来 说 是
较高的 , 无怪乎铁皮石解长期以来被作为珍品 “霍山石解” 的原植物之一 。
3 . 4 从担子菌 、 地衣及高等陆生植物中发现一些多糖具有免疫增强作用〔10 〕。 我们的药理实
验也证实了铁皮石解多糖具有明显地增强机体免疫效应的功能 。
致谢 : 程式君副研究员为本项研 究鉴定和提供植物材杆 。
参 考 文 献
1 唐振绷 , 等 . 植物研究 , 拍8 4 , 14 : 141
2 5 以z u k i H , e t a l
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2345
《中草药 》1 9 9 4年第 25 卷第 3期
D e t e r m ; n a t io n o f t h e E f f e c t i v e Su b s t a n e e s i n R o o t s o f
C h i n e s e p o k e w e e d ( P h少t o l a e c J ) p , a n t s
Z h a n g J i a n c h u n , W a n g Y a n , Z h e n g H a n e h e n , e t a l
T o t a l e s e u l e n t o s i d e s a n d p o l y s a c c h a r i d e s a r e d e t e r m i n e d a n d e o m P a r e d
t o l a e e a
e e d i n
d e s ( 6
。
a e f ”o s a R o x b
。 , P 。 a 仍 e r i e a n a L 。 , P . P o l少 a ” d r a B a t . , P 。 之几e j ‘a ”夕e 月: f s
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.
t 0 O t S
。 f 尸八y ·
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2 4% )
.
R e s u l t s s h o w e d t h a t P . P o l夕 a n d r a B a t . h a s t h e 五i g h e s t c o n t e n t
E a n P r o d u -
e s c 一工l e n t o s i -
w h i l e P 。 a e f”o s e 1 5 m o s t r i e h i n P o l y s a e c h a r i d e s ( 1 0
. 5 7 % )
.
( o r i g i n a l a r t i e le p a g e 1 2 6 )
St u d i e s o n t h e An t i hy P o x l a a n d F r e e Ra d ; e a l Se a v e n g : n g
A。t i v i t y o f T a n g u t D r a g o n h e a d ( D r a e o c e 夕h a l “。 t a n g u t f c u 。 )
Y e Y u e o n g , C h e n Q i n m i n g
, C h a i F e n g l in g , e t a l
A q u e o u s e x t r a c t o f D r a e o e e P 孟a l “沉 才a ” g u t I’e u 爪 M a x i m . ( D t M ) , w h e n g i v e n 19 o r i P t o e x P e r -
i m e n t a l h y P o x i a m i c e , 功 a r k e d l y i n c r c a s e d t h e i r t o l e r a n e e t o n o r m o b a r i e a n d h y P o b a r i e h y P -
o x i a
.
E r y t h r o c y t e s u P e r o x i d e d i s m u t a s e ( S O D ) a c t i v i t y o f 功 i e e o r r a t s d e t e r m i n e d a t h i g h
a l t i t u d e ( a n i m a q u i n g m o u n t a i n 4 7 0 0 m a b o v e s e a l e v e l ) s h o w e d a n e l e v a t e d d i s m u t a t io n a e t ·
i v i t y o f P e r o 又 i d e a n i o n s 。 A t a n e x p e r i m e n t a l l y s im u l a t e d a l t i t u d e o f 6 0 0 0 m a b o v e s e a 一e v e l ,
d e t e r m u n a t i o n o f M D A , H b a n d H c t s h o w e d a n o b v i o u s r e d u c t i o n o f a l l t h e a b n o r m a l l y e l -
e v a t e d e r i t e r i a
.
I t 15 s u g g e s t e d t h a t t h e a n t i h y P o x i a a e t i v i t y o f D T M m a y 、 b e P a r t l y d u e t o
i t s f r e o r a d i e a l s c a v e n g i n g a e t i v i t y 。
( 0 r i g i n a l a r t i e l e o n P a g e 1 3 4 )
E f f e 。t s 。 f W I: i t e f lo w e r H O g f e n n e l ( P e “e e d a o u 。: P r a e r u 夕t o r “。 )
o n 15 0 !a t e d R a b b i t P u lm o n a r y ‘ A r t e r i e s
W e 1 M i n j i e , Z h a n g X i n h u a a n d Z h a o N a i e a i
Q i a n H u 15 t h e r o o t s o f P e : , e e d a 。。。 p r a e r o p t o r 。。!D u n n
.
T h e o b j e e t o f t h e p r e s e n t p a p e r
w a s t o d e t e r m i n e t h e e f f e c t s o f w a t e r e x t r a e t ( Q H
一 I ) a n d p e t r o l e u m e t h e r e x t r a e t ( Q H
一
M ) o f
Q i a n H u o n s m o o t h 功 u s e l e c o n t r a e t i l i t y o f i s o l a t e d r a b b i t p u l 功 o n a r y a r t e r y r i n g s . Q H 一 I
a n d Q H 一M a ” t a g o n i z e d p u l m o n a r y a r r e r y r i n g s e o n l r a e t i o n e l i e i t e d b y N E a s , e l l a s K C I
.
Q H 一 1 a n d Q H
一
M e a u s e d r e l a x a t i o n o f r a b b i t P u l 功 o n a r y a r t e r y r i n g s P r e e o n t r a e t e d w i t h N E
a 5 w e l l a s K C I 。 T h e e o n t r a e t i o n d o s e
一 r e s P o n s e e u r v e s o f P u l m c n a r y a r t e r y r i n g s w i t h N E w e -
r e s h i f t e d t o t h e r i g h t a n d t h e m a x im a l e o n t r a e t i o n r e s P o n s e w e r e i n h i b i t e d 7 3
. 1 士 8 . 0 ;石 a n d
魂3 。6 士‘。 2 % b y 1 . 6 x xo 一 ‘% a n d 5 . 0 大 1 0 一 〔男 , QH 一M , P D , : = 刁。7 3 士0 . 4 3 . T h e s e r e s u l t s i n d i e a t e t h a t
Q i a n H u 功 a y r e l a x P u l m o n a r y a r t e r y s 功 o o t h 口 u s e l e d i r e c t l y a s a C a Z + a n t a g o n i s t .
( 0 r i g i n a l a r t i e l e o n P a g e j 3 7 )
断《中草药 》1 9 9 4 年第25 卷第3期