全 文 ：提取方法对抗病毒 工号有效成分的影响
北京友谊医院药剂科 (10 0 0 6 (, )
中国药品生物制品检定所
郝淑清 朱
曹铁军
摘 要 设计 了不同提取时 间 、 不同组 合以 及合煎 与分煎等制备方法 . 井以测 定制剂中君药大黄
中葱酿的含量衡量方法优劣 . 确定 合理的工艺 。
关键词 病毒 I 号 提取方法 葱醒 含量侧定
抗病毒 I 号在我院儿科临床应用已十多
年 . 本方有泻下攻积 、 滋阴降火 、 解毒散结之
功效 , 用于肠道积滞 、 大便秘结 、 高热不退效
果很好 。 但疗效不够稳定 . 为确保疗效 ,改进
工艺方法 , 我们设计 了不同提取时间 ,不同组
合以 及合煎 与分煎等制备 一方法 ,并以测定制
剂中君药大黄中葱醒的含量为衡觉制剂方法
优劣的指标 , 最后确定 一 个合理的工艺流程 。
1 仪器 、 药品及试剂
双波长薄 层扫 描仪 ( 岛津 C S 一 9 10 型 ) ,
高效薄层板 : 硅胶 H (青岛海洋化工厂 ) , 定量
毛细管 ( D r 、 , m m o n d s 。 i e o I J SA ) 。 试剂均为
分析纯 。 标准品为中国药品生物制品检定所
提供 ;制剂由北京友谊医院制剂中心制备 , 大
黄为市售品 。
2 实验方法
2
.
1 制剂工 艺方法 : a ) 玄参 3馆 、 甘草 2 09 、
芒硝 3 0 9 、 生地 3鲍 煮提 2 次 ,每次 hl ; 大黄
30 9
, 侵泡 。 . s h , 一再煮提 2 次 , 每次 l o m in , 合
并滤液 , 总纸为 1 7 Om l 。
b )大黄与 4 味药同煮 2 次 ` 侮次 hl , 煎
液总量为 1 70 m l
C )大黄浸泡 1 . ( )h ,其它同 a 项 。
d )大黄浸泡 2 . 01 : ,其它同 a 项 。
e )取 a 液 7o rn l , 加等量 9 5今石乙醇沉淀 ,
滤过 ,得滤液 拍 o m l 备用 。
f )取 b 液 6 o m l , 加等量 9 5% 乙醇沉淀 ,
滤过 ,得滤液 s o m l 备用 。
g )生地 3 09 煎煮 2 次 ,每次 l h : 大黄 3 0 9
浸泡 0 . s h ,煎 2 次 . 每次 1 5m in , 煎液总量为
I OOm l
。
l、 ) 玄参 3 0 9 ,大黄 3 0 9 ,操作同 g 。
i )甘草 2 0 9 ,大黄 3 09 ,操作同 g 。
j) 芒硝 3 09 .大黄 3 09 ,操作同 g 。
k )大 黄 3 09 , 浸泡 。 · 5 }。 , 煎 煮 2 次 , 皆
1
.
o h
,煎液总量为 I O0 m l 。
2 生药及制剂中葱酮的分离及含量制定 (何
丽一 ,等 . 药学学报 , 1 98 0 , 1 5 : 5 5 5)
2
·
l 标准品溶液的配制 : 精密称取大黄酸 、
芦荟大黄素 、 大黄素 、 大黄酚 、 大黄素 甲醚等
五种葱醒贰之一定量溶于 甲醇溶液 (加入少
斌敏仿助溶 ) .使浓度为 0 . 4一 0 . 51 9 /m l 。
2
.
2 提取
.2 .2 1 总葱醒的提取 : 生药的总葱酿提取 :
精 密称取大黄 1 0 m g 于 S Oml 具塞三 角瓶
中 ,加入 2 0m l 甲醇冷浸 1 2h , 滤取甲醇备用 。
精密吸取甲醇溶液 Zm l 于 Z om l 具塞试
管中 于水浴上蒸干 甲醇 , 加 1 . s m l 蒸馏水溶
解残渣 , 加 40 %三氯化铁溶液 0 . s ml . 于水浴
中加热 20 m in 再加 入浓盐酸 0 . 2m l , :于沸水
浴中加热水解 ,并不断振摇 30 m in 后立即用
流水冷却 . 加 乙醚 l o m l , 盖塞振摇 3m i n ,精
密量取 s m l 乙醚液于 10 m l 具塞试管中于水
浴蒸干 , 加 l m l 甲醇溶解残渣 。
制剂的总蕙醒提取 : 精密量取 1 . s ml 制
齐d溶液于 ZOm l 具塞试管中 , 按生药总蕙醒
提取方法提取 。
.2 .2 2 游离蕙醒的提取 : 生药的游离葱醒提
,
A d d
r e s s :
H
a o S h u q in g
,
L a b o r a t o r y o f P l
、 a r m a e e u t ie s , I女 i j in g F r ie n d s h里p H o s p it a l , B e i一in g
·
4 6 8
·
取: 精密量取生药甲醇提取液2 m l于具塞试
管中 , 蒸干 甲醇 ,残渣中加入蒸馏 水 2m l , 乙
醚 z om l , 盖塞振摇 3m i n ,量取上层醚液 s m l
于 l o m l 具塞试管中 , 蒸干 乙醚加 l m l 甲醇
溶解残渣 。
制剂的游离蕙醒提取 : 精密量取 1 . 5m l
样品溶液于 Z om l 具塞试管 中 , 加入 10 m l 乙
醚盖塞振摇 3m in ,量取上层醚液 5m l 于具塞
试管中 ,挥干乙醚 ,加入 l m l 甲醇溶解残渣 。
2
.
3 薄层分离 : 将标准溶液及制剂溶液的甲
醇溶液分别点于 0 . 5% C M C 的硅胶 H 薄层
板 上 , 用石油醚 ( 3 o C 一 6 0 C 卜甲酸 乙酷一甲
酸 ( 1 5 : 5 : 1) 的上层溶液为展开剂展开 。
2
.
4 含 量测 定 : 测 定条件 : 测 定波 长 住s )
4 2 o n m
, 参 比波长 (入; ) 6 5 o n m , 反射法直线扫
描 。 用光密度计法分别测定制剂中每个贰元
的斑点面积分值 , 用随行标准曲线法计算相
当贰元的量 , 即可按下式计算制剂中各贰元
的含量 。
表 1 大黄冷浸不同时间葱醒衍生物含 t 测定结果
::
总葱醒 提取率 游离葱醒 提取率 结合蕙酿 提取率
( g / 1 0 0 9 ) ( % ) ( g / 10 0 9 ) (% ) ( g /一0 09 ) (% )
0
.
5 5 8 7 14
.
8 7 0
.
2 6 6 7 1 0 5 1 0
.
2 9 2 0 23 9 7
0
.
5 3 9 3 14
.
3 5 0
.
3 80 0 1 4
.
9 7 0
.
1 5 6 3 12
.
8 1
0
.
4 7 1 0 1 2
.
5 3 0
.
2 7 8 3 10
.
9 7 0
.
1 9 2 7 15
.
7 9
表 2 大黄与其它药分煎与合煎葱醒
衍生物含盘测定结果
总葱醒 提取率 游离葱醒 提取率 结合蕙酿 提取率
( g八。 0 9 ) ( % ) ( g八。 09 ) ( % ) ( g / 20 0 9 ) ( % )
::
0
.
55 8 7
0
.
66 8 7 {: :;
0
.
2 6 6 7
0
.
3 6 2 7
10
.
5 1
14 2 9
0
.
2 92
0
.
30 6
2 3
,
9 3
2 5
.
0 7
表 3
总惠醒
( g / 1 00 9 )
酒沉与非酒沉葱酿衍生物含量测定结果
提取率 游离葱醒 提取率 结合蕙醒 、 提取率
( % ) ( 只 / 10 0只 ) ( % ) ( R / 10 0只 ) ( % )
ù.145a ) 0 . 55 8 7 1 4 . 8 7b ) 0 . 6 68 7 1 7 . 7 9
e ) 0
.
70 3 0 ] 8
.
2 1
f ) 0
.
8 53 3 2 2
.
7 1
0
.
2 6 6 7
0
.
3 6 2 7
0
.
4 7 7 0
0
.
6 7 7 0
10
.
5 1
14
.
2 9
王8 . 8 0
2 6
.
6 8
0
.
2 9 2
0
.
3 0 6
0
.
2 2 6 0
0
.
] 7 6 3
。 的含 、 % 一髯黯黔蕊 x `“ 。
表 4 大黄单煎与其中一味药合煎蕙醒含 t
测定结果
3 结果及讨论
实验结果表明 : 表 1 以大黄冷浸 0 . s h 总
蕙醒提取率高 ; 表 2 大黄与其它 4 味药合煎
总、葱醒提取率高 ,说 明复方制剂 中与其它 4
种成分共 同合煎可促进大黄葱醒的溶出 ,表
3 酒沉不仅使制剂沉淀减少 、 改善外观 ,并可
使药液中大黄蕙醒含量在单位体积中提高 ;
表 4 抗病毒 I 号中其它 4 味药与大黄配对煎
煮 , 说明大黄葱醒的含员与大黄单煎近似 。
总葱醒 提取率 游离葱醒 提取率结合葱酿 璐 提取率
( g八 0 0 9 ) (乡石) ( g / 1 00 9 ) ( % ) ( g / 1 0 09 ) (% )
g ) 0
·
3 4 5 0 9
·
18 0
·
1 55 0 6
·
1 1 0
.
1 9 0 0 13
·
11
h ) 0
.
2 6 7 0 7
.
1 1 0
.
20 5 7 吕 . 10 0 . 0 6 13 5 . 0 2
i ) 0
.
3 1 4 3 8
.
3 6 0
.
1 1 90 4
甲
6 9 0
.
19 5 3 16
.
0 0
j ) 0
.
3 6 6 0 9
.
7 4 0
.
2 84 7 1 1
.
22 0
.
0 8 1 3 6
·
6 6
k ) 0
.
3 9 1 0 10
.
4 0 0
.
2 68 7 1 0
.
5 0 0
.
1 2 2 3 10
.
0 2
, 结合蕙醒% 一总葱醒% 一游离蕙限%
通过实验可考虑将大黄冷浸半小时后与
群药合煎 , 并以酒沉为本制剂的工艺方法较
为合理 。 ( 1 9 9 5一。 9 一 2 1 收稿 )
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` 中草药 少1明 6 年第 27 卷第 吕期 · ,1 6 9 .