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葫芦科蔬菜花药培养研究进展



全 文 :中 国 瓜 菜2009 (1): 32-35 专题综述
收稿日期: 2008-10-20。
基金项目: 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 0815008-1-3);广西农科院科技发展基金项目[2006007(Z)];广西农科院基本科研
专项[200827(基)]。
作者简介: 周林,男,在读硕士研究生,从事西、甜瓜育种研究。 电话:13481032624; 电子信箱: jvkuang@163.com。
通讯作者: 李文信,男,研究员,从事西、甜瓜育种研究。 电话: 0771-3243945; 电子信箱: nkyqsh@163.com。
葫芦科蔬菜花药培养研究进展
周 林 1,2,3,韩金星 1,2,3,黄金艳 2,3,覃斯华 2,
李文信 2,洪日新 2,何 毅 2,李天艳 2,樊学军 2
(1. 广西大学农学院 南宁 530005; 2. 广西农业科学院园艺研究所 南宁 530007;
3. 广西作物遗传改良重点实验室 南宁 530007)
摘 要: 概述了当前国内外葫芦科蔬菜花药培养过程中的主要影响因素,总结了单倍体植株的倍性鉴定方法与
染色体加倍技术,探讨了目前存在的问题以及今后的发展方向。
关键词: 葫芦科蔬菜; 花药培养; 单倍体; 倍性鉴定; 加倍
Research progress of anther culture in Cucurbitaceae vegetables
ZHOU Lin1,2,3, HAN Jin-xing1,2,3, HUANG Jin-yan2,3, QIN Si-hua2, LI Wen-xin2, HONG Ri-xin2, HE
Yi2, LI Tian-yan2, FAN Xue-jun2
(1. College of Agriculture, Guangxi University, Nanning, 530005, China; 2. Horticulture Research Institute of Guangxi Academy of
Agricultural Sciences, Nanning, Guangxi, 530007, China; 3. Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Lab, Nanning,
Guangxi, 530007, China)
Abstract: This article reviews the main factors to anther culture of cucurbit vegetables. The method of ploidy determination
and technique of chromosome doubling are summarized. The problems and aspects of future research are also discussed.
Key words: Cucurbitaceae Vegetable; Anther Culture; Haploid; Ploidy determination; Chromosome Doubling
葫芦科 (Cucurbitaceae)蔬菜在我国常见的主要包括西
瓜、甜瓜、苦瓜、黄瓜、西葫芦等,栽培面积大,且具有较高的
经济效益,在百姓日常生活中具有重要作用 [1]。 但由于我国地
域辽阔,气候因素和地理环境因素等生态因子限制了优良品
种优良特性的发挥,通过简单的引种已经不能适应各地生产
的需要 [2]。 而通过常规育种手段进行品种改良又存在周期比
较长、难度大、遗传性状不稳定等诸多问题,因此利用生物技
术手段育种则是另一条重要途径 [3]。 葫芦科蔬菜的花药培养
技术不仅能够缩短育种过程中选择及纯化的时间,而且对遗
传育种具有重要的理论和实际意义 [4]。
利用葫芦科蔬菜花药培养的历史可追溯到 1971 年西贞
夫等对黄瓜花药培养进行的研究,他们获得了不定芽[5]。 在随
后的几十年里,研究者们在葫芦科蔬菜 9 个属中的南瓜属、葫
芦属、西瓜属、甜瓜属和苦瓜属等 5 个属获得了单倍体[6]。
1 影响葫芦科蔬菜花药培养的主要因

影响花药培养的因素很多,涉及到供体植株的基因型、小
孢子发育时期等内部因素和培养基成分、激素、碳源以及培
养条件等外部因素,并且这些因素之间还存在着一定的互作
效应。
1.1 材料
1.1.1 基因型 材料基因型对花药培养的影响主要表现
在对胚状体诱导率的不同上,即使在同一种内,同一方法、不
同材料间有显著的差别。 在葫芦科蔬菜中,研究者就此对西
瓜、甜瓜、黄瓜等进行了不同程度的研究,其中以西瓜花药培
养技术较为成功,前人研究较多,认为不同品种基因型之间
愈伤组织诱导率相差很大,选择适合诱导品种是培养成功的
关键 [7-10]。 在李娟等 [11]的试验中发现,野生品种和栽培品种的
愈伤组织诱导率有显著差别,前者要高于后者。 另有研究表
明,F1代在花药培养中的愈伤组织产量高于或至少等于其高
产量亲本,有个别组合的 F1代愈伤组织产量甚至成倍地高于
其高产量亲本,表现杂种优势[12]。 在缑艳霞[13]的西瓜花药培养
试验和董艳荣[14]的甜瓜花药培养试验中对此也进行了证明。
1.1.2 小孢子发育时期 小孢子细胞发育时期一般分
为四分体时期、小孢子时期(单核早期、单核中期、单核靠边
期、双核期)和成熟花粉粒时期 [4]。 不同植物花药培养最适宜
的小孢子发育时期不同,而最适发育时期是影响诱导效果的
关键。 有研究表明,南瓜小孢子单核中期和单核晚期效果较
好,接种在 MS+15%蔗糖+5 mg/L 2,4-D的培养基上能够诱导
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周林等: 葫芦科蔬菜花药培养研究进展
出具分化能力的愈伤组织 [15]。 另有文献指出,甜瓜花药培养
最佳时期是单核靠边期到双核期,黄瓜以单核中后期的小孢
子为佳[16]。 总体来说,大部分集中在小孢子时期,即单核早期
到双核期,通常以外部形态指标如花瓣长/花药长或花蕾长度
作为此期的标准[17]。
1.2 培养基成分
1.2.1 基本培养基 花药培养常用培养基有 MS、Nitsch、
White 和 N6 等,培养基的成分、种类、浓度不同,都会影响花
药培养的效果,以 MS 培养基的使用最为普遍。 薛光荣 [7]、袁
万良 [10]、魏瑛 [18]等在西瓜花药培养中都用 MS 作为基本培养
基,且效果较好。 陈佳[19]在苦瓜花药培养中比较了 MS、N6、B5 3
种基本培养基,发现 B5培养基不适合苦瓜花药愈伤组织的诱
导。
1.2.2 碳源 糖是培养基内的碳源,起到为细胞的呼吸代
谢提供底物与能源和调节渗透压的作用,糖的类型和浓度影
响着胚胎形成。 蔗糖作为众多碳源类型中在葫芦科花药培养
使用较多且效果较好的碳源,适宜浓度为 3%~6%。 蔗糖经高
压灭菌后分解为果糖和葡萄糖, 因此也常作为碳源另外添
加。 麦芽糖等其他碳源已用于小麦作物的花药培养中,但在
葫芦科蔬菜花药培养上应用还不多,陈佳 [19]在苦瓜花药培养
中对培养基添加麦芽糖进行了试验,认为其所诱导出的愈伤
组织胚性高低需进一步研究。
1.2.3 激素 激素对花药培养中诱导花药胚状体的发生
起到了关键作用,主要包括了生长素和细胞分裂素,前者常
用的包括 2,4-D,IAA,NAA 等,后者常用的包括 KT 和 6-BA
等。 一般来说,低质量浓度的生长素可以提高胚状体的诱导
率,其中 2,4-D 在西瓜愈伤组织诱导过程中不宜超过 0.5
mg/L,否则易产生没有分化能力的疏松愈伤组织;而低质量
浓度 2,4-D(0.4 mg/L)可以使甜瓜花药愈伤组织内部产生细
胞核较大的胚性细胞、二细胞团和多细胞结构 [20]。 同时,6-BA
与生长素的配合使用也起到了关键作用。 对愈伤组织和胚状
体的分化,6-BA 也起到了重要的作用,配合适当质量浓度的
IAA 可分化出小植株。
1.2.4 其他添加成分 活性炭(AC)常被作为防止褐化
的抗氧化剂物质添加到花药培养基中,在有关辣椒花药培养
中,有试验表明添加 0.5% 的活性炭是有益的 [21],而在葫芦科
蔬菜上,喻财铃 [22]和缑艳霞 [13]分别在丝瓜和西瓜的试验中发
现加入活性炭的效果差,有抑制作用。
大多数研究认为,硝酸银作为乙烯抑制剂,在组织及细
胞培养中能够促进胚性愈伤组织的形成;也有人认为它能促
进多胺的合成以提高胚性愈伤组织的形成,进而提高愈伤组
织分化频率。 在小麦花药愈伤组织分化培养基中加入硝酸银
有利于提高愈伤组织分化率和绿苗率,可提高小麦花药培养
效率 [23]。 在葫芦科蔬菜的花药培养中应用硝酸银少见报道,
曹利仙等 [24]发现黄瓜离体子叶培养中添加 2~6 mg/L 硝酸银
能显著提高子叶芽的再生频率,韩丽华 [25]将硝酸银应用于厚
皮甜瓜未受精胚珠的离体培养上,发现对诱导单倍体再生植
株有一定的作用。
三十烷醇作为外源添加剂最先在袁万良等 [10]报道的西瓜
花药培养中使用,发现可以提高绿色愈伤组织的诱导率,并形
成深绿色点状组织,提高了再生植株的诱导率。 随后在李娟
等 [11]的西瓜花药培养试验研究中也发现三十烷醇有此作用,
但在缑艳霞 [13]和王开冻等 [26]的西瓜花药培养试验研究中发现
三十烷醇只对诱导和保持绿色愈伤组织有利,对促进不定芽
形成作用不明显。 而三十烷醇在其他葫芦科蔬菜上的应用尚
未见报道。
1.3 培养方法
1.3.1 预处理 花药或花粉经过预处理后再进行培养是
花药培养中比较常见的培养方法,其中包括低温、高温、热激
以及离心。 大部分葫芦科蔬菜花药培养采用低温对花药进行
预处理,其作用是:第 1,引起花药内源激素发生变化,进而影
响愈伤组织的形成;第 2,引起小孢子的孤立化,使花药壁细
胞和绒毡层在低温预处理过程中退化解体;第 3,减缓小孢子
退化,保持生活力,使更多的小孢子有机会参与雄核发育 [27]。
魏瑛 [18]的研究表明西瓜花药在 4 ℃ 下低温处理 72 h 效果较
佳;Ashok Kumar 等[28]将黄瓜花蕾在 4、32℃ 下分别处理 1~10
d、1 d,结果表明在 4℃ 下处理 2 d 的效果最佳。
1.3.2 培养温度及光照 花药培养中,培养温度和光照
对愈伤组织或胚状体的形成以及促进其生长都有重要作用。
大部分葫芦科蔬菜花药培养的温度为 25~28 ℃,在西瓜花药
培养中,缑艳霞 [13]尝试了将花药在 30 ℃ 下高温预处理 72 h
后置于 25℃ 低温下,发现也能提高愈伤组织的诱导率。先黑
暗培养后光照培养,也能促进优良愈伤组织的诱导,这在甜
瓜、丝瓜上都得到了验证 [14,22]。
2 葫芦科蔬菜单倍体倍性鉴定及加倍
技术
通过花药培养途径再生的植株,往往会受到花药壁、绒毡
层组织等的影响产生单倍体、二倍体及其他倍性植株的混合
群体。 因此,有效的倍性鉴定是了解其遗传背景和进一步应
用的基础。 目前的倍性鉴定方法主要有直接鉴定法和间接鉴
定法。
2.1 直接鉴定法
直接鉴定法即染色体计数方法,这是确定倍性最基本和
最精确的方法,传统采用根尖、卷须、叶片愈伤组织为材料,
常采用压片法和去壁低渗法进行染色体标本制备。 其中压片
法先在对二氯甲苯或 8-羟基喹啉水溶液预处理,使中期染色
体缩短,再用卡诺固定液固定 1~2 h,最后以醋酸洋红或铁矾
苏木精作为染色剂,观察细胞中期染色体并计数。 在鉴定单
倍体根尖细胞染色体数目时,由于单倍体植株根尖具有二倍
化的倾向,也就是细胞中染色体组可能自然加倍,因此仅进
行根尖分析,还不能为植物的染色体提供可靠的证据,应辅
助根尖以外的细胞如嫩叶细胞、花粉母细胞等的染色体观察
也是必要的,这样可以排除嵌合体的干扰。 去壁低渗法是陈
瑞阳 [29]在国内首创的染色体标本制备方法,该方法既可用于
染色体计数,还可用于染色体组型分析 Gimsa 分带等研究,并
专题综述 中 国 瓜 菜
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周林等: 葫芦科蔬菜花药培养研究进展
可借助扫描电镜对植物染色体进行观察。
2.2 间接鉴定法
间接鉴定法主要包括外部形态指标鉴定、叶片气孔保卫
细胞数目鉴定以及流式细胞仪鉴定法。 杜胜利等 [30]通过研究
比较黄瓜辐射花粉授粉产生的再生植株中的二倍体和单倍
体,发现单倍体植株较之二倍体植株具有叶片小、花瓣裂片
深、长势弱等特点,且不能正常结籽,雄花败育,雌雄花花冠
明显深裂,可以作为区分黄瓜单倍体和二倍体植株的形态指
标。 在显微镜下观察叶片气孔保卫细胞的长度,是近年来采
用较多的倍性鉴定方法,通过卡方适应性测定表明,气孔保
卫细胞长度在单倍体与二倍体之间存在着真实差异。 Sari 等
[31]在西瓜、Norio[32]和马国斌等 [33]在甜瓜上均发现叶片气孔保
卫细胞叶绿体个数与植物倍性呈正相关, 可以作为鉴定西
瓜、甜瓜倍性的间接方法。 流式细胞仪通过测定处于分裂间
期细胞 DNA 含量,从而确定细胞的倍性,是一种快速的鉴定
方法,且不受取样部位和时间限制,对样品的需要量少,适合
大量样本检测使用,但检测成本较高,应用范围有限[34]。
2.3 染色体加倍技术
利用离体培养过程中染色体自然加倍现象得到二倍体
纯合植株是目前花药培养育种最为常见的加倍方法,但受到
多种因素影响,其中物种的影响最大,如自然加倍率水稻花
药培养为 70%,烟草花药培养几乎为 0,小麦花药培养在 20%
~30%[35]。 而葫芦科蔬菜花药培养再生植株自然加倍率也很
低,仅在西瓜上有过报道 [36]。 有研究表明花药培养再生植株
自然加倍主要是通过核内有丝分裂进行,这和接种花药的发
育时期,培养基中激素的种类和水平,花粉植株的发生方式
以及愈伤组织继代培养时间的长短有关系 [14]。
染色体人工加倍最有效的方法是采用药剂处理,常用药
剂除了秋水仙素,还有一些有机杀菌药剂 [37]。 通常使用秋水
仙素 0.1%~0.5% 溶液处理离体培养的单倍体植株腋芽、顶芽
或整个植株。 Sari等[31]用 0.5%秋水仙碱浸泡单倍体幼苗生长
点也成功地使西瓜单倍体加倍得到双单倍体植株。
3 问题与展望
就目前而言,大部分葫芦科蔬菜花药培养的研究主要集
中在西瓜、甜瓜、黄瓜 3 个种类上,而对南瓜、苦瓜等其他物
种研究较少。 在多数葫芦科蔬菜花药培养获得的再生植株是
通过愈伤组织途径得到的,而细胞愈伤化后极不稳定,容易
产生多倍体和非整倍体,并且花药愈伤组织可能来自小孢子,
也有可能来自花药壁等体细胞,在愈伤组织阶段很难鉴别其
倍性。 另外在花药培养离体再生的过程中,由于受到各种内、
外部因素的影响,愈伤组织容易褐化、分化难、芽伸长缓慢、
再生频率低,并且再生体系重复性差。 而通过胚状体途径得
到的再生植株可以减少来自花药壁等体细胞的再生植株,同
时胚状体的成苗率和再生植株的成活率都比较高,并且能自
然加倍成为二倍体纯合植株 [38]。 因此,深入研究小孢子脱分
化启动与胚状体的发生机理和诱导条件是从胚状体途径提
高葫芦科蔬菜花药培养诱导率的关键。 葫芦科蔬菜的自然加
倍率较低,而通过秋水仙素处理的人工加倍,整体加倍效率
不高,且易产生多倍体,人为控制的因素和方法需要进一步
的探讨[39]。 虽然对葫芦科蔬菜花药培养的研究已取得了一定
的进展,但存在的问题还很多。 在今后的研究中,高频再生体
系的建立和成熟的加倍技术仍是我们研究的重点,从而在此
基础上达到创制新的种质资源,提高葫芦科蔬菜育种水平的
目的。
参考文献
[1] 王秀峰.蔬菜栽培学[M].中国农业出版社, 2003: 235-236.
[2] 李文信,李天艳,洪日新,等. 广西厚皮甜瓜生产存在的问题和
对策[J].中国西瓜甜瓜,2004(6): 22-24.
[3] 西南农业大学主编 . 蔬菜育种学(第二版). [M]. 农业出版社,
1980: 182-185.
[4] 李浚明编译. 植物组织培养教程(第 2 版). [M]. 中国农业大学
出版社, 2002:103-105.
[5] 中国科学院植物研究所编译. 单倍体育种资料集(第二集). [M].
中国科学院植物研究所,1973.
[6] 雷春,陈劲枫. 葫芦科蔬菜作物单倍体材料创制的研究进展[J].
中国蔬菜,2006(1): 33-36.
[7] 薛光荣,余文炎,费开伟,等. 西瓜花药离体培养获得花粉植株
[J].植物生理学通讯,1983(4): 40-42.
[8] Ficcadenti N, Sestili S, Annibali S, et al. In vitro gynogenesis to
in-duce haploid plants in melon Cucumis melon L. [J]. Genet &
Breed, 1999, 53: 255-257.
[9] Ozzambak E, Atasayar A, Cockshull KE. Anther culture of tomatoes
andeggplant [J]. Acta Horticulture,1994,366:229-233.
[10] 袁万良,付润民,雷保林,等. 西瓜花药培养试验初报[J]. 陕西农
业科学,1995(1): 29-30.
[11] 李娟,张丽,李焕秀,等. 西瓜花药培养技术研究[J]. 中国瓜菜,
2008(4): 4-8.
[12] Barro F,Martin A. Response of different genotypes of Brassica cari-
nata to microspore culture[J]. Plant Breeding,1999,118(1): 79-81.
[13] 缑艳霞 . 西瓜花药离体培养技术研究 [D]. 杭州 : 浙江大学 ,
2006.
[14] 董艳荣. 甜瓜花药再生体系的基础研究[D]. 南京: 南京农业大
学, 2002.
[15] Metwally EI, Moustafa SA, EI-Sawy BI, et al. Haploid plantlet de-
rived by anther culture of Cucurbita pepo[J]. Plant Cell, Tissueand
Organ Culture,1998,52(3):171-176.
[16] 缑艳霞,张明方. 葫芦科花药培养再生体系和单倍体育种[J]. 北
方园艺,2006(4): 63-66.
[17] 谢淼,秦丽颖,潘俊松,等. 黄瓜花器形态发生、小孢子发育与花
药培养[J].西北植物学报,2005,25(6): 1096-1100.
[18] 魏瑛,张俊莲, 陈年来, 等.西瓜花药愈伤组织的诱导[J]. 甘肃农
业大学学报,1998,33(专辑): 127-130.
[19] 陈佳.苦瓜花药培养诱导愈伤组织及器官分化的研究[D]. 雅安:
四川农业大学, 2007.
[20] 马刘峰. 甜瓜花药离体培养研究[D].石河子: 石河子大学, 2006.
[21] 陈晓,詹玉丝,徐小利,等. 花药培养建立辣椒 DH 纯系的初步研
究[J].河南农业科学,2003(3): 52-55.
[22] 喻财铃. 丝瓜小孢子囊与雄配子体发育的研究和花药离体培养
初探[D].广州: 华南农业大学, 2001.
[23] 张廷红,杨随庄. 硝酸银对小麦花药愈伤组织分化的影响[J].甘
专题综述中 国 瓜 菜
34· ·
肃农业科技,2008(2): 28-29.
[24] 曹利仙,赵鹉,唐宇力,等 . 硝酸银对黄瓜离体子叶培养芽再生
的促进效应[J]. 甘肃农业大学学报, 2001, 36(2): 168-171.
[25] 韩丽华. 厚皮甜瓜未受精胚珠离体培养技术[D]. 保定: 河北农业
大学,2004.
[26] 王开冻,魏跃. 西瓜花药培养中不定芽的诱导与增殖[J]. 安徽农
业科学,2008, 36(16): 6826-6827,6859.
[27] 黄斌. 大麦花药培养中低温预处理对花药愈伤组织形成的影响
[J]. 植物学报,1985,27(3): 439-443.
[28] Ashok Kumar HG, Murthy HN. Effect of sugars and amino acids on
androgenesis of Cucumis sativus[J]. Plant Cell , Tissue and Organ
Culture, 2004, 78: 201-208.
[29] 陈瑞阳.植物染色体标本制备的去壁、低渗法及其在细胞遗传学
中的意义[J]. 遗传学报,1982,9(2): 151-159.
[30] 杜胜利,韩毅科,魏爱民,等. 黄瓜倍性鉴定方法的研究[J]. 园艺
学报, 2002, 29(3): 280-281.
[31] Sair N, Abak K. Comparison of ploidy level screening methods in
watermelon: Citrulius Lanalus (Thunb) [J]. Scientia Horticulture,
1999, 82: 265-277.
[32] Norio K, Surmio IWAI. Production of haploid plant of melon by
pseudo fertilized ovule culture [J]. Plant Tissue Culture, 1993, 10
(10): 60.
[33] 马国斌,王鸣,郑学勤. 甜瓜组织培养再生植株中的四倍体变异
[J]. 园艺学报,1999, 26,(2): 128-130.
[34] Zhang Xingping, Rhodes B, Skorupska H, et al. Determinations of
watermelon shoot tissue for cell flow cytometry[J]. Cucurbit Genetics
Coop Rpt, 1996(17): 102-105.
[35] 袁惠燕,姜茜,张琪. 花粉植株染色体倍性及加倍技术研究进展
[J]. 北方园艺,2008(2): 61-64.
[36] Xue GR, Yu WY, Fei KW. Watermelon nts derived by in vitro an-
ther culture [J]. Plant Physiology Common(CHN),1983,4: 4-42.
[37] Geoffriau E, Kahane R, Bellamy C, et al. Ploidy stability and in
vitro chromosome doubling in gynogenic clone of onion[J]. Plant Sci-
ence Limerick, 1997, 122(20): 201-208.
[38] 谢冰,王秀峰,樊治成. 西葫芦未受精胚珠离体培养条件的优化
及胚囊植株的产生[J]. 中国农业科学,2006,39(1): 132-138.
[39] 贾媛媛,张永兵,刁卫平,等 . 双单倍体甜瓜的获得及其初步定
性研究[J]. 江苏农业科学,2008(1): 116-118.
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J176 板栗栽培与贮藏加工新技术 5
J177 核桃栽培与贮藏加工新技术 5
J178 芒果无公害栽培实用技术 7
J179 无花果栽培与贮藏加工新技术 5
J180 扁桃高效栽培与加工利用 18
J181 中国优质专用薯类生产与加工 16
J182 西瓜栽培百事通 14
J183 怎样提高种西瓜效益 8.5
J184 无子西瓜栽培技术 10
J185 大棚温室西瓜甜瓜栽培技术 12
J186 甜瓜无公害高效栽培 10.5
J187 西瓜甜瓜无公害栽培技术 10
J188 西瓜生产技术指南 20
J189 西瓜大棚栽培新技术 5
J190 怎样提高甜瓜种植效益 9.5
J191 西瓜甜瓜南瓜病虫害防治 10.5
J192 西瓜优质栽培技术问答 5
J193 甜瓜温室大棚栽培新技术 5.5
J194 国家审定西瓜品种推广应用指南 66
J195 庆发 8 号西瓜高效栽培技术 5
J196 果树保护地栽培问答丛书-西瓜甜瓜 9
J197 西瓜早熟高效栽培 9
J198 西瓜甜瓜调查项目和方法 3
J199 袖珍小西瓜栽培技术 3
J200 西瓜无公害高效栽培 13
J201 西瓜栽培技术(修订版)8
J202 西瓜甜瓜良种引种指导 12
J203 番茄优质高产栽培法 8
J204 番茄·辣椒·茄子良种 9
J205 茄果类蔬菜良种引种指导 22
J206 瓜类蔬菜良种引种指导 14
J207 绿叶类蔬菜良种引种指导 12
J208 白菜类蔬菜良种引种指导 17
J209 根菜类蔬菜良种引种指导 15
J210 新编蔬菜优质高产良种 15
J211 无公害蔬菜栽培新技术 10
J212 瓜类豆类蔬菜良种 9
J213 绿叶类周年生产技术 14
J214 根菜类蔬菜周年生产技术 10
(三)期刊类
Q1《果树科学》1987~1988 年合订本 / 8
Q2《果树科学》1991 年合订本 / 10
Q3《果树科学》1992 年合订本 / 10
Q4《果树科学》1994 年合订本 / 13
Q5《果树科学》1996 年合订本(含增刊) / 22
Q6《果树科学》1997 年合订本(含增刊) / 24
Q7《果树科学》1998 年合订本 / 25
Q8《果树科学》1999 年合订本(含增刊) / 30
Q9《果树科学》2000 年合订本(含增刊) / 33
Q10《果树学报》2001 年合订本 / 50
Q11《果树学报》2002 年合订本 / 50
Q12《果树学报》2003 年合订本 / 50
Q13《果树学报》2004 年合订本 / 50
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