全 文 ：广 西 植 物 Ｇｕｉｈａｉａ ３２（３）：３７１－３７６ ２０１２ 年 ５ 月
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－３１４２．２０１２．０５．０１８
Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇｏｆ ｆｌｏｗｅｒｉｎｇｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
ｇｅｎｅ ＬＦＹｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ
ＹＵ Ｌｉ－Ｘｉａ，ＹＡＯ Ｙｏｕ－Ｌｉｎ，ＷＵ Ｘｉａｏ－Ｌｕ，
ＴＡＮＧ Ｘｉａｏ－Ｑｉａｎ，ＹＡＮ Ｂｏ＊
（Ｆａｃｕｌｔｙ ｏｆ Ｌａｎｄｓｃａｐｅ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０２２４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｇｅｎｅ ＬＦＹｇｅｎｅ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ，ｗｅ ｕｓｅｄ ｒｅｖｅｒｓｅ
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｔｈｒｅｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ（ＡＳ）ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｎａｍｅｄ ａｓ ＬＦＹ１２３９，
ＬＦＹ１２６３，ａｎｄ ＬＦＹ１２７５ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｔｈａｔ ｆｒａｇｍｅｎｔ ＬＦＹ１２６３ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ａｎ ｏｐｅｎ ｒｅａｄｉｎｇ
ｆｒａｍｅ ｏｆ １ ２６３ｂｐ，ａｎｄ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ｔｏ ｔｈｅ ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ａｎｄ ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ ｆｒａｇｍｅｎｔ，ｗｈｉｌｅ ＬＦＹ１２３９ｌａｃｋｅｄ ３６ｂｐ ａｔ
ｔｈｅ ３′ｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｅｘｏｎ，ａｎｄ ＬＦＹ１２７５ｈａｄ ａｎ ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ １２ｂｐ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ３′ｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｉｎｔｒｏｎ．Ｅｘｐｒｅｓ－
ｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＬＦＹ１２３９ｗａｓ ｏｎｌｙ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ，ｗｈｉｌｅ ＬＦＹ１２６３ａｎｄ
ＬＦＹ１２７５ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｉｎ ｂｏｔｈ ｆｌｏｒａｌ ｏｒｇａｎｓ ａｎｄ ｒｏｓｅｔｔｅ ｄｕｒｉｎｇ ｂｏｔｈ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ａｎｄ ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ ｓｔａｇｅｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，
ＬＦＹ１２６３ａｐｐｅａｒｅｄ ｔｏ ｂｅ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ａｂｕｎｄａｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｏｆ ＬＦＹ１２７５ｔｏ ＬＦＹ１２６３ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ
ｆｌｏｒａｌ ｏｒｇａｎｓ ｔｈａｎ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ，ｗｈｉｃｈ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｓｕｃｈ ｒａｔｉｏ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＬＦＹｇｅｎｅ；ｆｌｏｒａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ；ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ（ＡＳ）；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ＣＬＣ Ｎｕｍｂｅｒ：Ｑ７５２ Ｄｏｃｕｍｅｎｔ Ｃｏｄｅ：Ａ Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ：１０００－３１４２（２０１２）０３－０３７１－０６
＊
拟南芥成花调控ＬＦＹ基因的选择性剪接
于丽霞，姚有林，武晓璐，汤晓倩，鄢 波＊
（西南林业大学 园林学院，昆明６５０２２４）
摘 要：为研究拟南芥成花调控基因ＬＦＹ，我们采用ＲＴ－ＰＣＲ方法分离克隆了三种选择性剪接的片段，分别
命名为ＬＦＹ１２３９，ＬＦＹ１２６３和ＬＦＹ１２７５。序列分析表明ＬＦＹ１２６３包含一个大小为１ ２６３ｂｐ的开放阅读框，
与之前报道的ＬＦＹ基因片段大小相同，而ＬＦＹ１２３９在第一外显子的３′端缺失了３６ｂｐ，ＬＦＹ１２７５在第一内含
子的３′末端插入了１２ｂｐ。对几种片段表达部位的分析显示，ＬＦＹ１２３９只能在营养生长期的莲座叶中表达，
而ＬＦＹ１２６３和ＬＦＹ１２７５在营养生长期和花期的花器官和莲座叶中都可以检测到，并且，ＬＦＹ１２６３呈现出主导
地位，ＬＦＹ１２７５与ＬＦＹ１２６３表达的比例表现为花器官高于莲座叶，该比例的变化可能预示着与成花调控有关。
关键词：ＬＦＹ基因；成花转变；选择性剪接；差异表达
ＬＦＹｇｅｎｅ ｐｌａｙｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｔｏ ｐｒｏｍｏｔｅ
ｆｌｏｗｅｒ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ
ｏｔｈｅｒ ｇｅｎｅｓ，ｓｕｃｈ ａｓ ＴＦＬ，ＡＰ１，ＡＰ２，ＣＡＬ，ＦＴ，ＡＰ３，
ＵＦＯ，ＧＡ１ ｅｔ ａｌ．Ｉｎ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｆｌｏｗｅｒ－
ｉｎｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ，ｉｔ ｈａｓ ｂｅｅｎ
ｔｈｏｕｇｈｔ ｔｈａｔ ＬＦＹｉｓ ｃｅｎｔｒａｌ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌｏｒａｌ
ｓｉｇｎａｌｓ ａｎｄ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ．Ｓｉｎｃｅ Ｗｅｉｇｅｌ ｅｔ ａｌ．ｉ－
ｓｏｌａｔｅｄ ＬＦＹｇｅｎｅ ｏｆ Ａ．ｔｈａｌｉａｎａ（Ｗｅｉｇｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９９２），
ＬＦＹｇｅｎｅ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｃｌｏｎｅｄ ｆｒｏｍ ｏｔｈｅｒ ｓｐｅｃｉｅｓ（Ｍａｉｚｅｌ ｅｔ
ａｌ．，２００５；Ｍａｔｔｈｅｗｅｔ ａｌ．，２００５；Ｑｉｎｇｙｉ ｅｔ ａｌ．，２００５；
＊ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｄａｔｅ：２０１１－１０－０５ Ａｃｃｅｐｔｅｄ ｄａｔｅ：２０１２－０３－２９
Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｉｔｅｍｓ：Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ（３１０６００４２，３１１６０１７７）；Ｙｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ａｎｄ Ｍｉｎｉｓｔｅｒ Ｋｅｙ Ｓｕｂｊｅｃｔ，
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｋｅｙ Ｌａｂ ａｎｄ Ｓｈａｒｅ Ｐｌａｔｆｏｒｍ
Ｂｉｏｇｒａｐｈｙ：ＹＵ Ｌｉ－Ｘｉａ（１９８１－），女，山东威海人，硕士，助教，主要从事植物分子生物学等研究，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｙｕｌｉｘｉａ２００５＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ。
＊Ａｕｔｈｏｒ ｆｏｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ：ＹＡＮ Ｂｏ，男，博士，教授，主要从事植物生物技术等研究，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｙａｎｂｏｄｒ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。
Ｓｉｄｄｈａｒｔｈａ ｅｔ ａｌ．，２００８）．Ａｌｓｏ，ＬＦＹｇｅｎｅ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ
ｍｏｓｔ ｗｅｌ ｓｔｕｄｉｅｄ ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｏｌｅ ｉｎ ｆｌｏｗｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐ－
ｍｅｎｔ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｗｅｌ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ（Ｗｅｉｇｅｌ ＆Ｃｏｕｐｌａｎｄ，
１９９５；Ｐｅｎａ ｅｔ ａｌ．，２００１；Ｈｅ ｅｔ ａｌ．，２００１）．Ｉｎ ｆｌｏｗｅｒ
ｍｅｒｉｓｔｅｍｓ，ＬＦＹ ａｃｔｓ ａｓ ａ ｍａｓｔｅｒ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｏｒｃｈｅｓｔｒａ－
ｔｉｎｇ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｆｌｏｒａｌ ｎｅｔｗｏｒｋ（Ｍｉｇｕｅｌ，ｅｔ ａｌ．，２００６；
Ｖｉｖｉａｎ，２０１０）．ＬＦＹ ｉｓ ａ ｐｌａｎｔ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ
ｆａｃｔｏｒ ｔｈａｔ ｄｉｒｅｃｔｌｙ ｂｉｎｄｓ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｉｔｓ
ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ａ ｈｅｌｉｘ－ｔｕｒｎ－ｈｅｌｉｘ ｍｏｔｉｆ ｂｕｒｉｅｄ
ｗｉｔｈｉｎ ａ ｕｎｉｑｕｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｏｌｄ（Ｃéｃｉｌｅ Ｈａｍèｓ，ｅｔ ａｌ．，
２００８）．Ｔｏ ａｃｔｉｖａｔｅ ＡＰ３ｉｎ ｗｈｏｒｌｓ ２ａｎｄ ３，ＬＦＹ ｂｉｎｄｓ
ｔｏ ａｎ Ｆ－ｂｏｘ ｐｒｏｔｅｉｎ，ｋｎｏｗｎ ａｓ ＵＦＯ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ，
ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｐａｒｔ ｏｆ ａｎ ＳＣＦ－ｔｙｐｅ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ ｌｉｇａｓｅ（Ｅｕｎｙ－
ｏｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００８）．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＬＦＹｇｅｎｅ ｉｎ ｄｉｆ－
ｆｅｒｅｎｔ ｐｌａｎｔｓ ｅｘｉｓｔ ｔｅｍｐｏｒａｌｉｔｙ ａｎｄ ｓｐａｔｉａｌｉｔｙ．Ｉｔ ｈａｓ
ｂｅｅｎ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｔｈａｔ ｈｉｇｈ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＬＦＹ
ｇｅｎｅｓ ａｒｅ ｆｉｒｓｔ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ａｘｉｌａｒｙ ｍｅｒｉｓｔｅｍｓ ａｒｉｓｉｎｇ ｏｎ
ｔｈｅ ｆｌａｎｋ ｏｆ ｔｈｅ ｓｈｏｏｔ ａｐｅｘ ｉｎ ｓｅｅｄ ｐｌａｎｔｓ，ｆｒｏｍ ｗｈｉｃｈ
ｔｈｅｙ ｔｈｏｕｇｈｔ ｔｈａｔ ＬＦＹ ｓｔｉｌ ｅｘｅｒｔｓ ｉｔｓ ａｎｃｅｓｔｒａｌ ｒｏｌｅ ｏｎ
ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌ ｄｉｖｉｓｉｏｎ ｉｎ ｇｙｍｎｏｓｐｅｒｍｓ ａｎｄ ａｎ－
ｇｉｏｓｐｅｒｍｓ，ｂｕｔ ｉｎ ａ ｔｅｒｒｉｔｏｒｙ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｔｏ ａｘｉｌａｒｙ ｍｅｒｉ－
ｓｔｅｍｓ．
Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ（ＡＳ）ｉｎ ｅｕｋａｒｙｏｔｅｓ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ
ｔｏ ｔｈｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
（Ｍｉｃｈａｅｌ ｅｔ ａｌ．２００８）．Ｉｔ ｍａｙ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ｃｈａｎｇｅ ｐｒｏｔｅｉｎ
ｄｏｍａｉｎ ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ，ｂｕｔ ａｌ－
ｓｏ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｕｂｕｎｉｔｓ
ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｏｓｔ－ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｐｒｏ－
ｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ（Ｃｒａｉｇ ｅｔ ａｌ．，２００８）．
ＡＳ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｍｏｒｅ ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｌｙ ｉｎ ｈｕ－
ｍａｎ ａｎｄ ａｎｉｍａｌｓ ｗｉｔｈ ａｂｏｕｔ ７０％－８０％ｇｅｎｅｓ ｏｆ ｈｕ－
ｍａｎ ｗｉｔｈ ＡＳ ｓｈｏｗｎ ｂｙ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ ａｓｓａｙ（Ｊｏｈｎｓｏｎ ｅｔ
ａｌ．，２００３）．Ａｌｔｈｏｕｇｈ ｇｒｅａｔ ｅｆｏｒｔｓ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｍａｄｅ ｉｎ
ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ（Ｃｒａｉｇ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｋｅｍａｌ，２００３），ＡＳ ｉｎ
ｐｌａｎｔｓ ｓｔｉｌ ｒｅｍａｉｎ ｆｕｌ ｏｆ ｃｈａｌｅｎｇｅ．Ｉｔ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｒｅｐｏｒ－
ｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ｓｅｖｅｒａｌ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｇｅｎｅｓ ｉｎ
ｒｉｃｅ，ｗｈｅａｔ，Ｚｅａ ｍａｙｓ，ｏｒａｎｇｅ，ｐｏｐｕｌｕｓ，ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ，Ｖｉｔｉｓ
ｖｉｎｉｆｅｒａａｎｄ ｌｅａｆｙ ｓｐｕｒｇｅ ｉｎ ｔｈｅｓｅ ｆｅｗ ｙｅａｒｓ（Ｙａｍａｕｃｈｉ
ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｔｅｒａｓｈｉｍａ ＆ Ｔａｋｕｍｉ，２００９；Ｈｏｗｉｔｔ ｅｔ
ａｌ．，２００９；Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００９；Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００９；Ｓｒｉｖａｓ－
ｔａｖａ ｅｔ ａｌ．，２００９；Ｌａｚａｒｅｓｃｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０；Ｚｅｎｏｎｉ ｅｔ ａｌ．，
２０１０；Ｈｏｒｖａｔｈ ｅｔ ａｌ．，２０１０）．Ａｎｄ ｓｏｍｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙ
ｓｐｌｉｃｅｄ ｇｅｎｅｓ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｒｅｐｏｒｔｅｄ
（Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｙａｎ ｅｔ ａｌ．，２００９），ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ
ｓｏｍｅ ｇｅｎｅｓ ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ｆｌｏｒａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ，ｓｕｃｈ ａｓ
ＳＥＦ，ＧＡ５，ＳＰＹ，ＭＡＦ４，ＳＶＰ，ＦＴ，ＴＯＥ１ ｅｔ ａｌ．（Ｒｅｄｄｙ
＆Ｇｏｌｏｖｋｉｎ，２００８），ｈｏｗｅｖｅｒ，ＡＳ ｏｆ ＬＦＹｇｅｎｅ ｈａｓ ｎｏｔ
ｂｅｅｎ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｙｅｔ．Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ
ｆｏｒｍｓ ｏｆ ＬＦＹｇｅｎｅ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａ－
ｔｅｄ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ，ｎａｍｅｄ ａｓ ＬＦＹ１２３９，ＬＦＹ１２６３
ａｎｄ ＬＦＹ１２７５，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｏｆ
ｔｈｒｅｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ ａｎｄ ｆｌｏｒａｌ
ｏｒｇａｎｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ．
１ Ｍａｔｅｒｉａｌ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄｓ
１．１Ｐｌａｎｔ ｍａｔｅｒｉａｌｓ
Ｔｈｅ ｐｌａｎｔｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｗｅｒｅ Ａｒａｂｉｄｏｐ－
ｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ（Ｌ）Ｈｅｙｎｈ，Ｃｏｌｕｍｂｉａ．
１．２ ＲＮＡ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ－
ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ
ＲＮＡ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ＲＮＡｓｉｍｐｌｅ
Ｔｏｔａｌ ＲＮＡ ｋｉｔ（Ｔｉａｎｇｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｑｕｅ Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｃｈｉｎａ）．
Ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ－ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｕｓｉｎｇ
ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ－Ｓｔｒａｎｄ ＲＴ－ＰＣＲ ｋｉｔ（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｃｈｉｎａ）．
１．３ＲＴ－ＰＣＲ ａｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
ＰＣＲ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ９６－ｗｅｌ ｐｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ａ Ｂｉ－
ｏｍｅｔｅｒ Ｔ Ｇｒａｄｉｅｎｔ ｔｈｅｒｍａｌ ｃｙｃｌｅｒ．Ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ｄｅ－
ｓｉｇｎｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｃＤＮＡ ａｎｄ ｇｅｎｏｍｉｃ
ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ＬＦＹｇｅｎｅ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ
（ＧｅｎＢａｎｋ ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ｎｏ．ＮＭ＿１２５５７９，Ｍ９１２０８）．Ｔｈｅ
ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｔｈｅ ｆｏｌｏｗｓ，ＬＦＹＰｒｉｍｅｒ
Ｆｏｒｗａｒｄ： ５′－ＡＴＧＧＡＴＣＣＴＧＡＡＧＧＴＴＴＣＡＣＧＡＧ－
３′， ＬＦＹ Ｐｒｉｍｅｒ Ｒｅｖｅｒｓｅ： ５′－ＣＴＡＧＡＡＡＣＧ－
ＣＡＡＧＴＣＧＴＣＧＣＣＧ－３′（ｔｈｅ ｆｕｌ－ｌｅｎｇｔｈ ｃｏｄｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ
ｏｆ ＬＦＹｃＤＮＡ ａｎｄ ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ）；ＬＡＳ Ｐｒｉｍｅｒ Ｆｏｒ－
ｗａｒｄ： ５′－ＧＡＡＧＡＧＧＡＡＴＣＴＴＣＴＡＧＡＣＧＣＣＧ－３′，
ＬＡＳ Ｐｒｉｍｅｒ Ｒｅｖｅｒｓｅ：５′－ＣＣＡＧＴＡＡＣＣＡＣＴＴＣＣＴＣ－
ＣＴＣＣＧ－３′（ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｒａｎ－
ｓｃｒｉｐｔｓ）（Ｓｈｅｎｇｇｏｎｇ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
＆Ｓｅｒｖｉｃｅｓ Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｃｈｉｎａ）．Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ＰＣＲ ｃｏｎ－
ｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｗｉｔｈ Ｔａｑ ＴＭｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（Ｔａｋａｒａ
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｃｈｉｎａ）．Ｔｈｅ ｃｙｃｌｉｎｇ ｃｏｎｄｉ－
ｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｗｉｔｈ ａｎ ｉｎｉｔｉａｌ ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ ５ｍｉｎ ａｔ ９４℃ｆｏｌ－
ｌｏｗｅｄ ｂｙ ３５ｃｙｃｌｅｓ ｏｆ ｄｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎ ｌａｓｔｅｄ ３０ｓａｔ ９４
２７３ 广 西 植 物 ３２卷
℃，ｖａｒｉｅｄ ａｎｎｅａｌｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ３０ｓ，ａｎｄ ｐｏｌｙ－
ｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ９０ｓａｔ ７２℃．Ｔｈｅ ａｎｎｅａｌｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ
ｉｎｃｌｕｄｅｄ ６６℃ｉｎ ｔｈｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｏｄｉｎｇ
ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ６４℃ｉｎ ｔｈｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｏｆ
１８０ｂｐ ｏｒ ｓｏ．ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｗｅｒｅ ｖｉｓｕａｌｉｚｅｄ ｏｎ ａ １％
ａｇａｒｏｓｅ ｇｅｌ ｗｉｔｈ ０．５μＬ／ｍＬ ｅｔｈｉｄｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ．Ｇｅｌ
ｉｍａｇｅｓ ｗｅｒｅ ｃａｐｔｕｒｅｄ ｕｓｉｎｇ ａ ＵＶＰ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ
ａｎｄ ｄｏｃｕｍｅｎｔｅｄ ｂｙ ＶｉｓｉｏｎＷｏｒｋｓＬＳ．ＲＴ－ＰＣＲ ｐｒｏｄ－
ｕｃｔｓ ｗｅｒｅ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ａ ＤＮＡ Ｇｅｌ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ
（Ｗａｔｓｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｃｈｉｎａ）．Ｔｈｅ ｐｕｒｉｆｉｅｄ
ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｗｅｒｅ ｃｌｏｎｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｐＭＤ１８－Ｔ Ｅａｓｙ
ｖｅｃｔｏｒ（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｃｈｉｎａ）ｎａｍｅｄ
ａｓ ｐＴＬＦＹ，ａｎｄ ｔｈｅｎ ｗｅｒｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ ｉｎ Ｓｈｅｎｇｇｏｎｇ Ｂｉｏ－
ｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＆Ｓｅｒｖｉｃｅｓ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．
１．４Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｓｓａｙ ｉｎ ＡＳ ｐｒｏｄｕｃｔｓ
Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｙｃｌｅｓ
ｏｆ １２，１６，２８，３０，３２，３４，３６，３８，４０ａｎｄ ４２ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｙｃｌｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｓｔａｇｅ．ｃＤＮＡ
ｆｒｏｍ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｓｔａ－
ｇｅｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｅｍｐｌａｔｅｓ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｎａｔｕｒａｌ ｃｏｍ－
ｐｅｔｉｔｉｖｅ ｔｅｍｐｌａｔｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｉｎｃｉｐａｌ ｗａｓ ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｃｏｍ－
ｐｅｔｉｔｉｖｅ ＰＣＲ．Ｔｈｅ ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ＬＡＳ ｐｒｉｍｅｒ Ｆ ａｎｄ
ＬＡＳ ｐｒｉｍｅｒ Ｒ．Ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆ ｖａｒｉｅｄ ｓｉｚｅｓ ｗｅｒｅ ｓｅｐａ－
ｒａｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ３．５％ａｇａｒｏｓｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．Ｏｐｔｉｃａｌ
ｄｅｎｓｉｔｙ ａｓｓａｙ ｏｎ ＲＴ－ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ＡＳ
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｏｆ ＬＦＹｇｅｎｅ ｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｂｙ ｍｅａｎｓ ｏｆ
ＶｉｓｉｏｎＷｏｒｋｓ ＬＳ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｏｆ ＢｉｏＳｐｅｃｔｒｕｍ Ｉｍａｇｉｎｇ
Ｓｙｓｔｅｍ．
２ Ｒｅｓｕｌｔｓ
２．１Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ＡＳ
ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｏｆ ＬＦＹ
Ｗｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｔｈｅ ｆｕｌ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ＬＦＹｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ
ｔｈａｌｉａｎａ，ｗｈｉｃｈ ｉｎｃｌｕｄｅ ｔｈｒｅｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ
ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ ａｎｄ ｔｗｏ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｐｒｏ－
ｄｕｃｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ａｔｔａｉｎ ｍｏｒｅ ｖｉｓ－
ｕａｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ，ｗｅ ｉ－
ｓｏｌａｔｅｄ ｐａｒｔｉａｌ ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｏｒｇａｎｓ ｄｕｒｉｎｇ
ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｔａｇｅ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ＬＡＳ ｐｒｉｍｅｒｓ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ
ｓｈｏｗｎ ｉｎ Ｆｉｇ．１．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｈｒｅｅ ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉｎ ｒｏ－
ｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ（Ｌａｎｅ １，Ｆｉｇ．１：
ａ），ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｗｏ ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｂｏｔｈ ｉｎ ｆｌｏｒａｌ ｏｒ－
ｇａｎｓ（Ｌａｎｅ １，Ｆｉｇ．１：ｂ）ａｎｄ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ（Ｌａｎｅ ２，
Ｆｉｇ．１：ｂ）ｄｕｒｉｎｇ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ．Ｉｔ ｗａｓ ｏｂｖｉｏｕｓ
ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｆｅｒ－
ｅｎｔ ｄｕｒｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｔａｇｅ．
Ｆｉｇ．１ ａ．ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ
ｓｔａｇｅ（Ｍ：ＤＮＡ ｍａｒｋｅｒ）；ｂ．ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ
ｉｎ ｆｌｏｒａｌ ｏｒｇａｎ ＆ｒｏｓｅｔｔｅ ｄｕｒｉｎｇ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ
（Ｍ：５０ｂｐ ＤＮＡ ｌａｄｄｅｒ；１：ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉｎ
ｆｌｏｒａｌ ｏｒｇａｎ；２：ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ）
２．２Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ
Ｗｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｔｈｅｓｅ ｔｈｒｅｅ ＲＴ－ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆ
ＬＦＹ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｈｒｅｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｔｈｒｅｅ
ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ．
Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＬＦＹ ｇｅｎｏｍｉｃ ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ，
ＬＦＹ１２３９ｌａｃｋｅｄ ｏｆ ３６ｂｐ ｎｅａｒ ｔｈｅ ３′ｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ
ｅｘｏｎ，ＬＦＹ１２６３ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ｔｏ ｗｈａｔ ｗａｓ ｒｅｐｏｒｔｅｄ
ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ ｗｉｔｈ １ ２６３ｂｐ ｉｎ ｌｅｎｇｔｈ，ａｎｄ ＬＦＹ１２７５ｈａｄ
ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ １２ｂｐ ｉｎ ｔｈｅ ３′ｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｉｎｔｒｏｎ（Ｆｉｇ．
２）．Ｔｈｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｏｆ ＬＦＹｌｅａｄｓ ｔｏ ｅｉｔｈｅｒ ｉｎ－
ｓｅｒｔｉｏｎ ｏｒ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＬＦＹｐｒｏｔｅｉｎ（Ｆｉｇ．３）．Ｔｈｅ ａｌ－
ｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ，ＬＦＹ１２７５，ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ｆｏｕｒ ａ－
ｍｉｎｏ ａｃｉｄ（ＤＤＷＴ）ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ＬＦＹ１２６３．Ｉｎ
ｃｏｎｔｒａｓｔ，ｔｈｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙ ｓｐｌｉｃｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ，ＬＦＹ１２３９，
ｈａｄ ｔｗｅｌｖｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ（ＧＴＨＨＡＬＤＡＬＳＱＥ）ｄｅｌｅｔｉｏｎｓ
ａｎｄ ｆｏｕｒ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ（ＤＤＷＴ）ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ
ｔｏ ＬＦＹ１２６３．
２．３Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＳ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ
Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｉｆ ｔｈｅｓｅ ＡＳ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｌｙ
３７３３期 于丽霞等：拟南芥成花调控ＬＦＹ基因的选择性剪接
Ｆｉｇ．２ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ
Ｆｉｇ．３ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｄｅｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｒｅｅ ＡＳ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ
ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｓｔａｇｅ ｏｆ
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ，ｗｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ＲＴ－ＰＣＲ ｏｆ
ＬＦＹｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｉｎ ｏｒｇａｎｓ ａｔ ｂｏｔｈ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ
ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｅｄ ｓｔａｇｅｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉ－
ｔｙ ａｓｓａｙ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｗａｓ ｓｈｏｗｎ ｉｎ Ｆｉｇ．４．
Ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ａｓｓａｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｒａｔｉｏ
ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ａｓ ｆｏｌｏｗｓ：ａ．ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ ｉｎ
ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ ＬＦＹ１２７５ ∶ ＬＦＹ１２６３ ∶
４７３ 广 西 植 物 ３２卷
ＬＦＹ１２３９＝１∶４．７８４∶１．０４４，ｂ．ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ ｉｎ
ｒｅｐｒｏｄｕｃｅｄ ｓｔａｇｅ ＬＦＹ１２７５∶ＬＦＹ１２６３＝１∶４．６５２，
ｃ．ｆｌｏｒａｌ ｏｒｇａｎ ＬＦＹ１２７５∶ＬＦＹ１２６３＝１∶３．７６８．
Ｏｖｅｒ ａｌ，ＬＦＹ１２６３ａｎｄ ＬＦＹ１２７５ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ
ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ ｉｎ ｂｏｔｈ ｓｔａｇｅｓ ａｎｄ ｂｏｔｈ ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ
ａｎｄ ｆｌｏｒａｌ ｏｒｇａｎｓ，ｗｉｔｈ ＬＦＹ１２６３ｉｎ ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ ａ－
ｍｏｕｎｔ．ＬＦＹ１２３９ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｗａｓ ｏｎｌｙ ｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ ｉｎ
ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ ａｔ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ．Ｔｈｅｓｅ ｄａｔａ ｓｕｇ－
ｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ＬＦＹｇｅｎｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｗａｓ ａｓｓｏ－
ｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｇａｎｓ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐ－
ｍｅｎｔ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｌａｎｔ．
３ Ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ
Ｉｎ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔ ｓｔｕｄｙ，ｗｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｔｗｏ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ－
ｌｙ ｓｐｌｉｃｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｇｅｎｅ
ＬＦＹ．ＬＦＹ１２３９ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｏｎｌｙ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ ａｔ
ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ，ｗｈｉｃｈ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ＬＦＹ１２３９ｉｓ
ｎｏｔ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｆｌｏｒａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ
ｔｈａｌｉａｎａ．Ｉｎ ｃｏｎｔｒａｓｔ，ＬＦＹ１２７５ａｎｄ ＬＦＹ１２６３ｅｘ－
ｐｒｅｓｓｅｄ ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｌｙ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏ－
ｄｕｃｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ，ｗｈｉｃｈ ｉｍｐｌｉｅｄ ｔｈａｔ ｂｏｔｈ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｗｅｒｅ
ｒｅｌｅｖａｎｔ ｔｏ ｆｌｏｒａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ．
Ｆｉｇ．４ Ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ａｓｓａｙ ｏｎ ＲＴ－ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ＡＳ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＬＦＹｇｅｎｅ
ＬＦＹ１２６３ｗａｓ ｔｈｅ ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ａｔ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔａｇｅ，ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ＬＦＹ１２７５ｔｏ
ＬＦＹ１２６３ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｌｉｇｈｔｌｙ ｉｎ ｆｌｏｒａｌ ｏｒｇａｎｓ ｔｈａｎ
ｔｈａｔ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇ ｔｈａｔ ＬＦＹ１２７５
ｍａｙ ｐｌａｙ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｆｌｏｒａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ．Ｔｏ－
ｇｅｔｈｅｒ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ
ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＬＦＹ１２６３，ｗｈｏ ｔｈｏｕｇｈｔ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ
ｔｈｅ ｃｏｐｙ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ＬＦＹ１２６３ｒｅｄｕｃｅｄ
ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｌｅａｖｅｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｅｆｏｒｅ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ
ｆｌｏｗｅｒ ｉｓ ｆｏｒｍｅｄ（Ｍｉｇｕｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９９７），ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ
ＬＦＹ１２７５ｍａｙ ａｌｓｏ ｒｅｇｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｆｌｏｒａｌ
ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｔｏ
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ＬＦＹ１２６３．Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ＬＦＹｅｘｐｒｅｓ－
ｓｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔａｇｅ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｉｔ
ｐｌａｙｅｄ ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｉｎ ｐｌａｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
ｐｒｏｃｅｓｓ，ｉｔ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｆｌｏｒａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎ－
ｃｌｕｄｉｎｇ ｆｌｏｒａｌ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ｂｕｔ ａｌｓｏ ｐｌａｙｅｄ ａｎ ｉｍｐｏｒ－
ｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｌｅａｆ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａ－
ｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ．Ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｔｗｏ ｓｐｌｉｃｅｄ ｖａｒｉ－
ａｎｔｓ（ＬＦＹ１２３９ａｎｄ ＬＦＹ１２７５）ｏｆ ｔｈｅ ＬＦＹｇｅｎｅ ｏｆ
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ｒｅｍａｉｎ ｔｏ ｂｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ，ａｎｄ
ｗｅ ｗｉｌ ｄｅｖｅｌｏｐ ｉｔ ｉｎ ｔｈｅ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ．
Ｉｎ ｔｈｉｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｙ ｄｉｆｆｅｒｅｄ ｉｎ ａ
ｓｈｏｒｔ ｓｔｒｅｔｃｈ ｏｆ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｂａｓｅ ｐａｉｒｓ，ｗｉｔｈ ｍｏｓｔ
ｃｏｄｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ａｎｄ ｎｏ ｆｒａｍｅ ｓｈｉｆｔ ｍｕｔａ－
ｔｉｏｎｓ．Ｗｅｉｇｅｌ ｅｔ ａｌ．ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｔｈａｔ Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ（ｉｎ－
ｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｅｘｏｎ）ｏｆ ＬＦＹ ｗａｓ ｖｉｔａｌ ｔｏ ＬＦＹ
ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ＬＦＹ１２３９ｌａｃｋ ｏｆ ３６
ｂｐ ｉｎ ｔｈｅ ３′ｅｎｄ ｎｅａｒ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｅｘｏｎ ｌｅａｄｉｎｇ ｔｏ １２ａ－
ｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ，ｗｈｉｃｈ ｍａｙｂｅ
ｔｈｅｒｅ ｊｕｓｔ ｔｏ ｍａｋｅ ｕｐ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ａｎｄ ａｔｔｒｉｂｕｔｅ ｔｏ
ｉｔｓ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｄ ｗｉｔｈ ｆｌｏｒａｌ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｔｈｉｓ ｃｏｎｓｉｓｔ－
ｅｎｔ ｗｉｔｈ ｏｕｒ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｔｈａｔ ＬＦＹ１２３９ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ
ｗａｓ ｏｎｌｙ ｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ ｉｎ ｒｏｓｅｔｔｅ ｌｅａｖｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｖｅｇｅｔａ－
ｔｉｖｅ ｓｔａｇｅ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ＬＦＹ１２７５ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ １２
ｂｐ ｉｎ ｔｈｅ ３′ｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｉｎｔｒｏｎ ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔ ｉｎ ４ａｍｉｎｏ
ａｃｉｄ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｅｎａｂｌｅ ｔｈｅ ｇｅｎｅ
ｐｒｏｄｕｃｔ ｔｏ ｄｉｆｅｒｅｎｔｌｙ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｆｌｏｒａｌ
ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ．
Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ Ｇｅｎｏｍｅ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ．（２０００）Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｏｍｅ ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ ｐｌａｎｔ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ［Ｊ］．Ｎａｔ，
４０８：７９６－８１５
Ｒｅｄｄｙ ＡＳＮ，Ｇｏｌｏｖｋｉｎ Ｍ．２００８．Ｎｕｃｌｅａｒ ｐｒｅ－ｍＲＮＡ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｉｎ
Ｐｌａｎｔｓ［Ｍ］．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ Ｂｅｒｌｉｎ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ：２０１－２１８
Ｃéｃｉｌｅ Ｈａｍèｓ，Ｄｅｎｉｓ Ｐｔｃｈｅｌｋｉｎｅ，Ｃｌｅｍｅｎｓ Ｇｒｉｍｍ，ｅｔ ａｌ．２００８．
Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ＬＥＡＦＹ ｆｌｏｒａｌ ｓｗｉｔｃｈ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ
ｗｉｔｈ ｈｅｌｉｘ－ｔｕｒｎ－ｈｅｌｉｘ ｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］．Ｅｍｂｏ Ｊ，２７：２ ６２８－２ ６３７
Ｃｒａｉｇ Ｇ，Ｓｉｍｐｓｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｆｕｌｅｒ，ｅｔ ａｌ．２００８．Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ
ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ ＲＮＡ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｇｅｎｅ
５７３３期 于丽霞等：拟南芥成花调控ＬＦＹ基因的选择性剪接
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｊ，５３：１ ０３５－１ ０４８
Ｅｕｎｙｏｕｎｇ Ｃ，Ｑｕｅｅｎｉｅ ＫＧ Ｔａｎ，Ｔｈｅｒｅｓａ Ａ，ｅｔ ａｌ．２００８．Ａｎ Ａｒａｂｉ－
ｄｏｐｓｉｓ Ｆ－ｂｏｘ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｃｔｓ ａｓ ａ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｃｏ－ｆａｃｔｏｒ ｔｏ ｒｅｇｕ－
ｌａｔｅ ｆｌｏｒａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１３５：１ ２３５－１ ２４５
Ｈｅ Ｚ，Ｚｈｕ Ｑ，Ｄａｂｉ Ｔ，ｅｔ ａｌ．２００１．Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｉｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｆｌｏｒａｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ＬＦＹ ｃａｕｓｅｓ ｅａｒｌｙ ｈｅａｄｉｎｇ［Ｊ］．
Ｔｒａｎｓｇｅｎ Ｒｅｓ，９：２２３－２２７
Ｈｏｒｖａｔｈ ＤＰ，Ｓｕｎｇ Ｓ，Ｋｉｍ Ｄ，ｅｔ ａｌ．２０１０．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ｅｘｐｒｅｓ－
ｓｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｄｏｒｍａｎｃｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｄｓ－ｂｏｘ ｇｅｎｅｓ ｆｒｏｍ
ｌｅａｆｙ ｓｐｕｒｇｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，７３（１－２）：１６９－７９
Ｈｏｗｉｔｔ ＣＡ，Ｃａｖａｎａｇｈ ＣＲ，Ｂｏｗｅｒｍａｎ ＡＦ，ｅｔ ａｌ．２００９．Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ
ｓｐｌｉｃｉｎｇ，ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｙｐｔｉｃ ｅｘｏｎｓ ａｎｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ
ｉｎ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｇｅｎｅｓ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｌｕｔｅｉｎ ａｃｃｕ－
ｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｗｈｅａｔ ｅｎｄｏｓｐｅｒｍ［Ｊ］．Ｆｕｎｃｔ Ｉｎｔｅｇｒ Ｇｅｎｏｍｉ，９（３）：
３６３－３７６
Ｊｏｈｎｓｏｎ ＪＭ，Ｃａｓｔｌｅ Ｊ，Ｇａｒｒｅｔｔ－Ｅｎｇｅｌｅ Ｐ，ｅｔ ａｌ．２００３．Ｇｅｎｏｍｅ－ｗｉｄｅ
ｓｕｒｖｅｙ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｐｒｅ－ｍＲＮＡ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｗｉｔｈ ｅｘｏｎ ｊｕｎｃ－
ｔｉｏｎ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０２：２ １４１－２ １４４
Ｋｅｍａｌ Ｋ．２００３．Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｏｍｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎ
ｐｌａｎｔｓ：ｔｈｅ ｔｉｐ ｏｆ ｔｈｅ ｉｃｅｂｅｒｇ ｈａｓ ｊｕｓｔ ｅｍｅｒｇｅｄ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ
Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉ，１８：４６８－４７１
Ｌａｚａｒｅｓｃｕ Ｅ，Ｆｒｉｅｄｔ Ｗ，Ｓｔｅｉｎｍｅｔｚ Ａ．２０１０．Ｏｒｇａｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｔｅｒｎａ－
ｔｉｖｅｌｙ ｓｐｌｉｃｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｉｓｏｆｏｒｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ ＳＦ２１Ｃｇｅｎｅ
［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ Ｒｅｐ，２９（７）：６７３－８３
Ｌｉｎ Ｆ，Ｚｈａｎｇ Ｙ，Ｊｉａｎｇ ＭＹ．２００９．Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒ－
ｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｏｆ ｎｉｃｏｔｉｎｅ ａｄｅｎｉｎｅ ｄｉｎｕｃｌｅ－
ｏｔｉｄｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｏｘｉｄａｓｅ Ｂ ｇｅｎｅ ｆｒｏｍ Ｚｅａ ｍａｙｓ［Ｊ］．Ｊ Ｉｎｔｅｇｒ
Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｌ，５１（３）：２８７－９８
Ｍａｉｚｅｌ Ａ，Ｂｕｓｃｈ ＭＡ，Ｔａｋａｋｏ Ｔ，ｅｔ ａｌ．２００５．Ｔｈｅ ｆｌｏｒａｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ
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６７３ 广 西 植 物 ３２卷