全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 31(2)：244— 249 2011年 3月
DOI：10．3969／i．issn．1000—3142．2011．03．020
红豆杉属植物三种不同总 DNA
提取方法的分析比较
刘 杰1，2，高连 明¨
(1．中国科学院 昆明植物研究所生物多样性与生物地理学重点实验室，
昆明 650204；2．中国科学院 研究生院，北京 100049)
摘 要：红豆杉属植物均为濒危物种 ，也是国家一级保护植物。以红豆杉属植物叶片为材料，利用三种不同
的 DNA提取方法提取总 DNA，用分光光度计和琼脂糖凝胶电泳方法检测所得总 DNA 的得率和纯度 ，用
PCR扩增的方法检测所得总 DNA的质量，并对三种不同提取方法的结果进行了比较分析。结果表明：CTAB
法提取的DNA纯度和得率均较高 ，可直接用于下游分子生物学实验；用试剂盒提取的总DNA质量也很好，纯度
高，但得率较低且成本较高；SDS法提取的总 DNA质量较差，很难直接用于下游分子生物学实验 。同时对影响
植物总 DNA得率和纯度的限制因素进行了讨论 ，为植物总 DNA提取方法的改进和选择提供借鉴作用。
关键词：红豆杉属；DNA提取方法；PCR扩增
中图分类号 ：Q943 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—3142(2011)02—0244—06
Comparative anah of thin di rent methodsc lysis lteeatle O
of total DNA extraction used in Taxus
LIU Jie1 ，GAO Lian-MingI
(1．Key Laboratory of Biodiversity and Biogeography，Kunming Institute of Botany，Chinese Academy of Sciences，
Kunming 650204；2．The Graduate School of the Chinese,Academy of Sciences，Beijing 100049)
Abstract：Species of Taxus in China are endangered and were listed as the national first—class protected wild plant．In
present study，three different methods of total DNA extraction，i．e．SDS，CTAB and DNA extraction Kit(DNeasy
Plant Mini Kit)，were used to isolate genomic DNA from dried leaf materials of Ihxus．The total genomic DNA yiel—
ded by the three methods were quantified and analyzed by spectrophotometer，agarose gel electrophoresis and PCR re—
action respectively．The results of the three methods of DNA extraction were compared and analyzed，which indicated
that the CTAB method could yielded relatively pure and high amount total DNA and was highly suited for use directly
in downstream applications．The method of DNA extraction using Kit(DNeasy Plant Mini Kit)also could yield high
quality total DNA with the highest purity of the DNA comparing to other methods used in this study．However，the
relatively lower DNA yield and higher costs of this method might be limited to its wide use．W hereas the SDS method
could not yield high quantity of total DNA in most sampled accessions in the present study，which indicated low purity
of the yielded DNA of SDS method could not be used in downstream application directly．We also discussed the fac—
tors influencing on the total genomic DNA yield and purity，which could help to improve and select the suitable proto—
col of DNA isolation of plants．
收稿 日期 ：2O10-07 23 修回日期：2Ol1-01 16
基金项目：国家自然科学基金(30700042)；云南省自然科学基金(2007C088M)；中国科学院“西部之光”和云南省人才项目(2008PY064)~Supported by
the National Natural Science Foundation of China(30700042)；Natural Science Foundation of Yunnan Province(2007C088M )；the W est Light Programme of
Chinese Academy of Sciences(92231l1W1)：the Talent Project of Yunnan Province(2008PY064)]
作者简介：刘杰(I982一)，男(白族)，云南昌宁人 ，在读博士研究生，主要从事植物保护遗传学和谱系地理学研究 ．(Email)jieliu82@gmail．com。
通讯作者 ：高连明，博士，从事植物系统发育与保护遗传学研究 ，(Email)gaolm@mail．kib．ac．cn。
2期 刘杰等 ：红豆杉属植物三种不同总 DNA提取方法的分析 比较 245
Key words：Taxus；DNA extraction methods；PCR amplification
高质量的总 DNA是开展保护遗传学研究的基
础，也是获得分子遗传学实验成功 的关键 因素之一
(Murray等 ，1980)，而所提 取的植物 总 DNA 的纯
度是影响 PCR反应 的限制 因素之一 (Koonjul等 。
1999；Xin等 ，2003)。因此对植物总 DNA提取方法
的比较分析 ，改进植物总 DNA 提取方法 以获得 高
质量的 DNA就显得极为重要 。由于植物体 内化学
成分各异，导致即使在近缘类群中 DNA提取策略
也可能不一样 (Matasyoh等 ，2008)，故有必要针对
一 些特定类群进行专门的DNA提取方法研究。
目前，植 物总 DNA 提取 的方法 很多 ，主要 有
SDS法、CTAB法和试剂盒法等。SDS法是 由 Del—
laporta等(1983)首先使用 ，然后几经改进并用于植
物总 DNA 的提取 (Guillemaut等 ，1992；陈 莉等 ，
2007；Matasyoh等，2008)。CTAB法是最常用的方
法之一，Murray等 (1980)用 CTAB法 去除多糖 ，从
植物中快速提取了高分子量的 DNA。后来 ，Doyle
(1987)建立并改进植 物总 DNA 的 CTAB提取法 。
De la Cruz等(1997)和谢 国文等(2007)基于此方法
并进行过多 次改进。近年来 ，随着 DNA 提取技术
的不断发展 ，多种用 于 DNA提取 的试 剂盒得到 了
开发。当前 DNA提取试剂盒主要分为膜吸附法和
磁珠法两 种。由于 用试 剂 盒 (DNeasy Plant Mini
Kit)提取 DNA操作简单、快速，因而得到 了广泛 的
应用，但 因试剂盒的价格 比较昂贵，提取 的总 DNA
的数量有限 ，因此在群体遗传学研究 中受到一定程
度的制约 。
红豆杉属(Taxus)植物是 当前提取抗癌药物的
重要原料植物 ，受到很高的关注(Gao等 ，2007)。在
我国，红豆杉属所有种类均 已被列为 国家一级保护
植物(国家林业局 ，1999)。由于红豆杉属植物 次生
代谢产物较 多，总 DNA提取 比较 困难 (Suman等 ，
1999)。本文利用三种不 同方法对红豆杉属不 同物
种的总 DNA进行 了比较 分析 ，寻找红 豆杉属植物
总 DNA提取的最佳方法 ，用 于开展红 豆杉属保护
遗传学方 面的相关研究 。同时分析了影响 植物总
DNA提取的主要因素 ，为野生植物总 DNA提取方
法的改进提供借鉴作用。遵循的主要原则 为：可获
得高质量的总 DNA(DNA得率和纯度都高)；可直
接用于下游的分子生物学研究；降低总 DNA提取
的成本 ，达到质量与成本的统一。
1 材料和方法
1．1材料
1．1．1植物样品的选择 大多数样品为硅胶干燥的
野生红豆杉叶片材料 ，一个为昆明植 物园引种栽培
红豆杉的新鲜叶片材料 (于使 用前 1 h采集 ，置 于一
20 C冰箱中备用)。考虑到物种或地域差异可能对
实验结果有影响，实验材料包括了红豆杉属的 3种
2变种(表 1)。凭证标本 存于中国科学 院昆明植物
研究所标本馆 (KUN)。
1．1．2仪器设备 、药品及 试剂 实验 中使用的主要
仪器 ：冷冻高速离心机 ；灭菌锅；摇床；PCR扩增仪 ；
电泳仪；电泳槽；一20℃冰箱；制冰机；烘箱等。主要
药品试剂 ：CTAB；SDS；EDTA；Tris；HC1；氯化钠 ；
氯仿；异戊醇；乙醇；异丙醇；8一巯基乙醇；PVP；Taq
酶 ；dNTP及 PCR 缓冲液等。提取缓冲液配置：①
SDS提取缓 冲液 ：[1．5％SDS，0．1 mol／L Tris—HC1
(pH8．0)，0．05 mol／L EDTA ·Na，(pH8．0)，0．5
mol／L NaC1]。②CTAB提取缓冲液：[4 CTAB，0．1
mol／L Tris—HC1(pH8。0)，0．25 mol／L EDTA ·Na2
(pH8．0)，1．4 mol／L NaCl，1 PVP—K30]
1．2方法
1．2．1总 DNA提取方法 (1-)SDS法 ：本文方法参
照 Edwards等 (1991)的方 法改进而来 。①在液氮
中快速研磨硅胶干燥材料成粉末状 ，迅速称取 0．02
g，转入 2 mL离心 管，并置 于冰 中。② 加入 1 000
FL 65 uC预热的 SDS提取缓 冲液 ，每 1 mL提取液
加 2 L p一巯基 乙醇。65℃水浴保 温 30 min，每 5
min摇动一次 ，使提取液与样 品充分混合 。③加人
500 iLL 5 mol／L KAc，剧烈振荡 ，冰浴保温 20 min。
④12 000 r／rain离心 10 min，将上清液转移入一新
的 2 mL离心管中。⑤加入 50O“L氯仿一异戊醇(体
积比 24：1)，摇匀 ，12 000 r／min离心 10 rain。⑥
重复步骤⑤一次。⑦将 上清液转移人新 的 1．5 mI
离 心管 中，加 入 500肚L的异 丙醇 ，一20。C沉 降 3O
min。⑧12 000 r／rain离心 10 min，弃 上清液 ，用
200 L 7O 乙醇 和无 水 乙醇各洗涤沉 降 DNA两
次 。⑨ 加 入 100 L TE缓 冲 液，2 L RNase(10
mg／mL)，37 C恒温箱中保存 2 h，于 4℃冰箱中放
置 1 d，置于一2O|C冰箱 中备用。
246 广 西 植 物 3l卷
(2)试剂盒法：本研究采用 的是德 国 QIAGEN
公 司 生 产 的 DNeasy Plant Mini Kit(QIAGEN，
Hilden，Germany)。DNA提取步骤按 QIAGEN公
司提供的方法。
(3)CTAB法：依照 Doyle(1990)的方法改进而
来 ，具体 步 骤如 下 ：① 将研 钵 洗 净烘 干。提取 总
DNA前用酒精灼烧研钵 ，杵子 ，勺子 。65℃水浴锅
中预热 CTAB提取液 。②选取 干净 的叶片放 于研
钵中，加液氮；待材料水份完全损失后，用力研磨使
之呈粉末状。迅速称取 0．02 g材料 ，置于 2 mL离
心管 中，并将 离心管置 于冰 中。③在 2 mI 的离心
管中加入 1 000 I 预热的 CTAB提取液和 2 L p一
巯基乙醇(0．2 o．4 V／V)，使材料完全分散 ；置 于 65
-C水浴锅中温浴 1 h，每 10 rain摇匀一次 。④将温
浴的材料取 出置于室温下 ，待冷却 至室温后加 500
I 氯仿～异戊醇(体积比为 24：1)，摇匀 10 rain，离
心 1O rain(13 000 r／rain)。⑤将上清液转移至一新
的 2 mL离心管中。重复步骤④一 次。⑥将上清液
转移到一新的 I．5 mL离心管中，加入 7O 体积的
异丙醇，沉降 DNA，轻轻颠倒 2～3次 ，一2O℃冰箱 中
静置 1 h。13 000 r／min离心 10 rain，弃上清液。⑦
用 200扯L的 7O 的乙醇和无水乙醇各洗 2次 ，将
离心管放在 37 C恒温培养箱 中干燥 DNA。⑧待
DNA干燥后，加 1O0 L TE溶液和 2 L RNase于
37℃烘箱 中消化 RNA 2 h，于 4℃冰箱中放置 1 d，
而后保存于一20℃备用 。
表 1 红豆杉属植物材料的来源及凭证标本信息
Table 1 Origin and voucher information of Taxus samples used in present study
1．2．2 DNA的检 测方法 分别采用紫外分光光度
计法、琼脂糖凝胶电泳法 ，检测所得 DNA的得率和
质量；同时对核基因组 ITS序列和叶绿体的 trnL F
片段，进行 PCR扩增反应进一步检测所得 DNA的
质量。
(1)紫外分光光度计检测 ：提取的总 DNA用美
国 Beckman公司的 DU Series 600分光光度计进行
定量检测。取 4 L DNA样品置于比色皿中加 2
mI ddH2O，测 DNA溶液在 260、280 nm处 的光吸
收值，记录 A姗、A。 。及其比值(A姗／A蛳)，并参考
陈莉等(2007)的方法计算总 DNA得率。
(2)电泳检 测：取 5 I 总 DNA 与 l L 6 x
Loading Buffer f昆匀 。用 0．8％的琼脂糖凝胶 (含
0．5~g／mL EB)电泳检测 。而后用美 国 BIO—RAD
公司生产的 Gel Doc 2000凝胶成像系统检测和照
相。电泳缓冲液用 1×TAE溶液(40 mrnol／L Tris
Base，20 mmol／L Acetic acid，2 mmol／L EDTA)，
电压 5 V／cm。
(3)总 DNA 的 PCR扩增 ：以 ITS和 trnL—F为
目的片断进行 PCR扩增 ，ITS引物使用 White等
(1990)设计 的通 用引物 ITS4和 ITS5。trnI 一F片
段使用通用引物 trn c和 trn—f(Taberlet等，l991)
进行 PCR扩增 。① ITS的 PCR扩增 ：采用 25 L
反应体系rl6．3 7r5 I ddH2O、2．5 L 10xBuffer、2
L dNTP(2．5 tlmol／L)、0．75肚L Primer(10 mol／
L)、1．5 “I DMSO、0．125 uI Taq Polymerase(5
U／uL)和 1 L DNA)。反应程序为：94℃预变性 4
min，94_C变性 l min，50。C退火 1 min 30 S，72℃延
伸 2 min，34循环 ，72℃延伸 10 min。②trnL—F的
PCR 扩 增 ：采 用 25 L 反 应 体 系 [1 7．625／zL
ddH2O、2．5 L 10×Buffer、2 I dNTP(2．5 mol／
L)、0．75 uL Primer(10 umol／L)、0．25 uL BSA(×
100)、0．125 L Taq Polymerase(5 U／UI )和 1 L
DNA]。反应程序为：94 IC预变性 4 min，94。C变性
1 min，50。C退火 1 min 30 S，72。C延伸 2 min，3O循
环，72_C延伸 10 min。扩增产物用 1．oH的琼脂糖
2期 刘杰等 ：红豆杉属植物三种不同总 DNA提取方法的分析比较 247
凝胶(含 0．5／,g／mL EB)电泳检测并照相。
2 结果与分析
2．1总 DNA的光吸收比值和 DNA得率
通常将光吸收比值作为衡量总 DNA纯度 的一
个重要指标 。在三种不同的 DNA提取方法中，SDS
法所提取的总DNA的比值相对较低，介于 1．109～
1．919之问 ，A。。／A 。的平均值为 1．418，只有 K0、
FR和 SI 三个样 品的 A 。／A 。值近于 1．8。试 剂
盒法提取的总 DNA的 A 。／A 。值最高，为 1．963
～ 2．126，平 均 值 为 2．022。CTAB法 提 取 的 总
DNA的 A ／A瑚值为 1．639～1．868，平均值为
1．77l(表 2)。在总 DNA 的得率方面 ，SDS法 和试
表 2 三种不同植物总 DNA提取方法所得结果的比较
Table 2 Comparison of parameters of total DNA isolated by three different methods
样晶编码
Code
SDS法 试剂盒法 CTAB法
吸光值比值 总 DNA得率
Az60／A2so ( g)
吸光值比值 总 DNA得率
A2so／A28o ( g)
吸光值比值 总 DNA得率
A26o／A280 (gg)
23．00
30．00
l4．75
9．125
56．25
77．15
4．500
3．250
10．75
3．125
2．086
2．015
1．963
1．987
1．986
2．O54
1．973
2．126
1．988
2．046
2．022(0．053)
1．781
1．682
1．797
1．767
1．8l4
1．791
1．694
1．877
1．639
1．868
1．771(0．078)
78．7 5
26．25
57．00
47．25
69．00
54．25
28．00
55．25
12．25
44．5
47．25(2O)
图 1 三种不同提取方法所得总 DNA的
琼脂糖凝胶电泳检测结果
Fig．1 Agarose eIectroDhoresis results of Iotal DNA
yielded with three different methods
A：SDS法 ；B：试剂盒法 ；C：CTAB法 ；
样品代码同表 1；M ：Markers(XDNA／HindⅢ)。下 同。
剂盒法比较接近，总 DNA的平均得率分别为 23．19
g和 24．15／ag，而 CTAB法 的总 DNA得率较 高，
平均值为 47．25 tg(表 2)。
2．2总 DNA电泳检测结果
三种方法所提取总 DNA的琼脂糖凝胶 电泳检
测结果如图 1所示 。图 1结果表 明，不同种类 和不
同来源 的样 品其总 DNA得率存在一定差异 ；FR和
SL在三种 不 同的 提取方 法 中均 能得 到较多 的 总
DNA，而 DQ、PK和 K0提取的总 DNA量贝0较少 。
在三种不同的总 DNA 提取方法 中，SDS法提取 的
总 DNA效果最差 ，只有 FR和 SL两个样品具有 明
显的总 DNA带，而其 它样品无清晰的总 DNA带 ，
表明所提取 的总 DNA量较少。试剂盒法和 CTAB
法所提取的总 DNA质量较高 ，每个样品都有清 晰
的总 DNA带 ，并且部分样 品(如 NE、FR和 SL)的
带较亮 。CTAB法电泳检测的结果和分光光度计法
检测的结果一致 。
2．3 PCR扩增结果
将三种不同提取方法得到的总DNA稀释为相同
或相近浓度 (20～30 ng／／~I )用于 PCR扩增。叶绿体
trnDF片段和核糖体 ITS的 PCR扩增结果见图 2。
叶绿体 trnL—F片段 的 PCR扩增结果表 明，用
SDS法提取的样品中，只有 KO、DQ、FR、SL、HS五
个样品得到 了扩增产物 ，且 HS和 KO 的扩增条带
)
I
O O O 5 O 5 O O 5 5 1
O O O 2 O 2 O 5 2 2 (
． 。 ． ． _ - ． ． ． ．
5
6 7 6 1 7 6 9 7 7 4 1
1 l 2 4 3 i 3 ．
2
7 9 5 O O 9 0 5 5 1 s3 船 n
1 1 1 ； i 1L
№
M

2期 刘杰等 ：红豆杉属植物三种不同总 DNA提取方法的分析 比较 249
PCR反应影 响不大 ，可 以得到 较理想 的扩增 产 物
(图 2：C)。以上分析结果表 明总 DNA 的纯度是衡
量 DNA质量的一项重要指标，是影 响下游 PCR扩
增反应成败的关键因素之一(Xin等 ，2003)。
DNA得率是衡量 DNA 提取方法优 劣的重要
参数之一 。本文所用的三种植物总 DNA提取方法
中．CTAB法的得率最高 ，每 20 mg植物材料获得 的
总 DNA为 12．25～78．75 g，平均为 47．25 g，约为
SDS法(23．19)和试剂盒法 (24．15)得率 的 2倍 (表
2)。虽然根据光吸收值得出的SDS法与试剂盒法的
得率相近 ，但琼脂糖凝 胶检测结 果 中，SDS法 只有
FR和 SL两个样 品有明显的总 DNA条带 ，其 它样
品则很 弱或无 DNA条带 ，与总 DNA 的得 率不一
致 。而试剂盒法提取的总 DNA条带 的亮度差异较
大 ，但条 带 的亮 度基本 上与 DNA 的得 率成正 比。
用 CTAB法提取的总 DNA都 有明显 的条带 ，且条
带的亮度与得率成正 比(图 1)。本文总 DNA的得
率是根据 DNA在 A 。的光 吸收值计算而来 ，如果
总 DNA 中含有 较多 的杂 质会 影 响 DNA 分 子 在
A： 。的光吸收值，导致依此计算出的DNA得率不准
确，从琼脂糖凝胶检测的结果证 实了这一点 。也就
是说如果总DNA的光吸收比值(A 。／A。 。)远低于
1．8，仅根据在 A。。的光吸收值得出的总 DNA得率
并不可靠。总 DNA纯度越高(A。 。／A。。值在 1．7～
1．9之间)，根据 A 。的光吸收值得 出的总 DNA得
率越可信，反之不能真实反应 DNA浓度 (得率 )，还
需用其它方法 ，如凝胶电脉等做进一步检测 。
植物总 DNA得率与植物种类或来源存在一定
的关系，不同物种的DNA得率也有一定的差异，如
须弥红豆杉比密叶红豆杉的得率要高(图 1，表 2)。
但是影响总 DNA得率的主要因素是植物叶片材料
所保存时间(在硅胶干燥保存 的条件下)；保存的时
问越长 ，DNA降解的越严重 ，得率越低 ，保存 的时间
越短，总DNA的得率越高。如在三种提取方法中
DNA得率都很高的样品 FR和 SL的保存时间最
短 ，得率较低 的样 品 PK、KO和 DQ保存 的时 间则
较长。结果表 明，用硅胶干燥的植 物叶片材料在一
年内均能 获得较 好 的 总 DNA，如 果超 过两 年 ，总
DNA的得率会明显减少 ，用硅胶干燥的植物材料最
好不要超过二年为宜。
试剂盒法提取 DNA操作简单 ，快速 ，得到的总
DNA纯度较高，可以直接用于下游的PCR反应，但
成本较 SDS法 和 CTAB法 高 很 多 (以 QIAGEN
Plant Kit为例)。SDS法与 CTAB法的成本较低 ，
但较为费时 ；SDS法 的得率 和纯度都 较低，所得 总
DNA不能满足下游的 PCR反应，而 CTAB法的得
率和纯度均较高，能够直接用于下游的 PCR反应。
从成本 的角度看 ，CTAB法是一种较为经济的植 物
总 DNA 的提取方法 ，尤 其适用于经 费有限 、DNA
提取量大的群体遗传学研究。
通过本文的研究得出以下结论 ：(1)CTAB法和
试剂盒法均能得到较高质量的总 DNA，从成本的角
度考虑，CTAB法是一较 为理想 的选择。(2)总
DNA 的纯度与 PCR反应 的扩增结果 密切相关 ，高
纯度的 DNA 是 PCR 反应 成功 与否 的关键 因 素。
(3)利用光 吸收值计算总 DNA 的得率 (或浓度)要
小心 ，纯度 高的总 DNA得 到 的结果 才可信 ，如果
DNA纯度较低(光吸收值远低于 1．7)，得 出的结果
不能真实反应 DNA真实 的浓度 ，还应结合凝胶检
测或其它方法进行检测。(4)植物叶片保存的年限
(用硅胶 干燥 的材料)直 接影 响植 物 总 DNA 的得
率，保存一年内的材料(保存状态良好)均能获得较
高得率的 DNA，保存 的材料一般不要超过 二年为
佳 ，最好的方法是保 存总 DNA。(5)植物材料采集
后应快速干燥，使保存材料处于良好的保存状态，避
免高温和挤压等因素的影响导致材料褐化。(6)植
物总 DNA 的纯度与提取方法有关 ，而与 DNA的得
率和实验材料年限关系不大 。
致谢 感谢 实验室 Amin Shah博 士，张雪梅博
士提供部分实验材料 并在 实验 中给予帮助 ；杨俊 波
先生、李洪涛博士、卢金梅博士、冯邦同学等在实验
及文章写作 中给予指导和帮助。
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(下转第 159页 Continue on page 159)
2期 农东新等：广西翠柏属(柏科)植物小志 159
的也应该是岩生翠柏。
岩生翠柏生长 于石灰岩 山顶 、山脊或陡峭的悬
崖边 ，与其伴生的有华南五针松 (Pinus kwangtun—
gensis)、短 叶黄杉 (Pseudotsuga brevifolia)、圆果
化 香 (Platycarya longipes)、清 香 木 (Pistacia
weinmannifolia)、青 冈(C cf1)6n z口 0户s s glauca)、
岩樟(Cinnamomum saxatile)等，从岩 生翠 柏在越
南和广西的现存分布点来看 ，该种植物以前可 能在
广西的西南部、西北部和北部的石灰岩地 区广泛分
布 ，后来 由于人类活动对石灰岩植被的破坏 ，以及岩
生翠柏因材质优 良而遭到大肆砍伐 ，从 而形成 目前
的残存局面。根据刘演等 (2002)对翠柏 (实为岩生
翠柏)的野外资源调查数据和笔者近年来的野外调
查数据，按照 IUCN(2001)的评估标 准，岩生翠柏在
广西被定为濒危等级(EN)，需加强保护。岩生翠柏
目前零星分布 ，数量较少 ，受到的威胁较 大，只在环
江县分布的居群较集中，个体数量较多(刘演等估算
有 2 100多株)，而且居群在木论国家级 自然保护区
内，因此得到了较好的保护。另外在乐业县的分布
点位于雅长兰科植物 国家级 自然保护 区内，也得到
了较好的保护。岩生翠柏的发现对翠柏属的系统学
研究和中越石灰岩植物区系的研究 ，以及翠柏属植
物的保护都有着重要的科学意义。
致谢 广西植物研 究所刘演研究员提供岩生翠
(上接第 249页 Continue from page 249)
12：l3一
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柏野外调查数据，中央研究院生物多样性研究中心彭
镜毅博士、古训铭硕士，靖西林业局陆仕念工程师，广
西植物研究所盘波、叶晓霞、吴磊参加野外工作，朱运
喜先生制作 图版，在此谨致诚挚谢意。
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