全 文 :中国生态农业学报 2011年 3月 第 19卷 第 2期
Chinese Journal of Eco-Agriculture, March 2011, 19(2): 276279
* 河南省烟草专卖局科技攻关项目(HYKJ200718, HYKJ200804)资助
** 通讯作者: 许自成(1964~), 男, 博士, 教授, 研究方向为烟草品质生态、烟草营养与烟叶质量评价。E-mail: zcxu@sohu.com
马松(1986~), 男, 在读硕士, 主要从事烟草营养与烟叶质量评价。E-mail: masong5890@163.com
收稿日期: 2010-07-26 接受日期: 2010-10-29
DOI: 10.3724/SP.J.1011.2011.00276
施用控释复合肥对烤烟叶片抗氧化系统的影响*
马 松 1 许自成 1** 苏永士 2 陈彦春 2 汪孝国 2 李志刚 1 张 楠 1
(1. 河南农业大学烟草学院 郑州 450002; 2. 河南省烟草公司三门峡市公司 三门峡 472000)
摘 要 采用盆栽试验研究了控释复合肥对烤烟叶片抗氧化系统的影响, 结果表明: 与不施肥对照相比, 施
用普通复合肥和控释复合肥均能显著提高烤烟叶片的叶绿素、类胡萝卜素(50~65 d)、抗坏血酸(AsA)含量和超
氧化物歧化酶(SOD)活性(35~65 d), 降低类胡萝卜素(80 d)、丙二醛(MDA)含量和超氧阴离子自由基( 2O )产生
速率; 同时也一定程度提高过氧化物酶(POD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量; 控释复合肥与普通复合肥相
比, 对烤烟叶片生理特性的影响效果更明显。
关键词 控释复合肥 烤烟叶片 抗氧化系统
中图分类号: S572 文献标识码: A 文章编号: 1671-3990(2011)02-0276-04
Impact of controlled-release compound fertilizer on flue-cured
tobacco leaf antioxidant system
MA Song1, XU Zi-Cheng1, SU Yong-Shi2, CHEN Yan-Chun2, WANG Xiao-Guo2, LI Zhi-Gang1, ZHANG Nan1
(1. College of Tobacco Science, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;
2. Company of Sanmenxia City, Henan Provincial Tobacco Company, Sanmenxia 472000, China)
Abstract Pot experiments were conducted to study the effects of controlled-release compound fertilizer on antioxidant system of
flue-cured tobacco leaves. Comparing with no fertilizer application, results indicated that ordinary compound fertilizer and con-
trolled-release compound fertilizer greatly improved the contents of chlorophyll, carotenoids (50~65 days after transplant) and asor-
bic acid (AsA), as well as superoxide dismutase (SOD) activity (35~65 days after transplant). This significantly reduced the contents
of carotenoids (80 days after transplant) and malondialdehyde (MDA), as well as the production rate of superoxide ( 2O
) anion free
radicals. Meanwhile, peroxidase (POD) activity and glutathione (GSH) content improved to some extent. Controlled-release com-
pound fertilizer had greater influence on the physiological properties of flue-cured tobacco leaves than ordinary compound fertilizer.
Key words Controlled-release compound fertilizer, Flue-cured tobacco leaf, Antioxidative system
(Received July 26, 2010; accepted Oct. 29, 2010)
由于受外在包膜限制, 控释肥的养分释放速率
较慢, 明显低于普通化肥的养分释放速率, 而且其
持续供肥能力更强。专用控释肥的养分释放速率能够
与作物需肥规律同步, 促进作物对营养物质的吸收,
提高肥料的利用率[14]。而且, 养分释放结束后残留在
土壤中的包膜能降低土壤容重, 增加孔隙度, 从而使
土壤疏松, 增加通气透水性, 土壤结构得到改善[5]。因
此, 控释肥在促进植物正常生长、改善土壤理化性质,
提高作物的产量和品质方面具有显著的效果。目前,
控释肥应用于烟草的研究已有相关报道, 研究表明控
释肥既能适时满足烤烟对养分的需要, 又可以使成熟
期烟田近根区土壤速效钾出现富集, 从而促进烟株对
钾元素的吸收; 与普通钾肥处理相比, 控释肥处理的
烟叶钾含量得到显著提高, 烟叶产量提高[67]。
多数研究主要集中在控释肥可使烟叶增产、增
钾、节肥等方面, 而有关控释复合肥对烟叶生理特
性的研究却鲜见报道。本研究根据监测施用控释复
合肥后烤烟叶片光合色素和抗氧化能力的变化, 分
析控释复合肥对烤烟叶片抗氧化系统的影响, 以期
为控释肥的合理施用提供理论依据。
第 2期 马 松等: 施用控释复合肥对烤烟叶片抗氧化系统的影响 277
1 材料与方法
1.1 试验地点
试验地点为河南省洛阳市河南科技大学实验
园。土壤类型为褐土, 土壤有机质为 20.2 g·kg1, 碱
解氮为 64.3 mg·kg1, 速效磷为 17.5 mg·kg1, 速
效钾为 159.5 mg·kg1, pH 为 7.21, 阳离子交换量
(CEC)为 18.4 cmol·kg1。
1.2 供试材料
供试烤烟品种为“K326”。试验采用内径 40 cm、
高 35 cm的塑料盆, 每盆装土 20.0 kg。供试控释肥为瑞
士金霖公司生产的有机包膜控释复合肥(N︰P2O5︰
K2O = 2︰ 8 ︰20), 控释期为 90 d; 普通复合肥为烟草专
用复合肥(N ︰ P2O5 ︰ K2O =15︰ 15︰15); 磷、钾肥分
别为重过磷酸钙(P2O5≥43%)和硫酸钾(K2O≥50%)。
1.3 试验处理与实施
试验共设 3个处理, 每个处理 20盆, 共 60盆。
各处理分别为: T1, 不施肥; T2, 每盆施普通复合肥
(N︰P2O5︰ K2O=5 ︰5︰ 15) 33.3 g, 含 5 g纯氮, 所
缺钾肥用硫酸钾补充; T3, 每盆施控释复合肥(N ︰
P2O5︰ K2O =5︰ 5 ︰ 15)41.7 g, 含 5 g纯氮, 所缺
磷、钾肥分别用重过磷酸钙和硫酸钾补充。肥料与
土拌匀后一次性施入。烟苗取自洛阳市农业科学研
究院育苗大棚中长势健壮一致的幼苗, 并于 2009年
5月 4日移栽入试验盆。
1.4 项目测定及数据分析
于烤烟移栽后 35 d、50 d、65 d、80 d上午 9:00
取各处理健壮烟株的第 6 片叶片, 每处理各取 3 片
叶 , 在田间将鲜样置于冰盒中 , 及时带到实验室 ,
用冰水洗净, 再用已冷却的蒸馏水漂洗干净, 吸水
纸擦干, 立即进行生理指标测定, 3次重复。
叶绿体色素含量采用 95%乙醇萃取法测定; 丙
二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法测定 [8]; 超氧
化物歧化酶(SOD)活性采用氮蓝四唑还原法测定 [9];
过氧化物酶(POD)活性采用愈创木酚法测定 [8]; 超
氧阴离子自由基( 2O )产生速率采用李合生等[10]的方
法; 抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量参
照张宗申等[11]的方法测定。
各处理间的差异显著性检验采用 SPSS 17.0 统
计软件进行分析。
2 结果与分析
2.1 不同施肥处理对烤烟色素含量的影响
研究结果表明(表 1), 各处理叶绿素含量呈“降
升降”的变化趋势, 造成这种现象的原因可能是: 移栽
后 50 d, 烤烟进入生长旺盛期, 叶片干物质合成速率大
于叶绿素生成速率, 造成稀释效应而引起叶绿素含量
下降; 65 d时, 叶片干物质合成速率低于叶绿素合成速
率, 叶绿素含量有所上升; 至 80 d时, 烤烟进入衰老期,
叶绿素合成减少, 叶绿素含量再次降低。不同施肥处理
对烤烟叶片叶绿素含量影响显著, 普通复合肥处理(T2)
与控释复合肥处理(T3)的叶绿素含量均高于不施肥处
理(T1), 且在 50~80 d 差异达显著水平;T3 的叶绿素
含量均高于 T2, 且在 35~50 d 差异达显著水平。说明
35~50 d 时控释肥养分释放速率加快, 达到养分释放高
峰, 与普通复合肥相比, 控释复合肥更能够满足烟株生
长中后期对养分的大量需求, 从而形成叶绿素的大量
合成。这表明烤烟叶绿素合成与肥料的养分供应能力有
关, 这与赵平等[12]、王军等[13]的研究结果相一致。
表 1 不同施肥处理对烤烟叶片叶绿素和类胡萝卜素含量的影响
Tab.1 Effects of different fertilization treatments on contents of chlorophyll and carotenoid in flue-cured tobacco leaves
mg·g1(FW)
移栽后天数 Days after transplanting (d) 施肥处理
Fertilization treatment
指标
Index 35 50 65 80
叶绿素 Chlorophyll 0.92 ± 0.04b 0.38 ± 0.02c 1.80 ± 0.08b 1.08 ± 0.02b 不施肥
No fertilizert (T1) 类胡萝卜素 Carotenoid 0.25 ± 0.02ab 0.17 ± 0.01b 0.26 ± 0.01b 0.43 ± 0.01a
叶绿素 Chlorophyll 0.97 ± 0.12b 0.57 ± 0.11b 1.94 ± 0.05a 1.46 ± 0.10a 施普通复合肥
Ordinary compound fertilizer (T2) 类胡萝卜素 Carotenoid 0.22 ± 0.02b 0.18 ± 0.05b 0.36 ± 0.03a 0.41 ± 0.01ab
叶绿素 Chlorophyll 1.20 ± 0.13a 0.72 ± 0.04a 1.98 ± 0.01a 1.58 ± 0.15a 控释复合肥
Controlled-release compound fertilizer (T3) 类胡萝卜素 Carotenoid 0.29 ± 0.03a 0.28 ± 0.01a 0.35 ± 0.02a 0.39 ± 0.02b
同列相同指标的不同小写字母表示不同处理间差异显著(P<0.05) Different small letters of the same index in the same column indicate signifi-
cant difference among different treatments (P<0.05).
在烟叶整个生育期内, 类胡萝卜素含量于移栽后
50 d时有所降低, 之后呈升高趋势。T3在 35~65 d时
的类胡萝卜素含量均高于T1, 并在 50 d和 65 d时差异
达显著水平; T2在 50~65 d时的类胡萝卜素含量高于
T1, 并在 65 d时差异显著; 但 80 d时, T1的类胡萝卜
素含量高于 T2、T3, 且与 T3 之间存在显著性差异。
与 T2相比, T3能显著提高烤烟 35~50 d时的类胡萝卜
素含量。80 d时, T2和 T3的类胡萝卜素含量低于 T1,
表明合理施肥能提高烤烟的耐熟性。因此, 与普通复
合肥相比, 控释复合肥能显著提高烤烟 35~50 d 时的
类胡萝卜素含量, 且成熟期的耐熟性更强。
2.2 不同施肥处理对烤烟叶片细胞膜质过氧化作
用的影响
2.2.1 超氧阴离子自由基( 2O )产生速率
从图 1A 可知, 2O 产生速率在烤烟整个生育期
内一直持续增长。移栽后 80 d, 随着烤烟的成熟和
278 中国生态农业学报 2011 第 19卷
处理天数 Treatment days (d)
图 1 不同施肥处理对烤烟叶片 .2O 产生速率(A)和 MDA(B)、GSH(E)、AsA(F)含量及 SOD(C)、POD(D)活性的影响
Fig. 1 Effects of different fertilization treatments on production rate of 2O
(A), contents of MDA (B), GSH (E), AsA (F) and
activities of SOD (C) and POD (D) in flue-cured tobacco leaves
同时间不同小写字母表示处理间差异显著(P<0.05) Different small letters in the same time indicate significant difference among treatments (P<0.05).
衰老, 2O 急剧增长, 与 65 d相比, T1、T2、T3处理
分别增加 2.53倍、1.52倍和 0.75倍。整个生育期内,
施肥处理(T2、T3)的 2O 产生速率均明显低于不施肥
处理(T1)。其中, T3与 T1间差异在整个生育期均达
到显著水平, T2在 35 d和 80 d时与 T1差异显著。T3
处理整个生育期的 2O 产生速率显著低于 T2处理。
2.2.2 丙二醛(MDA)含量
由图 1B可知, 烤烟叶片的 MDA含量在移栽后
50 d有所下降, 而后呈不断上升趋势, 且以 65~80 d
上升最为明显, 可能与烟草细胞逐渐进入成熟和衰
老后对逆境抵抗力逐渐下降有关。整个生育期内 ,
施肥处理(T2、T3)的 MDA含量均明显低于不施肥处
理(T1), 其中, T3 与 T1 在整个生育期差异显著, T2
在 35~50 d时与 T1间差异显著。
2.3 不同施肥处理对烤烟活性氧清除系统的影响
2.3.1 超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化物酶(POD)
活性
图 1C表明, 随着生育期的延长, 各处理烤烟叶
片的 SOD活性逐渐增加。35~65 d时, 施肥处理(T2、
T3)的 SOD活性均明显高于不施肥处理(T1), 但 80 d
时, T1的 SOD活性却显著高于 T2和 T3。T3在 50~65
d时的 SOD活性均显著高于 T2, 但 T3在 80 d时的
SOD活性显著低于T2。与 65 d的 SOD活性相比, T1、
T2、T3处理在 80 d时的 SOD活性分别增加 48.67%、
39.91%和 13.07%,原因可能是随烟叶逐渐成熟和衰
老, 叶片 2O 增加[14], 且 80 d 时 2O 产生速率达到高
峰, 此时烟叶细胞中自由基的生成能力超出 SOD清
除自由基的能力, 进而诱导叶片中 SOD 活性升高,
以抵御 2O 大量积累造成的氧胁迫。因此 , 此时的
SOD 活性越高, 代表其所受氧胁迫也较强。T3 的
SOD活性在 35~65 d显著高于 T2, 但在 80 d又显著
低于 T2。表明施肥能提高烤烟 35~65 d的 SOD活性,
降低烤烟叶片成熟 期所受到的氧胁迫, 延迟叶片衰
老, 而且控释复合肥的效果显著优于普通复合肥。
图 1D 表明, 在整个生育期内, 各施肥处理的
POD活性呈先升后降的趋势, 50 d达高峰。在 35 d时,
施肥处理(T2、T3)的 POD 活性显著低于不施肥处理
(T1); 50~80 d, 施肥处理(T2、T3)的 POD活性显著高
第 2期 马 松等: 施用控释复合肥对烤烟叶片抗氧化系统的影响 279
于不施肥处理(T1)。T3在 50 d和 80 d的 POD活性分
别比 T2高 11.05%和 20.39%, 而在 35 d和 65 d, 处理
之间相差不大。表明施肥能提高 50~80 d的 POD活性,
但在 35 d时 POD活性较低; 与普通复合肥相比, 控释
复合肥能显著提高烤烟叶片 80 d的 POD活性。
2.3.2 谷胱甘肽 GSH与抗坏血酸 AsA含量
研究结果表明(图 1E), 烤烟叶片 GSH 含量在
50~65 d有所降低, 之后有所升高。在 35~65 d, 施肥
处理(T2、T3)的GSH含量稍高于不施肥处理(T1), 各
处理间差异不显著; 80 d时, T1显著高于 T2、T3。
整个生育期内, GSH含量在T3与T2之间差异不显著。
由图 1F可知, AsA含量在烤烟整个生育期内呈
持续升高趋势, 其中以 50 d时最为明显; T1、T2、
T3在 50 d时的AsA含量比 35 d时分别增加 0.67倍、
1.78倍和 6.43倍; 且 T3增加幅度最大, T2次之, T1
最小。移栽后 35 d, T1的 AsA含量显著高于 T2和
T3; 50~80 d, T2、T3的 AsA含量却明显高于 T1。T3
在 35 d时的 AsA含量显著低于 T2, 但 50~80 d时明
显高于 T2, 且在 50 d和 65 d时差异显著。
3 结论与讨论
光合色素是影响植株叶片光合作用的内在因素
之一, 其含量变化直接影响植株的生长过程。本研
究表明, 烤烟施肥后, 移栽 50~80 d时的叶片叶绿素
含量和 50~65 d 时的类胡萝卜素含量均显著增加,
成熟期的类胡萝卜素含量显著降低, 两种肥料相比,
控释复合肥的效果显著优于普通复合肥。
植物体内 MDA 大量积累, 会造成膜透性增加,
细胞内物质外渗 , 电导率增大 , 细胞失去活力 , 迅
速衰老, 但由于细胞内存在一系列的抗氧化系统而
使这些活性氧得以清除[1516]。正常情况下, SOD、
POD、AsA-GSH 协同作用, 维持植物体内活性氧的
平衡, 限制潜在的氧伤害[17]。林植芳等[14]研究表明,
随着烤烟的成熟与衰老, 叶片中的 2O 会逐渐增加。
本试验研究结果与此一致, 烤烟叶片在自然衰老过
程中, 2O 的产生速率持续上升, 并在移栽后 65~80
d 上升幅度较大, MDA 含量也呈相似变化趋势。整
个生育期内, 不施肥处理的 2O 产生速率和 MDA 含
量明显高于施肥处理, 且与控释复合肥处理之间存
在显著性差异, 普通复合肥处理也明显高于控释复
合肥处理, 且在 50~80 d均达到显著水平。这表明烤
烟进入成熟期后, 膜质过氧化作用明显加强, 叶片
衰老加剧, 而施用肥料能显著降低烤烟叶片的 2O 产
生速率和MDA含量, 延迟衰老, 且控释肥的效果显
著优于普通复合肥。原因可能是施肥能显著提高烤
烟叶片的 SOD 活性(35~65 d)和 AsA 含量, 同时,
POD活性和 GSH含量也得到一定程度的提高。与普
通复合肥处理相比, 控释复合肥处理的 SOD 活性
(35~65 d)和AsA含量显著增加, 且 POD活性和GSH
含量也有一定提高。但普通复合肥处理 80 d时的 SOD
活性显著高于控释复合肥处理, 可能是因为此时普通
复合肥处理的 2O 产生速率高, 诱导叶片中 SOD 活性
升高, 以此来抵御 2O 大量积累造成的氧胁迫。
综上所述 , 控释复合肥能增加生育期叶片叶绿
素含量、提高清除活性氧的能力、延缓烤烟叶片衰
老、增加耐熟性; 同时, 也能明显提高成熟期叶片叶
绿素含量和降低类胡萝卜素含量, 这可能造成烤烟
难以正常成熟落黄, 基于此点仍需要进一步改进控
释肥的释放时期, 研究合适的控释复合肥用量。
参考文献
[1] 沙之敏, 边秀举, 艾文静, 等. 两种包膜尿素的氮释放特性及
对高羊茅生长的影响[J]. 北方园艺, 2009(8): 30–33
[2] 杨越超, 张民, 陈剑秋, 等. 聚合物硫包尿素的养分释放特征
[J]. 化肥工业, 2006, 33(1): 26–30
[3] 党建友, 杨峰, 屈会选, 等. 复合包裹控释肥对小麦生长发育
及土壤养分的影响 [J]. 中国生态农业学报 , 2008, 16(6):
1365–1370
[4] 焦晓光, 罗盛国, 刘元英. 施用控释尿素对大豆吸氮量及产量
的影响研究[J]. 中国生态农业学报, 2004, 12(3): 95–98
[5] 耿毓清, 张民, 段路路, 等. 控释肥残膜对土壤物理性质及油
菜生长效应的影响[J]. 水土保持学报, 2006, 20(4): 94–97
[6] 施卫省, 文锦芬, 唐辉, 等. 桐油控释复合肥配比性质及对烟
草吸钾特性影响的研究[J]. 昆明理工大学学报: 理工版, 2007,
32(2): 103–107
[7] 施卫省, 王亚民, 戈振扬, 等. 营养元素对烟草产量和品质的
影响与对策 [J]. 农业系统科学与综合研究 , 2003, 19(4):
310–312
[8] 张志良. 植物生理学实验指导[M]. 北京: 高等教育出版社,
1990: 88–91, 154–155
[9] 朱广廉, 钟海文, 张爱琴. 植物生理学实验[M]. 北京: 北京大
学出版社, 1990: 242–245
[10] 李合生, 孙群, 赵世杰, 等. 植物生理生化试验原理和技术
[M]. 北京: 高等教育出版社, 2000
[11] 张宗申, 利容千, 王建波. 外源 Ca2+预处理对高温胁迫下辣椒
叶片细胞膜透性和 GSH、AsA 含量及 Ca2+分布的影响[J]. 植
物生态学报, 2001, 25(2): 230–234
[12] 赵平, 林克惠, 郑毅. 氮钾营养对烟叶衰老过程中内源激素与
叶绿素含量的影响[J]. 植物营养与肥料学报 , 2005, 11(3):
379–384
[13] 王军, 詹振寿, 谢玉华, 等. 施用生物有机肥对烤烟生长发育
的影响[J]. 安徽农业科学, 2007, 35(11): 3278–3288, 3290
[14] 林植芳, 林桂珠, 李双顺, 等. 衰老叶片和叶绿体中超氧阴离
子和有机自由基浓度的变化[J]. 植物生理学报, 1988, 14(3):
238–243
[15] 袁琳, 克热木·伊力, 张利权. NaCl 胁迫对阿月浑子实生苗活
性氧代谢与细胞膜稳定性的影响[J]. 植物生态学报 , 2005,
29(6): 985–991
[16] 齐英杰, 陈为峰, 张民, 等. 控释氮肥与多效唑互作对运动场
草坪草抗寒性生理指标的影响[J]. 中国草地学报, 2009, 31(4):
111–115
[17] 龚明, 丁念诚, 贺子义, 等. 盐胁迫下大麦和小麦叶片脂质过
氧化伤害与超微结构变化的关系[J]. 植物学报, 1989, 31(11):
841–846