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.
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知侧只与决受验
气相色谱 一质谱联用法测定红树科植物
木榄叶中脂肪酸
范润珍 , 林宏图 , 宋文东 , 郝晓敏
(广东海洋大学 理学院 , 湛江 5 240 2 5)
中图分类号 : 0 65 7 . 63 文献标志码 : B 文章编号 : 10 0 1一 4 0 20 ( 20 0 9 ) 12一 14 48一 0 3
木榄属红树科红树植物 , 生长于热带 、亚热带海
岸潮间带的特殊环境中 , 是非常宝贵的海洋生物资
源 ,主要分布于非洲大陆 、东南亚 、美洲 的加勒比等
地区的海岸线沿岸 。 在我 国主要分布于海南 、香港 、
广东 、广西 、 台湾 、福建等地 。
木榄是一种广布型红树科植物 ,具有多种药理
功效 , 民间常用于治疗发烧 、腹泻 、止血 、消除咽喉肿
痛及对抗疟原虫等疾病 。 红树科植物的药物作用与
其所含物质成分相关 , 此方面的研究 国外涉及较
早叶 4〕 。 随着海洋药物的研究与开发 ,对红树科植物
物质成分的研究倍受关注 ,物质成分的探讨 ,成为深
人了解其药用功能开发其药用价值的首要工作 。 近
些年 , 国内学者在该领域的研究报道不断增多 , 主要
涉及由红树科植物体的根 、茎 、叶等不同组织部位所
得成分和内生真菌的生物活性研究 。 就木榄的研究
而言 ,如对产于广西红树科植物木榄的茎叶中发现
了一个全新骨架结构新颖的多聚二硫大环化合物-
木榄六硫醇 ,体外生物活性筛选结果显示其对 n 型
糖尿病靶标分子人蛋白酪氨酸磷酸醋酶 ( h P T IP B)
具有显著的抑制作用〔5一 l0] 。
目前的报道 , 涉及到物质类型及其生物活性的
相关性比较零散 , 缺乏系统性 。 为了全面系统地了
解红树木榄的物质成分特征及其药用特性 , 根据物
质类型与生物活性的相关特征 , 对红树木榄所含物
质成分按不同物质类型如挥发性成分 、氨基酸 、脂肪
酸 、微量元素等进行了系列研究 。 本工作以气相色
谱一质谱联用技术分离 、 鉴定 ,考察红树科植物木榄
叶中的脂肪酸组成特征 , 以期为红树木榄更广谱的
生物活性探讨提供依据 。
收稿日期 : 20 0 8一 1 0一1 2
基金项目 : 湛江市科技招标项目 ( 0 7 0 9 1 9 1湛科 [ 2 0 0 7〕 11 3 号 ) ,
广东海洋大学科技项目 ( 0 8 1 2 1 1 8校科技 [ 2 0 0 5〕z 号 ) 。
144 8
·
1 试验部分
1
.
1 仪器与试剂
Q P 2 01 O 气相色谱 一质谱联用仪 , 旋转蒸发器
R -E 5 2G S H子D ( 1 ) 。
试剂均为分析纯 ,试验用水为二次蒸馏水 。
1
.
2 气相色谱一质谱分析条件
气相色谱条件 : 1〕件 SM S 石英弹性毛 细管柱
( 3 0 m X O
.
2 5 m m
, 0
.
2 5 拌m ) , 氦气为载气 , 流量为
1 m L
·
m i
n 一 , ;程序升温 :柱初温 s o oC ,恒温 2 m in ,
先以 4 ℃ · m i n 一 , 升温速率 升至 180 ℃ , 再 以
10 ℃ · m in 一 `升温速率升至 25 0 ℃ 。
质谱条件 : 电子轰击离子源 , 电子能量 70 e V ,
进样口温度 27 0 ℃ ,离子源温度 23 0 ℃ , 四极杆温度
1 5 0 0C
, 扫描质量范围 2 0一 5 0 0 a m u 。
分流进样 , 分流 比 70 比 1 ,进样量 1 拼oL
1
.
3 试验方法
木榄叶采于广东湛江特呈岛红树林区 ,采集后 ,
洗净 ,置阴凉通风处凉干 ,粉碎备用 。 称取已制备好
的木榄叶 10 0 . 0 9 ,用滤纸包好 ,置索氏提取器中 ,加
人石油醚 30 m I J , 65 ℃ 恒温水浴加热 回流提取
s h
,提取 3 次 ,合并提取液 ,然后按文献「1 1〕方法进
行处理 ,所得浓缩液按气相色谱一质谱条件分析 。
2 结果与讨论
2
.
1 木榄叶中脂肪酸的气相色谱一质谱分析总离子
流图
按气相色谱一质谱条件 ,对木榄叶脂肪酸提取液
进行气相色谱 -质谱分离检测 ,得到 2 个物质峰 ,其
总离子流图 ( T I C )如图 1 。
图 1显示 , 由木榄叶中得到的 2 个脂肪酸在上
述 气相色谱一质谱条件下得到了较好的分离 ,每种物
攫 ~
-
~范润珍等
: 气相色潜质谱联用法测定红树科植物木榄叶中脂肪酸
l 。1 7’之甲2 ,
2.!
J川翎卜卜一卿私溉 ; }』
7 3 10
.
0 12万 15刀 17 5 2 0 . 0 2 2 5 2 5刀 2 7 . 5 3 0 0 32巧
图 1 木榄叶脂肪酸甲酷总离子流图
T CI
e hr o m a t og
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e t h y l e
s t e r s of af t t y a e id s in lae v e s o f B翔 g 。泛翻 g y 阴” O法艺二
质的色谱峰尖而窄 ,且峰形完整 ,这为进一步的物质
鉴定和结果的准确性提供了保证 。
2
.
2 木榄叶中的脂肪酸成分
利用仪器工作站的数据分析系统功能 ,对总离
子流图 1进行数据分析 ,得到图 1 中 2 个物质峰对
应的质谱图 ,经过质谱数据系统检索 (N IS T 谱库 ) ,
并分析各色谱峰的质谱裂片特征 ,分别对各色谱峰
加以确认 ,从而鉴定出了其中的 13 种脂肪酸 ,并采
用峰面积归一化法测定其相对含量 ,其结果见表 1 。
由表 1 可知 , 由木榄叶脂肪酸提取物中鉴定出
了 13 种脂肪酸 ,被鉴定脂肪酸占所检测组分总量的
81
.
51 %
,在被鉴定的 13 种脂肪酸中 ,不饱和脂肪酸
5种 , 占 37 . 03 % ,饱和脂肪酸 8 种 , 占 62 . 97 % 。 不
饱和脂肪酸主要有十八三烯酸 (亚麻酸 , 6 . 87 % ) 、 9 ,
1 2
一十八二烯酸 (亚油酸 , 6 . 93 % ) 、 9一十八烯酸 (油
酸 , 6 . 9 4 % ) 、 15一甲基一 1 1一十六烯酸 ( 4 . 6 3% ) 、 2 , 4一二
甲氧基肉桂酸 ( 4 . 81 % ) ;饱和脂肪酸有十四酸 、 12 -
甲基一十四酸 、十五酸 、 十六酸 (棕桐酸 ) 、十七酸 、十
八酸 、二十酸和二十二酸 , 其中棕桐酸含量最高为
2 6
.
7 6写。
多不饱和脂肪酸在人体内不能直接合成 ,必须
由食物供给 ,是人体重要的必需脂肪酸 ,对人体具有
多种生理活性 。 如亚麻酸对人体的新陈代谢具有重
要作用 ,对心脑血管患者及高血脂病的防治和治疗
都有很好的效果 。 特别是在消退动脉粥样硬化和抗
血栓形成方面都有极好的疗效 lz[ ] 。 亚油酸具有抗
血栓 、降低血脂及胆固醇 ,促进大脑发育 , 改善及保
护血管壁 , 防止动脉粥样硬化的作用 13[ 〕 , 它还具有
抗癌作用 ,能够抑制乳腺癌 、 胃癌 、 皮肤癌和前列腺
癌肿瘤细胞的增殖 l[’- le] 。
木榄叶中含有亚麻酸 、油酸 、 亚油酸等不饱和脂
肪酸 ,含量达 37 . 03 % , 尤其是所含的亚麻酸 , 是对
人体非常重要的多不饱和脂肪酸 , 因此可预见 ,木榄
作为宝贵的海洋生物资源 , 而且又是一种分布广泛
的红树植物种 ,作为海洋药用资源 ,应具有潜在开发
前景 。
表 1 木榄叶中脂肪酸分析结果
1油b . I A”日 l yL 1.郎 ul is of fa t ty a e id s in le a v e s o f B川gU i e ar g y m n o r侧 z a
序号 脂肪酸名称 保留时间
/而 n
分子式 ( 甲酷 ) 相对含量
如/ %
相似度
/%
l 0
1 l
l 2
13
2
,
4
一二甲氧基肉桂酸
十四酸 (肉豆寇酸 )
1 5
一甲基 ~ 1 1一十六烯
十五酸
9
,
12
,
15
一十八三烯酸 (亚麻酸 )
十六酸 (棕桐酸 )
g
,
12
一十八二烯酸 (亚油酸 )
9
一十八烯酸 (油酸 )
12
一甲基一十四酸
十七酸
十八酸 (硬脂酸 )
二十酸 (花生酸 )
二十二酸 (山俞酸 )
6
.
9 1 5
16
.
5 3 9
16
.
8 5 2
17
.
2 7 2
1 8
.
68 4
20
.
4 5 0
2 1
.
7 8 5
2 3
.
1 1 3
2 4
.
16 1
2 4
.
3 4 5
2 5
.
6 6 0
2 7
.
1 8 1
2 9
.
0 4 2
C i i H
1 2
O4
C
15 H 3 0 02
C l s H 3 4 02
1C
6 H 3: 恢
C 19 H 3 202
C i 7 H 3; O2
Q
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9玩8认
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4
.
8 1
1
.
3 8
4
.
6 3
1
.
2 5
6
,
8 7
2 6
.
7 6
6
.
9 3
6
.
9 4
1
.
2 0
6
.
9 7
6
.
8 1
4
.
7 1
2
.
2 5
8 6
9 6
9 7
8 8
9 1
9 4
92
96
8 9
9 5
8 7
8 6
9 3
14 4 9
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热 理招淤验一肥拿台册 范润珍等: 气相色谱褪贡谱联用法测定红树科植物木榄叶中脂肪酸
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149
一
15 7
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一卜. ~ 刁 ~ . 刊一 ~ 一卜 . 叫卜 ` ~ 卜一十 ” 一卜 . 叫卜一卜 . 刁一“ 刊卜 , 一卜 ” ~ 卜” 一卜 . 州卜一卜 . 叫卜 ” 刊卜 ` 刁一 ~ 刊卜一伞 ~ 一卜 . 刁一~ 牛 一卜一 弓卜 ~ 十 ~ -卜 ~ 刁一二 日卜 ~ 一卜 . 州卜 , 州卜 ~ 斗 一卜 , 刊卜一卜 一卜 一州卜 . 叫卜一卜 . 州卜一冲~ “ 州卜一卜
(上接第 1 4 4 7 页 )
素 、长期稳定 ,且对分析线来说有足够高的强度 , 以
保证测量的计数统计误差满足要求 。 为了制备符合
要求的仪器漂移校正样 ,通常采用玻璃熔融片 ,即将
所需元素熔在玻璃中 。 但溟很难在玻璃中形成较高
浓度 。 试验中采用惚的 K 。 线代替澳的 K 。 用于漂
移校正 。 一方面 ,银的原子序数和嗅的原子序数相
近 , 它们的 K 。 的波长也比较接近分别为 。 . 1 04 1 1 ,
0
.
08 7 6
n
m
。 另一方面 , 当氯化铭的质量分数为
1环时能很容易地熔人玻璃中 ,得到稳定的玻璃片 ,
且用铭靶 X 射线管测定时 , rS K 。 的荧光强度很高 。
2
.
3 样品分析
按试验方法对 3 个不同厂家生产的二澳海因产
品中澳的含量进行了测定 , 并与化学法分析结果进
行对比 ,本法的测定结果分别为 54 . 06 % , 53 . 9 % ,
5 4
.
8 7%
,
5 4
.
6 5%
,
54
.
9 5写 , 5 2 . 5 9% ;化学法的测定
结果分别为 5 3 . 9 1% , 5 3 . 9 2% , 5 4 . 6 9 % , 5 4 . 5 9% ,
54
.
98 %
,
52
.
80 写 。 结果表明 : X 射线荧光光谱检测
能满足生产要求 。
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