全 文 :文章编号:0490-6756(2002)0z-0028-03
油菜OguCMS 与诸葛菜属间杂种 F1的快速繁殖
邓运涛 , 吴俊 , 高辉 , 苟晓松 , 李旭锋*
(四川大学生命科学学院 ,成都 610064)
摘要:作者通过摸索建立了适宜于油菜 OguCMS 与诸葛菜属间杂种 F1 的快速繁殖方法.发现 MS
+6-BA 1.0mg/L +NAA 0.1mg/ L适宜于诱导丛芽 ,丛芽增殖系数高达 3.5;MS +NAA 0.1mg/L
适宜于诱导生根.
关键词:油菜 OguCMS;诸葛菜;快速繁殖
中图分类号:Q943 文献标识码:A
油菜萝卜胞质雄性不育系(OguCM S)与诸葛菜属间杂种 F1[ 1]是四川大学生命科学学院植物遗传研究室
以油菜OguCMS 作为母本 ,诸葛菜[ 2-3](Orychophragmus v iolaceus)作为父本 ,人工合成的属间远缘杂交种.
其目的是将诸葛菜的优良性状(低芥酸 ———0.94%;高亚油酸———53.17%)导入油菜中 ,以培育成新的油料
品种.但因由此获得的杂种苗较少 ,从而影响了对其进一步研究.我们通过摸索建立了适宜于油菜 OguCMS
与诸葛菜属间杂种 F1 的快速繁殖方法 ,培育出大量的苗 ,供进一步研究的需要.
1 材料和方法
选用四川大学生命科学学院植物遗传研究室培育的油菜 OguCMS 与诸葛菜属间杂种 F1 无菌苗作为试
材 ,将其切成长约 1cm 的枝段(含一个腋芽)接种到丛芽诱导培养基上 ,获得一定数量的丛芽后 ,再进一步做
各种激素对比实验 ,然后转入生根培养基中 ,待苗生根后 ,炼苗 4 ~ 5d ,再移栽入大田内培养.基本培养基为
MS培养基 ,各培养基中均加入有 0.8%的琼脂 、3%蔗糖(pH5.8).培养温度 21 ~ 25℃,光照强度 1500 ~
2000 lx ,每天光照 10h.
2 结果与讨论
2.1 6-BA 与 NAA配比对丛芽增殖的影响
将外植体接种到丛芽诱导培养基上 ,各培养基激素组合见表 1.培养 10d后 ,在第 10 ,11 号培养基上的
腋芽开始萌动 ,分化出小芽.培养 14d后 ,在第 7 , 8号培养基上的腋芽才开始分化出芽.而在第 1 , 2 ,3 ,4 ,5 ,
6 ,9和 12号培养基上的腋芽却不发生变化 ,直到培养 20d后 ,少数外植体上才开始分化出芽.培养 30d时 ,
由统计结果(见表 1)可看出 ,第 10号培养基中的外植体平均出芽 3.5个 ,每个外植体最多出芽 4个 ,最少 2
个;第 11号培养基中的外植体平均出芽 3.2个 ,每个外植体最多出芽 4个 ,最少 2个;7号培养基上的外植
体平均长 2.4个芽;8号培养基中的外植体平均长 2.2个芽;第 1 ,2 ,3 ,4 , 5 , 6 , 9和 12号培养基上的外植体
平均长 1.3 , 1.2 , 1.2 , 1.6 ,1.8 ,1.6 ,1.6和 1.8个芽.由统计结果可看出 ,第 10 ,11号培养基中的激素配比对
于诱导丛芽是适宜的 ,尤以第 10号培养基中的激素配比效果最好.从表 1还可看出 ,6-BA 的浓度对丛芽增
殖差异影响显著[ 4] ;高浓度的 NAA 抑制丛芽增殖.观察发现从培养第 6d开始 ,各种培养基上均有很多外植
收稿日期:2002-02-09
*通讯联系作者
2002 年 4 月
第 39 卷增刊
四川大学学报(自然科学版)
Journal of Sichuan University(Natural Science Edition)
Apr.2002
Vol.39 Issue
体基部切口周边长出绿色愈伤组织.
表 1 6-BA与 NAA 配比对丛芽增殖的影响
培养基序号 激素组合(g/ L)
6-BA NAA 接种芽数(个) 30d 后出芽数(个) 增殖系数
1 0.1 0.1 20 25 1.3
2 0.1 0.2 20 24 1.2
3 0.1 0.5 20 24 1.2
4 0.2 0.1 25 39 1.6
5 0.2 0.2 30 55 1.8
6 0.2 0.5 20 31 1.6
7 0.5 0.1 20 49 2.4
8 0.5 0.2 30 65 2.2
9 0.5 0.5 30 49 1.6
10 1.0 0.1 20 69 3.5
11 1.0 0.2 30 64 3.2
12 1.0 0.5 30 53 1.8
2.2 GA3 对丛芽增殖的影响
在第 10号培养基上添加不同浓度的 GA3 ,观察 GA3 对丛芽增殖的影响(见表 2).由统计结果可看出 ,
GA3 对丛芽增殖差异影响不显著.观察发现在第 15号培养基上有少数芽的茎叶呈现玻璃化现象.表明高浓
度的 GA3能促使芽的茎叶玻璃化.
表 2 GA3 对丛芽增殖的影响
培养基序号 激素组合(g/ L)
6-BA NAA GA3 接种芽数(个) 30d后出芽数(个) 增殖系数
10 1.0 0.1 0 30 107 3.6
13 1.0 0.1 0.1 30 103 3.4
14 1.0 0.1 0.2 30 103 3.4
15 1.0 0.1 0.5 30 106 3.5
2.3 不同浓度的 NAA对诱导根的影响
培养 15d后 ,苗长至 6cm高 ,即可进行诱导生根.切取长为 1.0 ~ 1.5cm 左右的单芽接种在生根培养基
上(NAA浓度见表 3).5d后 ,在第 18号培养基上的多数芽基部切口处开始有绿色愈伤组织生成 ,7d后在第
16 ,17号培养基上的芽基部开始有白色根尖生成 ,14d后形成辐射状根 ,成为完整的再生植株.在第 18号培
养基上的单芽在 10d后才开始生根.实验结果显示 ,在 NAA 0.1 ~ 0.5mg/L 浓度范围内都可促使苗生根 ,但
随着浓度的升高 ,NAA表现出强烈的诱导愈伤组织的效应.
表 3 不同浓度 NAA 的诱导生根率
培养基序号 NAA浓度(g/ L) 接种苗数(株) 30d 后生根数(株) 生根率(%)
16 0.1 100 98 98
17 0.2 100 95 95
18 0.5 100 97 97
29增刊 邓运涛等:油菜 OguCMS 与诸葛菜属间杂种 F 1的快速繁殖
参考文献:
[ 1] 李旭锋 , 等.油菜 OguCMS×诸葛菜属间杂种的获得[ J] .四川大学学报(自然科学版), 2000 , 37(2):257-259.
[ 2] 罗鹏 , 陈昭麟 ,等.植物遗传资源诸葛菜研究[ M] .成都:四川大学出版社 , 1995.1-250.
[ 3] 罗鹏.油菜及近缘植物资源遗传研究[ M] .北京:中国农业科技出版社 , 1996.1-204.
[ 4] 潘颖南 , 等.甜菜的组织培养及快速繁殖[ J] .西南农业学报 , 1998 , 12(1):122-124.
Rapid Propagation in vitro of the Intergeneric Hybrid F1 between Brassica
napus with OguCMS and Orychophragmus violaceus
DENG Y un-tao , WU Jun , GAO Hui , GOU Xiao-song , LI X u-feng
(College of Life Science , Sichuan University , Chengdu 610064 , China)
Abstract:A method w as found which is sui t for rapid propagation of the intergeneric hybrid F1 between Brassi-
ca napus w ith OguCM S and Orychophragmus v iolaceus.The M S medium supplemented w ith 6-BA 1.0mg/L
and NAA 0.1mg/L adapts to inducing the hybrid F1 burgeoning and the multiplication coef ficient may reach 3.
5 , and the hybrid F1 can root on the MS medium with NAA 0.1mg/L.
Key words:Brassica napus with OguCMS;Orychophragmus violaceus;rapid propagat ion
30 四川大学学报(自然科学版) 第 39卷