全 文 ：园　艺　学　报　1998 , 25(3):297～ 299
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期:1997-10-28;修回日期:1998-04-30。
研究简报 Research Notes
芥蓝×诸葛菜属间杂种的获得
殷家明　罗　鹏　蓝泽蘧　黄邦权
(四川联合大学植物研究所 , 成都 610064)
提　要　用子房培养和胚培养相结合的方法 , 获得了芥蓝×诸葛菜属间杂种。授粉后
14 d和 18 d的子房在附加 IAA 2 mg/ L 和 KT 0.5 mg/L 的 MS 培养基上培养 , 结籽率分别为
54.3 %和46.2 %。在附加 IAA 0.2 mg/ L和 KT 2mg/L 的MS 培养基上 , 种子萌发率为13.3 %。
其F1 形态介于双亲之间 , 花粉无活力 , 开放授粉不能结籽 , 染色体数为 21 , 是双亲单倍染色
体数目之和。
关键词　芥蓝;诸葛菜;属间杂种;子房培养;胚培养
1　目的与材料方法
诸葛菜 〔Orychophragmus violaceus (L.)O.E.Schulz〕 是十字花科诸葛菜属植物 , 主要分布在中国。
许多地方人们把诸葛菜当作野菜食用。近来研究表明 , 诸葛菜是极有价值的蔬菜种质资源〔1, 2〕。为了将
诸葛菜的优良性状引入芸薹属蔬菜 , 丰富其遗传变异资源 , 我们进行了芥蓝 (Brassica alboglabra L.H.
Bailey)与诸葛菜属间杂交试验 , 通过授粉子房培养结合胚培养获得了属间杂种。
1997年 4 月 , 以芥蓝为母本 , 诸葛菜为父本 , 在四川联合大学试验地按照常规方法进行杂交。授粉
后第 14天和 18 天 , 剪取授粉子房 (保留花托), 用 70%酒精和0.15 %升汞溶液消毒 , 无菌水洗后将子
房竖立接种到MS+IAA 2 mg/ L+KT 0.5 mg/ L培养基上进行子房培养。取出培养 14 d 和 7 d 的子房 , 剖
取种子 , 小心地划破种皮后在 3种培养基上进行胚培养。培养基为:①MS+IAA 0.2 mg/ L+KT 2 mg/ L ,
②MS+NAA 0.2 mg/ L+6-BA 3 mg/ L, ③MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 3 mg/L+水解酪蛋白 1 g/ L。15 天
后 , 切去幼苗胚根 , 将芽转入新鲜的MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2 mg/L培养基 , 使之生长和萌发新芽。
以后 , 每 30 d继代繁殖一次。当芽足够多时 , 进行诱导生根试验并将生根后的小苗移栽于试验地。生根
试验培养基如下:不加激素的 MS 和 1/ 2 MS 培养基 , 附加 IAA 0.5 mg/ L的 MS 和 1/ 2MS 培养基 , 附加
IBA 0.5 mg/ L的MS 和 1/ 2MS 培养基。进行染色体数目检查时 , 亲本取种子萌发幼苗根尖 , 杂交后代随
机取无性苗嫩叶和花蕾 , 按常规压片法。杂种花粉育性鉴定参照Metz 等的方法〔3〕;雌性育性鉴定系在田
间观察开放授粉条件下的结籽情况。试验所用培养基的蔗糖和琼脂粉含量分别为 30 g/ L和 7 g/ L , pH 值
为6.0 。培养条件为光照时间 10 h/ d , 光照强度 2 000 lx , 培养温度 (25±3)℃。
2　结果与分析
2.1 　子房培养和胚培养
授粉后第 14天和 18 天分别接种 46 和 52个子房进行子房培养。前者培养 14 d 后 , 结籽 25 粒 , 结籽
率为54.3%;后者在培养 7 d后 , 结籽 24 粒 , 结籽率为46.2 %。所得种子均细小 , 种皮褐色 。田间生长
授粉的子房未结种子。
从授粉后第 14天培养的子房中取出的种子在培养基①、 ②和③上分别培养了 7、 10 和 8 粒 , 从授粉
后第 18天培养的子房中取得的种子分别培养了 8、 10和 6 粒。在培养基②和③上没有种子萌发。在培养
基①上培养 7 d 即观察到有种子萌发 , 以后逐渐长成小苗;培养 15 d 后 , 小苗生长十分缓慢 , 有玻璃化
倾向 , 故需转换培养基。在培养基①上 , 从授粉后第 18 天和第 14 天培养的子房中取得的种子各有 1 粒
成苗 , 分别命名为H1和 H2。在培养基①上 , 种子萌发率为13.3 %。上述结果表明 , 不同培养基对杂交
幼胚成苗的作用不同 , 胚培养基不一定是苗生长和繁殖的最佳培养基。
2.2 　芽的快速繁殖 、 生根及移栽
切去胚根的H1和 H2 在 NAA 0.2 mg/ L+6-BA 2 mg/L 的 MS 培养基上培养 30 d 后 , 产生许多不定
芽 , 呈丛生芽状。切取单芽继代培养 , 其表现与前述相同。因此 , 该培养基可用作快速繁殖培养基。
试验结果表明 , 所有供试培养基都能诱导生根 , 但附加 IBA 0.5 mg/ L的 MS 培养基效果最好 , 芽的
诱导生根率达 100%, 根系发达 , 基部伤口处仅产生少量愈伤组织。生根后的无性苗经炼苗后便可移栽
入土。在花期观察统计 , H1 和 H2 的无性苗移栽成活率分别为21.00 %和69.23 %。
2.3 　杂种的鉴定
由于本试验所用的诸葛菜群体虽经过多年选育 , 但个体间形态上仍有一定的变异 , 因此 H1 和 H2 的
植株形态也有差异 (图版 , 1 、 2), H1的下部茎生叶叶缘具不等波状钝齿 , 而 H2 的叶缘具粗齿 (图版 ,
3)。从总体上看 , H1和 H2的植株形态仍介于双亲之间 , 随着生长发育 , 叶片和叶柄上具密柔毛 、 疏柔
毛至无毛 , 下部茎生叶大头羽状分裂 (图版 , 3), 花瓣紫红色 (H1)或粉红色 (H2), 发育的角果具四
棱 、 密布柔毛 (H1)或无毛 (H2)等特征明显倾向于父本诸葛菜;叶基部无耳状抱茎 (图版 , 3), 花序
上花数较多 , 花瓣顶端微凹 , 柱头为圆头形等特征明显倾向于母本芥蓝。
开花时H1和 H2 的花药瘦小 , 不开裂 , 内有少量皱缩 、 无活力的花粉;在开放授粉条件下 , H1 和
H2 均未能结籽。经检测杂种体细胞和花粉母细胞 , H1 和 H2 染色体数均为 21 (图版 , 4 、 5), 为亲本芥
蓝 (2 n=18)和诸葛菜 (2 n=24)单倍染色体数目之和 , 证实 H1 和H2都是芥蓝与诸葛菜的属间杂种。
参 考 文 献
1　Luo P , Huang B Q.A study on exploitation of new germplasm Orychophragmus violaceus O.E.Schulz , a member of brassi-
caceae.Acta Hort., 1996 , 407:75～ 79
2　李新华 , 贺善安 , 任冰如 , 等.诸葛菜的营养成分及作为新型蔬菜的评价.植物资源与环境 , 1997 , 6 (3):8～ 12
3　Metz P L G , Nap J-P , Stiekema W J.Hybridization of radish (Raphanus sativus L.) and oilseed rape (Brassica napus L.)
through a flower-culture method.Euphytica , 1995 , 83 (2):159～ 168
Production of Intergeneric Hybrids from Brassica alboglabra ×Orychophragmus
violaceus
Yin Jiaming , Luo Peng , Lan Zequ , and Huang Bangquan
(Institute of Botany , Sichuan Union University , Chengdu 610064)
Abstract　Intergeneric hybrids of Brassica alboglabra ×Orychophragmus violaceus were successfully obtained by
using a combination of ovary culture and embryo culture.When ovaries were cultured on MS medium supplemented with
2 mg/ L of IAA and 0.5 mg/ L of KT on the 14th and 18th days after pollination , they produced 54.3 % and 46.2 %
seed set , respectively.Seed germination percentage was 13.3 % on MS medium supplemented with 0.2mg/ L of IAA
and 2 mg/ L of KT.The F1 hybrids were morphologically intermediate between both parents , and they had no viable
pollen and no seed set with open pollination.The F1 chromosome number was 21.Which was the sum of haploid chro-
mosome numbers of both parents.
Key words　 Brassica alboglabra;Orychophragmus violaceus;Intergeneric hybrids;Ovary culture;Embryo
culture
298　　　　　　　　　　　　　　　园　　艺　　学　　报 　　　　　　　　　　　　　　　25卷
图　版　说　明
1.H1的植株;2.H2的植株;3.芥蓝 (a)、 H1 (b)、 H2 (c)、和诸葛菜 (d , e)的叶;
4.具 21条染色体的杂种体细胞;5.具 21条染色体的杂种花粉母细胞
Explanation of plate
1.Plant let of H1;2.Plantlet of H2;3.Leaves of Brassica alboglabra (a), H1 (b), H2 (c)and Orychophragmus violaceus
(d , e);4.A somatic cell of the hybrid with 21 chromosomes;5.A pollen mother cell of the hybrid with 21 chromosomes
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2993期　　　　　　　　　　　殷家明等:芥蓝×诸葛菜属间杂种的获得