全 文 ：安徽产委陵菜属 7种药用种类的黄酮提取与分析
许正刚 1 , 闵运江 2　(1.安徽省淮南市淮南创大实业有限责任公司 ,安徽淮南 232087;2.皖西学院化生系 ,安徽六安 237012)
摘要　采用正交设计研究了 4因素 4水平的委陵菜黄酮提取工艺条件 ,从最适样品浓度、上样量、乙醇洗脱液浓度、乙醇洗脱液用量等
方面对 AB-8型大孔树脂纯化委陵菜黄酮的工艺条件进行了研究。并用优选的提取条件提取了安徽产的 7种药用委陵菜的黄酮 , 用比
色法测定各种委陵菜的黄酮含量。结果得出 ,委陵菜黄酮在 70℃条件下 ,乙醇浓度为 40%, 固液比为 1∶100,提取 3次的效果最佳。在
该条件下 ,粗黄酮粉的黄酮含量为 17.98%,经AB-8型大孔吸附树脂纯化后的委陵菜精黄酮粉中黄酮含量约达 33.30%。
关键词　委陵菜;黄酮;提取;纯化;正交设计
中图分类号　R282.71　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)06-02929-05
ExtractionandAnalysisofFlavonoidsfromSevenHerbalSpeciesofPotentilaefromAnhuiProvince
XUZheng-gangetal　 (HuainanChuangdaIndustrialCo.Ltd., Huainan, Anhui232087)
Abstract　 ThetechnologicalconditionsofextractionandpurificationofflavonoidsfromPotentilachinensisfromAnhuiProvincewerestudied
byusing4-factorand4-levelorthogonaltest.ThetechnologicalconditionsofflavonoidsfromPotentillachinensispurifiedwithAB-8 macro-
porousresinwerestudiedfromtheaspectsoftheoptimumsampleconcentration, loadvolume, theconcentrationofethanolelutionsolutionand
ethanolelutionvolume.Andflavonoidwasextractedfrom 7herbalspeciesofPotentilaefromAnhuiProvincebyusingtheoptimizedextraction
conditionsandflavonoidcontentindiferentspeciesofPotentilaewasmeasuredbyusingcolorimetry.Undertheconditionsof70 ℃, alcohol
concentrationof40%, solid-liquidratioof1∶100, extracting3 times, theextractionefectswerethebest.Thecrudeflavonoidcontentwas
17.98%.AfterbeingpurifiedwithAB-8macroporousabsorptionresin, thecontentofflavonoidincrudeflavonoidpowderwasupto33.30%.
Keywords　 PotentilachinensisSer;Flavonoids;Extraction;Purification;Orthogonaldesign
基金项目　安徽省教育厅自然科学基金 2010年度重点项目 “委陵菜属
植物的生物活性成分提纯及其对重金属富集能力的评价 ”。
作者简介　许正刚(1967-),男 , 安徽六安人 , 工程师 , 从事生物化工
研究。
收稿日期　 2009-10-20
　　委陵菜属是北温带分布的一个大属 ,该属中很多种是资
源植物 ,具有较高的经济价值。委陵菜(Potentilachinensis
Ser)主产山东 、辽宁 、安徽 ,为蔷薇科植物委陵菜(Potentila
chinensisSer)的全草 ,生于向阳山坡 、荒地 ,民间常以全草入
药 ,用于清热解毒 、凉血止痢 、赤痢腹病 、痈肿疮毒等 [ 1] 。
大量研究已表明 ,黄酮类化合物是一类生理活性较强的
化合物 ,且无毒无害 ,具有清除自由基 、抗氧化 、抗癌 、抗菌 、
抗过敏 、抗病毒等作用 ,近年来在医疗 、保健及食品等方面的
应用广泛 [ 2-4] 。目前对安徽产委陵菜属黄酮类化合物的提
取与纯化研究尚未见有文献报道 ,笔者采用正交设计对安徽
产委陵菜属黄酮类化合物的提取最佳条件进行了研究 ,并测
定了安徽产 7种委陵菜的黄酮含量 ,同时进一步对影响大孔
吸附树脂纯化委陵菜中黄酮类化合物的因素进行了探讨 ,为
委陵菜黄酮的提取与纯化提供了参考数据。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　植物材料。挖掘各种委陵菜植物全株为试验材料 ,
采集的具体时间地点见表 1。
1.1.2　仪器。TU-1201紫外可见分光光度计(北京普析通用
仪器设备有限公司), HH-4数显恒温水浴锅(国华电器有限
公司), GL-20G-Ⅱ高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂),
RE-520旋转蒸发器(上海浦沪仪器厂), KQ-500B型超声波
清洗器(昆山市超声仪器有限公司), SHANGPINGFA1004电
子天平(上海精科天平), 101AS-2型不锈钢数显电热鼓风干
燥箱(上海浦东跃欣科学仪器厂),层析柱 ,索式提取器 ,标准
检验筛等。
1.1.3　试剂。芦丁(国药集团化学试剂有限公司), AB-8型
大孔吸附树脂(天津市光复精细化工研究所),乙醇(徐州试
剂二厂),乙醚(开封化学试剂总厂),盐酸(合肥医药站化玻
部),亚硝酸钠(中国医药上海化学试剂公司),硝酸铝(上海
科昌精细化学品公司)等 ,以上试剂均为分析纯。
表 1　 7种药用委陵菜采集时间地点
Table1　Thesamplingtimeandsitesof7 speciesofherbalmedicine
Potentilla
种类
Species
采集时间
Samplingtime
采集地点
Samplingsites
委陵菜 P.chinenisis 2007-03-25 皖西学院桃园内小路边 ,杂草丛
三叶委陵菜 P.freyniana 2006-07-23 金寨天堂寨海拔 1 500～
1 600m山顶草丛
蛇含委陵菜 P.kleiniana 2007-05-19 金寨梅山/皖西学院阴湿地
中华三叶委陵菜 P.frey-nianavar.sinicaca 2006-07-23 金寨天堂寨 1 500～ 1 600m山顶草丛
莓叶委陵菜 P.fragari-oides 2007-04-10 六安市小华山山坡阳坡黏土荒地
翻白草 P.discolor 2007-04-10 六安市七里站、五中校内、小华山等地荒地
绢毛匍匐委陵菜 P.rep-tantsvar.sericophyla 2007-04-15 宿州市萧县闫庙村附近湿荒地
1.2　黄酮含量的测定 [ 5-6] 　采用分光光度法 ,利用黄酮类
化合物与铝盐反应生成红色络合物 ,以芦丁为标准在 510 nm
处测吸光度。绘制标准曲线 ,然后测定样品的吸光度 ,再以
标准曲线计算出黄酮浓度。其原理是利用黄酮类化合物与
铝盐反应生成红色络合物 ,以芦丁为标准在 510 nm处测吸
光度。
1.2.1　标准曲线的制作。称取约 20 mg芦丁标准品于称量
瓶中置 103℃烘箱下烘干至恒重 ,干燥器中冷却 ,精确称取
10 mg芦丁标准品 ,用 70%乙醇定容至 100ml为标准液。
精确吸取芦丁标准液 0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml分别
置于 6支具塞试管中 ,各补 70%乙醇至 5.0ml,加 5%亚硝酸
钠溶液 0.3ml,摇匀 ,放置 6 min后 ,加 10%硝酸铝溶液 0.3
ml,摇匀 ,放置 6 min后 ,再加 4%氢氧化钠溶液 4.0 ml,加水
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(6):2929-2933 责任编辑　李菲菲　责任校对　卢瑶
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.06.163
0.4 ml,摇匀 ,放置 15 min后 ,在 510 nm处测吸光度 -浓度
值 ,所得吸光度 -浓度曲线见图 1回归方程如下:A=
12.721 0C-0.029 03,相关系数 r=0.999 8。
图 1　标准芦丁吸光度浓度曲线
Fig.1　Thestandardabsorbency-concentrationcurveofrutin
1.2.2　样品中黄酮含量的测定。样品中的黄酮含量皆参照
标准曲线制作的测定方法测定吸光度 ,再由回归方程计算出
黄酮含量。
1.3　黄酮类化合物的提取 [ 7-13] 。
1.3.1　样品处理。以委陵菜为材料 ,取采回的新鲜委陵菜 ,
洗净 ,参考相关文献 ,在 103℃烘至约八成干 ,剪成约 1cm长
度 ,用粉碎机粉碎 ,再在 103 ℃烘至恒重。采用 Soxhlet提取
法 ,以无水乙醚为脱脂剂 ,于 43 ℃水浴中脱脂至充分除去样
品中脂类和脂溶性色素。取出样品滤纸包 ,先置通风处晾
干 ,再将滤纸包置烘箱中 130 ℃烘干 ,放入干燥器中冷却
备用。
1.3.2　单因素试验 [ 14] 。
1.3.2.1　温度单因素试验。取 6份已脱脂的委陵菜粉末 ,
每份 10 g,分别放在 250 ml容量瓶中在乙醇浓度 70%、固液
比 1∶100、浸取次数为 2次的条件下 ,设水浴温度分别为 30、
40、50、60、70、80 ℃进行提取试验 ,记录结果并绘图。
1.3.2.2　乙醇浓度单因素试验。取 4份已脱脂的委陵菜粉
末 ,每份 10 g,分别放在 250 ml容量瓶中在水浴温度 70 ℃、
固液比 1∶100、浸取次数为 2次的条件下 ,设乙醇浓度分别为
30%、50%、70%、90%进行提取试验 ,记录结果并绘图。
1.3.2.3　固液比单因素试验。取 6份已脱脂的委陵菜粉
末 ,每份 10 g,分别放在 250 ml容量瓶中在水浴温度 70 ℃、
乙醇浓度 50%、浸取次数为 2次条件下 ,设固液比分别为
1∶20、1∶40、1∶60、1∶80、1∶100、1∶120进行提取试验 ,记录结果并
绘图。
1.3.2.4　浸提次数单因素试验。取 4份已脱脂的委陵菜粉
末 ,每份 10 g,分别放在 250 ml容量瓶中在水浴温度 70 ℃、
乙醇浓度 50%、固液比 1∶100的条件下 ,设浸提次数分别为
1、3、5、7次进行提取试验 ,记录结果并绘图。
1.3.3　正交试验确定提取的最佳条件。按以上各单因素试
验结果 ,确定对水浴温度 、乙醇浓度 、固液比 、提取次数 4个
主要因素进行 4因素 4水平的正交试验 ,各因素水平设计见
表 2。
1.4　委陵菜属的 7种药用委陵菜黄酮类化合物含量的测
定　用正交试验得出的最佳提取条件对安徽产 7种药用委
陵菜分别提取各自的粗黄酮 ,以铝盐比色法计算各种的黄酮
含量。
表 2　正交试验因素水平
Table2　 Thelevelsandfactorsoftheorthogonaltest
水平Level
因素 Factor
水浴温度(A)∥℃Bathtemperature
乙醇浓度(B)∥%Ethanolconcentration
固液比(C)∥g∶mgSolid-liquidratio
提取次数(D)∥次Extractiontimes
1 40 40 1∶40 2
2 50 50 1∶60 3
3 60 60 1∶80 4
4 70 70 1∶100 5
1.5　黄酮类化合物的纯化 [ 15-18]
1.5.1　树脂的预处理。用 40目筛在水中筛选出大小合适 、
分布均匀的树脂 ,先用体积分数 95%的乙醇充分浸泡 24 h
后装柱 ,然后用 95%乙醇洗至洗出液加适量水无白色混浊 ,
再用去离子水洗至无醇味后加入大约 4倍体积的 5%HCl浸
泡 3 ～ 4 h,用去离子水洗至中性 ,再加入大约 4倍体积的 5%
NaOH浸泡 3～ 4 h,最后用去离子水洗至中性即可使用。
1.5.2　AB-8大孔吸附树脂的动态吸附试验。取预处理的
AB-8大孔吸附树脂装柱 ,装柱约 5cm,测得其树脂湿量为 10
g。将样液上柱 ,水洗 ,再洗脱 ,然后测定吸附率 、解吸率。按
下列公式计算:
吸附率 =[(m-m′)/m] ×100%
解吸率 =[m″/(m-m″)]
式中 , m为样液中含有的黄酮总量(mg);m′为吸附流出液中
含有的黄酮总量(mg);m″为洗脱液中含有的黄酮总量
(mg)。
1.5.2.1　样液浓度对吸附率的影响。取一定量的粗黄酮
粉 ,以水为溶剂 ,在 90 ℃水浴加热条件下充分溶解后 ,再在
离心机(6 000r/min)中离心 15min,取上清液定容到 100ml,
测量其浓度为 0.899 mg/ml。均分成 5份 ,分别配制 0.1、
0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml的黄酮样液 5份 ,分别上柱 ,皆以 1
ml/min的流速进行吸附后 ,各用 3倍床体积的水洗柱。收集
所有吸附及洗柱流出液 ,测定其中黄酮含量 ,计算吸附的黄
酮量及吸附率。
1.5.2.2　上样量对吸附率的影响。同 “1.5.2.1”中的方法配
制含黄酮 30、40、50、60、70mg,且浓度均为 0.3 mg/ml的黄酮
水溶液 5份 ,分别上柱 ,均以 1.0 ml/min的速率进行吸附 ,再
用 3倍床体积的水洗柱。收集所有吸附及洗柱流出液 ,测定
其中黄酮含量 ,计算吸附的黄酮量及吸附率。
1.5.2.3　洗脱剂浓度对解吸率的影响 。同 “1.5.2.1”中的方
法配制浓度 0.3mg/ml的黄酮水溶液 160ml5份 ,分别上柱 ,
均以 1.0 ml/min的速率进行吸附 ,再用 3倍床体积的水洗
柱 ,然后分别用 4倍床体积的浓度分别为 30%、50%、70%、
80%、90%的乙醇以 1.0 ml/min的速率进行洗脱。收集洗脱
液测定黄酮含量 ,计算解吸出的黄酮量及解吸率。
1.5.2.4　乙醇洗脱用量对解吸率的影响。同 “1.5.2.1”中的
方法配制黄酮浓度为 0.3 mg/ml的黄酮水溶液 160 ml5份 ,
分别上柱 ,均以 1.0 ml/min的速率进行吸附 ,再用 3倍床体
积的水洗柱 ,然后分别用 2、3、4、5、6倍床体积数的浓度为
70%的乙醇以 1.0 ml/min的速率进行洗脱。收集洗脱液测
2930 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2010年
定黄酮含量 ,计算解吸出的黄酮量及解吸率 。
1.5.3　大孔吸附树脂柱层析纯化委陵菜总黄酮的效果。按
1 g大孔吸附树脂吸附 5 mg黄酮计算 ,将粗黄酮粉配制成
0.4 mg/ml黄酮水溶液 ,以 0.5 ～ 1.0 ml/min的吸附速率上
柱 ,然后用 3倍床体积水洗柱 ,再用 4倍床体积的 70%乙醇
以 0.5 ～ 1.0ml/min洗脱速率洗脱 ,收集洗脱液经旋转蒸发
器浓缩后烘干得精制委陵菜黄酮粉 ,测定其总黄酮含量。
2　结果与分析
2.1　样品中的黄酮含量 　参照标准曲线制作的测定方法
测定吸光度 ,再由回归方程计算出粗黄酮粉样品中黄酮含量
为 17.98%。
2.2　黄酮类化合物的提取
2.2.1　单因素试验结果。
2.2.1.1　温度单因素试验。在乙醇浓度 70%、固液比 1∶100、
浸取次数 2次的条件下 ,水浴温度为 30、40、50、60、70、80 ℃
时 ,样品中黄酮提取量依次为 54.75、58.50、63.75、60.25、
71.25、71.50 mg。从图 2可以看出 ,当温度升高到 70 ℃时 ,
提取液中黄酮含量明显增加 ,但此时温度继续升高到 80 ℃
时 ,提取液中黄酮含量几乎不变 。因此 ,可以初步断定 70 ℃
时提取效果较好。
图 2　温度对委陵菜中黄酮提取量的影响
Fig.2　Theefectoftemperatureontheextractionamountoffla-
voneinPotentilachinensis
2.2.1.2　乙醇浓度单因素试验。在水浴温度 70 ℃、固液比
1∶100、浸取次数 2次的条件下 ,乙醇浓度为 30%、50%、70%、
90%时 ,样品中黄酮提取量依次为 56.90、68.25、60.75、32.00
mg。从图 3可以看出 ,乙醇浓度为 50%时 ,提取效果最好 。
因此 ,可以推测提取效果较好的乙醇浓度范围在 50%左右。
图 3　乙醇浓度对委陵菜中黄酮提取量的影响
Fig.3　Theeffectofethanolconcentrationontheextractiona-
mountofflavonefromPotentilachinensis
2.2.1.3　固液比单因素试验。在水浴温度 70℃、乙醇浓度
50%、浸提次数 2次的条件下 ,固液比为 1∶20、1∶40、1∶60、
1∶80、1∶100、1∶120时 ,黄酮提取量依次为 42.38、58.25、62.75、
72.50、74.50、73.25 mg。从图 4可以明显看出 ,当固液比由
1∶20逐渐变为 1∶100时 ,提取液中黄酮含量逐渐增加 ,且固液
比为 1∶100时提取量最高;当固液比为 1∶120时 ,提取量又有
所下降 。因此 ,可以初步确定当固液比为 1∶100左右时提取
效果较好。
图 4　固液比对委陵菜中黄酮提取量的影响
Fig.4　Theeffectofsolid-liquidratioontheextractionamount
offlavonefromPotentilachinensis
2.2.1.4　浸提次数单因素试验。在水溶温度 70 ℃、乙醇浓
度 50%、固液比 1∶100的条件下 ,浸提次数为 1、3、5、7次时 ,
黄酮的提取量依次为 30.25、39.75、41.00、42.00 mg。从图 5
可以看出 ,当提取次数增加至 3次时提取液中黄酮含量明显
增加 ,但当提取次数继续增加时 ,提取液中黄酮含量并无明
显变化 。所以 ,从经济及生产运用方面来考虑 ,初步确定提
取次数为 3次左右 。
图 5　浸提次数对委陵菜中黄酮提取量的影响
Fig.5　Theefectofextractiontimesontheextractionamountof
flavonefromPotentilachinensis
2.2.2　正交试验结果及分析 。由表 3可见 ,浸提液中的黄
酮含量均值最大的是处理 13,达 0.296 mg/ml,即处理组合
A4 B1C4D2 ,表明委陵菜黄酮的最佳提取条件是:水浴温度为
70 ℃、乙醇浓度为 40%、固液比为 1∶100、提取次数为 3次。
由表 8极差 R分析可得影响委陵菜提取效果因素的主次顺
序为 A>C>B>D,即水浴温度影响最大 ,固液比与乙醇浓
度的影响其次 ,提取次数影响最小。进一步进行方差分析
得 ,试验所选取的 A、B、C、D4个因素对委陵菜提取液中黄
酮含量影响都达到极显著。这一结果与极差分析的结果也
基本相同。
293138卷 6期　　　　　　　　　　　　　　　　许正刚等　安徽产委陵菜属 7种药用种类的黄酮提取与分析
表 3　L16(44)正交试验结果分析
Table3　TheresultsofL16(44)orthogonaltest
处理Treatment
水浴温度(A)Temperatureofwaterbath
乙醇浓度(B)Ethanolconcentration
固液比(C)Solid-liquidratio
提取次数(D)Extractiontimes
提取液中黄酮含量∥mg/mlConcentrationofflavonoidsinextract
重复 1Repeat1 重复 2Repeat2
均值mg/mlAverage
1 1 1 1 1 0.142 0.144 0.143
2 1 2 2 2 0.194 0.194 0.194
3 1 3 3 3 0.208 0.208 0.208
4 1 4 4 4 0.178 0.194 0.186
5 2 1 2 3 0.210 0.212 0.210
6 2 2 1 4 0.210 0.208 0.209
7 2 3 4 1 0.228 0.234 0.231
8 2 4 3 2 0.204 0.206 0.205
9 3 1 3 4 0.266 0.268 0.267
10 3 2 4 3 0.272 0.274 0.273
11 3 3 1 2 0.226 0.226 0.226
12 3 4 2 1 0.226 0.22 0.223
13 4 1 4 2 0.298 0.294 0.296
14 4 2 3 1 0.272 0.270 0.271
15 4 3 2 4 0.274 0.278 0.276
16 4 4 1 3 0.238 0.222 0.230
t1 1.462 0 1.712 0 1.978 0 2.146 0
t2 1.834 0 1.894 0 1.882 0 1.688 0
t3 1.616 0 1.808 0 1.902 0 1.972 0
t4 1.736 0 1.842 0 1.844 0 1.876 0
R 0.085 5 0.025 8 0.044 5 0.017 5
2.3　委陵菜属的 7种药用委陵菜黄酮类化合物含量的测
定　从表 4可见 ,以三叶委陵菜黄酮含量最高达 10.70%,其
次是莓叶委陵菜和中华三叶委陵菜 ,也达 6.00% ～ 7.00%;
再次是翻白草和委陵菜 ,均超过 3.00%。由此可见 , 7种委陵
菜均具有一定的经济利用价值。
表 4　 7种药用委陵菜黄酮含量测定结果
Table4　Thedeterminationresultsofflavonecontentin7herbalspe-
ciesofPotentilaL.
种类Species
提取液中黄酮含量均值∥mg/mlAveragecontentofflavonoidsintheextractliquid
植物中黄酮含量∥%Contentofflavonoidsinplants
蛇含委陵菜(P.kleiniana) 3.915 1.96
莓叶委陵菜(P.fragarioides) 13.750 6.88
绢毛匍匐委陵菜(P.reptants 3.085 1.54
var.sericophyla)
三叶委陵菜(P.freyniana) 21.400 10.70中华三叶委陵菜(P.freyni-ana 13.050 6.50var.sinicaca)
翻白草(P.discolor) 6.935 3.47
委陵菜(P.chinenisis) 6.650 3.33
2.4　黄酮类化合物的纯化
2.4.1　样液浓度对吸附率的影响。从图 6可以看出 ,当样液浓
度为 0.4mg/ml时 ,吸附率最大 ,黄酮液浓度过大或过小都影响
吸附效果。因此得出 ,样液浓度是 0.4mg/ml时上样最佳。
2.4.2　上样量对吸附率的影响 。从图 7可以看出 ,上样量的
多少对吸附率有影响 ,当上样量在 30 ～ 50 mg时吸附率均较
多 ,但当上样量超过 50 mg时 ,吸附率明显下降。因此 ,根据
柱用大孔吸附树脂用量 10 g计算 ,即 1 g大孔吸附树脂上样
图 6　样液浓度对吸附率的影响
Fig.6　Theeffectsofsamplesolutionconcentrationonthead-
sorptionrate
的黄酮量不宜超过 5 mg,以保证其对黄酮有较高的吸附率。
图 7　上样量对吸附率的影响
Fig.7　Theeffectsofsampleloadingquantityontheadsorption
rate
2932 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2010年
2.4.3　洗脱剂浓度对解吸率的影响。从图 8看出 ,乙醇浓度
低于 70%范围内 ,随乙醇浓度的增加 ,解吸效果增加 ,当浓度
大于 70%时解吸率呈下降趋势 ,当乙醇浓度为 70%时 ,洗脱
效果最好。因此 ,采用 70%乙醇洗脱最佳。
图 8　不同浓度乙醇洗脱对吸附率的影响
Fig.8　Theeffectsofethanolelutionconcentrationonthead-
sorptionrate
2.4.4　乙醇洗脱用量对解吸率的影响。从图 9可以看出 ,
当乙醇的洗脱用量达到 4倍床体积数时 ,解吸率基本不再增
加 。因此 ,乙醇的最佳洗脱用量为 4倍床体积数。
图 9　乙醇洗脱用量对解吸率的影响
Fig.9　Theeffectsofethanolevolutionvolumeonthedesorption
rate
2.4.5　大孔吸附树脂柱层析纯化委陵菜总黄酮的效果 。经
测定 ,大孔吸附树脂柱层析纯化后委陵菜中总黄酮含量达到
48.36%,与纯化前的粗黄酮粉中黄酮含量 17.98%相比 ,纯
度提高约 2.7倍 ,纯化效果较为显著。
3　结论与讨论
该研究主要对委陵菜的提取工艺条件和纯化条件进行
了研究 ,同时还测定了安徽产 7种药用委陵菜各种类植株中
的黄酮类化合物的含量 。在试验的提取条件研究过程中 ,先
分别用温度 、乙醇浓度 、固液比和提取次数 4组单因素试验
确定了正交设计的因素和水平范围 ,并进一步采用了 4因素
4水平正交设计试验。试验结果表明 ,委陵菜黄酮的最佳提
取条件是:水浴温度为 70℃、乙醇浓度为 40%、固液比为 1∶
100、提取次数为 3次。该提取方法可行且易操作 ,可以应用
于工业生产 。
AB-8型大孔吸附树脂对委陵菜黄酮有较好的纯化效果。
当黄酮溶液浓度为 0.4 mg/ml时 ,吸附速率最佳;70%的乙醇
对委陵菜黄酮的解吸附有很好的效果;当乙醇的洗脱用量达
到 4倍床体积数时 ,解吸率较高。在上述适宜条件下 , AB-8
型大孔吸附树脂柱层析纯化委陵菜效果较好 ,总黄酮由纯化
前的 17.98%到纯化后的 48.36%,纯度提高了 2.7倍。该法
简单可行 ,可以应用于工业生产。
参考文献
[ 1] 安徽植物志协会组.安徽植物志(第三卷)[M].北京:中国展望出版社,
1990:45-46.
[ 2] 陈乃富.蕨菜黄酮类化合物的提取及其抗氧化作用[ J].食品与发酵工
业 , 2003, 29(11):63-66.[ 3] 陈乃富 ,张莉.金樱子黄酮类化合物的初步研究 [ J] .中国林副特产,
2005(5):2-4.
[ 4] 裴凌鹏 ,李文州,唐粉芳.葛根总黄酮成分的超声提取及抗氧化作用
[ J] .北京联合大学学报:自然科学版 , 2003(3):25-27.
[ 5] 张德权 ,台建祥.生物类黄酮研究及应用概况 [ J].食品与发酵工业,
1999, 25(6):52-56.
[ 6] 陈乃富 ,张莉.蕨菜黄酮的提取与分析 [ J].中国林副特产, 2004(6):
1-4.
[ 7] 李剑君,李稳宏,李多伟,等.葛根总黄酮中葛根素的分离研究[ J].西北
大学学报, 2000, 31(4):311-314.[ 8] 贝伟剑 ,彭文烈,罗杰.柿叶黄酮的大孔吸附树脂分离提纯富集 [ J] .中
成药, 2005(3):257-261.
[ 9] 崔堂兵,石漫莹,郭勇 ,等.银杏黄酮的提取与大孔树脂吸附研究 [ J] .广
西农业生物科学, 2002, 21(4):266-270.
[ 10] 王静媛 ,田福利.蒙椴树叶中黄酮类成分的提取与分离[ J].内蒙古大
学学报:自然科学版 , 2003(4):478-479.
[ 11] 郑亚杰 ,张长弓 ,李晓斌.大孔吸附树脂分离纯化出山楂总黄酮的研究
[ J].华中科技大学学报, 2004, 33(2):136.
[ 12] 杨荣平 ,王宾豪 ,方艾全 ,等.大孔树脂分离葛根总黄酮工艺优化[ J].中成药 , 2004, 26(10):784.
[ 13] 杨世军 ,张会香 ,周怡静.葛根中异黄酮的提取与纯化工艺研究 [ J] .食
品科学 , 2004, 25(8):124-127.
[ 14] 明道绪.生物统计附实验设计 [ M].北京:中国农业出版社, 2005:309-
314.
[ 15] 卢锦花 ,胡小玲 ,岳红,等.大孔吸附树脂对银杏叶黄酮类化合物吸附
及解吸附的研究 [ J].化学研究与应用, 2002, 14(2):164-167.
[ 16] 任顺成 ,丁霄霖.大孔树脂对玉米须类黄酮类的吸附分离特性研究
[ J].食品与发酵工业 , 2003, 29(12):17-21.
[ 17] 李剑君 ,李稳宏 ,高新,等.AB-8型大孔吸附树脂吸附葛根素过程的研究 [ J] .西安交通大学学报 , 2000, 34(4):78-81.
[ 18] 陆志科 ,谢碧霞.大孔树脂对竹叶黄酮的吸附分离特性研究 [ J].经济
林研究 , 2003, 21(3):1.
科技论文写作规范———题名
以最恰当 、最简明的词句反映论文 、报告中的最重要的特定内容 ,一般不用副题(即二级标题),题名应避免使用不常见
的缩略语、首字母缩写词 、字符 、代号和公式等 。一般字数不超过 20字 。英文与中文应相吻合 。英文题名词首字母大写 ,连
词及冠词除外 。
293338卷 6期　　　　　　　　　　　　　　　　许正刚等　安徽产委陵菜属 7种药用种类的黄酮提取与分析