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三种忍冬属(Lonicera)植物花粉贮藏及生活力的测定



全 文 :基金项目:石河子大学 2008大学生研究训练计划项目(SRP)。
作者简介:王丽瑛(987-),女 ,四川阆中人 ,石河子大学农学院林学系 06级本科生。 *通讯作者
  收稿日期:2009-02-25
三种忍冬属(Lonicera)植物花粉贮藏及生活力的测定
王丽瑛1 王雪莲 2* 张 洮 1 彭 俊
(1石河子大学农学院 ,新疆石河子 832003;2石河子大学农学院林学系 ,新疆石河子 832003)
摘 要:分析了三种忍冬属植物花粉活力及不同贮藏温度对花粉活力的影响 , 结果表明:三种忍冬属植物花粉活力存
在极显著差别 , 其中鞑靼忍冬的生活力和耐贮力最强;低温有效地延长了花粉活力的保持时间;忍冬属植物花粉最适
萌发培养基成分为 10%蔗糖 +1%琼脂。
关键词:忍冬属;花粉;生活力;贮藏
中图分类号 S685   文献标识码 A   文章编号 1007-7731(2009)07-90-02
StudyonthePolenStorageandViabilityofThreeLonicera
WangLiyingetal. (AgriculturalCollege, ShiheziUniversity, Shihezi832003, China)
Abstract:ThepolenviabilityandstoragetemperatureofthreeLonicerawerestudiedinthisexperiment.Theresultsshowed
thatthepolenviabilityofthreeLonicerawassignificantlydiferent, anditisLoniceratataricaLinn.thattheabilityofbeing
hoardedisthebest.TheoptimumculturesolutionofLonicerapululatingis10%sucrose+1%agar, Thepollenviabilitiesof
threeLoniceracouldbekeptforalongtimeat4℃.
Keywords:Lonicera;polen;viability;storage
  鞑靼忍冬(LoniceratataricaLinn.)、金银忍冬(Lonicera
maacki(Rupr.))和忍冬(LonicerajaponicaThumb.)是忍
冬科忍冬属的落叶灌木或藤木 ,适应性强 ,具有一定的生
态效益和经济效益 ,花美叶秀 ,常栽培于庭院 、花境观赏 ,
在园林中得到广泛的应用 。
花粉是重要的植物种质材料 ,是很多植物有性繁殖途
径中进行遗传物质传递的载体 ,其活力有无直接影响有性
杂交的成败。花粉在采集 、运输和保存中受到多种因素的
影响 ,在使用之前 ,通常要对花粉的生活力进行测定 。因
此 ,了解花粉的活力和贮藏性 ,在杂交育种过程中对选定
优良杂交亲本 、解决花期不遇以及种质资源的保存可以提
供科学的依据 。
本研究以忍冬属的几种植物为试验材料 ,研究花粉萌
发适宜的培养基及不同贮藏条件 、贮藏时间对花粉生活力
的影响 。
1 材料与方法
1.1 材料 2008年 4-5月 ,从石河子市采集花粉 ,鞑靼
忍冬(LoniceratataricaLinn.)、金银忍冬(Loniceramaacki
(Rupr.))和忍冬(LonicerajaponicaThunb.)。采集含苞待
放的大蕾花朵 ,剥离花药 ,收集在内有干燥滤纸的培养皿
中阴干 ,让花粉自然散落后备用。
1.2 方法 
1.2.1 活力的测定 采用染色法和花粉离体萌发法(固
体培养基法)测定花粉生活力 。
染色法即将花粉均匀撒到载玻片上 ,滴甲液(0.2%联
苯胺 +0.15%α-萘酚 +0.25%碳酸钠),置 1min后再滴
乙液(0.3%的 H2O2溶液),盖上盖玻片 , 3min后在光学显
微镜(10 ×)下观察 ,分别取三个视野统计花粉染色情况
并取平均值 。红色或玫瑰红色为有活力的花粉 ,黄色或不
染色为无活力。
培养基法是选用三种不同蔗糖浓度的培养基 5%蔗
糖 +1%琼脂 、10%蔗糖 +1%琼脂 、15%蔗糖 +1%琼脂 ,
用胶头滴管吸取液态培养基滴制成厚度约在 0.5mm左右
的半球形培养基于载玻片上(每个浓度 3个重复)。待培
养基温度适宜时(5min后)用毛笔粘取少量花粉均匀弹播
于培养基上 ,并置于饱和湿度环境下 ,于 22-24℃培养 , 3h
后观察并统计萌发率 ,在显微镜下随机取三个视野 ,数取
花粉粒总数及萌发数 ,算出萌发率。(花粉管长度为花粉
直径 2倍以上者为萌发)。
1.3 贮藏温度对花粉活力的影响 花粉阴干后装入指
形管 ,并用脱脂棉封口 ,分成两份分别置于常温 (22 -
24℃)和低温(0-4℃)下贮藏 ,每隔一定时间测定一次花
粉活力 。
2 结果与分析
2.1 不同方法测定花粉活力的比较 不同的方法所测定
的花粉活力不同。染色法测得活力三种植物花粉的活力
都明显高于培养基法 。这是因为在有性杂交中存在着生
殖障碍 ,有呼吸作用的花粉粒不一定具有花粉管萌发的能
90 安徽农学通报 , AnhuiAgri.Sci.Bul.2009, 15(7)
DOI :10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2009.07.066
力;花粉管萌发不一定可以达到花粉直径的两倍 。因此培
养基法的活力指数会明显偏低 。
图 1 不同的方法测定花粉活力的比较
目前关于花粉活力鉴定的方法很多 ,主要有显微镜形
态观测法 、染色法 、离体萌发法和活体萌发法等 ,其中染色
法又有 TTC染色法 、醋酸洋红染色法 、I— KI染色法等。
染色法虽然操作简便 ,但测定误差相对较大。而培养基发
芽法应用较为普遍 ,并且测定结果比较精确可靠 ,但不同
植物花粉萌发的时间不同 ,适合萌发的条件也不同 。
2.2 培养基蔗糖浓度对花粉活力的影响 选用三种不同
浓度的蔗糖培养基 5%蔗糖 +1%琼脂 、10%蔗糖 +1%琼
脂 、15%蔗糖 +1%琼脂测定三种忍冬花粉的活力 ,测定结
果如图 2所示。对于忍冬属三种植物来说 ,浓度为 10%蔗
糖的培养基对花粉萌发较好 ,花粉萌发率最高 ,花粉萌发
率分别为 91.43%、92.22%、94.44%。
图 2 培养基蔗糖浓度对花粉活力的影响
图 3 贮藏温度对花粉活力的影响
花粉贮藏后活力的测定 ,选用浓度为 10%的蔗糖培
养基分别进行测定 ,并进行比较 。
2.3 贮藏温度对花粉活力的影响 低温 、干燥有利于花
粉活力的保存 ,这是由于花粉贮藏期间可溶性糖类和有机
酸消耗减少 ,在花粉贮藏过程中 ,贮藏温度条件对花粉生
活力影响最大。
结果表明 ,用低温冷藏的花粉萌发率(用 -1表示)明
显高于常温条件下贮藏(用 -2表示)的花粉 ,一般用冷藏
方法可比常温贮藏延长花粉寿命 40-50d。
2.4 贮藏后不同种类花粉活力的变化 由图 3可看出 ,
花粉的寿命随种类而异 ,其中鞑靼忍冬花粉的活力在低温
下保持的较好 ,相同时间内 ,其活力下降的较慢 ,因此贮藏
期延长 。有些树种的花粉活力在自然条件下数天就失去
发芽力 ,而有些树种的花粉在适当的温度和干燥条件下可
保存数年。花粉贮藏期的长短与花粉壁的性质以及在贮
藏期间花粉原生质代谢有关。贮藏期间可溶性糖类和有
机酸消耗较少的花粉 ,保持的时间较长 。
3 结论
3.1 忍冬属花粉适宜贮藏条件 忍冬属花粉适合于低温
0 -4℃贮藏。温度对延长花粉寿命有重要影响 ,低温可以
使贮藏期间可溶性糖类 、有机酸等消耗减少 ,从而保持较
长时间 。这是在低温条件下延长花粉寿命的生理学解释。
3.2 忍冬属花粉适宜的培养基 忍冬属花粉萌发最适培
养基蔗糖浓度为 10%。由于花粉萌发需要一定量的糖分
作为营养来源 ,糖浓度要适宜 ,一般用 10%蔗糖 +1%琼
脂的培养基效果较好 ,糖浓度过高会产生抑制作用。另
外 ,花粉萌发培养中一定要注意相对湿度的掌握 ,最好保
持在 85%以上。
3.3 不同种类间的比较  鞑靼忍冬的花粉(新鲜未经贮
藏)萌发率在不同糖浓度的培养基中均达到最高 ,活力随
时间下降比较缓慢 ,贮藏的时间相对较长 ,这是由于自身
遗传品质的原因造成其生活力较忍冬 、金银忍冬强 ,其花
粉萌发率最高。
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(责编:张琪琪)
91安徽农学通报 , AnhuiAgri.Sci.Bul.2009, 15(7)