全 文 ：收稿日期:2009-01-09;　修订日期:2009-07-29
基金项目:贵州省优秀科技教育人才省长基金项目资助(No.2008-61);
遵义医学院博士启动基金项目
作者简介:敖弟书(1978-),女(汉族),贵州遵义人 ,现任遵义医学院讲师 ,
硕士学位 ,主要从事医学微生物学工作.
＊通讯作者简介:钱　刚(1969-), 男(汉族),重庆垫江人 , 现任遵义医学
院副教授 ,博士学位 ,主要从事植物细胞与分子遗传学工作.
千里光属植物水煎剂的抑菌作用比较
敖弟书 ,钱　刚＊ ,罗素元 ,王安丽
(遵义医学院 ,贵州 遵义　563003)
摘要:目的 比较千里光属植物水煎剂抑菌效果 , 为千里光潜在药用价值的开发利用提供依据。 方法 二倍稀释法被用
于检测 4种千里光对 5种细菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果 4种千里光对甲型副伤寒杆菌表现出相同的抑菌效果 , 但
对金黄色葡萄球菌 、铜绿假单胞菌 、大肠埃希菌和福氏痢疾杆菌抑菌作用不同 , 表现为全缘千里光对金黄色葡萄球菌抑
菌作用最强(MIC=1.95g/L), 对大肠埃希菌和甲型副伤寒杆菌抑菌能力最差(MIC=7.81g/L)。结论 全缘千里光可
能具有更高的抗菌有效药用成分 ,同种千里光对不同细菌表现出不同最低抑菌浓度可能是由于不同细菌生物学性状的
差异所致。
关键词:千里光;　抑菌作用;　最低抑菌浓度
中图分类号:R285.5　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2009)12-3051-02
　　千里光 SenecioscandensBuch-Ham系菊科(compositae)千里
光属多年生草本植物 [ 1] , 是我国应用历史悠久的传统中药 , 有清
热解毒 、杀虫 、明目 、凉血 、生肌 、驱风除湿的功效 [ 2] 。 千里光在
我国南方分布多个种 , 包括掌裂千里光 、麻叶千里光 、全缘千里
光 、羽叶千里光等 [ 3 , 4] 。有研究表明 , 千里光的药理学作用集中
体现在抗菌 [ 5] 、抗钩端螺旋体 [ 6] 、抗滴虫并具有抗氧化及自由基
清除活性 [ 7]等作用;临床试验表明 , 千里光对炎症性疾患及细菌
性感染具有一定疗效 [ 8] , 但迄今尚无针对不同种千里光的抗菌
效果进行研究的报道。本研究组根据资源产地和形态学特征收
集整理不同种千里光 , 以此为基础 ,比较不同种千里光抗菌效果 ,
以分析千里光的遗传资源与药理学性状之间的关系 ,为进一步明
确千里光的药理作用成分和种质改良提供参考依据。
1 　材料
1.1　参试千里光资源 参试的 8份千里光资源系本研究组采自
贵州省遵义 、毕节 、贵阳和安顺 4个地区的野生种 , 包括掌裂千里
光 、麻叶千里光 、全缘千里光和羽叶千里光各 2份(表 1)。
表 1　参试千里光 SenecioscandensBuch.-Ham.的产地与表型
编 号 表型 产地 编号 表 型 产 地
SC-003 掌裂千里光 贵州贵阳 SC-013 羽叶千里光 贵州遵义SC-004 掌裂千里光 贵州遵义 SC-014 羽叶千里光 贵州遵义
SC-005 麻叶千里光 贵州毕节 SC-017 全缘千里光 贵州安顺
SC-006 麻叶千里光 贵州毕节 SC-019 全缘千里光 贵州遵义
1.2　供试菌种 5种供试菌种系遵义医学院微生物学教研室保
存菌种 , 均为标准株 , 包括金黄色葡萄球菌(S.aureus)No.CM-
CC26001,铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)No.ATCC27853, 大肠
埃希菌(E.coli)No.ATCC25922, 甲型副伤寒杆菌(S.Paratyphi
A)No.CMCC 50001, 福 氏 痢 疾 杆 菌 (S.flexneri) No.
CMCC51573。
1.3　 培养基 M-H液体培养基。
2　方法
2.1　抗菌原液(千里光煎剂)的制备 剪取千里光第 7片叶以上
的部位 ,于 30℃烘干至恒重。参照陈奇 [ 9]的方法 ,称取 10g千里
光置于砂锅 ,加 20 ml蒸馏水浸泡 30 min后 ,用慢火煎至水量浓
缩为 10ml过滤 ,药渣另加 20 ml蒸馏水继续煎煮 、过滤 , 将 2次
滤液共 20ml煎煮浓缩 ,定容至 10 ml,即得浓度为 1 g/ml的千里
光水煎剂 ,经高压蒸气灭菌后备用。
2.2　中药最低抑菌浓度(MIC)的测定 按 NCCLS推荐的琼脂稀
释法测定实验菌株的 MIC值。制备千里光琼脂平板 , 千里光和
药敏培养基琼脂按比例混合 , 使千里光的终浓度分别为 250.0,
125.0, 62.5, 31.25, 15.62, 7.81, 3.90, 1.95, 0.98g/L。
2.3　菌液的制备 菌液调整为 0.5麦氏单位后再按照 1:10进行
稀释 , 用 1 μl定量接种环点种于琼脂表面 , 最终琼脂上所含接种
菌量为 104个 /ml。采用多点接种法 ,首先点种对照平板(不含千
里光水煎剂),随后从最低浓度开始 , 依次点种不同浓度的千里
光平板 ,于 37℃孵育 , 24h后记录无菌生长的最低千里光浓度。
3　结果
3.1　千里光抗菌效果比较 本研究结果显示 , 当终浓度高于
15.62g/L时 , 4种千里光资源对参试的 5种细菌生长均表现出
抑制作用(图 1-a)。尽管各种千里光都表现出抗菌作用 , 但量
化抗菌效果的最低抑菌浓度存在差异。当全缘千里光水煎液终
浓度为 7.81g/L时 , 仅大肠埃希菌出现菌斑(图 1-b);而当其
终浓度为 3.90g/L时 , 大肠埃希菌和甲型副伤寒杆菌能够生长
(图 1-c);在其终浓度为 1.95g/L时 ,表现为金黄色葡萄球菌不
能生长 ,其余 4种细菌能正常生长(图 1-d)。对掌裂千里光而
言 , 当其终浓度为 3.90 g/L时 , 铜绿假单胞菌 、大肠埃希菌和甲
型副伤寒杆菌能够正常生长(图 1-e)。当麻叶千里光的水煎液
终浓度为7.81 g/L时 ,表现为铜绿假单胞菌和大肠埃希菌出现菌
斑 , 而其它三种参试细菌不能正常生长(图 1-f);而对终浓度同
为 7.81 g/L的羽叶千里光 , 表现为对金黄色葡萄球菌 、铜绿假单
胞菌 、甲型副伤寒杆菌和福氏痢疾杆菌有抗菌作用(图 1 -g)。 4
种千里光的终浓度为 0.98g/L时表现为对参试的 5种细菌没有
抗性(图 1-h)。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.12 时珍国医国药 2009年第 20卷第 12期
平板标注:金黄色葡萄球菌(1区),铜绿假单胞菌(2区),
大肠埃希菌(3区),甲型副伤寒杆菌(4区),福氏痢疾杆菌(5区)
图 1　千里光抗菌作用比较
3.2　不同种千里光的最低抑菌浓度 如表 2所示 , 参试的 4种千
里光对不同细菌抗菌作用有不同的最低抑菌浓度 ,表现出不同的
抗菌效果。与全缘千里光对金黄色葡萄球菌抗菌效果相比较 ,掌
裂千里光 、羽叶千里光和麻叶千里光的最低抑菌浓度同为 3.90
g/L,高出全缘千里光的 MIC一倍。 4种千里光对铜绿假单胞菌
的抗菌作用表现出更大的差异 , 其中 , 麻叶千里光的抗菌效果
最差 , 最低抑菌浓度为15.62g/L, 然后是掌裂千里光和羽叶千里
光 , 二者的 MIC同为 7.81g/L, 全缘千里光的 MIC最低 , 为 3.90
g/L,表现出最好的抗菌效果。整体来讲 , 4种千里光对参试的大
肠埃希菌抗菌作用较低 ,其 MIC介于 7.81 ～ 15.62 g/L之间 , 其
中 , 掌裂千里光 、羽叶千里光和麻叶千里光对大肠埃希菌的抗菌
能力显得更低 ,抗菌效果最好属全缘千里光 , 其 MIC也高达 7.81
g/L。不同种千里光对甲型副伤寒杆菌的抗菌作用没有表现出差
异 , 参试的 8份千里光资源的 MIC均为 7.81 g/L, 显示出相对较
低的抗菌能力。 4种千里光对福氏痢疾杆菌的抗菌作用表现为
掌裂千里光和全缘千里光较强 , 二者的 MIC为 3.90 g/L, 相对来
讲 , 羽叶千里光和麻叶千里光的抗福氏痢疾杆菌效果较差 , 它们
的 MIC因此显得更高(7.81g/L)。
总体看来 , 4种千里光对不同细菌的抗菌效果并不相同 , 而
且同种千里光对不同细菌的最低抑菌浓度也不相同。其中 ,千里
光对金黄色葡萄球菌的抗菌效果最好 ,而对大肠埃希菌的抗菌作
用最差 。 4种千里光对 5种细菌的抗菌效果显示 , 全缘千里光对
5种细菌的抗菌作用更强(见表 2)。
表 2　参试千里光对 5种细菌的最低抑菌浓度 (MIC) g· L-1
菌种 SC-003 SC-004 SC-005 SC-006 SC-013 SC-014 SC-017 SC-019
金黄色葡萄球菌 3.90 3.90 3.90 3.90 3.90 3.90 1.95 1.95
铜绿假单胞菌 7.81 7.81 15.62 15.62 7.81 7.81 3.90 3.90
大肠埃希菌 15.62 15.62 15.62 15.62 15.62 15.62 7.81 7.81
甲型副伤寒杆菌 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81
福氏痢疾杆菌 3.90 3.90 7.81 7.81 7.81 7.81 3.90 3.90
4　讨论
千里光被认为是一种有良好开发前景的抗菌中草药 [ 10] 。
体外抗菌实验结果表明 , 千里光全草水煎剂具有广谱性抗菌作
用 [ 11] , 但迄今尚无对不同种千里光药理学作用进行比较的研
究 ,使千里光开发缺乏量化分析指标。我们通过对金黄色葡萄
球菌 、铜绿假单胞菌 、大肠埃希菌 、甲型副伤寒杆菌和福氏痢疾
杆菌抗菌效果研究证实了千里光的细菌生长抑制作用 , 本研究
结果表明 , 不同种千里光对甲型副伤寒杆菌有相同的抑菌效
果 ,但对其它 4种不同细菌的抗菌作用存在差异 , 表现为全缘千
里光的抗菌效果更佳 , 意味着全缘千里光具有更高的潜在药用
价值。
周艳娟等 [ 12]比较羽叶千里光根 、茎 、叶和花 4个部位甲醇提
取物的抗氧化活性时发现叶提取物对二苯苦味酰自由基(DP-
PH)清除作用最强 ,表明植物不同器官的生理代谢存在差异 , 这
种差异会影响次生代谢产物的累积。 千里光遗传特性稳定 [ 2] ,
不同种千里光遗传背景差异稳定 ,这可能是导致不同种千里光对
不同菌株抑菌效果差异的遗传学因素。
生药中药理作用显著或足以说明该生药疗效的成分 , 通常认
为是有效成分 [ 13] 。目前发现 ,千里光水煎剂含有黄酮及其苷类 、
酚酸性成分 、鞣质 、生物碱以及挥发油等化学成分 [ 14] , 尽管发现
千里光全草水煎剂及黄酮类提取物均有很强的抗菌作用 , 但决定
千里光药理学性状的有效化学成分究竟是哪些 ,却并不清楚。本
研究发现 , 除甲型副伤寒杆菌外 , 不同种千里光对同一种细菌的
最低抑菌浓度并不相同 ,表明不同种千里光的有效抑菌化学成分
的含量或天然产物结构之间存在差异。能否结合不同的抗菌效
果 , 对比分析不同种千里光水煎剂的化学组分 , 以明确千里光的
有效抗菌化学成分或结构 ,正在做进一步研究。
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