全 文 ：生命科学与实验研究
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引言
太行菊[Opisthopapus taihangensis (Ling) Shih]是菊科太
行菊属多年生草本植物[1],是我国特有的珍稀濒危物种。国内关于太
行菊的研究起步较晚,且多集中于分类学、繁育及种质资源保存等
方面。这些研究有效扩大了太行菊的种群数量,为太行菊的开发利
用提供了先决条件。
近几年,太行菊的活性成分研究逐渐引起人们的关注,已有报
道主要集中太行菊提取液抗氧化性的测定。刘海芳等[2]检测到太行
菊花、叶、茎均含有绿原酸和芦丁、槲皮素、木犀草素和芹菜素等黄
酮类物质。与野菊相比,太行菊水、醇提取液均具有较高的抗氧化
性,叶片提取液抗氧化性最强,可能与太行菊叶片总黄酮和多酚类
物质含量较高有关[3,4],这些化合物是菊花具有抗氧化作用的主要活
性物质。对于太行菊提取液抑菌作用的研究还未见报道。
因此,本文以太行菊的叶片为对象,研究其醇提取液对金黄色
葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用,为太行菊的药用开发提供理论基
础和依据。
1 材料和方法
1.1 材料与设备
1.1.1 实验材料 太行菊叶片
1.1.2 实验菌种
选用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,G+)和大肠杆
菌(Escherichia coli,G-),均由本实验室保存。
1.1.3 主要仪器设备及试剂
VC-255超声破碎仪、HH-2恒温数显水浴锅、SYQ-DSX-
280-B手提式压力蒸汽灭菌锅、DHP-9162电热恒温培养箱、Allegra
64R台式高速冷冻离心机、THZ-D台式恒温振荡器、UV1700分光光
度计、乙醇(国产试剂)、0.5麦氏比浊液等。
1.2 实验方法
1.2.1 太行菊提取液的制备
取太行菊叶片洗净,60℃烘干,粉碎,过40目筛,得干粉备用。精
确称取太行菊干粉2 g,参考文献[5]的方法,分别制成蒸馏水、50％乙
醇、80％乙醇和95％乙醇提取液,用0.45m微孔滤膜过滤,4℃冰箱
冷藏待用。
1.2.2 含菌平板的制备
供试细菌进行平板活化,用麦氏比浊法,调制成含菌体为106～
107个/mL的菌悬液.转移50L菌悬液到LB平板培养基上,用无菌的
玻璃涂布棒将菌液涂抹均匀。
1.2.3 抗菌活性的测定
滤纸片法:将6 mm无菌滤纸片分别在不同提取液中浸泡3h,
37 °C温箱干燥后,用紫外灯照射灭菌10～15min。用无菌镊子将滤
纸片放在含菌平板上,每种提取液4次重复。将所有菌板放于37℃培
养18 h,用游标卡尺十字交叉法测定抑菌圈直径,大于或等于7mm
判为抑菌,根据抑菌圈大小判断太行菊提取液抑菌能力。
1.2.4 最低抑菌浓度(MIC)
选取抑菌效果明显的提取液,采用二倍稀释法,用无菌蒸馏水
将提取液稀释成不同浓度,备用。分别配置S.aureus和E.coli的菌悬
液,其浓度控制在106～107个/mL之间。取500 L不同浓度提取液分
别同25L菌悬液充分混合,取混合液50 L滴加在LB固体平板培养
基上,均匀涂布后置于37 ℃培养,24 h后观察结果,以能够抑制平
作者简介:张钰倩(1991 —),女,河南荥阳人,硕士,主要从事天然产物化学研究
通讯作者:张靖楠(1983 —),女,辽宁沈阳人,讲师,主要从事农业生物资源的可持续利用研究
太行菊提取物的抑菌作用研究
张钰倩 刘君锋 张靖楠 *
(郑州大学生命科学学院 河南郑州 450001)
摘要:本文对太行菊叶片不同溶剂提取物进行抑菌作用研究。结果表明,太行菊乙醇提取液抑菌效果好于水提液。其中,80 %乙醇提取液抑菌效
果最显著,对S. aureus和E. coli的MIC分别为25 mg/mL和50 mg/mL,S. aureus对提取物更加敏感。
关键词:太行菊 提取物 抑菌作用 MIC
中图分类号:Q949.9 文献标识码:A 文章编号:1674-2060(2016)01-0015-01
抑菌圈直径/mm 提取液
S. aureus E. coli
蒸馏水 6.65a cCb 7.08 cB
50%乙醇 8.41 bB 8.33 aAB
80%乙醇 14.36 aA 8.64 aA
95%乙醇 8.92 bB 7.68 bB
注：a-直径小于 7mm，为无抑菌作用；b-同列数据后的不同小写字母表示差异达0.05显著水平，大写字母表示差异达0.01显著水平。


表 1 太行菊叶片提取物抑菌效果
浓度/（mg/mL） 细菌
0 12.5 25 50 100 200
S. aureus ＋＋＋ ＋＋ － － － －
E. coli ＋＋＋ ＋＋ ＋ － － －
注：“－”无菌生长；“＋”菌体生长少；“＋＋”菌体生长较多；“＋＋＋”菌体生长很多；空白对照（0）为“＋＋＋”。


表 2 80% 太行菊叶片乙醇提取液 MIC 测定结果
······下转第18页
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4 总结
(1)实验组在生态透析持续进行一段时间后,藻类去除较为明
显,对应的嗜肺军团菌的生物量降低也较为明显,说明通过去除冷
却水中的藻类,能在一定程度降低嗜肺军团菌的生物量。
(2)未作任何处理的冷却水在一段时间后,藻类的生物量并不会
自行消减,而且嗜肺军团菌的生物量也并未随藻类的变化而呈现较
为明显的变化趋势,在实验段内依然保持着较高的浓度。
(3)有关研究表明,冷却塔水、淋浴设施的热水系统、喷水池水、
一般自来水等水体,未必能包含军团菌生长至少所需的9种氨基酸,
因此,有人认为军团菌之所以能在这些人工环境中生长繁殖,是因
为这些设备的构建尤其是设备的管道不常清洗,留下了有机物和原
虫,从而为军团菌的生长繁殖提供了充足的养料[7-8]。故通过生态
透析技术控制冷却塔里冷却水的营养,抑制冷却塔内藻类爆发,降
低藻类污垢的生成,从而减少了军团菌的庇护场所,能够在一定程
度上抑制了冷却塔冷却水内军团菌的爆发。
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糖尿病、老年痴呆、高血压、肺部疾病等［8-10］。摄取足够的抗氧化
剂,可增强身体抗氧化防卫系统、保护细胞免受自由基侵害、促进新
陈代谢。因此,维生素E的抗氧化小麦胚芽油软胶囊中的研究,将有
利于人类疾病的预防和治疗。
参考文献
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······上接第15页
······上接第14页
板可见菌生长最高稀释度为最低抑菌浓度(MIC),用无菌蒸馏水做
空白对照。
2 结果与分析
如表1所示,不同溶剂提取液抑菌效果之间存在显著差异(P <
0.05)。不同乙醇提取液对S. aureus和E. coli均有抑制作用。其中,
80 %乙醇提取液对2种细菌的抑制作用最好。水提液抑菌效果相对
较差,对S. aureus未表现抑制作用。说明不同溶剂对太行菊成分的
提取存在差异,乙醇提取液较水提取液的抑菌作用显示更强,其原
因可能是太行菊中所含绿原酸和黄酮类物质等有效的抑菌物质属
于有机物质,更易溶于乙醇这类有机溶剂从而实现较好的提取。80%
乙醇对抑菌成分提取分离的效果最好。与E.coli相比,S. aureus对
太行菊乙醇提取物更敏感。
选择抑菌圈最明显的80%乙醇提取物进行MIC测定。结果如表
2所示,太行菊80%乙醇提取物对S. aureus的MIC值为25mg/mL,
对E. coli的MIC值为50mg/mL,说明其对S. aureus的抑菌效果
好于对E. coli,与滤纸法测定的抑菌权结果具有较好的一致性,与
羊耳菊的结果相似[6],这可能与细胞壁的组成成分有关。
3 结论与讨论
本试验已初步证明,太行菊叶片乙醇提取液比水提液具有更好
的抑菌作用,相较于试验中采用的其他溶剂,80%乙醇更能有效提取
太行菊体内的抑菌成分。S. aureus比E. coli更敏感,且抑菌圈和
MIC结果具有相关一致性。为下一步从太行菊分离提纯具有生物活
性的有效抑菌成分提供了理论依据。
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