全 文 ：龙血竭、苦参、蜘蛛香的体外抑菌作用研究*
＊
王鹏娇，孟小夏，高秀丽＊＊
(贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 550004)
［摘 要］目的:研究龙血竭、苦参、蜘蛛香的体外抑菌活性。方法:以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽
胞杆菌和白念珠菌为实验菌株，采用固体培养基连续稀释法观察龙血竭、苦参、蜘蛛香体外抑菌活性。结果:龙
血竭和苦参对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和白念珠菌均有不同程度的抑菌作用，对大肠埃希菌的抑菌作用
较差;蜘蛛香对这 3 种细菌及白念珠菌均有较好的抑菌作用。结论:龙血竭、苦参和蜘蛛香对细菌和真菌在体
外有一定的抑菌活性，有一定的开发前景。
［关键词］龙血竭;苦参;蜘蛛香;抑菌作用;体外研究
［中图分类号］Ｒ285;Ｒ961 ［文献标识码］A ［文章编号］1000-2707(2014)04-0508-03
Study on the External Bacteriostasis of Three Chinese Herbal Medicine
WANG Pengjiao，MENG Xiaoxia，GAO Xiuli
(School of Pharmacy，Guiyang Medical University，Guiyang 550004，Guizhou，China)
［Abstract］Objective:To investigate the external bacteriostasis of Dragon ＇s blood，Ｒadix sophorae
flavescentis and Valeriana jatamansi jones． Methods:Agar serial dilution assay was applied to detect
the antibacterial action of the three traditional Chinese medicines． The microorganisms used in this ex-
periment were Staphylococcus aureus，Bacillus subtilis，Escherichia coli and Candida albicans． Ｒe-
sults:The Dragon＇s blood and Ｒadix sophorae flavescentis had different levels of inhibition effects on
Staphylococcus aureus，Bacillus subtilis，and Candida albicans，but it showed weak inhibition effect on
Escherichia coli;the Valeriana jatamansi jones had good inhibition effect on all of the microorganisms．
Conclusions:The three traditional Chinese medicines have external bacteriostasis effects on germ and
fungus． They might have bright perspectives for infectious diseases．
［Key words］Dragon＇s blood;Ｒadix sophorae flavescentis;Valeriana jatamansi jones;bacteriostasis;
in vitro
近年来，由于抗生素的不合理应用，临床耐药
菌株不断增加，细菌及真菌的耐药性增强，导致临
床感染病死率不断增高［1］。据报道，龙血竭提取
物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、真菌有抑制
作用，但是龙血竭药材的抑菌作用未见报道［2 － 3］;
苦参碱和氧化苦参碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希
菌、绿脓杆菌、白念珠菌等多种细菌及真菌有抑菌
活性，但是它们的最低抑菌浓度(minimal inhibitory
concentration，MIC)较高，抑菌活性不高，对苦参的
醇提物的抑菌作用的研究还未见报道;蜘蛛香的抑
菌试验研究还未见报道［4 － 6］。本实验选取了 4 种
常用指示菌，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus au-
reus，S． aureus)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis，
B． subtilis)、大肠埃希菌(Escherichia col，E． coli)
和白念珠菌(Candida albicans，C． albicans)，采用
固体培养基连续稀释法，观察龙血竭、苦参、蜘蛛香
3 种中药的体外抑菌作用。
1 材料和方法
1． 1 材料
805
第 39 卷 第 4 期
2014 年 8 月
贵 阳 医 学 院 学 报
JOUＲNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
Vol． 39 No． 4
2014． 8
* *［基金项目］贵州省科技厅计划项目［黔科合社字(2009)5025 号］;贵阳市科技局计划项目［筑科合同(2012204)7 号］
＊＊通信作者 E-mail:xiuligao@ hotmail． com
网络出版时间:2014 － 08 － 14 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /52． 5012． Ｒ． 20140814． 2246． 063． html
303A-4 型恒温培养箱(武汉精华科教仪器有
限公司)，SW-CJ-1F型超净工作台(苏净集团安泰
公司)，YXQ-SG46 － 280SA 型压力蒸汽灭菌器(上
海博讯实业有限公司医疗设备厂)，202AV-2 型干
燥箱(武汉精华科教仪器有限公司)，DFT-2000 型
手提式高速中药粉碎机(温州市大德中医机械有
限公司)，超临界流体萃取仪(北京化工集团)。营
养琼脂培养基、沙保氏培养基(上海盛思生化科技
有限公司)，二甲基亚砜(DMSO，天津科密欧化学
试剂有限公司)，龙血竭(西双版纳版纳药业有限
责任公司);金黄色葡萄球菌 ATCC25112、大肠埃
希菌 ATCC25922、白念珠菌 ATCC10231 购自中国
食品药品检定研究院，枯草芽胞杆菌由贵阳医学院
微生物教研室分离鉴定。
1． 2 方法
1． 2． 1 药物的配制 将龙血竭粉碎过 100 目筛，
称取 5 g用 60% DMSO溶解并定容至 50 mL;粉碎
苦参，用 60%乙醇回流提取，微波真空干燥，称取
浸膏粉 5 g用 60% DMSO溶解并定容至 50 mL;粉
碎蜘蛛香，超临界萃取(萃取压力 12 MPa，萃取温
度 45 ℃，分离温度 35 ℃，萃取时间 1 h)，称取萃取
物 5 g用 60% DMSO溶解并定容至 50 mL，此时药
物的浓度为 100 g /L。
1． 2． 2 含药培养基的配制 无菌操作下用生理盐
水按照二倍稀释法将药物稀释成 100、50、25、
12. 5、6. 25、3. 125、1. 562 5 g /L 的浓度梯度，同法
稀释 60%的 DMSO空白溶剂做阴性对照［7］。取 7
个直径 60 mm的无菌平皿编号后按顺序分别加入
配好的药物 0. 5 mL，同法处理阴性对照。营养琼
脂培养基经 121 ℃灭菌 20 min，稍微放冷至 60 ℃
左右，用无菌刻度吸管取 4. 5 mL 到一份加好药的
平皿中，轻摇使药液和琼脂充分混匀，放置，冷却，
该含药平皿将接种金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆
菌、大肠埃希菌这 3 种菌，先做好标记。另外将沙
保氏培养基经 115 ℃灭菌 20 min，然后按照上述方
法制备含药培养基，用以接种白念珠菌。
1. 2. 3 菌悬液的制备 采用直接菌落法制备菌悬
液［8］。无菌操作下将金黄色葡萄球菌、枯草芽胞
杆菌、大肠埃希菌分别划线接种于营养琼脂斜面培
养基上，将白念珠菌划线接种于沙氏斜面培养基
上，37 ℃培养 24 h。将用接种环挑取适量的各菌
培养物于无菌生理盐水中，校正菌液浓度相当于
0. 5 麦氏标准比浊管，用无菌生理盐水稀释 100 倍
备用，此时菌液为 1. 5 × 106 CFU /mL。
1. 2. 4 最低抑菌浓度 无菌操作下用接种环取配
制好的菌悬液一环，分别接种于含药培养基及对照
培养基表面。将平皿倒置放入 37 ℃培养箱中培养
24 h，观察细菌在不同浓度药物平皿上的生长情
况，无菌生长的平皿所含药物最低浓度即为该药的
最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration，
MIC)。
1. 2. 5 最低杀菌浓度 将 MIC 测定中未生长细
菌的琼脂用镊子小心取下，反过来涂于营养琼脂平
板上，做好标记，37 ℃培养 24 h，以仍无细菌生长
的管内的药物浓度为该药的最小杀菌浓度(mini-
mum bactericidal concentration，MBC)。
2 结果
2. 1 MIC测定结果
根据 1. 2. 4 项下方法测定 MIC，结果见表 1。
表中的药物浓度为每个平皿中药物与培养基混合
后的有效浓度。
表 1 3 种中药提取物的 MIC
Tab． 1 The minimum inhibitory concentration
of three Chinese herbal extract
中药提取物
MIC(g /L)
S. aureus E. coli B. subtilis C. albicans
龙血竭 0. 321 5 ＞ 10 0. 312 5 10
苦参提取物 2. 5 ＞ 10 0. 625 10
蜘蛛香提取物 0. 625 2. 5 2. 5 5
阴性对照 － － － －
“－”表示没有测到 MIC值
2. 2 MBC测定结果
根据 1. 2. 5 项下方法测定 MBC，结果见表 2。
表中的药物浓度为每个平皿中药物与培养基混合
后的有效浓度。
表 2 3 种中药提取物的 MBC
Tab． 2 The minimum bactericidal concentration
of three Chinese herbal extract
中药提取物
MBC(g /L)
S. aureus E. coli B. subtilis C. albicans
龙血竭 5 ＞ 10 ＞ 10 ＞ 10
苦参提取物 ＞ 10 ＞ 10 ＞ 10 ＞ 10
蜘蛛香提取物 0. 625 5 ＞ 10 ＞ 10
3 讨论
本实验采用固体连续稀释法中的平板法测抑
905
4 期 王鹏娇等 龙血竭、苦参、蜘蛛香的体外抑菌作用研究
菌活性，该方法可用于测定同一药物对多种实验菌
株的 MIC，结果准确，重复性好，且不受药物颜色及
浑浊度的影响，特别适合中药的药效学实验［9］。
本实验检测到苦参提取物对金黄色葡萄球菌
的 MIC值(0. 321 5 g /L)比文献报道的苦参碱对金
黄色葡萄球菌的 MIC值(25 g /L)和氧化苦参碱的
MIC值(25 g /L)要小;对白色念珠菌的 MIC 值(10
g /L)比文献报道的也小很多［5］，说明苦参中的抗
菌活性物质并非仅是苦参碱和氧化苦参碱。
在临床上，龙血竭片口服联合局部上药治疗宫
颈糜烂效果显著且无刺激性，患者依从性好，在治
疗带状疱疹、压疮及鼻出血等疾病有很好的疗
效［10 － 13］;苦参在治疗妇科炎症、炎性外痔、前列腺
炎等炎症具有很好的疗效［14 － 16］;蜘蛛香对革兰阳
性细菌及轮状、非轮状病毒肠炎都具较好的疗
效［17］。本实验的体外抑菌效果来看，进一步说明
3 种中药在治疗细菌及真菌感染方面有一定的开
发前景。
体外实验未考虑到药物在体内的动力学和复
杂的生物学，因此，体外实验并非总能预测到药物
在患者体内的作用，还需进行体内实验和抗菌机制
的研究［8］。
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(2014－04－23 收稿，2014－06－02 修回)
中文编辑:周 凌;英文编辑:赵
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中文编辑:周 凌;英文编辑:周 凌
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贵 阳 医 学 院 学 报 39 卷