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蕺菜属植物富钾基因型的筛选



全 文 :第25卷第6期
2011年12月
水土保持学报
Journal of Soil and Water Conservation
Vol.25No.6
Dec.,2011
 
  收稿日期:2011-06-30
  基金项目:国家留学基金委员会留学回国人员启动基金
  作者简介:邹宇婷(1987-),女,硕士研究生,主要从事药用植物学研究。E-mail:yuxianlianlei@126.com
  通讯作者:吴卫(1970-),女,博士,教授,主要从事药用植物资源以及次生代谢研究。E-mail:ewuwei@sicau.edu.cn
蕺菜属植物富钾基因型的筛选
邹宇婷,吴 卫,代 沙,曾建威,李静夜
(四川农业大学 农学院,成都611130)
摘要:在低钾土壤培养和营养液培养的条件下,采用植株含钾量、吸钾速率和钾素利用率并结合植株根系
形态特征,对蕺菜属(Houttuynia Thunb.)16份不同基因型材料的富钾能力进行筛选。结果表明,峨眉蕺
菜 W01-86以及蕺菜 W01-34和 W01-71在低钾土壤培养和溶液培养时植株含钾量分别高于9.0%,
5.50%,吸钾速率大于1.50μmol/(g·h),低钾土壤培养和溶液培养时的钾素利用率分别高于2.50,0.30
g/g,为富钾基因型;W01-4和 W01-99低钾土壤培养和溶液培养时的植株含钾量分别低于8.5%,5.0%,
吸钾速率小于0.65μmol/(g·h),低钾土壤培养和溶液培养时的钾素利用率分别低于2.00,0.30g/g,为
低钾基因型。
关键词:蕺菜属;富钾;基因型
中图分类号:Q945.1;S326   文献标识码:A   文章编号:1009-2242(2011)06-0260-05
Screening Houttuynia Thunb.for Genotypes of
the Capability of Enrichment in Potassium
ZOU Yu-ting,WU Wei,DAI Sha,ZENG Jian-wei,LI Jing-ye
(Agronomy College,Sichuan Agricultural University,Chengdou611130)
Abstract:Under the low potassium solution and soil cultures conditions,capability of enrichment in potassi-
um of 16different genotypes in genus Houttuynia Thunb.were screened by comparing the potassium con-
tents,potassium uptakes and utilization ratios,and the morphology characters of root.H.cordata was cul-
tured under low and normal potassium solution conditions,the result showed that the genotype of H.emeien-
sis Z.Y.Zhu et S.L.Zhang(W01-86),H.cordata(W01-34and W01-71)had high capability of enrichment in
potassium,the contents of potassium in plant were higher than 9.0%and 5.50%and the utilization ratio of
potassium were higher than 2.50,0.30g/g,respectively,and the uptake ratio of potassium in per plant were
more than 1.5μmol/(g·h),so the genotypes W01-34and W01-86were the genotype of enrichment in po-
tassium.However,the genotypes W01-4and W01-99had lower contents of potassium lower than 8.5%and
5.0%,and the utilization ratio of potassium were lower than 2.00,0.30g/g,resperctively,under solution
and soil cultured with low potassium.Besides,the uptake ratio of potassium in per plant were less than 0.65
μmol/(g·h).The two genotypes were the genotypes with low potassium.
Key words:Houttuynia Thunb.;enrichment in potassium;genotypes
钾元素是植物生长必需的三大元素之一,参与诸多的生理活动,如光合作用、气孔导度、渗透压、光合产物
吸收、运转,酶活性及蛋白质合成等[1,2]。我国耕地土壤普遍缺钾,现有约1/4~1/3耕地土壤缺钾或严重缺钾,
尤其是长江以南广大地区[2]。我国钾肥资源短缺,主要依靠进口,寻求新的生物钾肥资源已经引起科学工作者
的兴趣。胡笃敬等从30种植物中筛选出20种富钾(高钾)植物,包括空心莲子草、金鱼藻、青萍、黑藻等[3]。近
年来陆续发现商陆、烤烟以及籽粒苋也具有很强的富集钾能力,可作为富钾绿肥开发。筛选出的富钾植物,可
将其富钾基因导入农作物中,筛选出富钾的农作物品种。蕺菜属(Houttuynia Thunb.)为三白草科(Saurura-
ceae)多年生草本。据《中国植物志》和《四川植物志》记载,蕺菜属仅蕺菜1种,全草入药,性寒味辛,有清热解
毒、利尿消肿、祛痰止咳等作用,曾在抗击非典(SARS)等重大疫情中发挥重要作用[4]。祝正银等在四川峨眉
山发现蕺菜属一新种峨眉蕺菜Houttuynia emeiensis Z.Y.Zhu et S.L.Zhang,该种在峨眉、乐山等地,也作蔬
DOI:10.13870/j.cnki.stbcxb.2011.06.013
菜和鱼腥草药用[5]。蕺菜是喜钾植物,其吸钾量远高于氮、磷的吸收量,5月中旬地上茎含钾量可达5%,可作
为富钾植物加以开发利用[6]。但对峨眉蕺菜吸钾能力的研究目前尚未见报道。鉴于此,本研究采用低钾水平
盆栽以及低钾和正常钾水平营养液培养,对具有较强富钾能力的蕺菜属植物基因型进行筛选,并对峨眉蕺菜富
钾能力进行探讨,以期为蕺菜属植物资源的进一步开发利用奠定基础。
1 材料和方法
1.1 试验材料
供试16份材料为四川农业大学农学院吴卫教授和杨瑞武教授等收集和鉴定,15份蕺菜(Houttuynia cor-
data Thunb.)与1份峨眉蕺菜(W01-86)的基本情况见表1。各材料均在四川农业大学教学科研农场同田分
小区种植多年,该农场地处四川雅安,北纬30°08′,东经103°00′,海拔620m,年平均气温16.2℃,极端高温
37.7℃,极端低温-3℃,年均相对湿度79%,年均日照时数1 039.6h,日均温≥5℃的年积温为5 770.2℃。
表1 供试材料的基本情况
材料号 来源 材料号 来源
W01-86 四川省峨眉山的栽培种 W01-41 四川省名山县新店的野生种
W01-4 四川省乐山五通桥的栽培种 W01-46 四川省都江堰紫坪的野生种
W01-5 四川省键为县清溪的栽培种 W01-71 四川省巴中市磨子乡的野生种
W01-16 四川省宜宾市宜宾县的野生种 W01-92 四川省资阳市的栽培种
W01-32 贵州松桃的栽培种 W01-94 四川省雅安市望渔乡的野生种
W01-34 重庆秀山县峻岭乡的野生种 W01-98 四川省雅安市合龙乡的野生种
W01-37 重庆酉阳县中都区的野生种 W01-99 四川省资阳市的野生种
W01-39 重庆彭水县汉邻区的野生种 W01-100 四川省邛崃市的野生种
1.2 试验设计
1.2.1 盆栽试验 供试土壤pH 值
为5.55,有机质含量为0.9%,碱解氮
含量为100.63mg/kg,有效磷和速效
钾含量分别为4.73,55.10mg/kg。
于2009年12月用直径20cm的盆,
每盆装土5kg,2010年12月分别从
四川农业大学教学科研农场蕺菜属
植物资源圃挖取16份材料的地下
茎,选取长短粗细基本一致的地下茎,剪成3个茎节为1段。每盆栽种10段,出苗后施入适量氮肥,按常规管
理。每份材料12盆,每份材料3次重复,随机区组分布。次年出苗后整株取样,每份材料取90株,30株为1
个混合样,3次重复。每株材料按叶、地上茎以及地下茎部位分开洗净,于105℃杀青15min,70~80℃下烘
干,粉碎后过0.25mm筛,供分析用。
1.2.2 营养液培养试验 营养液培养分为2个阶段,即蕺菜属植物幼苗培养阶段以及不同钾元素浓度培养阶
段。将粗细相似,长度为1个茎节的蕺菜属植物地下茎洗净,用次氯酸钙消毒后栽种在经过消毒处理的育苗漂
浮板中,漂浮板的每个小孔栽种1段蕺菜属植物地下茎,覆盖石英砂(HCl脱钙并灭菌),高度为每段茎节的
1/2。溶液培养的前6d用1/2营养液浇灌,之后用完全营养液浇灌。每3d换一次营养液,每天采用1mmol/L
HCl或0.1mmol/L NaOH调节溶液pH,使pH保持在6.0左右。营养液配方为 Hoagland-Aron配方,培养
在温度为(22±2)℃,10h光照、14h黑暗的培养室中。待蕺菜属植物出苗后,选取长势相似,三叶期的蕺菜属
植物进行试验。试验设2个钾水平(0.5,5.0mmol/L),每份材料90株蕺菜属植物幼苗,重复3次,培养25d
取样。每份材料每个培养水平取30株用于测定植株吸钾速率,每10株为1个混合样,3次重复;其余60株整
株取样测量农艺性状后于105℃杀青15min,70~80℃下烘干,粉碎后过0.25mm筛,供分析用。
1.3 测定方法
土壤理化性质按常规方法[6]测定;含钾量采用1mmol/L HCl浸提-火焰光度计法测定,其中溶液培养地
上部分的含钾量是指鱼腥草地上茎和叶的含钾量;其他分析项目按常规方法进行。
吸钾速率测定[7]:蕺菜属植物在正常供钾水平下培养20d后,将植株转移到无钾营养液中培养24h,取出
10株长势一致的植物,用0.2mmol/L的CaSO4 溶液浸洗3次,吸干根系的水分后放入配好的吸收液中,称其
总重量。吸收3h后,测定溶液中钾含量,再称重。取出植株并剪下根系,吸干根系表面的水分后称其鲜重,并
计算吸钾速率。吸收液由0.5mmol/L K2SO4 和0.2mmol/L CaSO4 组成,吸收试验在人工气候箱中完成。
2 结果与分析
2.1 不同培养条件下蕺菜属植物含钾量
2.1.1 土培条件下蕺菜属植物含钾量 植株含钾量可以反映植物吸收和富集钾的能力,用来衡量不同基因型
蕺菜属植物的富钾能力。植株不同部位含钾量的高低可以反映植株体内钾元素的运输状况,以及不同部位富
集钾的能力。表2表明,不同基因型蕺菜属植物的叶片、地上茎以及地下茎含钾量都存在显著差异。峨眉蕺菜
W01-86叶片、地上茎以及地下茎含钾量都显著高于蕺菜各材料的;其含钾量分别为3.19%,3.74%和4.83%。
162第6期       邹宇婷等:蕺菜属植物富钾基因型的筛选
蕺菜中,W01-16、W01-34和 W01-39叶片含钾量显著高于其他基因型的,且含钾量均高于2.5%;W01-46含钾
量最低,峨眉蕺菜 W01-86的含钾量是其含钾量的2.03倍。而地上茎含钾量,以 W01-16、W01-34和 W01-37
显著高于其他基因型的(≥3%);W01-41的含钾量最低,小于2%。地下茎含钾量情况与叶、地上茎的相似,以
W01-16、W01-34居高,最低含钾量也是 W01-41。综合以上分析,峨眉蕺菜 W01-86叶、地上茎以及地下茎含
钾量都显著高于各蕺菜材料的。蕺菜中,则以 W01-16、W01-34和 W01-37含钾量较高,全株含钾量均高于
10%;W01-39、W01-71和 W01-92全株含钾量高于9.0%;W01-41和 W01-99含钾量最低,分别为7.02%和
7.60%。
方差分析结果表明,不同基因型蕺菜属植物地下茎含钾量极显著地高于地上茎的(p≤0.01),地上茎的含
钾量又极显著地高于叶的(p≤0.01)。例如:峨眉蕺菜(W01-86)地上茎含钾量是叶的1.17倍,地下茎是地上
茎的1.29倍;蕺菜 W01-99地上茎的是叶片中的1.24倍,地下茎的是地上茎含钾量的1.61倍。植物体内钾
元素大多数都是通过根系从土壤中吸收,再向地上各个营养器官运输,表2的结果说明,蕺菜属植物在向地上
茎输运了必需的钾营养外,在根系还储存了大量的钾素,根系仍是蕺菜属植物最富集钾的部分。
表2 不同培养条件下蕺菜属各部位的含钾量 %
基因型
土培低钾
叶 地上茎 地下茎 全株
溶液培养
低钾地上部分 正常钾地上部分
峨眉蕺菜 W01-86  3.19A 3.74A 4.83A 11.75A 5.83ABCD  8.21D
蕺菜属 W01-4  2.22DE  2.46EF  3.57G 8.27G 4.86G 8.13DE
W01-5  2.05FG  2.33FG  3.62FG  8.00H 4.96G 7.44F
W01-16  2.63BC  3.20B 4.24B 10.07C 5.25EFG  8.34CD
W01-32  2.18E 2.80CD  3.48G 8.46F 6.35A 8.40CD
W01-34  2.62C 3.22B 4.96A 10.59B 6.35A 8.12DE
W01-37  2.48D 3.33B 4.22B 10.03C 5.83ABCD  8.89AB
W01-39  2.74B 2.49EF  3.83DE  9.05E 6.16AB  9.11A
W01-41  2.14EF  1.87H 3.02H 7.02J 5.05FG  8.48BCD
W01-46  1.57I 2.63DE  3.84DE  8.04GH  5.77BCDE  8.70ABC
W01-71  2.15EF  2.86C 4.00C 9.01E 5.86ABC  8.29CD
W01-92  2.16EF  2.84C 4.22B 9.23E 5.31DEFG  6.74G
W01-94  2.38D 2.89C 4.36B 9.63D 5.38CDEF  8.29CD
W01-98  1.97FG  2.57E 3.95CD  8.49F 6.16AB  7.70EF
W01-99  1.79H 2.22G 3.58G 7.60I 5.00CDEF  8.13DE
W01-100  2.15EF  2.26G 3.74EF  8.16GH  5.90ABC  7.56F
  注:A,B,C表示在p≤0.01水平上差异显著。下同。
2.1.2 溶液培养条件下蕺菜属植物含钾量 在不同供钾水平溶液培养下,蕺菜属植物植株含钾量也存在显著
基因型差异(表2)。低钾浓度(0.5mmol/L)溶液培养,所有材料含钾量在4.86%~6.35%变动,平均含钾量
为5.66%。以峨眉蕺菜 W01-86和蕺菜 W01-32、W01-34、W01-37、W01-39、W01-71含钾量较高,平均大于
5.7%。在正常钾溶液培养(5mmol/L)下,所有材料的含钾量都分别有增加的趋势:含钾量在6.74%~9.11%
变动,平均含钾量为8.16%。除 W01-92外,其他蕺菜材料含钾量都高于7%。其中,W01-37、W01-39和 W01-
46含钾量高于8.5%,峨眉蕺菜 W01-86次之,含钾量为8.21%。
    表3 不同基因型蕺菜属植物
吸钾速率 μmol/(g·h)
材料号 吸钾速率 材料号 吸钾速率
W01-86  1.53D W01-41  1.82CD
W01-4  0.49GH  W01-46  1.88BC
W01-5  1.85C W01-71  3.61A
W01-16  0.36HI  W01-92  0.66FGH
W01-32  1.11E W01-94  0.10I
W01-34  2.23B W01-98  0.62FGH
W01-37  0.63FGH  W01-99  0.62FGH
W01-39  0.90EF  W01-100  0.72FG
2.2 溶液培养条件下不同基因型蕺菜属植物吸钾速率
植物根系(鲜根)吸收钾元素速率的大小可以说明在相同生
长时间内植株吸收钾营养的多少。从表3可知,吸钾速率也存
在显著的基因型差异。蕺菜 W01-71的吸钾速率极显著地高
于其他蕺菜属植物因型的,吸钾速率大于3.50μmol/(g·h);
其次是蕺菜 W01-34、W01-5、W01-41和峨眉蕺菜 W01-86,吸
钾速率大于1.50μmol/(g·h);W01-16和 W01-94的吸钾速
率最慢,W01-71分别是其吸钾速率的10,35倍。
2.3 不同培养条件下蕺菜属植物钾素利用率
钾素利用率即指每1g钾转化为植物干物质的重量。从
262 水土保持学报       第25卷
  注:图中不同字母表示在p≤0.01水平上差异显著。
图1 不同培养条件下蕺菜属植物的钾素利用率
图1知,3种培养条件下,钾素利用率存在显著的基因型差异。
在土培盆栽条件下,所有蕺菜属植物钾素利用率都显著地高于
溶液培养的,且钾素利用率都高于1.00g/g,其中,蕺菜 W01-
46钾素利用率最高,达3.46g/g。在溶液培养条件下,低钾溶
液培养钾素利用率较高于正常钾培养的利用率:在低钾溶液培
养时,蕺菜 W01-16钾素利用率最高,其次是 W01-34,W01-98
最低;在正常钾培养下,W01-34的钾素利用率最高,其次是
W01-16和 W01-86,其余基因型钾素利用率都偏低。在土培和
低钾溶液培养下,峨眉蕺菜 W01-86的钾素利用率都较高,土
壤培养钾素利用率仅低于蕺菜 W01-46、W01-41和 W01-32的,低钾溶液培养的仅次于蕺菜材料 W01-16的。
2.4 不同钾浓度培养下蕺菜属植物根系形态差异
植物根冠比的大小反映地上茎与地下根的相关性,表明植物的营养生长状态。从表4可知,在低钾(0.5
mmol/L)和正常钾(5mmol/L)溶液培养条件下,不同蕺菜属植物根冠比、根长、根数和茎基部直径都表现出差
异:相对于正常钾水平,除蕺菜 W01-16、W01-34和 W01-71的根冠比升高外,其他基因型根冠比都有所降低;
正常钾溶液培养最大根冠比(W01-16)是低钾溶液培养最大根冠比(W01-5)的1.6倍;不同基因型的主根长也
表现出相同的变化趋势,除蕺菜 W01-71、W01-98和 W01-99的主根长相对正常钾浓度的有所增长外,其余基
因型主根长都大幅降低。低钾培养蕺菜侧根数都在8以上,多于正常钾培养的;总体根数也多于低钾溶液培养
的。植物茎基部直径在2种供钾水平培养下差异不显著。峨眉蕺菜的侧根数和茎部直径在2种供钾水平溶液
培养时不存在差异,其根冠比与蕺菜不同基因型的增长趋势相同,即相对于正常供钾水平有所降低,而根长则
相对变长。
表4 不同钾浓度培养蕺菜属植物根冠比和根系形态差异
基因型
低钾溶液培养
根冠比 根长/cm 侧根数 茎部直径/cm
正常钾溶液培养
根冠比 根长/cm 侧根数 茎部直径/cm
峨眉蕺菜 W01-86  0.15  1.57  8  0.15  0.19  1.37  7  0.15
蕺菜 W01-4  0.30  2.01  10  0.15  0.17  1.57  8  0.16
W01-5  0.36  2.04  11  0.14  0.22  1.56  11  0.16
W01-16  0.26  2.77  11  0.16  0.59  1.95  10  0.15
W01-32  0.23  1.81  8  0.15  0.21  1.63  12  0.13
W01-34  0.27  2.03  13  0.18  0.31  1.77  12  0.20
W01-37  0.32  1.83  9  0.17  0.23  1.70  7  0.15
W01-39  0.21  1.9  9  0.17  0.21  1.54  13  0.15
W01-41  0.17  1.96  9  0.14  0.17  1.90  8  0.22
W01-46  0.22  1.71  10  0.23  0.23  1.66  11  0.16
W01-71  0.20  1.73  11  0.16  0.48  1.88  13  0.15
W01-92  0.32  1.88  8  0.13  0.30  1.65  11  0.14
W01-94  0.40  1.95  17  0.15  0.25  1.83  8  0.15
W01-98  0.20  1.95  8  0.19  0.18  2.28  9  0.15
W01-99  0.37  1.78  9  0.15  0.21  1.79  6  0.17
W01-100  0.25  1.74  10  0.15  0.19  1.40  11  0.15
3 讨 论
我国从20世纪70年代就开始富钾(高钾)植物的筛选研究,彭科林等先后从事富钾植物的筛选,已筛选出
了20多种高钾植物[8,9]。目前,国内外对于耐低钾植物的筛选已有深入研究,已建立完善的筛选体系[10],而对
于富钾植物的筛选研究报道很少,李廷轩等认为用筛选耐钾植物的指标体系(生物量,吸收动力曲线等)来筛选
富钾植物基因型显然不妥,耐钾和富钾属于不同的体系,采用某一个指标来判定也是不完善的,因而采用了植
株含钾量、单株吸钾量和吸钾速率等指标作为筛选富钾基因型植物的依据[11]。也有研究者采用钾吸收动力学
参数、钾素利用率、钾吸收积累曲线等作为筛选富钾植物的依据[12,13]。植株含钾量代表着植物吸收以及贮藏
钾元素的能力。本研究认为植株含钾量是筛选植物富钾基因型必不可少的指标,而植物根系(鲜根)吸收钾元
素速率的大小直接影响到植物吸收钾营养量的多少,从而引起不同植株体内含钾量的高低差异。因此,植物根
362第6期       邹宇婷等:蕺菜属植物富钾基因型的筛选
系吸钾速率可以用来衡量植物是否富集钾。一般意义的富钾(高钾)植物是指植物从生长介质中获取钾元素并
将其转化为经济产量的能力[14],包括两方面的内容:一是指具有较高钾素吸收效率,即植物根系从缺钾或低钾
生长介质中吸收钾素并向地上转运钾素的能力;二是具有较高钾素利用率,即单位养分吸收量所获得的作物经
济产量较高。因此,本研究采用植株含钾量、吸钾速率、钾素利用率以及植物根系的形态特征作为筛选蕺菜属
植物富钾基因型的依据。目前,耐低钾、富钾植物基因型的筛选大多局限于溶液培养,与植物实际生长环境相
差较大。本研究采用溶液培养和盆栽培养(与植物生长环境接近)相结合的方法从16份蕺菜属植物材料中筛
选富钾(高钾)基因型。研究中发现,某些基因型(蕺菜 W01-34和峨眉蕺菜 W01-86)在2种培养条件下都比较
稳定,但有些基因型在2种条件下相差较大,如蕺菜 W01-99在低钾土培时的含钾量仅高于最低含钾量,而在
低钾溶液培养时含钾量居中。峨眉蕺菜 W01-86、蕺菜 W01-34和 W01-71在土壤和溶液2种生长介质中生长
都相对稳定,因此研究采用这3种富钾基因型材料作为以后进一步研究的富钾对象。
在溶液培养条件下,正常钾培养时所有材料的含钾量都是低钾培养时的2倍左右,低钾溶液培养所有供试
材料的叶、地上茎、地下茎以及全株含钾量也存在明显基因型差异,并且在供钾充足情况下,各材料都吸收了足
够的钾营养,难于体现材料自身的富钾能力。因此,本研究认为低钾培养确实有利于富钾基因型的筛选,这与
李廷轩等[11]、徐玮[15]得出的结论一致。峨眉蕺菜(W01-86)的叶、地上茎、地下茎和全株含钾量在土壤和低钾
溶液培养时全株含钾量都极显著高于蕺菜属各材料的。土壤和低钾溶液培养时其全株含钾量分别为11.75%
和5.83%。蕺菜中,以 W01-34和 W01-71含钾量最高,土壤培养时含量分别为10.59%,9.01%,低钾溶液培
养时含量分别是5.83%,5.86%,远远高于富钾籽粒苋的含钾量(>3%)[11],也高于高钾烟草含钾量
(8.2%)[16]。吸钾速率代表着植物从生长介质中获取钾元素的多少,从而影响植株的含钾量。峨眉蕺菜 W01-
86的吸钾速率为1.53μmol/(g·h),蕺菜 W01-34和 W01-71的吸钾速率分别为2.23,3.58μmol/(g·h),与
籽粒苋吸钾速率相当[11]。钾素利用率代表植物将钾元素转化为经济产量的能力,峨眉蕺菜 W01-86在土培和
低钾溶液培养时钾素利用率分别高于2.5,0.5g/g,具有很高的钾素利用率,并且土培时的钾素利用率更高,
因此,土壤仍是植物生长的最佳介质。综合以上分析,峨眉蕺菜的富钾能力明显强于蕺菜各材料的,W01-86
是一份难得的富钾材料。但本试验只采用了峨眉蕺菜其中一种基因型,其他基因型是否也具有强富钾能力还
须进一步探索。
植物生长所需的钾营养绝大部分来自土壤,而根系是植物从土壤中获取钾的主要器官,因此,植物含钾量
以及吸钾速率等都与根系存在密切关系。本试验考察根冠比以及根系的形态特征结果表明,根冠比以及主根
长都是在正常钾溶液培养生长状态更佳,侧根数以及茎基部直径没有显著差异,说明蕺菜属植物富钾不是主要
通过根系形态来体现。但是绝大部分的钾营养都是通过根系从生长介质中获得,因此蕺菜属植物钾的富集可
能与根系的生理特性等有密切关系,对此还须做深入研究。
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462 水土保持学报       第25卷