全 文 :sVCAM-1水平的高低也作为一个参考指标 ,均是值
得研究的课题.
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编辑 黄良田
收稿日期:2002-11-27; 修回日期:2003-02-24
作者简介:王增禄(1957-),男(汉族),陕西省蒲城县人.博士生(导师
赵文明).T el.(029)3374774 Ext.504 Email.zengluw ang @hot-
mai l.com
·经验交流· 文章编号:1000-2790(2003)14-1320-01
槐属苷的紫外分光光度法检测
王增禄1 ,王多宁2 ,王剑波3 ,孙 刚3 , 赵小兵3 , 王四
旺3 ,赵文明1 (1 西安交通大学生命科学与技术学院生物
化学与分子生物学实验室 , 陕西 西安 710049 , 2陕西医学高
等专科学校 ,陕西 西安 710068 , 3 第四军医大学药物研究所 ,
陕西 西安 710033)
【关键词】槐属苷;紫外分光光度法;测定
【中图号】R282.71 【文献标识码】B
1 材料和方法
1.1 材料 仪器设备 WF2800-D3A 型紫外分光光度计 , 北
京第二光学仪器厂生产;R200D型电子分析天平 , 德国沙多
利斯公司生产.950 mL·L-1乙醇 , 分析纯 ,西安化学试剂厂生
产;染料木素 , 美国 Sigma 公司产品;槐属苷对照品(98%以
上), 自制(国内外尚无标准品出售).
1.2 方法 槐角甙 、染料木素属黄酮类化合物 , 其紫外扫描
图谱显示 ,都以带Ⅱ为主峰(245 ~ 270 nm), 而配糖基对带Ⅱ
的影响不大 ,所以我们以染料木素为标准品 , 以槐属苷为标准
对照品 , 分别用乙醇配制成浓度为 11.28 mg·L -1的溶液 , 进
行紫外扫描 ,同样对醇提样品液进行紫外扫描 ,观察最大吸收
波长峰位变化;准确称取槐属苷 5.4 mg , 用 950 mL·L-1乙醇
溶解 ,定容于 50 mL 的容量瓶中 ,配制成 108 mg·L-1的槐属
苷母液.然后用 800 mL·L-1的乙醇稀释成 0.5 , 2 , 4 , 6 , 8 ,
9 , 10 , 11 , 12 μmg·L-1的槐属苷梯度溶液 , 用紫外分光光度
计在 260 nm 测定 A 值(ABS),然后以 ABS 对槐属苷的浓度
做标准曲线;称取槐属苷 , 用 800 mL·L-1的乙醇配制标准曲
线范围内的 3 种不同浓度的溶液 , 分别连续测定 A 值的变
化 , 共测定 5 次.并分别观测日内和日间测定值的变化;称取
槐属苷 , 用 800 m L·L-1乙醇配制标准曲线范围内的 3 种不同
浓度的溶液 , 分别连续测定 A 值的变化 , 共测定 5 次.并分别
观测日内和日间测定值的变化;用 800 mL·L-1的乙醇配制槐
属苷溶液 , 不断稀释并做 UV 吸收测定 , 以光密度值对槐属
苷的浓度做曲线 , 观察两者的线性关系.当相关系数>0.999
时 , 其最小点所对应的槐属苷浓度即为槐属苷的最低检出浓
度;取 3 种不同浓度的槐属苷溶液 , 分别加入到同一醇提样品
液中 , 测定计算测定浓度和实际浓度的差别 , 得到回收率.
2 结果 槐属苷紫外测定的λmax 为 260 ~ 261 nm(乙醇
中).醇提样品液的测定结果与标准对照品相同 ,故选择λmax
=260 nm 为测定波长.槐属苷的浓度与 A 值(ABS)呈线性关
系 , 相关系数 r=0.9997.其线性方程为 y=0.078398 x-0.
01054.槐属苷的最低检出浓度为 0.125 mg·L -1.方法的精
密度 、稳定性和回收率稍有差异(表 1).
表 1 UV 测定槐属苷的精密度 ,稳定性和回收率
c/
mg·
L-1
精密度(n=5)
A
变异
系数
(CV%)
稳定性(n=5)
日内变
异系数
/ %
日间变
异系数
/ %
回收率(n=3)
检出量/
mg·L-1
回收率
/ %
2 0.145±0.003 1.93 1.87 1.75 2.02±0.07 101
6 0.465±0.004 0.87 1.04 0.86 6.00±0.12 100
10 0.783±0.010 1.24 0.62 0.51 9.98±0.09 99
3 讨论 用 UV 方法测定槐属苷方法的精密度 、灵敏度 、稳
定性较好 , 其方法简便 、快速 , 适用于生产过程中的槐属苷浓
度测定[ 1 , 2] .
【参考文献】
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编辑 许昌泰
1320 第四军医大学学报(J Four th M il Med Univ)2003;24(14)