全 文 ：收稿日期:2007-04-28;　修订日期:2007-08-01
作者简介:闫志慧(1983-),女(汉族),山西晋中人 ,现为兰州大学硕士研
究生 ,学士学位 ,主要从事药用植物资源的开发与利用研究工作.
炮制后鲜卑花属植物叶中熊果酸的超声提取工艺
闫志慧 1 , 李志刚2 , 杨永建 1
(1.兰州大学药学院生药学研究所 ,甘肃 兰州　730000;　2.甘肃省天水市药品检验所　741000)
摘要:目的 优选炮制后鲜卑花属植物叶中熊果酸的超声提取工艺。方法 采用 L9(34)正交实验 , 考察超声功率(A)、时
间(B)、次数(C)和溶媒用量(D)4个影响因素 ,以熊果酸含量为评价指标 ,并采用薄层扫描法进行测定。结果 超声影
响因素主次顺序为 D、B、A、C。结论 熊果酸的超声提取最佳工艺为用 8倍量无水乙醇浸泡 30 min后 , 在输入功率 80%
下超声 20min2次。
关键词:鲜卑花属植物;　超声波提取;　薄层扫描;　熊果酸;　正交实验
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)01-0177-01
StudiesontheUltrasonicExtractionProcessfortheUrsolicAcidofSibirae
YANZhi-hui1 ,LIZhi-gang2 ,YANGYong-jian1(1.PharmaceuticalColegeofLanzhouUniversity, Lanzhou, Gansu730000, China;2.TianshuiProvincialIn-
stituteofDrugControlTianShui, Gansu741000, China)
Abstract:ObjectiveTooptimizetheconditionsofultrasonicextractionofSibirae.MethodsThefourrelevantfactors-ultrason-
icpower(A), ultrasonictime(B), ultrasonictimes(C)andsolventvolume(D)wereinvestigatedbytheL9(34)orthogonalde-sign.Thecontentofursolicacidwasdefinedasthestandardindex.ResultsTheexperimentalresultsshowedthatthefactorDwas
themostimportantone.ConclusionTheoptimumconditionoftheultrasonicextractionisthatthesampleissoakedin8 foldof
ethanolforhalfanhour, andthenextractedfor30 minunderthepowerof80%byultrasonicextractiontwice.
Keywords:Sibirae;　Ultrasonicextraction;　TLC;　Ursolicacid;　Orthogonaltest
　　柳茶为藏族民间常用药, 以蔷薇科(Rosaceae)鲜卑花属(Sibi-
raea)植物窄叶鲜卑花 Sibiraeaangustata(Rehd.)Hand-Mazz.及鲜
卑花 Sibiraealaecigata(L)Maxim.的枝叶及果序(带果实的果枝)
入药 ,主要用于消食导滞 、疏散风热;藏药文献收载 ,主治热病和疫
病 [ 1] 。藏族民间所用鲜卑花属植物的传统炮制方法为小火煨熟。
熊果酸是存在于天然植物中的一种三萜类化合物 , 具有安定 、降
温 、降酶 、镇静 、抗炎 、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种效
应 ,近年来发现它还具有抗致癌、抗促癌 、诱导 F9畸胎瘤细胞和抗
血管生成作用 , 可明显增强机体免疫功能 ,有可能成为低毒高效的
新型抗癌药物。熊果酸是鲜卑花属植物的主要药效成分之一 , 而
超声技术因其设备简单 、操作方便 、提取时间短 、效率高 、节能等优
点 ,已广泛用于有效成分的提取 [ 2] 。本实验以熊果酸含量为评价
指标 ,首次运用正交实验方法对鲜卑花属植物中熊果酸的超声提
取法的提取工艺进行多因素多水平优选。
1　仪器与材料
1.1　仪器 KQ一 500DE型医用数控超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司 , 频率 40 kHz, 输入功率 500 W), CS-9301型双波
长薄层扫描仪(日本岛津), AE-240双量程电子天平(瑞士梅特
勒公司),硅胶 G板(青岛海洋化工厂)。
1.2　 材料 鲜卑花属植物叶采于甘肃省甘南藏族自治州合作
市郊 , 海拔 3 200m。经兰州大学药学院生药学研究所杨永建教
授鉴定。将原植物叶除杂质 , 放入名茶多功能机中 , 对其进行炮
制加工后备用。
对照品熊果酸(中国药品生物制品检定所 , 批号:110742 -
200313);其余试剂均为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　超声提取样品液的制备
2.1.1　正交设计考察 超声功率 、时间 、超声次数和溶媒(无水
乙醇)用量 4个主要因素。设计实验因素和水平见表 1。
2.1.2　工艺过程 各取经粉碎的炮制后鲜卑花属植物叶的粉末
2 g,精密称定 9份 , 分别用 20 ml石油醚回流 20 min, 过滤取滤渣
按 L9(34)正交表实验 , 浸泡 30 min,超声提取 , 合并提取液 ,挥干
后用 10ml蒸馏水溶解 , 20 ml醋酸乙酯萃取 2次 , 合并醋酸乙酯
层挥干后无水乙醇定溶至 10 ml,得 1 ～ 9号超声样品液。
表 1　正交实验因素水平
因素水平 A功率(%)
B
时间t/min
C
次数
D
溶媒用量 /倍
1 40 10 1 8
2 60 20 2 10
3 80 30 3 12
2.2　对照品液的制备 精密称取熊果酸对照品 13.33 mg,置 10
ml容量瓶中 ,以无水乙醇溶解 , 并稀释至刻度 , 即得 1.333 mg/ml
对照液 。
2.3　含量测定
2.3.1　薄层及扫描条件 薄层条件:硅胶 G薄层板;展开剂:环
己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶ 2.5∶ 4∶0.5), 上行展开;取
出晾干喷以 10%硫酸乙醇显色;110℃烘箱中烘至斑点清晰 。扫
描条件:双波长反射法线性扫描 , λS=520 nm, λR=700 rim, Sx=3
中等灵敏度。
2.3.2　线性关系考察 用定量毛细管分别吸取对照品液 2, 4, 6,
8, 10 μl, 依次点于同一块硅胶板上 ,按上述薄层层析扫描条件测
定 , 以点样量(X)对斑点面积积分值(Y)进行回归 , 得回归方程
为:Y=5.542 9X+11.696 , r=0.999 8, 点样量在 2.666 ～ 13.33
μg范围内与斑点面积呈良好线性关系。
2.3.3　精密度实验 同板精密度实验:分别定量吸取对照品液 6
μl5次 , 依次点于同一块硅胶板上 , 按上述办法展开测定各斑点
面积积分值 , RSD=2.38%;异板精密度实验:分别定量吸取对照
品液 6 μl点在不同的 5块硅胶 G板上 , 按上述办法展开测定各
斑点面积积分值 , RSD=5.66%。
2.3.4　稳定性实验 定量吸取对照品液 4 μl点于硅胶板上 , 依
法展开 ,显色 , 20 min后扫描测定 , 2 h内每隔 30 min扫描 1次 ,
RSD=1.98%表明 2h内测定结果稳定。
2.3.5　加样回收率实验 精密称取已知含量的样品适量 , 定量
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.1 时珍国医国药 2008年第 19卷第 1期
加入熊果酸对照品 , 按样品液制备并测定。 得平均回收率为
97.60% , RSD=2.81%。
2.3.6　样品含量测定 将超声提取样品液和熊果酸对照品液用
定量毛细管点于同一块硅胶 G板上 。采用外标两点法测定熊果
酸含量。结果见表 2。
表 2　实验结果
实验号 A B C D 熊果酸含量 C/mg· g-1
1 1 1 1 1 0.3645
2 1 2 2 2 0.4943
3 1 3 3 3 0.4920
4 2 1 2 3 0.3382
5 2 2 3 1 0.5463
6 2 3 1 2 0.2308
7 3 1 3 2 0.2602
8 3 2 1 3 0.6595
9 3 3 2 1 0.8625
K1 2.702 1.928 2.510 3.547K2 2.231 3.400 3.390 1.973K
3 3.566 3.171 2.599 2.979R 1.335 1.472 0.880 1.574
2.4　结果分析 由 R值可知 ,超声影响因素主次顺序为 D、B、A、
C,溶媒用量是控制鲜卑花属植物提取工艺的关键因素;超声时
间和超声功率影响次之 ,超声次数影响最小。方案 A3B2C2D1较
好 , 即用 8倍量无水乙醇浸泡 30 min后 , 在功率 80%下超声 20
min两次为最优方案。
3　结论
本文首次对炮制后鲜卑花属植物叶中的熊果酸进行超声波
提取 , 并利用正交实验优选了熊果酸的醇提工艺。
由方法学考察结果可见 ,本方法线性关系 、重现性(同异板)
良好 , 回收率满意 ,稳定性满足测定时间的要求 ,可以认为本方法
工序简便 ,稳定可靠。
参考文献:
[ 1 ] 　甘肃省卫生局.甘肃中草药手册 ,第 3册 [ M].兰州:甘肃人民出版
社 , 1973:1554.
[ 2 ] 　董嘉德.超声技术在中药提取中的应用 [ J] .中国药业 , 2002, 11
(11):55.
国药鉴别
收稿日期:2007-04-07;　修订日期:2007-06-27
作者简介:杨　兰(1979-),女(汉族),河南信阳人 ,现为广东药学院中药
学院在读硕士研究生 ,主要从事中药鉴定与分析工作.
＊通讯作者简介:房志坚(1956-), 男(汉族),广东广州人 , 现任广东药学
院 中药学院副教授 ,学士学位 ,主要从事药用植物与中药鉴定工作.
虎奶菇和虎乳灵芝的生药鉴定
杨　兰 , 房志坚＊
(广东药学院中药学院 ,广东 广州　510006)
摘要:目的 建立虎奶菇和虎乳灵芝两种菌类药材的生药鉴定方法。方法 从形态特征 、显微特征 、理化性质方面对虎奶
菇和虎乳灵芝两种真菌进行系统观察和鉴别 ,采用紫外 -可见光谱(UV-Vis)法对两种真菌的乙醇提取物进行表征区
分。结果 两者在形态特征 、显微特征 、理化性质 、紫外吸收方面均呈现出不同。 结论 该鉴定方法操作简便 , 重复性好 ,
测定结果准确 , 可作为虎奶菇和虎乳灵芝两种菌类药材的鉴定依据。
关键词:虎奶菇;　虎乳灵芝;　生药鉴定
中图分类号:R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)01-0178-02
IdentificationoftheSclerotiumofPleurotustuber-regium(Fr.)SingandLignosusrhi-
noceros(Cooke)Ryv.
YANGLan, FANGZhi-jian＊
(DepartmentofChineseMedicine, GuangdongPharmaceuticalUniversity, Guangzhou, Guangdong510006, China)
Abstract:ObjectiveToevaluatetheidentificationmethodsforthesclerotiumofPleurotustuber-regium(Fr.)SingandLigno-
susrhinoceros(Cooke)Ryv.MethodsTooverallsurveyanddistinguishthetwoRindsoffungusonmorphological, microscopici-
dentification, physicalandchemicalcharacter, andtodeterminetheabsorptionoftheethanolextractbyUV-Visspectra.Results
Thetwokindsoffungusweredistinctonmorphologic, microscopicidentification, physicalandchemicalcharacter, andUVabsorp-
tion.ConclusionThemethodissimpleandaccurate, whichcanbeusedforidentificationofthesclerotiumofPleurotustuber-re-
gium(Fr.)SingandLignosusrhinoceros(Cooke)Ryv.
Keywords:Pleurotustuber-regium(Fr.)Sing;　Ligrosusrhinoceros(Cooke)Ryv.;　Identification
　　虎奶菇为侧耳科植物虎奶菇 Pleurotustuber-regium(Fr.)
Sing的菌核 ,是产于热带和亚热带地区的一种珍稀食药用菌 ,主
产于非洲 ,在我国只分布于少数地区 ,如云南省藤冲 、章风两县。
具有提高人体免疫力 、止咳等功效 [ 1] 。
虎乳灵芝 , 为多孔菌科虎乳灵芝 Lignosusrhinocerus(Cooke)
Ryv的菌核 , 主要分布于中国 、马来西亚 、菲律宾 、斯里兰卡 、澳大
利亚和其他国家(东非), 我国主要分布于海南省保亭黎族自治
县 , 具有治疗肝癌 、慢性肝炎 、肝热 、胃病的作用 [ 2] 。
虎奶菇和虎乳灵芝两种菌类药材有一定的相似性 ,到目前为
止还未见二者的生药鉴定标准。本研究拟通过对虎奶菇和虎乳
灵芝进行生药鉴定 ,从性状特征 、显微特征 、理化性质等方面进行
比较 , 并用 UV-Vis光谱手段进行表征区分。
1　材料和仪器
1.1　材料 虎奶菇由广东国康科技实业有限公司提供 , 经广东
药学院房志坚副教授鉴定;虎乳灵芝购于香港 , 由广东药学院房
志坚副教授鉴定。
1.2　仪器 日本岛津紫外分析仪(Shimadzu2450型);麦克奥迪
数码显微系统(BA300+Maticam3.2型)。
2　方法与结果
2.1　性状鉴别 虎奶菇菌核呈不规则团块 ,类圆形或扁球形 , 大
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.1