全 文 ：17种梅(桃)属观赏树木花粉生活力的比较＊
何小弟1 ,赵正兰2 ,周　魁3 ,吴发明4 ,徐玮玮1 ,刘　华5
(1.扬州大学农学院 ,江苏　扬州　225009;2.淮安市园林局 ,江苏　淮安　223001;3.高淳市建设局 ,江苏
高淳 , 211300;4.武进市化肥厂 ,江苏　武进 , 213100;5.无锡市农林局 ,江苏　无锡　214023)
摘　要:用琼脂培养基发芽法 , 对梅(桃)属(Prunus)观赏树种中的梅(P.mume)、红梅(P.mume f.rubri f lo-
ra)、杏(P.armeniace)、李(P.saliciua)、紫叶李(P.cerasi f era var.atropupura)、郁李(P.japonica)、东京樱花
(P.yedoensis)、毛樱桃(P.tomentosia)、榆叶梅(P.triloba)、桃(P .persica)、白花桃(P.persica f.a lba)、蟠桃
(P.persica f.comp ressa)、紫叶桃(P.persica f.atropurpurea)、红碧桃(P.persica f.rubro-plena)、白碧桃(P.
persica f.albo-plena)、红寿星桃(P.persica f.rubro-densa)、白寿星桃(P.persica f.albo-densa)计 17 份种质 ,
进行花粉生活力测定研究。统计结果表明:供试梅(桃)属观赏树种中 ,种(变种)间花粉生活力存在显著性差
异 ,桃种若干栽培变型间也大都存在显著性差异。琼脂培养基 pH 处理(5.4 , 5.8 , 6.2)间具显著性差异 , 且以
pH 5.8 为最佳;琼脂培养基蔗糖处理(质量分数 10%, 15%)间无显著性差异。
关键词:梅(桃)属(Prunus);观赏树种;花粉生活力测定;琼脂培养基发芽法
中图分类号:S718　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1000-2006(2005)02-0029-04
The Comparison of Pollen Viability Determination among
17 Ornamental Trees of Prunus
HE Xiao-di1 , ZHAO Zheng-lan2 , ZHOU Kui3 , WU Fa-ming4 , XU Wei-wei1 , LIU Hua5
(1.S chool of Agricu tu re Yangzh ou Universi ty , Yangzh ou 225009 , China;2.H uai an City Landscape Bu reau ,
H uai an 223001 , China;3.Gaochun Ci ty Cons tru ction Bu reau ,Gaochun 211300 , China;4.Wujin Chemical
Ferti lizer Plant ,Wu jin 213100 , C hina;5.Wuxi City Ag ricultu re and Fores t Bureau ,Wuxi 214023 ,C hina)
Abstract:The pollen viability of 17 o rnamental t rees of Prunus were studied by germinative
method on agar plate.The trees are P.mume ,P .mume f.rubri f lora , P.armeniace , P.sal ici-
ua , P.cerasi f era var.atropupura ,P .japonica ,P .edoensis , P.omentosia , P.ri loba , P.persi-
ca , P.persica f.alba , P .persica f.compressa , P.persica f.atropurpurea , P .persica f.rubro-
p lena ,P .persica f.albo-plena , P.persica f.rubro-densa , P.persica f.albo-densa.T he result
show n that the difference of po llen viabi li ty among species or cul tivars w as significant.The
viability w as affected by the pH of culture medium great ly .The opt imal one is pH 5.8.The
sucro se consistency in agar cul ture medium had no significant af fectes on pollen viability.
Key words:Prunus;O rnamental t rees;Pollen viabi li ty;Germinative method
蔷薇科梅(桃)属(Prunus)植物约 200种 ,主产北温带 ,我国约有 140种 ,早在 2 500多年前就开始
应用于观赏栽培 ,如傲雪之梅 、绚丽之桃 、烂漫之樱花等 ,在园林植物景观中的应用极为广泛。特别是在
城市森林生态网络体系营建和生态园林城市创建水准不断提升的新形势下 ,梅(桃)属观赏树种更加受
到人们的青睐 ,对其新品种的需求也愈显迫切 。花粉生活力的测定可为相关观赏树种的杂交育种工作
提供理论依据。
—29—
第 29卷第 2期
2005 年 3 月 　
南 京 林 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版)
Journal of Nanjing Fo rest ry Unive rsity(Natural Science s Edi tion)　
Vo l.29 , No.2　
M ar., 2005
＊ 收稿日期:2004-07-18　　　　修回日期:2004-11-16
基金项目:国家“十五”科技攻关项目(2002BA516A15-07)
作者简介:何小弟(1948-),男 ,副教授 ,硕士生导师。
1　材料与方法
1.1　供试材料
供试材料为梅(桃)属植物中的梅 、杏 、李 、东京樱花 、桃等种 、变种及栽培变型计 17份种质 ,具体情
况见表 1[ 1 , 2] 。
表 1　供试梅(桃)属(Prunus)观赏树种名录
Table 1　A list of testing trees
编号 种　质 学　　名　　　
A1 梅 P.mume
A2 红梅 f.rubr i f lora
A3 杏 P.armeniaca
A4 李 P.sa licina
A5 紫叶李 P.cerasi fera var.atropurp urea
A6 郁李 P.japonica
A7 东京樱花 P.yedoensis
A8 毛樱桃 P.tomentosa
A9 榆叶梅 P.t ri loba
编号 种　质 学　　名
A10 桃 P.p ersica
A11 白花桃 f.alba
A12 蟠桃 f.comp ressa
A13 紫叶桃 f.atropu rp urea
A14 红寿星桃 f.rubro-d ensa
A15 白寿星桃 f.albo-densa
A16 红碧桃 f.rubro-p lena
A17 白碧桃 f.albo-p lena
　　取材于扬州市城区内 ,时间为 2004 年 3 月下旬至 4月上旬。采集即将开放的花蕾 ,取出花药 ,在
24 ℃恒温条件下干燥 6 ～ 8 h;待花粉粒散出后 ,进行生活力测定 。
1.2　花粉培养及生活力测定方法
(1)琼脂培养基发芽法　培养基配制时在 100 mL 蒸馏水中加入 0.01 g 硼酸(H3 BO 4)和 1 g 琼脂 ,
加热煮沸后加入蔗糖 。待蔗糖溶解后 ,用盐酸溶液和氢氧化钠溶液调节 pH 。pH 处理分 5.4 ,5.8和 6.2 ,
琼脂培养基蔗糖浓度处理为2种 ,质量分数分别为 10%、15%;计 6个处理 ,每种质每处理接种 3次重复。
在载波片凹穴内注入适量热融琼脂培养基 ,使其表面略呈球型面;待琼脂培养基冷却后 ,接种适量
待测花粉 。在有盖瓷盘内放入自制金属培养架 ,将供试载玻片有接种培养基的一面向下架设在培养架
上;注入适量蒸馏水 ,以满足花粉粒发芽所需湿度要求 。加盖后将瓷盘放入恒温培养室内 ,培养室温度
24 ℃。
第 1次检测为接种培养后 2 h ,其后每隔 3 h检测 1次 ,以 48 h培养为试验终结。三因素随机区组
设计 ,计 102处理。以单枚接种培养载玻片为重复 ,每处理重复 3次 。每重复(片)每次检测 6个视野 ,
以花粉萌发作为有生活力的标志 ,以供试期限内所测最高值 ,记录花粉发芽百分率平均值 。
(2)B.C 夏尔达考夫染色法　将 0.02 g 联苯胺溶于 100 mL 酒精(体积分数为 50%),0.15 g α-萘酚
溶于 100 mL 酒精(体积分数为 50%),0.25 g 碳酸钠溶于 100 mL 蒸馏水 ,使用前等量配制成 A 液 ,以
体积分数为 0.3%的过氧化氢液为 B液。
在载玻片上置少量待测花粉 ,加 A 、B 液各 1 滴 ,用镊尖搅拌后盖上盖玻片 ,经 3 ～ 4 min 后镜检。
以单枚载玻片为重复 ,每处理重复 3次;每次观察 6个视野 ,以染成红色的花粉为具生活力者 ,记录其平
均值 。
(3)I-KI染色法　将 1 g 的碘化钾溶于 5 ～ 10 mL 蒸馏水 ,后加入 0.5 g 碘 ,待完全溶解后定容至
300 mL。在载玻片上置少量待测花粉 ,加 I-KI液 1 ～ 2滴 ,用镊尖搅拌后盖上盖玻片镜检 。以单枚载玻
片为重复 ,每处理重复 3次;每次观察 6个视野 ,以染成深蓝色的花粉为具生活力者 ,记录其平均值 。
2　结果与分析
2.1　种质 、琼脂培养基蔗糖浓度及 pH 三因素试验方差分析
种质(A)、琼脂培养基蔗糖浓度(B)、pH(C)三因素方差分析结果见表 2。由表 2 可知:(1)C 因素
F(771.5) F0.05(3.89),琼脂培养基 pH 处理间对供试种质花粉生活力的测定呈显著性差异。供试种
质花粉发芽的最适琼脂培养基 pH 为 5.8;pH 偏低(5.4)或偏高(6.2)条件下 ,花粉发芽百分率均明显
较低;(2)B 因素 F(0.98)<1 ,琼脂培养基蔗糖浓度处理间对花粉生活力测定无显著性差异 。花粉发芽
百分率的统计数据也表明 ,除 A4(李)略有差异外 ,B1(10%), B2(15%)处理间差异不显著 ,这与文献报
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南 京 林 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版)　　　　　　第 29 卷　第 2 期　
道的一致[ 3 ～ 5] ;(3)A 因素 F(74.55)>F0.05(1.74),种质处理间的花粉生活力测定具显著性差异水平。
由表 2也可以看出 ,种 、变种间的花粉发芽百分率差异较明显 ,若以琼脂培养基 pH 5.8 、蔗糖浓度 10%
处理的结果为准 ,蟠桃 、桃的测定值最高 ,毛樱桃 、李 、紫叶桃的测定值最低 。
表 2　花粉发芽的百分率
Table 2　The percentage of pollen germination %
因素 A 因素 B 因素 C
C1 C2 C 3
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
B1 32.6 74.3 15.0
B2 61.6 72.8 12.3
B1 45.8 72.2 31.9
B2 43.6 68.0 27.9
B1 21.3 68.6 26.3
B2 18.5 60.0 24.8
B1 12.6 31.6 18.3
B2 14.0 54.5 33.9
B1 29.0 81.4 61.3
B2 36.1 89.8 63.4
B1 41.7 74.5 61.6
B2 42.1 85.6 62.7
B1 11.8 63.5 35.0
B2 17.6 39.8 51.2
B1 21.5 31.9 24.8
B2 20.7 30.3 21.1
B1 22.6 33.6 21.1
因素 A 因素 B 因素 C
C1 C2 C3
A9
A10
A11
A12
A13
A14
A15
A16
A17
B2 19.7 28.0 21.3
B1 60.0 89.9 38.8
B1 55.5 79.0 36.3
B1 24.5 66.9 10.1
B1 33.8 40.3 25.9
B1 17.5 91.1 16.5
B2 24.6 74.5 21.8
B1 7.5 28.3 12.3
B2 16.7 24.3 17.9
B1 38.8 78.9 23.5
B2 35.9 70.3 28.0
B1 39.3 84.0 34.1
B2 36.4 58.9 24.0
B1 28.4 85.5 36.3
B2 44.7 72.6 38.4
花粉败育
　　　　　　　　　　　注:A17(白碧桃)因花粉败育 ,花粉发芽百分率极低 ,故未列入统计分析 ,实际处理数 96。
双因子互作分析显示(表 3),一级互作效应 A ×B , A×C , B×C 和二级互作效应 A ×B×C 均对花
粉发芽率测定具 5%水平显著性差异 。由于 F 值的大小表示着主作效应或互作效应差异的大小 ,故在
上述差异性显著的主作效应和互作效应中 ,对花粉发芽百分率影响力的表现从大到小依次为:C , A ,
B×C , A×C ,A×B ,A ×B×C 。
表 3　双因子互作分析
Table 3　The interactive analysis of two factors
因素 A1 A2 A3 A 4 A 5 A 6 A 7 A8 A9 A 10 A 11 A 12 A 13 A14 A15 A16 TC TB B1 B2 TC
B1 365.5 449.7 348.3 187.5 515.1 533.5 330.8 234.6 231.9 566.1 331.4 375.2 144.4 387.6 472.1 450.6 5 205.3
B2 440.1 418.5 308.4 307.3 567.8 571.3 326.0 216.1 206.7 512.3 299.9 362.8 176.8 402.6 358.1 466.3 5238.5
TA 805.6 868.2 656.7 494.8 1082.9 1104.8 656.8 450.7 438.6 1078.4 631.3 738.0 321.2 790.3 830.2 916.9 10 443.8
C1 282.6 268.4 119.2 79.7 195.1 251.6 88.2 126.5 126.9 346.6 174.8 126.2 72.6 188.1 227.0 218.4 2 529.0 1 328.2 1 563.7 2 891.9
C2 441.3 420.4 384.4 358.3 513.6 480.3 310.3 186.5 184.7 506.6 321.5 496.8 158.0 447.6 428.7 474.4 524.4 3 168.5 2 844.6 6 013.1
C3 81.7 179.4 153.1 156.8 374.2 372.9 258.6 137.7 127.0 225.2 135.0 115.0 90.6 154.6 174.5 224.1 2 669.8 1 427.6 1 532.8 2 960.4
TA 805.6 868.2 656.7 494.8 1 082.9 1 104.8 656.8 450.7 438.6 1 078.4 631.3 738.0 321.2 790.3 830.2 916.9 10 443.8
TB 5 924.3 5 941.1 11 865.4
2.2　桃种质间花粉生活力差异显著性检验
表 4　桃种质花粉的生活力
Table 4　Pollen viability determination of
persica germplasm
种质 花粉发芽百分率%Ⅰ Ⅱ Ⅲ T r x t%
A 10 90.6 89.7 89.4 269.7 89.9
A 11 67.2 66.5 67.0 200.7 66.9
A 12 91.5 90.6 91.3 273.4 91.1
A 13 28.9 28.5 27.6 85.0 28.3
A 14 79.1 78.7 78.9 236.7 78.9
A 15 83.8 84.2 83.9 251.9 84.0
A 17 86.0 84.8 85.8 256.6 85.5
Tr 527.1 523.0 523.9 1 574.0(T) 75.0
x t % 75.3 74.7 74.8
　　注:琼脂培养基 pH 5.8 ,蔗糖质量分数 10%。
以琼脂培养基 pH 5.8 、蔗糖质量分数 10%为
培养条件 ,对 7个桃种质的花粉发芽百分率进行显
著性测定 ,结果见表 4 。
单因素方差分析表明 ,供试桃种质间的花粉生
活力具显著差异 。进一步对桃属各种质间的显著性
差异作新复极差测验(LSR法)得知:蟠桃 、桃之间 ,
红碧桃 、白寿星桃之间无显著性差异;蟠桃 、桃 ,红碧
桃 、白寿星桃 ,红寿星桃 ,白花桃 ,紫叶桃 ,相互之间
的花粉生活力均呈 1%水平极显著差异。
2.3　3种花粉生活力测定法的比较
以供试种质(A i)为材料 ,对琼脂培养基发芽法
(X1)、B.C夏尔达考夫染色法(X2)及I-KI染色法
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　2005 年　总第 116 期　　　　　　　　　　何小弟等:17 种梅(桃)属观赏树木花粉生活力的比较
表 5　有生活力的花粉百分率
Table 5　The percentage of vigorous pollen %
种质 测定法
X 1 X2 X 3
A1 74.3 80.3 83.6
A2 72.2 75.1 78.3
A3 68.6 86.0 99.5
A4 54.5 69.3 70.8
A5 89.8 86.0 98.2
A6 85.6 91.5 96.0
A7 63.5 64.6 66.0
A8 33.6 37.9 52.1
A9 33.6 38.9 47.2
A10 89.9 91.7 94.5
A11 66.9 69.0 71.5
A12 91.1 92.4 93.9
A13 28.3 31.4 58.0
A14 78.9 80.6 82.2
A15 84.0 84.8 85.2
A16 85.5 89.9 90.7
A17 花粉败育
(X3)的花粉生活力测定效果进行比较 ,结果见表 5。
进行 t检验方差分析的结果表明 ,琼脂培养基
发芽法与 B.C 夏尔达考夫染色法在花粉生活力测
定数据间差异不显著;琼脂培养基发芽法与 I-KI 染
色法在花粉生活力测定数据间差异不显著 。但以
I-KI染色法效果最好[ 6] 。
3　结　论
(1)pH 调节琼脂培养基对花粉生活力具重要
影响 。此次试验中 , pH 处理以 5.8为宜。
(2)供试梅(桃)属种质处理间的花粉生活力具
显著性差异水平 ,其花粉发芽百分率高低与树种的
生物学特性密切相关 ,琼脂培养基 pH 5.8 、质量分
数为 10%蔗糖处理时:蟠桃 、桃的花粉发芽百分率
最高(91.1%,89.9%),毛樱桃 、李 、紫叶桃的花粉发
芽百分率最低(31.9%, 31.6%, 28.3%), 差距达
3倍左右 。
种质(A),琼脂培养基蔗糖浓度(B),琼脂培养基 pH(C)各因素及互作效应对花粉发芽百分率测定
的影响力从大到小依次为:C ,A ,B×C ,A ×C ,A×B ,A×B×C 。
(3)pH 5.8 ,蔗糖(10%)琼脂培养基处理时 ,供试桃种质间花粉生活力差异不等:蟠桃与桃之间 、红
碧桃与白寿星桃之间均无显著性差异;但蟠桃 、桃 ,红碧桃 、白寿星桃 ,红寿星桃 ,白花桃 ,紫叶桃 ,相互之
间均呈 1%水平极显著性差异。
(4)供试种质范围内 ,3种常见的花粉生活力测定方法间虽无显著性差异 ,但测定值却以 I-IK染色
法的最高 ,B 、C 夏尔达考夫染色法的次之 ,琼脂培养基发芽法的最低 。在梅(桃)属种质花粉生活力测定
方法中 ,虽染色法要较琼脂培养基发芽法简便易行 ,但染色深浅的评判界限既不易准确掌握 、也明显偏
高;而琼脂培养基发芽法的操作虽较复杂 ,但花粉萌发观察值的测定数据却科学可靠 ,故仍推崇为目前
杂交育种中花粉生活力测定的首选方法 。
[ 参 考 文 献 ]
[ 1] 陈有民.园林树木学[ M] .北京:中国林业出版社 , 1990.
[ 2] 董保华.汉拉英花卉及观赏树木名称[ M] .北京:中国农业出版社 , 1996.
[ 3] 程金水.园林植物遗传育种学[ M] .北京:中国林业出版社 , 2000.
[ 4] 景士西.园艺植物育种学总论[ M] .北京:中国农业出版社 , 2000.
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[ 6] 骆建霞 ,史燕山 ,马莉楠 ,等.木奈李花粉生活力试验[ J] 天津农学院学报 , 1999 , 6(3):34-37.
(责任编辑　郑琰炎炎)
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南 京 林 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版)　　　　　　第 29 卷　第 2 期