全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2016 年
收稿日期：2014－12－29
基金项目：贵州省自然科学基金项目（黔科合 J 字 LKS［2013］10 号）
作者简介：赵 欧（1980），女（苗族），江苏徐州人，副教授，主要从事天然产物化学及中药现代化研究，（电话）15985185763（电子信箱）
zhaoou2004＠163．com。
第 55 卷第 1期
2016年 1月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 55 No.1
Jan.，2016
ol． 55 o.1
Jan.，2016
八爪金龙［Ardisia crispa （Thunb．） A． DC．］又
名百两金、八爪龙、八爪根、铁雨伞、高八爪、开喉箭
（四川），主要分布在湖北、四川、贵州、江西、广西等
地。 为紫金科植物百两金或矮茎朱砂根的根茎或全
草，《贵州草药》有记载，称其辛微苦涩，平，能清热，
利咽化瘀，对慢性咽炎有较好疗效，被苗族奉为喉
科良药，清热排湿，消肿止痛，为贵州民间常用的治
疗咽喉的中草药，具有明显的抑制甲型流感病毒作
用，能显著抑制革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的生
长，对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、枯
草杆菌、变形杆菌抑制作用更为明显，具有明显抗
炎、镇痛和解热作用。岩白菜素（Bergeninum）是八爪
金龙的成分之一，属于异香豆素类化合物，具有良
好的镇咳、祛痰、抗炎、护肝、抗病毒和神经保护作
用 ［1］，选择岩白菜素类型的药物活性成分作为八爪
金龙质量控制指标具有科学意义和应用前景。开喉剑
喷雾剂由八爪金龙、山豆根、蝉蜕、薄荷脑等 4 味药
材组成，具有清热解毒、消肿止痛的功效。 已有对各
种中药如小儿止咳颗粒、喘胶囊、复方矮地茶片、虎
耳草、岩白菜等的岩白菜素含量的测定的报道 ［2－11］，
但鲜有对八爪金龙和开喉剑喷雾剂中的岩白菜素
的超声提取及定量分析的研究报道。 本研究采用超
高效液相色谱法测定八爪金龙及组方制剂中
岩白菜素的含量
赵 欧，杜 莹
（贵州师范大学，贵阳 550001）
摘要：为测定八爪金龙及其组方制剂开喉剑中的有效成分岩白菜素，研究建立高效液相色谱（HPLC）法，
以甲醇∶水（25∶75，V ／V）为流动相，流速 1．0 mL ／ min，柱温 30 ℃，检测波长 274 nm。 结果表明，溶液中岩白
菜素在 0．585 6～58．560 0 μg ／ mL 时有良好的线性关系 （r＝0．999 5）， 平均回收率为 103．17％，RSD 为
0．28％，该方法操作简单、稳定、准确、可行，可用于开喉剑及组方药材八爪金龙中岩白菜素的含量测定。
关键词:八爪金龙；开喉剑喷雾剂；岩白菜素；高效液相色谱
中图分类号：O657．7＋2；R284．1 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2016）01－0186-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.01.049
Determination of Bergeninum Content in Ardision crispa（Thunb．）A．DC and Kaihoujian
Preparations by HPLC
ZHAO Ou， DU Yin
（Guizhou Normal University， Guiyang 550001， China）
Abstract：The HPLC method for determination of bergeninum content in Ardision crispa （Thunb．）A．DC and KaiHou sword was
established． The method was performed on Luna－5u－c18 （2）－100A （150×4．6 mm，5 um）column with a mixture of methanol and
water（25∶75，v ／ v）as mobile phase．The detection wavelength was 274 nm，the flow rate was 1．0 mL ／min，and the column temper-
ature was 30 ℃．The results indicated that the good linear range of vergeninum content was 0．585 6～58．560 0 μg （r＝0．999 5），
the mean recovery was 103．17％，and RSD was 0．28％．The method is simple、stable、accurate and feasible，which can be used
for the determination of bergeninum in Ardision crispa（Thunb．）A．DC and KaiHou sword．
Key words：Ardision crispa（Thunb．）A．DC；Kaihoujian spray；bergeninum；HPLC
第 1 期
声提取八爪金龙和开喉剑喷雾剂中的岩白菜素，并
用高效液相色谱（HPLC）法测定其含量。
1 材料
1．1 测试样品 八爪金龙，产地广西桂林；开喉剑
喷雾剂，贵州三力制药有限责任公司提供。
1．2 仪器 LC2000D 型高效液相色谱仪 ，CQ－
100B－ST 型超声提取器，玻璃砂芯过滤装置（FD．JH．
JS），HZY－A200型电子天平。
1．3 试剂 甲醇为色谱纯，水为经 0．45 μm 微孔滤
膜滤过的纯化水，岩白菜素对照品由中国药品生物
制品检定所提供，批号 111532。
2 试验方法
2.1 色谱条件
色谱柱型号 Luna－5u－c18（2）－100A（150 mm×
4．6 mm，5 μm），柱温 30 ℃，流动相甲醇 ∶水（25∶75，
V ／V），流速 1．0 mL ／min；检测波长 274 nm。
2．2 对照品溶液的制备
精密称取适量岩白菜素对照品， 置于 25 mL容
量瓶中，加甲醇溶解，摇匀，稀释，配置成 0．732 mg ／mL
的溶液，测得色谱见图 1（A）。
2．3 样品溶液的制备
八爪金龙粉末 0．40～0．45 g， 开喉剑溶液 2．00～
2．10 g，精密称定 ，置于具塞锥形瓶中 ，加入甲醇
25 mL，密塞，称定重量，放置 30 min，超声波处理
40 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，
摇匀，过滤。 精密量取续滤液 5 mL，置于 10 mL 容
量瓶中加甲醇至刻度，摇匀。 与原续滤液分别置样
品瓶贴标签、密封保存。 取续滤液，用 0．45 μm 微孔
滤膜过滤，即得供试液样品。 HPLC分离后的色谱见
图 1（B、C）。
2．4 方法考察
2．4．1 线性关系的考察 量取上述对照品溶液
0．06、0．08、0．20、0．40、1．00、2．00、4．00 mL 置于 25 mL
容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成浓度为 0．585 6，
2．928，5．856，29．28，58．56 μg ／ mL 岩白菜素对照品溶
液，分别进样 10 μL。 以岩白菜素浓度（μg ／ mL）为横
坐标（x），峰面积为纵坐标（y）进行线性分析，得到回
归方程为 y＝25．79x＋548．79，R2＝0．999 5。结果表明，岩
白菜素在 0．585 6～58．56 μg内有良好的线性关系。
2．4．2 稳定性试验 精密称取八爪金龙 0．410 g，开
喉剑 2．010 g，按照样品溶液制备的方式制备溶液，每
次进样 10μL，共 5次，时间间隔分别为 0、1、2、4、8 h，
记录峰面积值。 5次岩白菜素含量测定值基本不变，
平均值分别为 0．121％、0．073％，RSD分别为 1．388％、
1．370％，结果表明样品溶液至少在 8 h内稳定。
2．4．3 精密度试验 精密吸取样品溶液，连续进样
5 次，每次进样 10 μL，5 次进样测得八爪金龙中岩
白菜素含量平均值为 0．118％，RSD＝1．695％，开喉剑
中岩白菜素含量平均值为 0．073％，RSD＝0．968％，结
果表明试验方法精密度良好。
2．4．4 重复性试验 精密称取八爪金龙样品和开
喉剑样品各 5份，分别约 0．4、2．0 g，按样品溶液制备
方式制备溶液，进样，记录峰面积值。 测得峰面积的
图 1 药材与制剂中岩白菜素的分离色谱
峰
值
//m
v
A.对照品色谱图
B.八爪金龙岩白菜素色谱图
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
时间//min
C.开喉剑喷雾剂岩白菜素色谱图
峰
值
//m
v
0 1 2 3 4 5
时间//min
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
时间//min
峰
值
//m
v
3.250
3.230
3.210
3.190
3.170
3.150
3.250
3.230
3.210
3.190
3.170
3.150
3.10
3.80
3.60
3.40
3.20
赵 欧等：高效液相色谱法测定八爪金龙及组方制剂中岩白菜素的含量 187
湖 北 农 业 科 学 2016 年
RSD 分别为 1．586％、0．865％，结果表明该方法具有
良好的重复性。
2．4．5 加样回收率试验 精密称取已知含量的八
爪金龙和开喉剑样品各为 0．2、1．0 g，共 5份，分别加
入对照品，进行回收率试验，八爪金龙和开喉剑的
平均回收率分别为 103．2％（n＝3）、100．7％（n＝3），具
有良好的准确度。 具体见表 1、表 2。
2．5 样品含量的测定
按照“2．2”、“2．3”的方法分别制备对照品和样
品溶液，进样各 10 μL，测定其峰面积，计算样品中
岩白菜素的含量，结果表明，开喉剑和八爪金龙中
岩白菜素的含量分别为 0．072％~0.073%、0.115%~
0．125％。 具体见表 3、表 4。
3 小结与讨论
根据岩白菜素在甲醇中溶解、在乙醇或水中微
溶的特性，考虑操作容易等原因，采用甲醇作为提
取溶剂，考察超声提取法的适合温度、功率以及时
间，试验结果表明，超声提取法操作简单、省时、提
取效率高且周期短［12－15］，具有良好的应用前景，且试
验可在室温进行，设备简单，操作简便，是提取八爪
金龙中岩白菜素的一种有效方法。 本研究得到的对
八爪金龙和开喉剑喷雾剂中岩白菜素的超声提取
和分析方法精密度、稳定性、重复性符合定量分析
要求，色谱分离良好，操作简便，可作为该药材与中
药制剂的含量测定方法。
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表 1 八爪金龙加样回收率试验结果
样品量
g
0.204
0.209
0.205
加入量
μg
732
732
732
测得量
μg
746.47
756.69
751.58
回收率
%
102.98
103.37
103.18
平均回收率
%
103.17
RSD
%
0.28
表 2 开喉剑喷雾剂加样回收率试验结果
样品量
g
1.048
1.050
1.050
加入量
μg
2 928
2 928
2 928
测得量
μg
2 924.57
2 993.95
2 929.86
回收率
%
99.86
102.25
100.06
平均回收率
%
100.73
RSD
%
1.33
表 3 开喉剑岩白菜素含量
样品
1
2
3
4
5
样品量//g
2.012
2.012
2.010
2.006
2.009
测得量//μg
1 452.32
1 457.16
1 462.01
1 463.95
1 465.89
含量//%
0.072
0.072
0.073
0.073
0.073
RSD//%
0.97
表 4 八爪金龙岩白菜素含量
样品
1
2
3
4
5
样品量//g
0.412
0.410
0.411
0.413
0.413
测得量//μg
475.20
476.07
494.58
491.68
491.68
含量//%
0.115
0.117
0.120
0.125
0.124
RSD//%
1.70
188