全 文 ：26-位葡萄糖基 , F-环自动环合得到相应的次级皂
苷 ,所以应避免加热。而且 C-22-OH易被甲基化 ,不
能用甲醇提取、溶解。 因此本研究选择超声提取 ,重
蒸水溶解 ,乙腈为流动相。
3. 2　采用超声提取法 ,考察了水 , 35%、 65%、 95%
乙醇作为提取溶剂的提取效果 ,发现以 35%乙醇作
为溶剂 ,原薯蓣皂苷提取效率高 ,干扰峰较少 ,分离
度较好 ,故采用 35%乙醇作为提取溶剂。样品经溶
剂提取后 ,考察了直接进样、正丁醇一步萃取后进
样、醋酸乙酯 -正丁醇两步萃取后进样 ,发现醋酸乙
酯 -正丁醇两步萃取后进样 ,杂质干扰少 ,重现性好。
3. 3　该属植物中所含甾体皂苷类成分种类繁多 ,结
构相似 ,在紫外区处于末端吸收 ,分离难度较大。对
于液相色谱条件 ,曾考察了不同填料的色谱柱 ,不同
比例的甲醇 -水、乙腈-水、乙腈 -醋酸水溶液、乙腈 -甲
醇 -水等流动相 ,结果表明以 XterraTM ODS为固定
相 ,乙腈 -水 ( 27∶ 73)为流动相 ,分离效果最好 ,灵敏
度高。 通过二极管阵列检测器检测 ,色谱峰纯度良
好 ,分析方法具有专属性。
3. 4　首次采用 RP-HPLC方法测定穿山龙及其同
属植物中原薯蓣皂苷 ,结果显示穿山龙富含原薯蓣
皂苷 ,质量分数为 11. 24～ 27. 05 mg /g ,黄山药次
之 ,山药较少。 该方法简便、快速 ,可用于该生药、提
取物及其制剂的质量控制。
References:
[1 ]　Ch P (中国药典 ) [S ]. Vol Ⅰ . 2005.
[2 ]　 Delectis Flo rae Reipub licae Popularis Sinicae, Agendae
Academiae Sinicae Edita. Flora Reipublicae Popularis Sinicae
(中国植物志 ) [M ] . Tomus 16. Bei jing: Science Press ,
1985.
[3 ]　 Sh ao Y, Poobrasert O, Kenn elly E J, et al . Steroidal
saponins f rom Asparagusof f icinalis and th eir cytotoxic act iv-
ity [ J ]. Planta Med , 1997, 63( 3): 258-262.
[4 ]　 Ke H, Yao X S. Protodioscin ( N SC-698796): It s spect rum
of cytotoxici ty against sixty h uman cancer cell lines in an an-
ticancer d rug screen panel [ J]. Planta Med , 2002, 68: 297-
301.
[5 ]　 Hu K, Dong A J, Yao X, et al . An tin eoplas tic agents; Ⅱ .
Four furostanol g lycosid es f rom rh izomes of Dioscorea collet-
tiiv ar hypoglauca [ J] . Planta Med , 1997, 63: 161-165.
[6 ]　 Zhang J B, Hui Y Z. Recen t p rog ress es in res earch of
furos tanol s aponin s [ J] . Ch in J Org Chem (有机化学 ) ,
2000, 20( 5): 663-668.
浙产猕猴桃属植物根、茎、叶中多糖的比较
吴瑾瑾 1 ,石森林 2 ,张小寅 2 ,魏颖慧 2
( 1. 杭州第四医院 ,浙江 杭州　 310003; 2. 浙江中医学院 ,浙江 杭州　 310053)
　　近年来 ,猕猴桃属 ( Actinidia Lindl. )药用植物
资源种类及药理作用日益受到国内外医药界的重视 ,
其中浙江产的主要有中华猕猴桃 A. chinensis
Planch.、镊合猕猴桃 A. valvata Dunn、大籽猕猴桃
A. macrosperma C. F. Liang、毛花猕猴桃 A . eri-
antha Benth.、软枣猕猴桃 A. arguta ( Sieb. et
Zucc. ) Planch. et Miq.、长叶猕猴桃 A. hemsleyana
Dunn、葛枣猕猴桃 A. polygama ( Sieb. et Zucc. )
Maxim.、异色猕猴桃 A. callosa Lindl. v ar. discolor
C. F. Liang等 ,其中前 4种在浙江资源相对较丰富 ,
药材主要有藤梨根 (中华猕猴桃的根 )和猫人参 (镊合
猕猴桃、大籽猕猴桃的根 )。 现代药理研究发现猕猴桃
属多糖成分具有抗肿瘤、增强免疫机能、消除活性氧自
由基等作用 ,且无副作用。 随着其药用价值的凸现 ,猕
猴桃属药材利用率增加 ,由于药用部位为根 ,造成其自
然资源人为破坏严重 ,为了科学合理地利用药材资源 ,
笔者对浙江主产的猕猴桃属植物中华猕猴桃、镊合猕
猴桃、毛花猕猴桃和大籽猕猴桃的根、茎、叶含多糖的
量进行比较 ,以寻找新的药用部位。
1　仪器、材料和试剂
1. 1　仪器: 万能粉碎机 (河北黄骅齐家务科学仪器
厂 ) ; CQ250超声清洗器 (上海船舶电子设备研究
所 ) ;国家统一标准筛 (浙江上虞华康化验仪器厂 ) ;
电子天平 AR1140 /C(奥豪斯 ) ; 751- GW分光光度
计 (安捷伦科技上海分析仪器有限公司 ) ; DKS- 24
型电热恒温水浴锅 (沈阳中新电器厂 )。
1. 2　材料和试剂:药材来自猕猴桃科猕猴桃属的镊
合猕猴桃、大籽猕猴桃、毛花猕猴桃、中华猕猴桃 ,均
产自浙江 ,由罗国海副教授鉴定 ; D (+ )葡萄糖购自
中国生物制品检定所。硫酸 (中国浙江衢州巨化试剂
有限公司 )、碳酸氢钠 (中国上海虹光化工厂 )、苯酚
(浙江杭州双林化工厂 ) ,以上均为分析纯 ;铝片
·1099·中草药　 Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 37卷第 7期 2006年 7月
收稿日期: 2005-12-11基金项目:浙江省自然科学基金 (课题编号 300431)
( 99% ,中国医药上海化学试剂公司 )。
2　方法与结果
2. 1　供试液制备: 取供试药材细粉适量 ,加 80%乙
醇 100 mL强超声 20 min,滤过 ,滤渣连同滤纸再加
入 80%乙醇 50 mL强超声 20 min,滤过 ,再用 80%
乙醇洗涤至基本无色 ,干燥。然后 ,加入 50 mL蒸馏
水强超声 20 min,滤过 ,滤渣加蒸馏水 30 m L强超
声 10 min,洗涤滤渣 ( 2× 5 mL) ,合并两次水提液和
洗涤液 ,用活性炭脱色 ,并定容于 100 mL量瓶中。
2. 2　对照品溶液的制备:精密称取 105℃干燥恒重
的 D (+ )葡萄糖 50 mg,用蒸馏水定容于 100 mL量
瓶中 ,取 50 mL再定容于 100 mL量瓶中 ,配成 250
μg /mL的对照品溶液。
2. 3　线性关系的考察与回归方程的建立: 分别取对
照品溶液 0. 1、 0. 15、 0. 21、 0. 27、 0. 33、 0. 39、 0. 45
m L,分别加蒸馏水至 2 mL,加 15%苯酚水溶液 1
m L摇匀 ,依次加入 5 mL浓硫酸 ,静置 10 min,沸水
浴加热 10 min,冷却至室温。在 490 nm波长处测定
吸光度 ( A ) ,以质量浓度 (C )为横坐标、 A为纵坐标
作标准曲线 ,得回归方程: A= 0. 059 5C+ 0. 009 5,
r= 0. 999 8,表明质量浓度在 3. 2～ 14. 00μg /mL与
A有良好的线性。
2. 4　精密度试验:精密量取供试液和对照品液 ,分别
按前述多糖测定方法操作 ,测定 A值 ,结果对照品
RSD为 0. 69% (n= 7) ;样品 RSD为 1. 38% (n= 7)。
2. 5　重现性试验:同一批样品 6份制备供试液 ,每
份分别取 2 mL,按前述多糖测定方法操作 ,测定 A
值 ,结果 RSD为 1. 63% (n= 6)。
2. 6　稳定性试验:取 3批供试液 ,按前述多糖测定
方法操作 ,每隔 1 h测定其多糖的量 ,共测 10 h,结
果表明在 10 h内 A值基本不变 , RSD= 1. 85% 。
2. 7　回收率试验: 精密称取中华猕猴桃细粉
3. 021、 3. 005、 3. 007 g ,分别加入适量的 D (+ )葡萄
糖对照品 ,按测定方法操作 ,结果平均回收率为
99. 54% (n= 9)。
2. 8　换算因子 ( f )的测定:精密称取 D (+ )葡萄糖
对照品 50 mg,加蒸馏水稀释到 100 mL,再取 5 mL
定容于 50 mL量瓶中 ,摇匀 ,作储备液。精密量取储
备液 1. 5 mL,按对照品制备下的方法测定其 A值 ,
按下列换算因子 f = w /c ,w为实际总多糖量 ,c为
测得多糖中总多糖量 ,测得 f 1= 1. 161 87(毛花猕猴
桃和大籽猕猴桃 ) , f 2= 1. 186 58(中华猕猴桃和镊
合猕猴桃 )。
2. 9　样品的测定: 精密称取毛花猕猴桃、大籽猕猴
桃、中华猕猴桃和镊合猕猴桃的根、茎、叶细粉 ,按供
试液制备 (除镊合猕猴桃茎稀释成 104 m L外 )和多
糖测定方法操作 ,测定结果见表 1。
表 1　样品中多糖的测定 (n= 3)
Table 1　 Determinat ion of polysaccharide in samples ( n= 3)
品　种 部位 称样量 / g 取样量 /m L 质量分数 /%
毛花猕猴桃 根 5. 002 9 0. 8 0. 900
茎 5. 000 7 0. 8 0. 808
叶 5. 001 5 0. 8 0. 779
大籽猕猴桃 根 5. 004 3 0. 2 2. 000
茎 5. 001 9 0. 2 1. 710
叶 5. 001 7 0. 8 0. 700
中华猕猴桃 根 5. 005 0 1. 0 0. 544
茎 5. 004 0 0. 5 1. 814
叶 5. 003 0 1. 5 0. 405
镊合猕猴桃 茎 2. 001 0 0. 5 3. 390
叶 5. 004 0 0. 5 0. 694
3　讨论
3. 1　猕猴桃多糖采用超声提取有较大的优势 [1, 2 ] ,
可以缩短提取的时间 ,提高提取率 ,而且无需加热 ,
所用仪器简单易行 ,多糖的提取条件易控制 ,先用
80%乙醇提取以除去单糖、低聚糖、苷类、脂类等干
扰成分 ,然后用水提取多糖成分 [3 ] ,实验结果证明了
此法可行。
3. 2　苯酚 -硫酸比色法是测定多糖较为常用的方
法 ,原理是多糖在硫酸的作用下 ,先分解成单糖 ,并
脱水生成糖醛衍生物和苯酚缩合成有色化合物 ,在
490 nm处测定多糖的量 ,方法简单可行 ,显色稳定 ,
灵敏度好 ,但是苯酚具有不稳定性 ,容易被氧化 ,所
用苯酚最好临时现配。
3. 3　本实验结果表明浙产猕猴桃属植物中 ,叶的量
普遍较低 ,而茎则较高 ,其中镊合猕猴桃茎含多糖的
量最高 ,可以利用其茎或叶代替药用部位根 ,避免不
可再生资源的破坏。人工种植也是一条很好的出路 ,
但如果仅仅取其根来药用 ,那将是对药材资源的一
种浪费 ,可以利用秋、冬季节修剪下来的枝叶加以利
用 ,这样就能大大提高其经济效益。对于野生的猕猴
桃属植物也没有必要非取其根不可 ,利用其茎、叶而
有效地保护现有的自然资源 ,从而更加科学合理地
利用药材资源。
References:
[1 ]　 Wang H Y, Liu J R, Dan J M , et al . U lt rasonic ext raction
and determination of Lycium barba rum polysaccharides f rom
Xin Jiang [ J] . J Chin Med Ma ter (中药材 ) , 2002, 1( 1):
42.
[2 ]　 Zhao J, Zh ong R, Wang H Z, et al . Ex t raction optimization
of polys accharide in Morus alba L. [ J ]. Ch in Trad it Herb
Drugs (中草药 ) , 2000, 31( 5): 347.
[3 ]　 Zeng M , Zhang H M, Zheng S Q, et al . As say of polys ac-
ch arid e and conten t comparison in Gegen [ J] . Chin J Mod
Appl Pharm (中国现代应用药学杂志 ) , 2002, 19( 2): 45.
·1100· 中草药　 Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 37卷第 7期 2006年 7月