全 文 ：２０１３年９月 四川大学学报（自然科学版） Ｓｅｐ．２０１３
第５０卷　第５期 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｖｏｌ．５０　Ｎｏ．５
收稿日期：２０１３－０６－２０
基金项目：国家自然科学基金（２１２７７１１０）
作者简介：秦红英（１９８９－），女，硕士研究生，研究方向为色谱分析．Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｈｙ２０１３１４＠ｙａｈｏｏ．ｃｎ
通讯作者：周光明．Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｍｚｈｏｕ＠ｓｗｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ｄｏｉ：１０３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０４９０－６７５６．２０１３．０５．０２５
ＨＰＬＣ同时测定虎耳草中的岩白菜素、
原儿茶酸和没食子酸的含量
秦红英，周光明，彭贵龙，李俊平
（西南大学化学化工学院发光与实时分析教育部重点实验室，重庆４００７１５）
摘　要：建立了以离子液体１－丁基－３－甲基咪唑六氟磷酸盐（［ＢＭＩｍ］ＰＦ６）为萃取剂，结合超
声辅助萃取，利用高效液相色谱法同时分离测定虎耳草中的岩白菜素、原儿茶酸和没食子酸三
种有效成分的方法．方法：采用Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８色谱柱 （２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相
为甲醇－０．２％冰醋酸水溶液（２０∶８０，Ｖ／Ｖ）；流速０．８ｍＬ／ｍｉｎ；紫外检测波长２７３ｎｍ；柱温
为３５℃．结果：该方法对岩白菜素、原儿茶酸和没食子酸分别在０．００１５６～１３０μｇ／ｍＬ（ｒ＝
０．９９９９９），０．００１７２～１４３μｇ／ｍＬ（ｒ＝０．９９９８８），０．００１４０～１１６μｇ／ｍＬ（ｒ＝０．９９９９３）范围内线
性关系良好，相关系数（ｒ）均大于０．９９９８，定性检测限（Ｓ／Ｎ＝３）依次是：０．１２９５ｎｇ／ｍＬ，
０．０７４９ｎｇ／ｍＬ，０．０２７７ｎｇ／ｍＬ；样品回收率为９１．１０％～９８．２６％．结论：本法操作简单快速、
定量准确、灵敏度高、成本低、且对环境友好，为虎耳草中岩白菜素、原儿茶酸和没食子酸的检
测及分离提供了一个有效的科学方法．
关键词：离子液体；超声辅助；高效液相色谱；虎耳草
中图分类号：Ｏ６５２．６２　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：０４９０－６７５６（２０１３）０５－１０４４－０５
Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｅｒｇｅｎｉｎ，ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ
ａｎｄ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｓａｘｉｆｒａｇｅ　ｂｙ　ＨＰＬＣ
ＱＩＮ　Ｈｏｎｇ－Ｙｉｎｇ，ＺＨＯＵ　Ｇｕａｎｇ－Ｍｉｎｇ，ＰＥＮＧ　Ｇｕｉ－Ｌｏｎｇ，ＬＩ　Ｊｕｎ－Ｐｉｎｇ
（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｎ　Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ（Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ），Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ；
Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　４００７１５；Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ　ｓｉｍｐｌｅ　ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｓ　ｂｅｅｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ
ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｅｒｇｅｎｉｎ，ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｒｏｍ　ｓａｘｉｆｒａｇｅ　ｕｓｉｎｇ　１－ｂｕｔｙｌ－
３－ｍｅｔｈｙｌｉｍｉｄａｚｏｌｉｕｍ　ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ａｓ　ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ　ｗｉｔｈ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：
Ｔｈｒｅｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ａ　Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ　ｉｎ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．２％ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｏ－
ｌｕｔｉｏｎ（２０：８０，ｖ／ｖ）ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　０．８０ｍＬ／ｍｉｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ＵＶ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ａｔ　３６５ｎｍ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｒａｎｇｅ　ｆｏｒ　ｂｅｒｇｅｎｉｎ，ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｗｅｒｅ　ｆｏｕｎｄ　ｔｏ　ｂｅ　０．００１５６～
１３０μｇ／ｍＬ，０．００１７２～１４３μｇ／ｍＬ，ａｎｄ　０．００１４０～１１６μｇ／ｍＬ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉ－
ｃｉｅｎｔｓ　０．９９９９９，０．９９９８８ａｎｄ　０．９９９９３，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｉｔ　ｗａｓ　ｉｎｄｉｃａｔｉｖｅ　ｏｆ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ　ｏｆ　ｐｅａｋ
ａｒｅａ　ｏｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｌｉｍｉｔｓ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ（ＬＯＤ）ａｒｅ　０．１２９５ｎｇ／ｍＬ，０．０７４９ｎｇ／ｍＬ　ａｎｄ　０．０２７７
ｎｇ／ｍＬ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａｃｃｕｒａｃｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｃｈｅｃｋｅｄ　ｂｙ　ｃｏｎｄｕｃｔｉｎｇ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ａｔ　ｔｈｒｅｅ　ｄｉｆ－
　 四川大学学报（自然科学版） 　 第５０卷
ｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｖｅｌｓ　ｆｏｒ　ａｌ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｇｅｄ　ｆｒｏｍ　９１．
１０％ｔｏ　９８．２６％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｐｒｏｐｏｓｅｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｓｉｍｐｌｅ，ｐｒｅｃｉｓｅ，ｓｐｅｃｉｆｉｃ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ
ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｃｙ．Ｉｔ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ａ　ｎｅｗ　ａｎｄ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　ｍｅａｎｓ　ｆｏｒ　ｒｏｕｔｉｎｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｓａｘｉｆｒａｇｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｉｏｎｉｃ　ｌｉｑｕｉｄ，Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄ，Ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，Ｓａｘｉｆｒａｇｅ
１　引　言
虎耳草（Ｓａｘｉｆｒａｇｅ）系虎耳草科植物虎耳草
（Ｓａｘｉｆｒａｇａ　ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ　Ｍｅｅｒｂ）的全草，又名金丝荷
叶、石荷叶、金线吊芙蓉、耳朵红、系系叶等，味苦、
辛寒，具有祛风、清热、凉血解毒之功效，主治风热
咳嗽、肺痈、吐血、风火牙痛、中耳炎、风疹瘙痒、痈
肿丹毒、毒虫咬伤、外伤出血等病症，同时兼具强
心、利尿等药用功能［１］．近年来广泛将虎耳草制成
注射剂用于治疗增生性疾病，在治疗乳腺小叶增生
症［２］、前列腺增生症［３］等方面取得了良好的疗效．
虎耳草中含有岩白菜素、原儿茶酸、没食子酸、槲皮
素等多种有效成分［４］，其中岩白菜素具有镇咳祛痰
作用，已从药用植物中提取出来应用于临床［５］，是
治疗慢性支气管炎、肺气肿、肺心病、支气管哮喘等
呼吸系统疾病的特效药物［６］，是虎耳草中最重要的
生物活性因子．现代药理实验表明，原儿茶酸、没
食子酸等有机酸类具有抗炎［７－８］、抑菌［９－１０］、抗肿
瘤［１１－１３］、抗氧化［１４］、预防心血管疾病［１５］等药理作
用．目前虽已有虎耳草中相关有效成分的研究报
道，如岳美娥等［１６］报道了测定虎耳草属植物中虎
耳草素含量的高效毛细管电泳法；家欣等［１７］报道
了虎耳草中没食子酸含量的 ＨＰＬＣ测定法．但同
时测定虎耳草中岩白菜素、原儿茶酸、没食子酸三
种有效成分的报道鲜见，且其前处理多采用以甲醇
和乙醇为主的有机溶剂传统回流提取法，此类传统
萃取法不但操作步骤繁琐、耗时长，而且需消耗大
量有机溶剂．本实验以离子液体为萃取剂超声提
取，耗时短、污染小．
离子液体是近年来在绿色化学的框架下发展
起来的新型萃取剂，具有蒸汽压低、热稳定性好、液
程宽、溶解强和可设计调节等特性［１８］．将离子液
体作为萃取剂，不仅对环境友好，而且能提高选择
性，增加萃取化合物的范围，兼具高效萃取和预富
集的优点［１９－２０］．本研究首次建立了以１－丁基－３－甲
基咪唑六氟磷酸盐（［ＢＭＩｍ］ＰＦ６）溶液为萃取剂，
利用超声辅助萃取，结合高效液相色谱法以期建立
同时分离测定虎耳草中的岩白菜素、原儿茶酸、没
食子酸三种有效成分的方法．
２　材料、仪器与方法
２．１　材料与试剂
岩白菜素、原儿茶酸和没食子酸对照品（纯度
均≥９８．５％，上海晶纯实业有限公司；１－丁基－３－甲
基咪唑六氟磷酸盐（纯度≥９９％，中科院兰州化学
物理研究所）；甲醇 （分析纯，重庆川东化工有限
公司化学试剂厂）；乙醇（分析纯，重庆川东化工
有限公司化学试剂厂）；冰醋酸（分析纯，重庆川
东化工有限公司化学试剂厂）；磷酸 （分析纯，成
都市科龙化工试剂厂）；二次蒸馏水（实验室自
制）；虎耳草原药材购于当地药房（西南大学周光
明教授鉴定）．
２．２　仪器与设备
ＬＣ－２０ＡＴ液相色谱输液泵、ＳＰＤ－２０Ａ紫外检
测器、ＣＴＯ－１０ＡＳ柱温箱、ＬＣ－Ｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱数据处
理系统（日本岛津公司）；ＫＨ－３２００Ｂ型超声波清洗
器 （昆山禾创超声仪器有限公司）；ＴＧＬ－１６Ｇ高速
离心机（上海安亭科学仪器厂）；ＳＺ－２自动双重纯
化水蒸馏器 （上海泸西分析仪器）；ＬＩＤＡ　ｐＨ 计
（上海理达仪器厂）；ＦＡ２００４Ａ型分析天平．
２．３　实验方法
２．３．１　色谱条件　色谱柱为 Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８
（２５０ｍｍ ×４．６ ｍｍ，５μｍ）．流动相：甲醇
－０．２％醋酸（２０∶８０，Ｖ／Ｖ）；流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ；
进样量：２０μＬ；检测波长：２７３ｎｍ；柱温：３５℃．
２．３．２　溶液的配制　对照品溶液的制备：分别精
密称取对照品岩白菜素、原儿茶酸、没食子酸适量，
甲醇溶解，配制成岩白菜素７８０μｇ／ｍＬ、原儿茶酸
８６０μｇ／ｍＬ、没食子酸７００μｇ／ｍＬ的溶液，作为储
备液，避光保存，待用．
混合对照品溶液：分别准确吸取三种对照品储
备液适量，用流动相配制成一系列不同浓度的混合
对照品溶液，置于冰箱（４℃）内避光保存备用．
２．３．３　供试品溶液的制备　将虎耳草于７０℃干
燥至恒重后粉碎，过６０目筛（０．５～１．２ｍｍ），干燥
条件下保存备用．准确称取０．１ｇ虎耳草粉末，加
入５ｍＬ　１．２ｍｏｌ／Ｌ离子液体溶液，浸泡２小时，超
声萃取３０ｍｉｎ，过滤取滤液，离心１０ｍｉｎ（３５００
６４０１
第５期 　　秦红英，等：ＨＰＬＣ同时测定虎耳草中的岩白菜素、原儿茶酸和没食子酸的含量　
ｒ／ｍｉｎ），取上清液经０．４５μｍ有机滤膜过滤，进样
分析．
３　结果与分析
３．１　色谱条件的选择
本实验比较了ＣＨＨ３ＯＨ－ＨＨ２Ｏ，ＣＨＨ３ＯＨ
－ＣＨＨ３ＣＯＯＨ，ＣＨＨ３ＣＮ－ＣＨＨ３ＣＯＯＨ，ＣＨＨ３
ＣＮ－ＨＨ３ＰＯ４体系对三种目标分析物的分离效果．
当流动相为ＣＨＨ３ＯＨ－ ＨＨ２Ｏ体系时，调节流动
相比例，组分峰不能完全分离且拖尾严重．当流动
相为ＣＨＨ３ＯＨ－ＣＨＨ３ＣＯＯＨ 时，不断调节其比
例时，发现当甲醇比例为２０％时，三种目标物出峰
时间适宜，组分峰分离度大，且峰形对称性良好．
当甲醇比例小于２０％时，原儿茶酸和岩白菜素的
出峰时间延长，严重拖尾；当甲醇比例大于２０％时
原儿茶酸和岩白菜素的峰不能完全分离．在以
ＣＨＨ３ＣＮ－ＣＨＨ３ＣＯＯＨ，ＣＨＨ３ＣＮ－ＨＨ３ＰＯ４为
流动相时，调节其比例，三种组分峰峰形和分离度
均未有改善，且 ＨＨ３ＰＯ４易损坏色谱柱，故选择
ＣＨＨ３ＯＨ－ＣＨＨ３ＣＯＯＨ 体系为流动相．在色谱
柱允许的ｐＨ范围内，考察了醋酸比例对峰形的影
响，当醋酸比例为０．２％（Ｖ／Ｖ）时，峰形最佳，分离
度最好（见图１），故最终选择ＣＨＨ３ＯＨ－０．２％
ＣＨＨ３ＣＯＯＨ体系为流动相．
图１　混合对照品 ＨＰＬＣ图
１－没食子酸；２－原儿茶酸；３－岩白菜素
Ｆｉｇ．１　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｓｔａｎｄａｒｄｓ
３．２　提取溶剂的选择
本实验分别采用离子液体 ［ＢＭＩｍ］ＰＦ６、
［ＯＭＩｍ］ＰＦ６、［ＨＭＩｍ］ＰＦ６以及甲醇溶液为提取
剂，在相同萃取条件下比较对目标分析物的提取效
果．结果表明，当以［ＢＭＩｍ］ＰＦ６溶液作为提取剂
时，没食子酸、原儿茶酸、岩白菜素的提取率均明显
提高．同时，本实验比较了不同浓度的离子液体对
提取率的影响，表明用１．２ｍｏｌ／Ｌ离子液体提取
时，提取率最高．当离子液体浓度过高时，由于离
子液体的粘度太大，对色谱柱和测定结果均会造成
很大的影响．此外，本实验还考察了不同浸泡时间
对提取效果的影响，通过浸泡不同时间后提取分析
比较，表明浸泡２小时提取效果最佳．
３．３　固液比的选择
为了得到最佳的提取效果，本实验考察了不同
的固液比对提取率的影响．当固液比分别为１∶
２０，１∶３０，１∶５０，１∶８０，１∶１００ｇ／ｍＬ时，三种目
标分析物的提取率显著下降，因此，本实验以１∶
２０ｇ／ｍＬ为最佳固液比（见图２）．
图２　虎耳草样品 ＨＰＬＣ图
１－没食子酸；２－原儿茶酸；３－岩白菜素
Ｆｉｇ．２　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｓａｘｉｆｒａｇｅ
３．４　线性关系的考察
分别精密量取１．３．２项下的混合对照品溶液，
用甲醇稀释至不同浓度．从低浓度到高浓度，依次
进样，每个浓度进样三次，每次２０μＬ，按１．３．１项
下的色谱条件进行 ＨＰＬＣ分析，以峰面积（Ｙ）为纵
坐标，对照品质量浓度（Ｘ）为横坐标，进行线性回
归．回归方程、相关系数和线性范围见表１．
３．５　精密度实验
精密吸取没食子酸、原儿茶酸和岩白菜素的质
量浓度分别为１４．０μｇ／ｍＬ、１７．２μｇ／ｍＬ、１５．６
μｇ／ｍＬ的对照品混合液２０μＬ，按照１．３．１项下的
色谱条件进行ＨＰＬＣ分析．重复进样６次，测定各
个对照品的峰面积，结果没食子酸峰面积ＲＳＤ为
２．０３％，原儿茶酸峰面积 ＲＳＤ为０．９４％，岩白菜
素峰面积ＲＳＤ为１．０４％，表明仪器精密度良好．
３．６　稳定性实验
精密吸取１．３．３项下供试品溶液２０μＬ，在避
７４０１
　 四川大学学报（自然科学版） 　 第５０卷
表１　线性关系实验结果（ｎ＝３）
Ｔａｂ．１　Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｅｑｕａｔｉｏｎｓ，ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ａｎｄ　ＬＯＤｓ
化合物 线性方程
线性范围
（μｇ／ｍＬ）
相关系数
（ｒ）
检出限
（ｎｇ／ｍＬ）
没食子酸 Ｙ＝５４６９９．３６＋１０２８５６．２９Ｘ ０．００１５６～１３０．００　 ０．９９９９３　 ０．０２７７
原儿茶酸 Ｙ＝４３０８７．９４＋５４６２６．５２Ｘ ０．００１７２～１４３．００　 ０．９９９８８　 ０．０７４９
岩白菜素 Ｙ＝１５０４７．００＋４８９５２．１８Ｘ ０．００１４０～１１６．００　 ０．９９９９９　 ０．１２９５
光条件下，于０、４、８、１２、１６、２０、２４ｈ、４８ｈ分别进
样，测定没食子酸的峰面积 ＲＳＤ为１．８６％，原儿
茶酸的峰面积ＲＳＤ为１．６１％，岩白菜素的峰面积
ＲＳＤ为０．７７％，表明该方法稳定性良好．
３．７　重复性实验
精密称取同一批虎耳草样品６份，按照１．３．３
项下的方法制备，１．３．１项下的色谱条件测定．结
果没食子酸峰面积ＲＳＤ为３．０８％，原儿茶酸峰面
积 ＲＳＤ 为 ４．４１％，岩白菜素峰面积 ＲＳＤ 为
１．０８％，表明该方法重复性良好．
３．８　回收率实验
精密称取已知含量的同一批虎耳草样品０．１ｇ
９份，分成三组，每组按照低、中、高三个标准准确
加入对照品混合液，按１．３．３项下的方法制备，１．
３．１项下的色谱条件测定．没食子酸、原儿茶酸和
岩白菜素的回收率测定结果见表２．
表２　回收率实验结果
Ｔａｂ．２　Ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ（％）ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
化合物
样品含量
（μｇ）
加入量
（μｇ）
测得量
（μｇ）
回收率
（％）
没食子酸 ６２．４０　 ５５．００　 １１５．２３　 ９６．０５
６２．４０　 ６０．００　 １２０．８１　 ９７．３５
６２．４０　 ６５．００　 １２５．３９　 ９６．９１
原儿茶酸 ２７．１７　 ２０．００　 ４５．３９　 ９１．１０
２７．１７　 ２５．００　 ５０．４８　 ９３．２４
２７．１７　 ３０．００　 ５５．６２　 ９４．８３
岩白菜素 １５３．９０　 １４５．００　 ２９６．３７　 ９８．２６
１５３．９０　 １５５．００　 ３０２．８８　 ９６．１２
１５３．９０　 １６５．００　 ３１４．３４　 ９７．２４
３．９　样品含量的测定
取同一批虎耳草样品３份，按照１．３．３项下方
法制备，１．３．１项下色谱条件测定，样品含量测定
结果见表３．记录虎耳草样品色谱图，见图２．
表３　样品含量测定结果 （&ｇ／ｇ，ｎ＝３）
Ｔａｂ．３　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅｓ
化合物
样品１
（％）
样品２
（％）
样品３
（％）
没食子酸 ６２．１７（１．４９） ６１．２９（０．７３） ６３．８２（２．４４）
原儿茶酸 ２６．３２（０．９８） ２８．６１（２．１７） ２５．２０（２．３５）
岩白菜素 １５５．６４（１．２６） １５８．１０（１．７４） １５３．９３（０．５８）
４　结　论
实验首次提出了以离子液体１－丁基－３－甲基咪
唑磷酸盐（［ＢＭＩＭ］ＰＦ６）溶液为萃取剂，结合超声
辅助对虎耳草中的没食子酸、原儿茶酸和岩白菜素
进行有效提取，高效液相色谱测定．在优化的最佳
实验条件下，三种有效成分萃取率高，分离完全．
该方法绿色环保，操作简便，定量结果可靠．为虎
耳草中有效成分的提取检测提供了一种新的科学
方法．
８４０１
第５期 　　秦红英，等：ＨＰＬＣ同时测定虎耳草中的岩白菜素、原儿茶酸和没食子酸的含量　
参考文献：
［１］　国家中医药管理局．中华本草［Ｍ］．上海：上海科学
技术出版社，２００５．
［２］　居龙涛．虎耳草治疗乳腺小叶增生症临床报告［Ｊ］．
中国中医基础医学杂志，２００９，１５（９）：７１１．
［３］　Ｌｉ　Ｓ，Ｌｕ　Ａ　Ｐ，Ｗａｎｇ　Ｙ　Ｙ．Ｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ
ｉｎ　ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｂｅｎｉｇｎ　ｐｒｏｓｔａｔｉｃ　ｈｙｐｅｒｐｌａ－
ｓｉａ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｗｏ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ［Ｊ］．
Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ　Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ　ｉｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１０，１８（１）：
２１．
［４］　 先春，龚小见，赵超，等．虎耳草的化学成分研究
［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１２，１８（１０）：１２４．
［５］　Ｐａｔｅｌ　Ｄ　Ｋ，Ｐａｔｅｌ　Ｋ，Ｋｕｍａｒ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉ－
ｃａｌ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ａｓｐｅｃｔｓ　ｏｆ　ｂｅｒｇｅｎｉｎ：ａ　ｃｏｎｃｉｓｅ　ｒｅ－
ｐｏｒｔ［Ｊ］．Ａｓｉａｎ　Ｐａｃｉｆｉｃ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅ，
２０１２，２（２）：１６３．
［６］　 董成梅，杨丽川，邹澄，等．岩白菜素的研究进展
［Ｊ］．昆明医学院学报，２０１２，（１）：１５０．
［７］　 Ｔｓａｉ　Ｓ　Ｊ，Ｙｉｎ　Ｍ　Ｃ．Ａｎｔｉ－ｇｌｙｃａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍ－
ｍａｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｂｒａｉｎ　ｏｆ　ｍｉｃｅ
ｔｒｅａｔｅｄ　ｂｙ　ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓｅ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｔｏｘｉ－
ｃｏｌｏｇｙ，２０１２，５０（９）：３１９８．
［８］　Ｐａｌ　Ｃ，Ｂｉｎｄｕ　Ｓ，Ｄｅｙ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｐｒｅｖｅｎｔｓ
ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ　ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｄｒｕｇ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｇａｓｔｒｏｐ－
ａｔｈｙ　ｉｎ　ｒａｔ　ｂｙ　ｂｌｏｃｋｉｎｇ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
［Ｊ］．
［９］　Ｓｔｏｊｋｏｖｉ＇ｃＤ　Ｓ，ｉｖｋｏｖｉ＇ｃＪ，Ｓｏｋｏｖｉ＇ｃＭ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉ－
ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｖｅｒｏｎｉｃａ　ｍｏｎｔａｎａ　Ｌ．ｅｘｔｒａｃｔ　ａｎｄ
ｏｆ　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ　ｉｎ　ａ　ｆｏｏｄ　ｓｙｓｔｅｍ
［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２０１３，５５：２０９．
［１０］　Ｃｈａｎｗｉｔｈｅｅｓｕｋ　Ａ，Ｔｅｅｒａｗｕｔｇｕｌｒａｇ　Ａ，Ｋｉｌｂｕｒｎ　Ｊ　Ｄ，
ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｒｏｍ　Ｃａｅｓａｌｐｉｎｉａ　ｍｉ－
ｍｏｓｏｉｄｅｓ　Ｌａｍｋ ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００７，１００
（３）：１０４４．
［１１］　Ｌｏｃａｔｅｌｉ　Ｃ，Ｆｉｌｉｐｐｉｎ－Ｍｏｎｔｅｉｒｏ　Ｆ　Ｂ，Ｃｒｅｃｚｙｎｓｋｉ－Ｐａｓａ
Ｔ　Ｂ．Ａｌｋｙｌ　ｅｓｔｅｒｓ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｓ　ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　ａｇｅｎｔｓ：
Ａ　ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍ－
ｉｓｔｒｙ，２０１３，６０：２３３．
［１２］　Ｔｓｅｎｇ　Ｔ　Ｈ，Ｈｓｕ　Ｊ　Ｄ，Ｌｏ　Ｍ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ
ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｈｉｂｉｓｃｕｓ　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒ　ｐｒｏ－
ｍｏｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍｏｕｓｅ　ｓｋｉｎ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９８，
１２６（２）：１９９．
［１３］　Ｖｅｒｍａ　Ｓ，Ｓｉｎｇｈ　Ａ，Ｍｉｓｈｒａ　Ａ．Ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ：Ｍｏｌｅｃｕ－
ｌａｒ　ｒｉｖａｌ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ
ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１３，３５（３）：４７３．
［１４］　ＶａｒìＲ，Ｄ’Ａｒｃｈｉｖｉｏ　Ｍ，Ｆｉｌｅｓｉ　Ｃ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｒｏｔｏｃａｔｅ－
ｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ／ｄｅｔｏｘｉｆｙｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ＪＮＫ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　Ｎｒｆ２ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｉｎ
ｍｕｒｉｎｅ　ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ［Ｊ］．Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１，２２（５）：４０９．
［１５］　Ｐｒｉｓｃｉｌａ　Ｄ　Ｈ，Ｐｒｉｎｃｅ　ＰＳ　Ｍ．Ｃａｒｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ
ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｎ　ｃａｒｄｉａｃ　ｔｒｏｐｏｎｉｎ－Ｔ，ｃａｒｄｉａｃ　ｍａｒｋｅｒ
ｅｎｚｙｍｅｓ，ｌｉｐｉｄ　ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａ－
ｎｔｓ　ｉｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ
ｉｎ　Ｗｉｓｔａｒ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｃｈｅｍｉｃｏ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，
２００９，１７９（２－３）：１１８．
［１６］　岳美娥，姜廷福，师彦平．高效毛细管电泳测定虎
耳草属植物中虎耳草素含量［Ｊ］．分析测试技术与
仪器，２００５，１１（１）：７．
［１７］　家欣，张秋海，李淑莉，等．ＨＰＬＣ测定虎耳草中
没食子酸的含量［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１０，
１６（３）：１９．
［１８］　张锁江，吕兴梅，等．离子液体－从基础研究到工业
应用［Ｍ］．北京：科学出版社，２００６．
［１９］　Ｈｏｕ　Ｑ　Ｘ，Ｚｈａｎｇ　Ｘ　Ｇ，Ｘｉａｏ　Ｊ　Ｐ．Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ－ａｓｓｉｓ－
ｔｅｄ　ｉｏｎｉｃ　ｌｉｑｕｉｄ　ｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅ　ｌｉｑｕｉｄ－ｐｈａｓｅ　ｍｉｃｒｏ－ｅｘｔｒａｃ－
ｔｉｏｎ：Ａ　ｎｏｖｅｌ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｒｏｍａｔｉｃ　ａｍｉｎｅｓ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ　ｓａｍｐｌｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒ－
ｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ａ，２００９，１２１６（２０）：４３６１．
［２０］　Ｍａ　Ｗ　Ｙ，Ｌｕ　Ｙ　Ｂ，Ｈｕ　Ｒ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉ－
ｏｎｉｃ　ｌｉｑｕｉｄｓ　ｂａｓｅｄ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ
ｔｈｒｅｅ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　Ｎ－ｎｏｒｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ，Ｏ－ｎｏｒｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ，
ａｎｄ　ｎｕｃｉｆｅｒｉｎｅ　ｆｒｏｍ　ｌｏｔｕｓ　ｌｅａｆ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，２０１０，
８０（３）：１２９２．
［责任编辑：陈向荣］
９４０１