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HPLC法测定盘龙七中岩白菜素的含量



全 文 :4  近现代  药理研究证实 ,大枣对试验性肝病
家兔血清白蛋白有明显的影响 ,有较好的保护肝脏作
用。
近现代 ,大枣药食两用的价值倍受重视 ,临床较前
不同的是用于肝病。如《古今名方》载肝得安 ,以五味
子、茵陈蒿、大枣各等量。 用于各型传染性肝炎 ,有退
黄、降酶、恢复肝脏功能之效。又泻水丸 ,用生甘遂、巴
豆、红大戟、芫花各 15g ,沉香 3g ,煮熟大枣肉 90g等。
本方较之仲景十枣汤攻逐水饮之力更强 ,用于肝硬化
腹水而水肿胀满急重之证 ,但应收效即止 ,改用扶正祛
邪之剂。山东《中草药验方选编》治肝硬化腹水方 ,以胡
桃仁、白矾、大枣、发面馒头、黑豆各 125g。又方 ,以赤
小豆或绿豆、金针菜、大枣各适量 ,亦治疗肝硬化腹水。
崔氏等用黄芪、茵陈、大枣各 30g。 对临床治愈好转后
的慢性乙型肝炎预后有改善作用 [1 ]。
5 结 语  大枣 ,历代以来 ,被公认为养生保健
之佳品 ,俗有“一日食三枣 ,终生不显老”之誉 ,男女老
幼皆宜 ,可长期食用。 同时 ,又是中医辅助治疗最常配
用的药物。不同历史时期大枣的药用既具有特色 ,又有
承接性。 汉 ,重在健脾养血和营 ,缓和药性 ,疗营卫不
和 ,脏躁 ;唐宋 ,主以补脾益肺 ,治脾虚证、咳嗽 ;金元明
清 ,补中益气 ,养血安神 ,缓和药性 ,虚证、神志异常多
用 ;近现代 ,补虚扶正 ,养血保肝 ,肝病多用。补中益气
常与人参、黄芪、白术等配伍 ;养血安神常与当归、酸枣
仁等配伍 ;和中调营则常与生姜共用。对于峻猛和有毒
之品 ,亦常佐以大枣 ,以缓和药性。
参考文献
[ 1 ]  崔德广 ,李素云 .黄芪茵陈大枣汤治疗慢性乙型肝
炎稳定期 50例疗效观察 [ J].山东中医杂志 , 2006, 25( 9): 605-
606.
(收稿 2010-09-10;修回 2010-11-23)  
HPLC法测定盘龙七中岩白菜素的含量*
索建兰  林宏领 宝鸡文理学院化学化工系 (宝鸡 721007)
 摘 要 目的:建立一套完整的岩白菜素的测定方法。方法:运用高效液相色谱法对盘龙七中岩白
菜素进行测定 ,比较了不同提取剂 ,同一提取剂不同时间和不同流动相对岩白菜素的影
响 .采用 ODS柱 ( 15cm× 4. 6mm ) ,检测波长 275nm ,流速 0. 8mL /min,柱温为室温。结果:
甲醇对岩白菜有很好的提取效果 ,同时以甲醇∶水∶磷酸 ( 20∶ 80∶ 0. 5)作为流动相分离
效果最佳。
 主题词 中药 /标准 盘龙七 /化学 白菜素 /分析 色谱法 ,高压液相反
 【中图分类号】  R931 【文献标识码】  A 【文章编号】  1000-7369( 2011) 03-0353-03
  岩白菜为虎耳草科岩白菜属多年生草本植物。 生
长在阴湿的悬崖绝壁上故名岩白菜 ,其根状茎在陕西
眉县及秦岭地区称为盘龙七。岩白菜素又称岩白菜内
酯、矮茶素 ,属异香豆类化合物 ;其化学名为: 3, 4, 8,
10-四-O-羟基 -2-羟甲基 9-O-甲基-2, 3, 4a, 10b-四氢吡
喃基 [3, 2-c ]苯并吡喃 -6-酮 ,结构式:
* : 陕西省植物化学重点实验室重点项目 ( 2010 JS067) ,宝鸡文
理学院重点项目 ( ZK0933)。
  岩白菜主要分布在陕西、四川、贵州、云南等地 ,对
其研究较少。特别是各地由于气候的差异 ,有效成分含
量差距较大 [1, 2 ]。因此 ,研究其分析方法具有重要意义。
2 实验部分
2. 1 仪器与试药  岛津 LC-10A高效液相色谱
仪、 SPD-10AVp紫外检测器、药物粉碎机 ;盘龙七、岩
白菜素 (购自宝鸡市亚鑫生物工程有限公司 )、甲醇为
色谱纯其余为分析纯、水为去离子水。
2. 2 色谱条件  色谱柱: Vp-ODS柱 ( 15cn× 4.
6mm) ;流动相∶甲醇∶水∶磷酸 ( 20∶ 80∶ 0. 1) ;检
测波长 275nm;流速: 0. 8mL /min; 柱温∶室温 ;进样
量∶ 15μL
2. 3 对照品的色谱图  精确称取岩白菜素标品
40mg置 10mL的容量瓶中 ,以甲醇溶解定容 ,备用。按
2. 2色谱条件进样 15μL得高效液相色谱图 1。由图可
知标品保留时间为 12. 298min。
353陕西中医 2011年第 32卷第 3期
  图 1  岩白菜素对照品
   2. 5 提取工艺的确定
2. 5. 1 供试品Ⅰ 的制备: 称取盘龙七粉末 3. 00g
置于圆底炒瓶中 ,加入 23mL甲醇回流提取 2h,放置
室温 ,过滤 ,用甲醇定容到 25mL的容量瓶中 ,过 0.
45μL滤膜即得。
2. 5. 2 供试品Ⅱ的制备: 称取盘龙七粉末 3. 00g
置于圆底炒瓶中 ,加入 23mL95%乙醇回流提取 2h,放
置室温 ,过滤 ,用乙醇定容到 25mL的容量瓶中 ,过 0.
45μL滤膜即得。
2. 5. 3 供试品Ⅲ的制备: 称取盘龙七粉末 3. 00g
置于圆底炒瓶中 ,加入 23mL氯仿回流提取 2h,放置
室温 ,过滤 ,用氯仿定容到 25mL的容量瓶中 ,过 0.
45μL滤膜即得。
3  结果与讨论
3. 1 三中提取方法的色谱图 按 2. 2之方法和
条件 ,分别对上述三种不同方法从盘龙七中得到的岩
白菜素样品Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ ,以 15μL进样得色谱图 2、图 3、
图 4。
   图 2
   由上三图可以看出 ,不同提取剂得到的波谱均出
现四个峰值 ,但峰高、峰面积及所对应的含量有较大差
别 ,详见表 1~ 表 3。
   3. 2 不同提取溶媒的比较 由图 2、图 3、图 4三
图可以看出 ,每种提取溶媒得到结果各异。 为此 ,可通
过图谱分析得确定最佳溶媒。其图谱结果列于表 4。
   图 3
   图 4
  表 1  不同提取剂四个峰值比较素
峰 名保留时间 峰高 峰面积 含量
  2. 388 20274. 801 221348. 203 2. 2915
  3. 078 38429. 055 997459. 688 10. 3261
  4. 740 162244. 844 3189084. 250 33. 0147
  12. 367 154146. 125 5251684. 0000 54. 3676
    375094. 824 9659576. 141 100. 00
  表 2  不同提取剂 4个峰值比较表
峰 名保留时间 峰高 峰面积 含量
  1. 370 9895. 751 457485. 875 23. 6870
  3. 193 10397. 627 97884. 180 5. 0687
  4. 842 32271. 236 388841. 000 20. 1350
  12. 525 28152. 992 857712. 500 44. 4142
  14. 057 2742. 546 129294. 523 6. 6951
    83460. 546 1931168. 522 100. 0000
  表 3  不同提取剂 4个峰值比较表
峰 名保留时间 峰高 峰面积 含量
  3. 055 2630. 357 25698. 934 3. 6064
  4. 692 11865. 895 177477. 313 24. 9060
  5. 080 1571. 911 33812. 988 4. 7451
  8. 932 646. 474 11494. 195 1. 6130
  11. 385 1955. 287 131440. 641 18. 4455
  12. 387 12200. 232 332664. 188 46. 6839
    30870. 156 712588. 258 100. 00
354 陕西中医 2011年第 32卷第 3期
  图 5
  图 6
  图 7
  表 4  三种提取方法的比较
提取剂 提取方法 提取时间 结果
甲醇 回流提取 2h 杂质峰较少 ,主峰含量多 ,分离明显
95%乙醇 回流提取 2h 杂质峰较多 ,主峰含量少 ,分离不明显
氯仿 回流提取 2h 杂质峰较多 ,主峰含量少 ,分离不明显
  由表 3. 4可见 ,甲醇回流提取效果最佳。
3. 3 三种流动相的比较  以甲醇为溶媒 ,分别
以甲∶醇水∶磷酸 ( 20∶ 80∶ 0. 1)、甲醇∶水 ( 30∶
70)、甲醇∶水 ( 40∶ 60)为流动相得到色谱图 5、图 6、
图 7,如下。
  由图可见 ,甲醇∶水∶磷酸作流动相得到的图谱
干扰峰较少 ,分离效果好。
3. 4 提取时间的比较  岩白菜素也可用超声波
震荡提取 [3 ] ,相关文献报道 [4, 5 ] ,甲醇回流效果优于超
声波震荡提取。不同提取时间对岩白菜素的影响见表
5。
表 5 提取时间的比较
提取方法 30min 60min 120min
甲醇回流提取 4. 19% 5. 08% 5. 12%
甲醇超声提取 2. 55% 2. 75% 3. 66%
  由表 5知回流 2h岩白菜素提取率最高。
  综上所得:甲醇回流 2h对岩白菜素的提取效果最
好 ,以甲醇∶水∶磷酸 ( 20∶ 80∶ 0. 1)作为流动相 ,检
测波长 275nm分离效果最佳。本方法是测定盘龙七中
岩白菜素含量的快速简便准确可靠的定量方法。
参考文献
[1 ] 肖培根 .新编中药志 [ M ].北京: 化学工业出版社 ,
590.
[ 2 ] 吕修梅 ,王军宪 .岩白菜属植物的研究进展 [ J].中药
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[ 3 ] 常新全 ,丁丽霞 .中药活性分析手册 [ M ].北京: 学苑
出版社 , 2004: 1251.
[ 4 ] 纪兰菊 .西藏两种岩白菜中岩白菜素的 HPLC测定
[ J].西北植物报 , 2005, 25( 2): 397-399.
[ 5] 段新瑜 , 何华斌 , 杨 兰 ,等 . 鬼灯檠属及近缘植物
中岩白菜素 HPLC定量分析 [ J]. 2007, 6( 10): 17.
(收稿 2010-09-10;修回 2010-11-23)  
(上接第 351页 )
适用于虚寒性出血如便血。而煨姜不适用于此症。临床
应用时应区别 ,不能混用。
综上所述 ,姜的不同炮制品 ,性状不同 ,临床应有
各异 ,使用不当 ,影响疗效 ,临床应用时要严格区别 ,不
能混用代用。
参考文献
[ 1 ] 沈映君 .中药药理学 [M ].上海: 科学技术出版社 ,
2003: 101.
[ 2 ] 叶定江 .中药炮制学 [M ].上海: 科学技术出版社 ,
2003: 153.
[ 3] 段喜乐 ,高凤琴 ,成东升 .温阳利水法治疗肝硬化腹
水的临床探讨 [ J].陕西中医 , 2010, 31( 5): 570.
(收稿 2010-09-25;修回 2010-10-25)  
355陕西中医 2011年第 32卷第 3期