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五指毛桃对~(60)Coγ射线损伤小鼠组织DNA的防护及修复作用研究



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五指毛桃对60Coγ射线损伤小鼠组织
DNA的防护及修复作用研究
王晓平,黄 翔,陈晓白,岑业文
(玉林师范学院,广西 玉林 537000)
摘要 目的:探讨五指毛桃对60Coγ射线损伤小鼠组织 DNA的防护和修复作用。方法:120 只 SPF级雄性小鼠
随机分为辐照前用药、辐照后用药、辐照前后连续用药三大模块各 5 组,各模块设低、中、高剂量给药组分别给予 5、
10、20 g /(kg·d)五指毛桃水提液连续灌胃 7 d,正常对照组给予生理盐水,单纯照射组作为辐照模型组,除正常对
照组外,所有小鼠接受全身一次性60 Coγ 照射,照射剂量为 6Gy。各模块均于实验结束次日处死小鼠,取肺、肝、睾
丸、股骨和外周血,分别制作单细胞悬液,用单细胞凝胶电泳技术进行 DNA损伤检测。结果:辐照模型组小鼠组织
细胞 DNA的尾部 DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)显著高于正常对照组(P < 0. 05) ,各给药组的 Tail
DNA%和 Tail Moment均显著低于辐照模型组(P < 0. 01) ,且随着给药剂量的增加,Tail DNA%和 Tail Moment降低。
结论:五指毛桃水提液对60Coγ射线损伤小鼠组织 DNA具有很好的防护作用和修复作用。
关键词 五指毛桃;60Coγ射线;DNA损伤;防护;修复
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2010)10-1614-05
收稿日期:2010-01-11
基金项目:广西教育厅科研项目(200809MS124;200911MS195)
作者简介:王晓平(1968-) ,女,副教授,硕士,主要从事药理学和生理学研究;E-mail:sywxp@ 163. com。
随着核技术在工农业、医学生命科学等领域的
广泛应用,人们接触辐射的机会日益增多,受辐射损
伤的可能性随之增加。辐射通过能量传递、分解水
分子产生自由基,损伤机体的生物大分子,引起各种
急、慢性和潜在性危害〔1〕。DNA作为一类基本生物
大分子,是遗传信息的载体,也是辐射的主要靶分
子。辐射可引起 DNA 的各种损伤,其中,DNA 链断
裂是辐射所致生物效应中最重要的原初损伤〔2〕。
目前,辐射防护剂多为巯基类化合物,这些药物
普遍毒性较大〔3〕,从而限制了其使用,寻找毒性低、
疗效高的抗辐射新药是当今辐射防护剂的研究热
点。经过多年的研究,人们发现具有清热解毒、活血
化瘀、补血益气、养阴生津几类中药均有不同程度的
抗辐射作用,其组分如多糖类、生物碱类、皂苷类等
可通过不同的途径对辐射损伤产生防护作用〔4〕,且
中药毒性低,使其在辐射防护剂的研究中显示出巨
大的优势和潜力。五指毛桃(Radix Fici Hirtae)是
华南地区广泛使用的一种中药,为桑科植物粗叶榕
的干燥根〔5〕,含有丰富的多糖、补骨脂素、生物碱等
生物活性物质〔6〕。本研究应用单细胞凝胶电泳技
·4161· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 33 卷第 10 期 2010 年 10 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2010.10.023
术,探讨五指毛桃对60Coγ射线辐射引起的小鼠组织
细胞 DNA损伤的保护和修复作用,为五指毛桃在改
善辐射损伤方面的应用提供实验依据。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 6 周龄 SPF 级昆明种雄性小鼠
120 只,体质量(20 ± 2)g,购自广西医科大学医学实
验动物中心,动物生产许可证号:SCXK 桂 2009-
0002。
1. 2 试剂 正常熔点琼脂糖(NMA) ;低熔点琼脂
糖(LMA) ;Triton X-100;十二烷基肌氨酸钠;二甲亚
砜(DMSO) ;乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA) ;三羟甲
基氨基甲烷(Tris-base) ;氢氧化钠(NaOH) ;淋巴细
胞分离液;溴化乙锭。
1. 3 主要仪器 FYC-50H60Coγ 治疗机:上海医用
核子仪器厂;DYY-III 型电泳槽、DYY-11B 型三恒电
泳仪:北京市六一仪器厂;BX51·R-32FB3F01 正置
荧光相差生物显微镜:日本 Olympus 公司;150 万相
素 CCD:日本 Nikon 公司;L420 台式低速自动平衡
离心机:长沙湘仪离心机仪器有限公司。
2 方法
2. 1 五指毛桃水提液的制备 五指毛桃购自玉林
市中药材公司。五指毛桃水提液的制备参照周添
浓〔7〕等的方法略加改进:取五指毛桃干燥药材,用
10 倍体积的蒸馏水浸泡 1 h,加热煮沸 3 h,趁热滤
取药液;再加 8 倍量体积蒸馏水,煮沸 30 min,合并
2 次滤液,浓缩至相当于生药 2 g /mL。4 ℃冰箱保
存,用时稀释至所需浓度。
2. 2 动物分组和处理
2. 2. 1 辐照前给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail
DNA%、Tail Moment的影响:将小鼠随机分为 5 组,
即正常对照组、辐照模型组及五指毛桃低、中、高剂
量组,每组 8 只。五指毛桃水提液低、中、高剂量按
5、10、20 g /(kg·d)灌胃给药,1 次 /d,正常对照组、
模型组给予等量生理盐水。辐照条件:除正常对照组
外,其余各组小鼠进行60 Coγ 射线一次性全身均匀照
射,照射率为 182. 28 cGy /min,照射野 18 cm ×18 cm,
源皮距为 75 cm,照射剂量为 6 Gy。先给予五指毛桃
水提液灌胃,连续 7 d,最后一次给药 1 h后辐照。
2. 2. 2 连续给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail
DNA%、Tail Moment 的影响:动物分组及给药剂量
同“2. 2. 1”,先给予五指毛桃水提液灌胃,第 4 d 给
药 1 h后辐照,再继续灌胃到第 7 d。
2. 2. 3 辐照后给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail
DNA%、Tail Moment 的影响:动物分组及给药剂量
同“2. 2. 1”,先辐照,接着给予五指毛桃水提液灌
胃,连续 7 d。
2. 3 单细胞悬液的制备 各模块均于实验结束次
日处死小鼠,取肺、肝、睾丸、股骨和外周血。将肺、
肝和睾丸组织用 37 ℃PBS缓冲液冲洗 2 次,用眼科
剪剪碎,以一定量 PBS 稀释后,擦镜纸过滤、收集细
胞悬液,1 000 r /min 离心 5 min,弃上清液,重悬。
取股骨,剔尽肌肉,用眼科剪刀将股骨从骨干中间剪
断,用 2 mL注射器进行骨髓腔冲洗,直到骨头发白,
收集冲洗下的细胞悬液,过滤、离心、重悬。外周血
沿离心管内壁轻轻加在 0. 2 mL 淋巴细胞分离液液
面上,3 500 r /min 离心 4 min。离心后吸取中间层
淋巴细胞移入离心管中,加入 PBS 缓冲液至 2 mL,
1 500 r /min离心8 min,弃上清液,再将淋巴细胞重悬
于 PBS。所有细胞浓度均调为 1 ×105 ~1 ×106 /mL。
2. 4 单细胞凝胶电泳实验
2. 4. 1 铺胶:在完全磨毛的载玻片(75 mm × 25
mm)上铺第一层 180 μL质量分数为 1%的 NMA,待
其固化后铺第二层 100 μL 质量分数为 0. 8% 的
LMA和细胞悬液的混合液(体积比为 5∶ 3) ,待第二
层固化后铺第三层质量分数为 0. 5% 的 100 μL
LMA。固化条件均为 4 ℃,10 min。
2. 4. 2 细胞裂解:将玻片置于碱性裂解液(2. 5
mol /L NaCl,100 mmol /L Na2EDTA,10 mmol /L Tris-
base,1%十二烷基肌氨酸钠,临用前加终浓度为 1%
TritonX-100,10%DMSO,pH 10. 0)中,4 ℃下裂解 2 h。
2. 4. 3 细胞 DNA解旋和电泳:将玻片置于水平电
泳槽中,加入新配制的电泳缓冲液(1 mmol /L Na2
EDTA,300 mmol /L NaOH,pH 13. 0)浸泡 20 min,以
便双链 DNA解螺旋。室温下调节缓冲液液面高低,
于 19 V(骨髓细胞为 22 V) ,190 mA下电泳 20 min。
随后将玻片浸入 0. 4 mol /L Tris-base 缓冲液(pH
7. 5)中,中和 30 min。
2. 4. 4 染色与观察:5 μg /mL溴化乙锭染色,双蒸
水漂洗,24 h内在荧光显微镜下观察。
2. 4. 5 拍照与分析:每只小鼠随机选择 50 个细胞
进行分析。细胞图像由 CCD 拍摄,用 CASP 彗星图
像分析软件自动分析。分析指标为国际公认的尾部
DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)。
其中 Tail DNA%为单一的彗尾强度指标,Tail Mo-
ment为复合指标,定义为彗尾 DNA 百分率和彗尾
长度的乘积。
2. 5 统计学处理 实验结果以 珋x ± s 表示,采用
Origin 7. 0 统计分析软件进行数据分析。
3 结果
3. 1 辐照前给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail DNA%、
·5161·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 33 卷第 10 期 2010 年 10 月
Tail Moment的影响 结果如表 1、2 所示,小鼠接受
6Gy 60Coγ射线照射后,模型组各细胞的 Tail DNA%
和 Tail Moment与正常对照组比较均显著升高(P <
0. 01) ,提示造模成功。五指毛桃各剂量组的 Tail
DNA%和 Tail Moment 均显著低于模型组(P <
0. 01) ,且随着给药剂量的增加,Tail DNA%和 Tail
Moment逐步降低。其中,中剂量组和高剂量组睾丸
细胞的 Tail DNA%和 Tail Moment 与正常对照组比
较,差异无统计学意义(P > 0. 05) ,高剂量组肺、肝
细胞的 Tail Moment与正常对照组比较,差异无统计
学意义(P > 0. 05)。提示预防性给予五指毛桃后再
进行照射,可显著降低60Coγ射线对小鼠各组织细胞
DNA的损伤,说明五指毛桃对辐射损伤细胞具有一
定的保护作用。
表 1 辐照前给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail DNA%的影响(珔x ± s,n =8)
组别 剂量 /(g /kg) 肺细胞 肝细胞 睾丸细胞 骨髓细胞 淋巴细胞
正常对照组 - 2. 90 ± 0. 50 3. 73 ± 0. 64 14. 19 ± 1. 34 0. 90 ± 0. 07 1. 48 ± 0. 21
模型组 - 35. 42 ± 1. 45* 27. 56 ± 1. 47* 48. 21 ± 2. 03* 23. 35 ± 1. 02* 25. 27 ± 1. 68*
五指毛桃低剂量组 5 9. 70 ± 1. 26* # 16. 94 ± 0. 97* # 26. 21 ± 1. 03* # 5. 50 ± 0. 34* # 13. 71 ± 0. 71* #
五指毛桃中剂量组 10 6. 40 ± 0. 72* # 10. 77 ± 0. 50* # 16. 50 ± 1. 43# 3. 30 ± 0. 28* # 10. 65 ± 0. 72* #
五指毛桃高剂量组 20 5. 23 ± 0. 57* # 5. 51 ± 0. 49**# 15. 80 ± 0. 74# 2. 48 ± 0. 20* # 6. 16 ± 0. 44* #
注:与正常对照组比较,* P < 0. 01,**P < 0. 05;与模型组比较,#P < 0. 01
表 2 辐照前给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail Moment的影响(珔x ± s,n =8)
组别 剂量 /(g /kg) 肺细胞 肝细胞 睾丸细胞 骨髓细胞 淋巴细胞
正常对照组 - 0. 54 ± 0. 22 0. 68 ± 0. 19 4. 54 ± 0. 66 0. 03 ± 0. 00 0. 09 ± 0. 02
模型组 - 17. 16 ± 1. 18* 10. 67 ± 0. 93* 22. 93 ± 1. 64* 8. 17 ± 0. 66* 7. 45 ± 0. 73*
五指毛桃低剂量组 5 2. 24 ± 0. 58* # 4. 65 ± 0. 43* # 7. 67 ± 0. 44* # 0. 76 ± 0. 09* # 2. 99 ± 0. 24* #
五指毛桃中剂量组 10 1. 35 ± 0. 28**# 1. 87 ± 0. 14* # 4. 22 ± 0. 51# 0. 33 ± 0. 06* # 2. 19 ± 0. 29* #
五指毛桃高剂量组 20 0. 98 ± 0. 16# 0. 85 ± 0. 14# 4. 30 ± 0. 33# 0. 16 ± 0. 02* # 0. 64 ± 0. 10* #
注:与正常对照组比较,* P < 0. 01,**P < 0. 05;与模型组比较,#P < 0. 01
3. 2 连续给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail DNA%、
Tail Moment的影响 结果如表 3、4 所示,与正常对
照组比较,模型组各细胞的 Tail DNA%和 Tail Mo-
ment显著升高(P < 0. 01) ;与模型组比较,五指毛桃
各剂量组的 Tail DNA%和 Tail Moment 均显著降低
(P < 0. 01) ,且呈明显的量效关系。中剂量组睾丸
细胞、高剂量组肺细胞的 Tail Moment与正常对照组
比较,差异无统计学意义(P > 0. 05) ,高剂量组肝细
胞、睾丸细胞的 Tail DNA%和 Tail Moment与正常对
照组比较,差异无统计学意义(P > 0. 05)。提示五
指毛桃可有效抑制60 Coγ 射线对细胞 DNA 的损伤,
具一定的抗辐射作用。
表 3 连续给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail DNA%的影响(珔x ± s,n =8)
组别 剂量 /(g /kg) 肺细胞 肝细胞 睾丸细胞 骨髓细胞 淋巴细胞
正常对照组 - 2. 81 ± 0. 48 3. 25 ± 0. 59 15. 29 ± 1. 16 1. 20 ± 0. 12 1. 87 ± 0. 23
模型组 - 28. 60 ± 1. 32* 25. 54 ± 1. 19* 39. 17 ± 1. 99* 23. 61 ± 1. 32* 18. 06 ± 1. 28*
五指毛桃低剂量组 5 10. 47 ± 1. 12* # 15. 30 ± 1. 04* # 23. 77 ± 1. 16* # 10. 18 ± 1. 10* # 12. 30 ± 0. 63* #
五指毛桃中剂量组 10 7. 90 ± 0. 77* # 9. 33 ± 0. 68* # 21. 71 ± 1. 12* # 5. 50 ± 0. 51* # 10. 24 ± 0. 59* #
五指毛桃高剂量组 20 5. 21 ± 0. 91**# 4. 71 ± 0. 57# 15. 37 ± 0. 88# 3. 09 ± 0. 48* # 4. 94 ± 0. 38* #
注:与正常对照组比较,* P < 0. 01,**P < 0. 05;与模型组比较,#P < 0. 01
表 4 连续给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail Moment的影响(珔x ± s,n =8)
组别 剂量 /(g /kg) 肺细胞 肝细胞 睾丸细胞 骨髓细胞 淋巴细胞
正常对照组 - 0. 51 ± 0. 15 0. 57 ± 0. 17 5. 13 ± 0. 59 0. 05 ± 0. 01 0. 12 ± 0. 02
模型组 - 10. 63 ± 0. 88* 9. 44 ± 0. 71* 13. 99 ± 1. 61* 8. 71 ± 0. 80* 4. 61 ± 0. 59*
五指毛桃低剂量组 5 2. 14 ± 0. 41* # 3. 87 ± 0. 42* # 6. 80 ± 0. 50**# 2. 87 ± 0. 59* # 2. 46 ± 0. 20* #
五指毛桃中剂量组 10 1. 66 ± 0. 30* # 1. 65 ± 0. 28* # 5. 48 ± 0. 46# 0. 78 ± 0. 14* # 1. 65 ± 0. 16* #
五指毛桃高剂量组 20 1. 44 ± 0. 52# 0. 85 ± 0. 16# 4. 08 ± 0. 38# 0. 43 ± 0. 15**# 0. 50 ± 0. 06* #
注:与正常对照组比较,* P < 0. 01,**P < 0. 05;与模型组比较,#P < 0. 01
·6161· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 33 卷第 10 期 2010 年 10 月
3. 3 辐照后给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail DNA%、
Tail Moment的影响 结果如表 5、6 所示,模型组各
细胞的 Tail DNA%和 Tail Moment 与正常对照组比
较均显著升高(P < 0. 01) ,说明 6Gy 60Coγ射线造成
了小鼠细胞 DNA 的严重损伤。治疗性给予五指毛
桃,可使各剂量组的 Tail DNA%和 Tail Moment均显
著低于模型组(P < 0. 01) ,且随着给药剂量的增加,
DNA 损伤修复增加,残余损伤逐渐减少,Tail
DNA%和 Tail Moment 逐步降低。中剂量组睾丸细
胞的 Tail Moment与正常对照组比较差异无统计学
意义(P > 0. 05) ,高剂量组肝细胞、睾丸细胞的 Tail
DNA%和 Tail Moment与正常对照组比较,差异无统
计学意义(P > 0. 05)。提示五指毛桃能促进受辐射
小鼠多组织细胞 DNA损伤的修复。
表 5 辐照后给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail DNA%的影响(珔x ± s,n =8)
组别 剂量 /(g /kg) 肺细胞 肝细胞 睾丸细胞 骨髓细胞 淋巴细胞
正常对照组 - 2. 74 ± 0. 48 3. 80 ± 0. 65 14. 74 ± 1. 37 1. 08 ± 0. 16 1. 67 ± 0. 23
模型组 - 23. 60 ± 1. 23* 25. 31 ± 1. 16* 32. 81 ± 1. 21* 21. 87 ± 1. 45* 19. 35 ± 1. 30*
五指毛桃低剂量组 5 14. 79 ± 1. 11* # 10. 79 ± 1. 05* # 24. 30 ± 1. 42* # 12. 30 ± 1. 04* # 12. 84 ± 0. 62* #
五指毛桃中剂量组 10 9. 58 ± 0. 96* # 8. 10 ± 0. 67* # 20. 05 ± 0. 65* # 7. 68 ± 0. 81* # 8. 50 ± 0. 62* #
五指毛桃高剂量组 20 5. 77 ± 1. 01**# 5. 39 ± 0. 673# 16. 57 ± 1. 04# 3. 26 ± 0. 50* # 2. 53 ± 0. 33**#
注:与正常对照组比较,* P < 0. 01,**P < 0. 05;与模型组比较,#P < 0. 01
表 6 辐照后给予五指毛桃对小鼠细胞 Tail Moment的影响(珔x ± s,n =8)
组别 剂量 /(g /kg) 肺细胞 肝细胞 睾丸细胞 骨髓细胞 淋巴细胞
正常对照组 - 0. 46 ± 0. 21 0. 69 ± 0. 19 4. 73 ± 0. 68 0. 06 ± 0. 03 0. 11 ± 0. 03
模型组 - 6. 83 ± 0. 59* 9. 58 ± 0. 74* 11. 51 ± 0. 64* 6. 78 ± 0. 74* 5. 65 ± 0. 74*
五指毛桃低剂量组 5 3. 77 ± 0. 50* # 2. 46 ± 0. 40* # 6. 75 ± 0. 59**# 3. 52 ± 0. 71* # 2. 55 ± 0. 20* #
五指毛桃中剂量组 10 2. 15 ± 0. 44* # 1. 41 ± 0. 29**# 4. 99 ± 0. 30# 1. 85 ± 0. 32* # 1. 27 ± 0. 16* #
五指毛桃高剂量组 20 1. 79 ± 0. 55**# 1. 10 ± 0. 19# 4. 64 ± 0. 43# 0. 59 ± 0. 16**# 0. 24 ± 0. 05**#
注:与正常对照组比较,* P < 0. 01,**P < 0. 05;与模型组比较,#P < 0. 01
4 讨论
在日常生活中,人们不可避免的受到各种辐射
的影响。60Coγ射线广泛应用于恶性肿瘤的治疗、辐
射育种、辐射消毒及其它工农业和医学领域,对人体
健康造成极大的威胁。电离辐射可直接作用于机体
并通过产生自由基造成生物大分子的损伤,从而导
致各种急慢性放射病、遗传物质损伤甚至致癌。本
研究结果显示,当小鼠受到 6Gy 60Coγ 射线一次性
全身照射后,其肺细胞、肝细胞、睾丸细胞、骨髓有核
细胞和外周血淋巴细胞的 Tail DNA%和 Tail mo-
ment升高,表明60 Coγ 射线可引起小鼠多个组织器
官 DNA单链和双链的断裂。其损伤机制可能为:
①60Coγ射线直接作用于小鼠组织细胞核内 DNA,
DNA直接吸收能量后,脱氧核糖破坏或磷酸二酯键
断开,造成 DNA链断裂;②60Coγ射线辐射使组织中
大量的水分子电离,生成大量的自由基,进而造成
DNA氧化性损伤,间接导致 DNA 链断裂。DNA 链
断裂是电离辐射引起的严重损伤事件,被认为是启
动和促进肿瘤发生发展的重要因素,也成为辐射导
致的人类和动物多种肿瘤发生以及细胞恶性转化的
重要机制,特别是双链断裂很难修复,可能影响到后
代。
中药作为辐射防护剂的研究已经取得了很大的
进展,五指毛桃具有益气补虚、行气解郁、健脾化湿
的功效,在临床上广泛使用,但其抗辐射作用未见报
道。本研究结果显示,无论是辐照前或辐照后或连
续用药,五指毛桃均可使小鼠肺细胞、肝细胞、睾丸
细胞、骨髓有核细胞和外周血淋巴细胞的 Tail
DNA%和 Tail moment 均降低,表明五指毛桃对
60Coγ射线造成的小鼠多组织 DNA 损伤有良好的防
护作用和修复作用。五指毛桃含有丰富的多糖、补
骨脂素、生物碱等生物活性物质,这些物质均具有一
定的抗辐射作用。孙元琳等研究了当归多糖的抗辐
射作用,结果表明,当归多糖 ASP 组分可增强细胞
DNA损伤修复能力,促进辐照后细胞的抗氧化能
力,保护细胞膜结构的完整,减轻 DNA 损伤,对
3Gy60Coγ 射线辐射损伤小鼠具有良好的防护作
用〔3〕。补骨脂素是五指毛桃的主要有效成分之一,
常作为评价五指毛桃质量的重要依据,研究表明,补
骨脂素可吸收紫外线,具有抗辐射作用。有些生物
碱类物质有显著的抗辐射作用,其机制可能是通过
提高抗氧化水平来保护机体,如苦豆子总碱可通过
·7161·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 33 卷第 10 期 2010 年 10 月
提高血清中超氧化物歧化酶活力,降低肝脏中 MDA
含量,提高受辐射小鼠 30 d存活率〔8〕。五指毛桃所
含的其他活性物质如香豆精、挥发油、酚类等也具有
一定的抗辐射作用。五指毛桃抗辐射损伤机制可能
为:①其活性成分对损伤后的 DNA具有较强的修复
能力。某些活性因子可作为 DNA 修复系统酶类的
活性基团,或者可提高这些酶类的活性。②其活性
成分具有清除自由基,提高机体抗氧化能力的作用。
Templeton证实,低传能线密度射线导致的 DNA 损
伤 90%是由羟自由基引起的〔9〕。多糖、补骨脂素、
生物碱等可使机体超氧化物歧化酶等机体抗氧化系
统酶类的活力升高,从而提高清除自由基的能力,阻
止过多的自由基氧化损伤 DNA等生物大分子。
五指毛桃对60Coγ射线损伤小鼠多种组织 DNA
具有良好的防护和修复作用,本课题组今后将对其
抗辐射以及抗氧化机制展开进一步的研究。
参 考 文 献
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青钱柳多糖体外抗脂质过氧化作用研究
段小群,张小芳,卢 曦,梁成钦
(桂林医学院,广西 桂林 541004)
摘要 目的:研究青钱柳多糖(CP)抗脂质过氧化的作用。方法:采用组织匀浆 MDA 比色法,观察不同浓度的
CP对小鼠肝脏自发性脂质过氧化及对自由基诱导剂 CCl4、H2O2、Fe
2 + -VitC 激发的脂质过氧化的作用。结果:CP
可减轻小鼠肝组织自发性及 CCl4、H2O2、Fe
2 + -VC 所致的肝脏脂质过氧化程度。结论:提示 CP 具有较强的体外抗
脂质过氧化作用,并呈一定的量效关系。
关键词 青钱柳多糖;脂质过氧化;丙二醛;还原型谷胱甘肽;抗氧化
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2010)10-1618-04
收稿日期:2010-04-27
基金项目:广西自然科学基金项目(桂科自 0728234)
作者简介:段小群(1972-) ,男,副教授,博士,主要从事抗肝炎、糖尿病、抗癌药物研究;Tel:13977389288,E-mail:robortduan@ 163. com。
青钱柳[Cyclocarya paliurus(Batal)Ijinskaja]为
胡桃科青钱柳属植物,是我国特有属树种和宝贵的
中药资源。我国从 1970 年开始对青钱柳进行研究,
结果表明其具有明显的降血糖、降血压、减肥、抗肿
瘤、抗衰老、抗过敏、清热解暑、提高人体免疫力、促
进新陈代谢等多种功效,尤其对治疗糖尿病有显著
疗效〔1〕。本实验对青钱柳多糖(polysaccharide from
Cyclocarya paliurus,CP)的体外抗氧化性进行研究,
为其进一步开发提供理论依据。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 昆明种小鼠,体质量(20 ± 2)g,雌
雄兼用,由桂林医学院 SPF级实验动物中心提供(生
产许可证:SCXK桂 2007-0001) ,自由采食和饮水。
1. 2 药物与试剂 青钱柳多糖(CP) ,由本实验室
自行提取和鉴定;MDA试剂盒(南京建成试剂公司,
批号:20081217) ;GSH试剂盒及考马斯亮蓝试剂盒
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