全 文 :了甲醇 ,所以使用甲醇溶解脂质体 。
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[收稿日期] 2006-12-29
[ 作者简介] 刘亚妮 ,女 ,硕士 ,药师 ,电话:027-85726073 , E-m ail:yani liu @hotmail.com
齐墩果酸缓释片的研制及体外释放度考察
刘亚妮1 ,易以木2 ,陈华庭1 ,苏玉永1 (1.华中科技大学同济医学院附属协和医院药剂科 , 湖北 武汉 430022;2.华中科
技大学同济医学院药学院药剂教研室 ,湖北 武汉 430030)
[ 摘要] 目的:制备齐墩果酸缓释片并考察其体外释放度 。方法:以羟丙基甲基纤维素(HPMC)为缓释骨架材料 ,加淀粉和
乳糖作填充剂 ,通过正交设计优化处方 , 并考察制剂大小 , 硬度 ,释放介质 , pH 及转速等因素对缓释片体外释放度的影响。结
果:正交设计获最优处方为 A2B3C1 ,即亲水凝胶骨架材料为 HPMC(K4M), 用量为 30%, 淀粉与乳糖的比例为 1∶1。药物体
外释放行为符合 Higuich 方程。结论:该方法制得的缓释片具有良好的缓释效果 , 且制备工艺简单易行。
[ 关键词] 齐墩果酸;缓释;制备工艺;释放度
[中图分类号] R944 [ 文献标识码] A [ 文章编号] 1001-5213(2008)05-0345-03
Preparation of oleanolic acid sustained-release tablets and its in vitro drug release
LIU Ya-ni1 , YI Yi-mu2 , CHEN Hua-ting1 , SU Yu-yong1(1.Union Hospital , Tong ji Medical College , Huazhong
Univer sity of Science and Technology , H ubei Wuhan 430022 , China;2.Pha rmaceutical Schoo l , H uazhong Univer sity of Sci-
ence and Techno log y , H ubei Wuhan , 430030 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To prepare o leanolic acid sustained-release table ts and to evaluate its releasing features in v itr o.
METHODS The fo rmula tion of the OA sustained-release tablets w as selected by or thogonal design using H PMC as the ma-
trix , starch and lactose as additiv es.Based on the optimized prescription , facto rs(such as adhesives , moistening agents , disso-
lution media , compaction pr essures , pH , ro tational speeds and so on)affecting the in vitro dissolution w ere studied.RESULTS
The optimized pre scription w as A 2B3C1 :HPM C(K4M)as hydrophilic gel mat rices material;30% do sage;1∶1 starch and
lacto se.The release of OA sustained-release tablets in vitro fitted the Higuich equa tion.CONCLUSION The tablets have de-
sirable sustain-release capability.The fo rmulation and technique are simple and can be applicable in produc tion.
KEY WORDS:oleano lic acid;sustained-re lease;preparation technique;dissolution ra te
齐墩果酸(oleano lic acid ,OA),又名庆四素 ,为
五环三萜类化合物 ,广泛的存在于食物 ,医学草本植
物和其他植物中 。具有护肝 ,解肝毒;降糖 、降脂;抑
制各种类型的变态反应;还具有抗炎 、抗病毒;抗突
变 、抗癌等作用[ 1] 。临床所用的齐墩果酸制剂为治
疗黄疸型肝炎 、慢性迁移性肝炎及慢性活动性肝炎
的齐墩果酸片剂和胶囊剂 ,规格有 10 ,20 mg ;治疗
黄疸型肝炎 tid ,每次 30 mg;慢性肝炎 qid ,每次 50
mg 。为减少给药次数 ,方便患者服药;减少血药浓
度的峰谷现象 ,降低不良反应 ,提高疗效等;故将
OA 制成规格为 50 mg 的缓释片。国内有关于 OA
固体分散体的研究 ,但缓释制剂尚未见报道。本试
验拟用正交设计法优选 OA 缓释片 ,以 HPMC 为缓
释材料 ,加淀粉和乳糖作填充剂 ,测定其释放 ,考察
辅料对缓释性能的影响 ,确定最佳的处方工艺 ,制备
OA缓释片 ,并对缓释片体外释药特性进行了探讨 。
1 材料
Dionex P680A高效液相色谱仪(美国);齐墩果
酸原料药(四川省玉鑫药业有限公司);齐墩果酸标
准品(中国药品生物制品检定所 ,批号 709-9803);
羟丙基甲基纤维素(HPMC-K100 , HPMC-K4M ,
HPMC-K15M ;上海卡乐康包衣技术有限公司);十
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二烷基硫酸钠(SDS ,化学纯 ,中国医药集团上海化
学试剂公司)。
2 方法与结果
2.1 缓释片释放度的测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱:Eclipse XDB-C18柱
(Agilent , 4.6 mm ×250 mm , 5μm);流动相:甲醇-
缓冲液(pH 6的三乙胺/冰醋酸缓冲体系 ,其中三乙
胺为0.3%)=9∶1 ;检测波长:210 nm;柱温:30 ℃;
流速:1.0 mL·min-1 。理论塔板数按齐墩果酸峰计
算应不低于3 000。
2.1.2 体外释放度方法 按照中国药典 2005年版
体外释放度试验法第一法转篮法[ 2] ,释放介质为
0.5%SDS溶液 900 mL(磷酸盐调节 pH 为7.00 ±
0.05),温度为(37±1)℃ ,转速为 100 r·min-1 。分
别于 2 , 6 ,12 h取样 10 mL(同时补充等体积同温介
质),滤过 ,取续滤液 20 μL 注入液相色谱仪 ,记录
主峰面积 ,另取齐墩果酸对照品适量 ,精密称定 ,用
甲醇溶解并稀释成每 1 mL 中约 55 μg 的溶液 ,同法
测定 。按外标法 ,分别计算每片在不同时间的累积
释放度。
2.2 正交试验筛选处方 根据预试试验结果 ,确定
影响 OA 缓释片缓释效果的主要因素为 HPMC 黏
度(A)、HPMC用量(B)、淀粉与乳糖比例(C)。对
A 、B 、C 3个因素各取 3个不同水平 ,如表 1所示 。
以 2 h累积释放度(Q2), 6 h 累积释放度(Q6), 12 h
累积释放度(Q12)作为考察指标 。以正交表 L9(34)
设定 9个处方进行实验 ,测定各处方的累积释放度 ,
结果见表 2。
表 1 齐墩果酸缓释片三因素三水平表
Tab 1 Levels o f e xperimental factor s
水平
因素
A
HPMC黏度
B
H PMC 用量/%
C
淀粉与乳糖比例
1 K100 10 1∶1
2 K4M 20 1∶2
3 K15M 30 1∶3
根据考察指标的数据测定 , 由 R 值的大小可
知 ,影响齐墩果酸缓释效果的因素主次关系:B>A
>C;由 K 值的大小可知 ,最佳处方为 A 2 B3C1 , 即亲
水凝胶骨架材料为 HPMC(K4M),用量为 30%,淀
粉与乳糖的比例为 1∶1。
2.3 缓释片的制备 按正交设计确定的最佳处方 ,
分别称取适量齐墩果酸 50 g 、HPMC 50 g 、乳糖和
淀粉各 25 g ,混合均匀 ,过 5 号筛 ,加入适量 70%乙
醇制软材 ,过 1号筛 ,干燥 ,整粒过筛 ,加入适量硬脂
酸镁 ,混匀 ,压片即得 。
2.4 不同因素对体外释药速率的影响
表 2 正交实验方案与结果
Tab 2 Experimental a rrangements w ith the or thogona l de-
sign and the re sults
试验号 A B C Q2/ % Q6/ % Q12/ % K
1 1 1 1 45.29 96.78 99.04 45.86
2 1 2 2 36.75 92.82 100.43 54.45
3 1 3 3 27.93 78.63 101.83 72.12
4 2 1 2 35.42 93.65 101.32 55.03
5 2 2 3 26.56 73.94 99.41 74.59
6 2 3 1 18.63 51.39 100.05 98.10
7 3 1 3 30.15 86.13 99.04 61.51
8 3 2 1 24.71 68.64 100.78 81.55
9 3 3 2 16.07 44.61 85.46 78.79
K 1 57.48 54.13 75.17
K 2 75.90 70.20 62.76
K 3 73.95 83.00 69.41
R 16.47 28.87 5.76
注:K=Q12 -[(Q2 -20)2+(Q6-50)2] 1/2
2.4.1 片剂的大小 按正交设计最终确定的最佳
处方计算 ,缓释片的平均片重约为 150 mg ,可选用
7 ,8 mm 直径的冲头 。按最佳处方制备片剂直径分
别为 7 mm 和 8 mm 的缓释片 ,考察片剂大小对药
物释放的影响 ,结果见表 3。由试验结果可以看出 ,
直径为 8 mm 的缓释片比 7 mm 的释放要快 ,但仍
符合药典的规定 。而从制剂的整体外观形状来看 ,
直径为 7 mm 的片剂较好 ,故在压片过程中选用直
径为 7 mm 冲头 。
2.4.2 硬度 调节压片机的压力 ,分别压制硬度为
4 ,8 ,12 kg·mm-2缓释片 ,考察片剂硬度对齐墩果酸
缓释片体外释药行为的影响 ,结果见表 3。由试验
得出 ,以不同的压力压制不同硬度的缓释片其体外
释放几乎没有差别。但是硬度为 4 kg·mm-2的缓
释片表面很疏松 ,不平整;硬度为 12 kg·mm-2时 ,
压力过大使压片困难 ,并对仪器有一定的损耗 ,所以
选择中间压力 8 kg·mm-2作为最终压片压力。
2.4.3 释放介质 分别以新制注射用水 、0 .5%
SDS 溶液(磷酸盐调节 pH 为7.00 ±0.05)和乙醇-
磷酸盐缓冲液(pH 为 7.00 ±0 .05)为释放介质 ,考
察不同释放介质对体外释放度的影响 ,结果见表 3 。
2.4.4 pH 值 选择 pH 值分别为1.0 ,3 .0 , 7.0的
0.5 %SDS 900 mL 为释放介质 ,考察介质 pH 对其
体外释放度的影响 ,结果见表 3。
2.4.5 转速 选择转篮转速分别为 50 , 75 , 100 r·
min
-1 ,考察转速对其体外释放度的影响 ,结果见表
3。转速对释放片的释放有一定的影响 。考虑人体
正常生理条件下的胃肠道环境 ,本试验选取了 100 r
·min-1为最合适条件。
2.5 释药曲线拟合 将齐墩果酸缓释片累积释放
百分量-时间数据分别按一级动力学方程 , Higuich
方程及零级动力学方程进行拟合 ,结果见表 4。
·346· 中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 5期 Chin H osp Ph arm J , 2008 Mar , Vol 28 , No.05
表 3 影响体外释放度的因素试验结果(累积释放度的平均
值%, n=6)
Tab 3 Results of influencing factor s test(accumulative re-
lease percentage , n=6)
因素 时间/ h
2 4 6 8 12
制剂大小
/mm
硬度
/ kg·mm-2
释放介质
介质 pH
转篮转速
/ r·min-1
7 18.76 35.83 51.99 67.89 98.25
8 20.58 41.71 61.01 77.12 97.78
4 18.57 35.92 52.53 67.86 97.78
8 17.89 35.54 51.86 66.78 98.35
12 17.35 34.26 51.26 66.01 97.66
注射用水 2.81 4.32 5.14 6.23 6.75
0.5%SDS 17.85 35.21 52.96 67.36 96.77
乙醇-磷酸盐缓冲液 15.88 29.74 42.01 55.16 63.03
1.0 12.88 26.95 38.73 49.77 71.38
3.0 15.83 32.69 45.59 64.73 84.93
7.0 18.16 34.97 51.33 67.08 97.66
50 11.04 23.01 38.37 45.72 68.67
75 15.79 31.93 44.95 64.50 82.78
100 18.16 34.97 51.33 67.08 97.66
表 4 释药动力学方程
Tab 4 Release kinetics equations
释药动力学 方程 r
零级动力学方程 Q=7.984 1t+3.674 2 0.989 7
一级动力学方程 Ln(100-Q)=-0.221 9t+4.940 1 0.977 1
Higuich方程 Q=36.207 t 1/2-32.376 0.996 8
3 讨论
3.1 HPLC法测定累积释放度 本试验考察了齐
墩果酸在释放介质中的线性 、稳定性 、精密度 、回收
率等均符合要求 。说明此法测定齐墩果酸累积释放
度准确 、精密 、稳定。
3.2 处方筛选 综合评分 K 值参考了法莫替丁缓
释片综合评分的设计思想[ 3] ,根据中国药典 2005年
版的要求 ,缓释片应于 3 h释放接近 30%,6 h 释放
为 50%左右为宜 ,而我们选用的是 Q2 ,理论上应该
接近 20 %,故以此作为 Q2 , Q6的期望值。[(Q2 -
20)2 +(Q6 -50)2 ] 1/ 2反映了 2 , 6 h 释放度的偏差 ,
此偏差愈小愈佳 。 12 h 时应释放 75 %以上 , Q12应
愈大愈好 ,故 K =Q12 -[ (Q2 -20)2 +(Q6 -50)2 ] 1/ 2
可与释放度一起描述缓释片的体外释放情况 ,且 K
值最大者为最优 。故最佳处方为以亲水凝胶骨架材
料为 HPMC(K4M),用量为 30%,淀粉与乳糖的比
例为 1∶1。
3.3 体外释放度影响因素考察
3.3.1 释放介质 释放介质对缓释片体外释放有
显著影响 ,齐墩果酸为疏水性药物 ,由试验结果可以
看出其缓释片在水中基本不释放 ,而在 30%的乙醇
溶液中也释放不完全 ,但是在 0.5%SDS 溶液中释
放效果最好。又考察了齐墩果酸在0.5 %SDS 的饱
和浓度为 169 mg·L-1 ,基本满足制剂在释放介质中
为理想的漏糟状态 ,所以选用 0.5%SDS 溶液为释
放介质。
3.3.2 释放介质 pH 值 试验结果说明齐墩果酸
缓释片的释放度与释放介质的 pH 值有一定的关系 。
随着 pH 的增大其释放度有增大的趋势。因为难溶
性药物 HPMC骨架片的释放主要以骨架溶蚀为主和
药物扩散为辅的协同控制 ,而 HPMC在生理 pH 范
围内性质稳定 ,即骨架溶蚀不受 pH 的影响 ,故在不
同的 pH 溶出介质中 ,药物释放表现出的一定差异主
要是由扩散所引起的。难溶性药物在不同的 pH 溶
出介质中溶解性的不同 ,造成药物从骨架片扩散到介
质中的驱动力也不同 ,从而表现出释药的快慢[ 4] 。考
虑到齐墩果酸在体内是生理环境及减少试验的繁琐 ,
最终确定释放介质的pH 为7.00±0.05。
3.4 释药曲线拟合
3.4.1 Higuichi方程 Higuchi等人研究骨架型
缓释片的释药规律 ,认为释药规律与溶出时间的平
方根有线性关系 。Q=36.207t1/2 -32.376 在释放
介质中 , 齐墩果酸缓释片的体外释药行为符合
Higuchi方程 ,在 12 h内 , r=0.996 8 , t0.3 =2.97 h ,
t d =5.18 h , t0.9 =11 .42 h。由此可见 ,在此释放环
境中 ,齐墩果酸缓释片具有良好的释放效果 ,可持续
长时间缓慢释药。
3.4.2 零级动力学方程 本缓释片在释放介质中 ,
1 ~ 9 h 内 ,平均累积释放度与溶出时间呈线性关
系 ,符合零级动力学方程 , Q=8.861 4t +0 .492 , r =
0.995 4。
3.5 HPMC 其为亲水凝胶骨架材料 , 用其制成
齐墩果酸缓释片遇胃肠液后 ,吸水略有溶胀 ,形成凝
胶屏障而控制药物溶出 。实际上亲水凝胶骨架片遇
消化液首先表面润湿形成凝胶层 ,表面药物向消化
液中扩散;凝胶层继续水化 ,骨架溶胀 ,凝胶层增厚
延缓药物释放;片剂骨架同时溶蚀 ,药物全部释放。
亲水性凝胶骨架片由于药物的水溶性不同 ,释放机
制也不同 ,对于水溶性药物主要以药物扩散为主;对
于难溶性药物则以骨架溶蚀为主 。表现在先快后慢
的现象 ,这是由于凝胶层逐渐增厚而使释药速率逐
渐减慢所致。因齐墩果酸几乎不溶于水 ,本品为溶
蚀性骨架片。
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[收稿日期] 2006-12-29
·347·中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 5期 Chin H osp Pharm J , 2008 Mar , Vol 28 , No.05