全 文 ：山刺玫根中齐墩果酸含量测定方法的研究
谢晓燕 , 贡济宇＊ , 蔡广知 , 王莎莎 , 孙全乐 , 沈晓君
(长春中医药大学 ,吉林 长春 130117)
收稿日期:2008-08-04
基金项目:吉林省中医药青年基金项目(98Y120)
作者简介:谢晓燕(1974-),女 ,硕士 ,工程师 ,从事医院制剂检验工作。 E-mail:ccxyan@126.com
＊通讯作者:贡济宇(1960-),女 ,教授 ,硕士 ,研究方向为中药活性成分及构效关系。 Tel:(0431)86172207E-mail:gjy0431@126.com
关键词:山刺玫根;齐墩果酸;高效液相色谱
中图分类号:R284.1 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2009)09-1464-02
山刺玫根为蔷薇科植物山刺玫(RosadavuricaPal.)的
干燥根 , 又称野玫瑰根。分布我国东北 、华北 [ 1] 。 具有止血
及广谱抗菌作用。用于治疗经血不止 ,功能性子宫出血 、慢
性气管炎 、肠炎 、菌痢 、膀胱炎和肾炎等。国内外对其研究报
道较少 [ 2, 3] , 本实验采用高效液相色谱法对山刺玫根中齐墩
果酸做了含量测定 , 结果显示 , 该法简单快速 、结果准确 , 重
现性好 , 为控制药材质量提供依据。
1 仪器和试剂
1.1 仪器 高效液相色谱仪(美国 Waters-600);紫外检测
器(美国 Waters-2487);色谱柱 Nova-PakC18;电子天平(瑞士
梅特勒-托立多);TU-1810紫外分光光度计(北京普析通
用);旋转蒸发仪(中国北京)。
1.2 试剂 齐墩果酸(中国药品生物制品检定所 110709-
200304);山刺玫根药材采于省内各地区 ,经长春中医药大学
张景龙教授鉴定为蔷薇科植物山刺玫(RosadavuricaPal.)
的根 , 样品及标本保存在长春中医药大学药学院标本室;乙
腈 、甲醇为色谱纯;水为重蒸水;其它试剂皆为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱 Nova-PakC18;流动相:乙腈-水(70
∶30);检测波长:210 nm;流速:0.8 mL/min;柱温:25 ℃。采
用外标法定量分析。
2.2 标准曲线的制备 精密称量齐墩果酸对照品 25mg, 定
容到 25 mL量瓶中。分别吸取 0.5、1.0、2.0、4.0、6.0mL, 各
加甲醇定容到 10 mL量瓶中 , 即得对照品溶液。精密吸取
10 μL依次进样 , 平行测定 3次 , 以齐墩果酸峰面积积分值
为纵 坐标 , 以 浓度为 横坐标 计算 得回 归方程:Y=
3 904 287.221 2+19 105 522.884 6X, r=0.999 7。 齐墩果
酸进样量在 0.5 ～ 6.0 μg之间与峰面积积分值呈良好的线
性关系。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取药材粗粉 4g,加 95%乙
醇 40mL回流提取两次 ,每次 2 h,滤过 , 用少量乙醇分次洗
涤容器和药渣 , 洗液与滤液合并 , 回收乙醇。残渣用 20 mL
水溶解 , 再用氯仿萃取 3次 ,每次 20 mL, 合并氯仿液 , 蒸干。
用甲醇溶解并转移至 10mL量瓶内 , 加甲醇至刻度 ,摇匀 , 作
为供试品溶液。
2.4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 10μL, 重复进样 5
次 ,依法测定 , 记录峰面积积分值。精密度考察结果 RSD=
1.2%。
2.5 重复性实验 精密称取同一批样品 5份 , 按 2.3项制
备样品溶液 ,各样品溶液吸取 10 μL进样分析 , RSD=0.8%
(n=5), 方法重复性好。
2.6 回收率试验 准确称取齐墩果酸含量已知的样品 5
份 ,分别加入适量齐墩果酸对照品制备样品溶液 , 吸取 10
μL注入液相色谱仪 , 测定齐墩果酸的含量。 其 RSD=
0.8%, 平均回收率为 99.5%。
3 样品测定
精密称取不同产地的药材适量 , 按 2.3项方法制备供试
品溶液 ,并依法测定 , 采用外标法测定不同产地样品中齐墩
果酸的含量。结果见表 1。
表 1 不同产地的山刺玫根药材中齐墩果酸的含量
产地 齐墩果酸含量 /%
1 2 3
x RSD/%
左家 0.064 0.062 0.063 0.063 1.59
四平 0.045 0.044 0.045 0.045 1.29
敦化 0.053 0.052 0.051 0.052 1.92
珲春 0.037 0.037 0.036 0.037 1.57
吉林 0.042 0.042 0.043 0.042 1.36
长白山 0.060 0.061 0.062 0.061 1.64
蛟河 0.028 0.028 0.029 0.028 2.04
4 讨论
经紫外扫描可知齐墩果酸在 203nm波长处有最大吸收
峰。但流动相在短波长处有末端吸收 , 为减少干扰 , 提高信
噪比 ,提取不同波长的色谱图进行比较 ,最后选择 210 nm为
检测波长 ,该波长处信噪比高 ,峰形好。
山刺玫在我省资源丰富 、分布广泛 , 且具有多方面的生
理活性。本实验采用高效液相色谱法对山刺玫根中齐墩果酸
的含量进行测定 , 为建立药材的质量评价标准提供了依据。
目前国内外对其根类研究较少 ,有必要对山刺玫根化学 、药理
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第 31卷 第 9期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
September2009
Vol.31 No.9
AB
图 1 齐墩果酸 HPLC图
A.齐墩果酸对照品 B.样品
及临床应用进行深入研究 , 使其丰富的资源得到充分利用。
参考文献:
[ 1] 严仲铠 ,李万林.中国长白山药用植物彩色图志 [ M] .北京:
人民卫生出版社 , 1997:230-231.
[ 2] 黄文哲 ,李玉环 ,李宗利 , 等.野玫瑰根化学成分的研究 [ J].
佳木斯医学院学报 , 1998, 21(1):17-18.
[ 3] 黄文哲 ,刘伟强 ,李玉环.刺玫根中齐墩果酸的分离鉴定及含
量测定 [ J] .中国野生植物资源 , 1999, 18(8):30-31.
HPLC测定地锦草中没食子酸和芦丁的含量
林 辉
(福建省龙岩市药品检验所 ,福建龙岩 364000)
收稿日期:2008-07-12
作者简介:林 辉(1976-),男 ,主管药师 ,主要从事天然植物药的分离提取及新药物的开发研究 ,中药材及饮片的真优劣的鉴别 ,中成药
的分析鉴定。 Tel:(0597)2285092E-mail:lin-hui@126.com。
关键词:地锦草;没食子酸;芦丁;HPLC;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2009)09-1465-03
地锦草来源于大戟科植物地锦 Euphorbiahumifusa
Willd.或斑地锦 EuphorbiamaculataL.的干燥全草 , 别名血
见愁 、红茎草 、奶汁草 、铺地锦 ,主要分布在山东 、江苏 、浙江 、
江西 、福建 、广东等地。性味辛平 , 具有清热解毒 、活血止血 、
利湿通乳的功效。临床上主要治疗细菌性痢疾 、肠炎 、咳血 、
吐血 、便血 、崩漏 、外伤出血 、湿热黄疸 、乳汁不通 、痈肿疔疮 、
跌打肿痛 [ 7-8] 。化学成分研究表明地锦草中所含的有效成分
主要以有机酸类的没食子酸 , 黄酮类的槲皮素 、芦丁为主。
没食子酸具有收敛止血的作用 [ 6] 。中国药典 2005年版一部
建立了高效液相色谱法测定地锦草中槲皮素的含量。参考
了有关的文献 , 本试验建立高效液相色谱法测定地锦草中没
食子酸和芦丁含量的方法 , 目的是为了更好地控制地锦草药
材的质量 , 保证临床用药安全有效。
1 仪器与试药
日本岛津 LC-2010A高效液相色谱仪 , KQ-500B型超声
波清洗器(昆山市超声仪器有限公司), 甲醇(色谱纯), 冰醋
酸(分析纯), 水为超纯水 , 没食子酸和芦丁对照品(中国药
品生物制品检定所 , 批号分别为:110831-200302, 11080-
200412);地锦草(福建龙岩明通医药公司提供)。
2 测定方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:岛津 ShimadzuC18(5 μm, 4.6 mm×150 mm);
流动相:甲醇-1%冰醋酸溶液(1∶99);流速:1.0 mL/min;柱
温:40 ℃;检测波长:275 nm;理论板数按没食子酸峰计算应
不低于 1 500,色谱图见图 1。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的没食子酸对
照品 13.31 mg, 置 100 mL的量瓶中 , 加 50%甲醇溶解并稀
释至刻度 ,摇匀 , 即得。 (每 1 mL含没食子酸 133.1 μg)。
2.3 供试品溶液的制备
称取本品粉末(过三号筛)约1.5 g, 精密称定 , 置具塞的
锥形瓶中 ,精密加入 50%甲醇 50 mL, 密塞 , 称重 , 超声处理
30min,放冷 、称重 ,加 50%甲醇补足减失的重量 ,摇匀 , 用 0.
45 μm的滤膜过滤 , 取续滤液即得。
2.4 线性关系考察
精密吸取上述对照品溶液 2、 4、 8、 12、16、 20 μL, 在选择
的色谱条件下分别进样 , 以没食子酸峰面积(Y)对进样量
(X)进行回归分析 , 得到回归方程和相关系数为:Y=
408 090.9X+4 237.31, r=0.999 9(n=6)。结果表明 ,没食子
酸在 0.266 2 ～ 2.662 μg浓度范围内与峰面积线性关系良好。
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中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
September2009
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