全 文 ：腈 － 0． 05%三乙胺等不同比例的流动相进行梯度洗脱，结果发现
乙腈 － 0． 05%三乙胺系统在梯度条件: 0 min，乙腈( A) － 0． 05%
三乙胺( B) ( 5∶ 95) ; 2 min ，A － B( 5∶ 95) ; 10 min，A － B( 30∶
70) ; 30 min，A － B( 70∶ 30) ; 40 min，A － B( 90∶ 10) 时，各组分得
到较好分离，同时 2 倍保留时间的色谱图显示，40 min 后无其他
色谱峰出现，因此选择该梯度条件进行测定。
Ｒ －共有模式 Ｒ1 ～ Ｒ10 － 1 ～ 10 批萝芙木样品
图 2 10 批萝芙木药材 HPLC 图谱
表 4 萝芙木药材相似度评价结果
样品编号 相似度 样品编号 相似度
1 0． 961 6 0． 975
2 0． 958 7 0． 958
3 0． 931 8 0． 965
4 0． 979 9 0． 931
5 0． 916 10 0． 928
3． 3 提取方法的优化 对多种提取方法进行了考察和优化，分别
对提取溶剂( 甲醇、75%乙醇、氯仿) 、提取方式( 超声、加热回
流) 及提取时间进行了考察，结果表明，用 75%乙醇溶液 70℃加
热回流两次，每次 1 h，进行提取，方法简便，得到的色谱峰信息丰
富。
3． 4 参照峰的选择 15 号峰经指认为萝芙木中主要成分阿马里
新，且其含量稳定，与邻近色谱峰的分离度较好，故选择其作内参
比峰。
萝芙木中含有多种化学成分，简单的测定一个或几个有效成
分的量为主的传统的质量分析方法不能全面地反映药材的质量。
本研究采用高效液相色谱法测定了 10 批次不同产地萝芙木药材
的指纹图谱，并建立了其共有模式，可以为其质量评价和控制提
供一个有效的参考方法。经相似度评价其相似度均在 0． 90 以
上，说明不同产地萝芙木药材的化学组成一致性较好。
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收稿日期: 2013-01-09; 修订日期: 2013-06-27
基金项目:广西壮族自治区自然科学基金( No．桂科自 0899012) ;
广西壮族自治区高等学校重点资助科研项目( No． 201202ZD066) ;
广西卫生计划项目( No． Z2010268)
作者简介:李 江( 1970-) ，男( 汉族) ，四川金堂人，现任桂林医学院附属医院药学部副主任药师，硕士学位，主要从事天然药物与中药新药的研究开
发工作．
三叶青藤抗炎活性部位研究
李 江1，蔡小玲1，罗昱澜1，何 洁1，张智红2
( 1．桂林医学院附属医院药学部，广西 桂林 541001; 2．桂林医学院药学系，广西 桂林 541001)
摘要:目的 筛选三叶青藤的抗炎活性部位。方法 分步溶剂萃取法制备不同极性部位，采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通
透性模型、大鼠棉球肉芽肿模型筛选抗炎活性部位。结果 三叶青藤正丁醇提取部位和水溶液部位能显著抑制小鼠腹腔
毛细血管通透性增高以及大鼠棉球肉芽肿的形成。结论 正丁醇提取部位和水溶液部位为三叶青藤的抗炎有效部位。
关键词:三叶青藤; 抗炎; 活性部位
DOI标识: doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 11． 021
中图分类号: 285． 5 文献标识码: A 文章编号: 1008-0805( 2013) 11-2623-02
Study on the Anti － inflammatory active fraction of Illigera rhodantha Hance．
LI Jiang1，CAI Xiao － ling1，LUO Yu － lan1，HE Jie1，ZHANG Zhi － hong2
( 1． Department of Pharmacy，The Affiliated Hospital of Guilin Medical College ，Guilin，Guangxi 541001，Chi-
na; 2． pharmacy Department of Guilin Medical College，Guilin Guangxi 541001，China)
Abstract: Objective To screen the active fraction with anti － inflammatory effect of Illigera rhodantha Hance． Methods Differ-
ent polar fractions were prepared by extraction with organic solvents． Their anti － inflammatory effects were evaluated by acetic
acid － induced celiac capillary permeability in mice and cotton pellets － induced granuloma in rats． Ｒesults N － butanol extracted
fraction and water solution fraction of Illigera rhodantha Hance． could significantly inhibit the increasing of celiac capillary perme-
ability and the cotton pellets granuloma． Conclusion The n － butanol extracted fraction and water solution fraction were effective
anti － inflammatory fractions of Illigera rhodantha Hance． ．
Key words: Illigera rhodantha Hance; Anti － inflammation; Active fraction
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 11 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 11 期
三叶青藤，别名红花青藤、三姐妹青藤、毛青藤等，为青藤科
植物红花青藤 Illigera rhodantha Hance．的干燥地上部分，主要分
布在广西、广东、云南、四川、湖南、福建及台湾等地，在广西有较
长的使用历史。性甘、辛、温，具有祛风散瘀、消肿止痛功效，用于
风湿性关节炎、跌打肿痛、小儿麻痹后遗症等［1］。本课题组前期
研究已证实，三叶青藤醇提物有明显的抗炎作用，对二甲苯所致
小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀有显著的抑制作用且
毒性很低［2，3］，但其抗炎有效物质基础尚不明确。本实验首次对
三叶青藤抗炎的有效部位进行了研究，为进一步明确其抗炎有效
物质基础提供实验依据。
1 仪器和材料
1． 1 仪器 ＲE － 52AA旋转蒸发器，SH2 －亚型循环水真空泵( 上
海亚荣生化仪器厂) ; 小型真空干燥箱( 郑州长城科工贸有限公
司) ;离心机( 美国 ABBOOT) ; Libra S32 紫外分光光度计 ( 英国
Biochrom) 。
1． 2 试剂 冰醋酸 ( 广东光华科技股份有限公司，批号
20120503) ，临用时用生理盐水配成 0． 6% 的溶液; 伊文思蓝( 国
药集团化学试剂有限公司，批号 W20111101 ) ，临用时用生理盐
水配成 0． 5%的溶液;醋酸泼尼松片( 浙江仙琚制药股份有限公
司，批号 120293) ，石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇均为分析
纯。
1． 3 动物 昆明种小鼠，SPF级，♀♂兼有，体质量( 20 ± 2) g; SD
大鼠，SPF级，♂性，体质量( 200 ± 20) g。均由桂林医学院实验动
物中心提供，实验动物生产许可证号 SCXK桂 2007 － 0001。
1． 4 药材 三叶青藤，购自广西玉林市药材市场，经桂林医学院
药学系天然药物化学教研室唐爱莲副教授鉴定为青藤科植物红
花青藤 Illigera rhodantha Hance．的干燥茎。
2 方法与结果
2． 1 供试样品的制备 药材 1 kg，粉碎成粗粉，以 70%乙醇热回
流提取 3 次，每次 1． 5 h，合并提取液，滤过，滤液减压回收溶剂至
无醇味后用适量蒸馏水稀释至 100 ml。依次用等体积的醋酸乙
酯、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取 3 次，减压回收溶剂，得石油
醚浸膏( 1． 994 9 g) ，二氯甲烷浸膏 ( 1． 820 6 g) ，乙酸乙酯浸膏
( 0． 606 6 g) ，正丁醇浸膏( 4． 665 7 g) 和水层浸膏( 18． 597 1 g) ，
临用时用蒸馏水稀释成所需浓度的药液。
2． 2 抗炎活性部位筛选
2． 2． 1 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响［4］ 小鼠
80只，按性别、体质量随机分为正常对照组，模型对照组( 均给予
等容积蒸馏水) ，阳性对照组( 给予醋酸泼尼松 25 mg /kg) ，三叶
青藤石油醚浸膏组、二氯甲烷浸膏组、乙酸乙酯浸膏组、正丁醇浸
膏组和水层浸膏组( 各组均给予相当于生药量 4． 5 g /kg) ，每组
10 只，灌胃给药，连续给药 5 d。末次给药 1 h 后，各鼠均尾静脉
注射 0． 5%伊文思蓝生理盐水 0． 2 ml /只，立即腹腔注射 0． 6%醋
酸 0． 2 ml /只，20 min后脱臼处死，腹腔注射 5 ml生理盐水，轻揉
小鼠腹部，剪开腹腔，收集洗涤液，3 000 r /min 离心 10 min，取上
清液于分光光度计 590 nm 处比色，以吸光度( A) 表示小鼠腹腔
毛细血管通透性，记录各鼠测得的吸光度值。给药组抑制率
( % ) = ( 模型组吸光度平均值 －给药组吸光度平均值) /模型组
吸光度平均值 × 100%。数据的统计分析运用 EXCEL 软件的数
据分析功能，数据结果以 珋x ± s表示，不同组间均数比较采用 t 检
验。
实验结果表明，正丁醇浸膏组和水层浸膏组均能显著抑制醋
酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高。结果见表 1。
2． 2． 2 对大鼠棉球肉芽肿形成的影响［5］ 大鼠 70 只，按体质量
随机分为空白对照组( 给予等容积蒸馏水) ，阳性对照组( 给予醋
酸泼尼松 25 mg /kg) ，三叶青藤石油醚浸膏组、二氯甲烷浸膏组、
乙酸乙酯浸膏组、正丁醇浸膏组和水层浸膏组( 各组均给予相当
于生药量 4． 5 g /kg) ，每组 5 只，腹腔注射 10%水合氯醛( 0． 3 ml /
100g) 进行麻醉，胸部皮肤切口，将已高压灭菌的 20 mg小棉球植
入大鼠腋窝皮下，左右各 1 个，缝合皮肤后消毒。手术第 2 天灌
胃给药，连续给药 7 d，第 8 天脱臼处死大鼠，取出小棉球 ，剔除
其上脂肪组织，在 60 ℃真空干燥箱中干燥至质量不变，称质量，
减去原小棉球的重量即为肉芽肿质量，以 mg( 肉芽肿) /100 g 体
质量表示。数据的统计分析运用 EXCEL 软件的数据分析功能，
数据结果以 珋x ± s表示，不同组间均数比较采用 t检验。
实验结果表明，正丁醇浸膏组和水层浸膏组均能显著抑制大
鼠棉球肉芽肿的形成。结果见表 2。
表 1 三叶青藤各极性提取部位对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 ( 珋x
± s)
组别 剂量 /mg·kg －1 吸光度 /A 抑制率( % )
正常对照组 0． 2436 ± 0． 0743 －
模型对照组 0． 8692 ± 0． 0876＊＊ －
醋酸泼尼松组 25． 0 0． 5376 ± 0． 0931＊＊▲▲ 38． 15
石油醚浸膏组 9． 6 0． 8103 ± 0． 0664＊＊ 6． 78
二氯甲烷浸膏组 8． 5 0． 8758 ± 0． 0360＊＊ 0． 75
乙酸乙酯浸膏组 3． 0 0． 8224 ± 0． 0639＊＊ 5． 38
正丁醇浸膏组 22． 8 0． 5551 ± 0． 0741＊＊▲▲ 36． 13
水层浸膏组 84． 3 0． 5499 ± 0． 0479＊＊▲▲ 36． 73
与正常对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;与模型对照组比较，▲P
＜ 0． 05，▲▲P ＜ 0． 01; n = 10
表 2 三叶青藤各极性提取部位对大鼠棉球肉芽肿形成的影响 ( 珋x ±
s)
组别
剂量 /
mg·kg －1
肉芽肿质量 /
mg·( 100g) － 1
抑制率
( % )
空白对照组 29． 6739 ± 4． 3282 －
醋酸泼尼松组 25． 0 23． 6015 ± 3． 4256＊＊ 20． 46
石油醚浸膏组 9． 6 29． 3927 ± 3． 4009 0． 95
二氯甲烷浸膏组 8． 5 28． 4470 ± 3． 5942 4． 13
乙酸乙酯浸膏组 3． 0 28． 7394 ± 3． 2758 3． 15
正丁醇浸膏组 22． 8 24． 6159 ± 3． 6655* 17． 05
水层浸膏组 84． 3 23． 8850 ± 3． 6778＊＊ 19． 51
与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01; n = 10
3 讨论
三叶青藤为多年生草本植物，在广西壮族民间广泛用于风湿
性关节炎、跌打肿痛的治疗。民间主要应用的部位是地上部分的
茎和叶，但目前购买的原药材多为干燥茎。本研究以抗炎作用为
导向，对三叶青藤茎提取的不同溶剂极性部位进行了筛选。实验
表明，三叶青藤正丁醇浸膏和水层浸膏对急性炎症导致的毛细血
管通透性增高和慢性迟发性增殖性炎症所致的肉芽肿形成均有
明显的抑制作用。因此，我们将对三叶青藤正丁醇部位和水层部
位的化学成分开展进一步的研究工作。
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