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人血七药材的生药学鉴别



全 文 :华西药学杂志
W C J·P S 2010,25(2)∶138 ~ 140
基金项目:湖北省教育厅重点科研项目(编号 B200524024)
作者简介:朱海涛(1968—),男,湖北十堰,副教授,主要从事医院药学工作。Email:thz1261@ sohu. com
* 通信作者(Correspondent author),Email:jiyanchen@ sohu. com
人血七药材的生药学鉴别
朱海涛,王彦祥,陈 黎,袁胜浩,陈吉炎*
(郧阳医学院附属太和医院药学部,湖北 十堰 442000)
摘要:目的 制定人血七的质量标准。方法 采用性状鉴定、显微鉴定与理化鉴定的方法鉴别了人血七的根、茎、叶。结果
茎横切面中,皮层中部的细胞壁增厚,木化,中柱鞘纤维断续排列成环状,维管束外韧型;叶中无栅栏组织与海绵组织的分化;
粉末中特异薄壁细胞表面有斜向交错网状纹理;皮层的细胞壁增厚,木化。人血七甲醇提取液可与生物碱沉淀试剂反应产生
沉淀。结论 上述特征可作为人血七药材的鉴别依据。
关键词:人血七;人血草;性状鉴定;数码显微鉴定;理化鉴定
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2010)02 - 0138 - 03
Pharmacognostical study on Stylophorum lasiocarpum
ZHU Hai - tao,WANG Yan - xiang,CHEN Li,YUAN Sheng - hao,CHEN Ji - yan*
(Affiliated Taihe Hospital of Yunyang Medical College,Shiyan,Hubei,442000 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To provide the scientific basis for quality criteria of Stylophorum lasiocarpum.METHODS Macroscopic,
microscopic identification,physical and chemical identification were adopted. RESULTS In the transverse section of stem,cell which
in the middle of cortex was sclerosis and lignification and pericycle fibre was circle in interrupt;no cell differentiation was observed in
palisade parenchyma and spongy parenchyma of leaves;overlapping texture could be found in characteristic parenchyma cell,and the
cortex cell was sclerosis and lignification. CONCLUSION These characteristics can be used as the scientific basis for gruffs identifi-
cation of Stylophorum lasiocarpum(Oliv.)Fedde.
Key words:Stylophorum lasiocarpum;Macroscopic identification;Digital microscopic identification;Identification
CLC number:R284 Document code:A Article ID:1006 - 0103(2010)02 - 0138 - 03
人血七又名野人血草、大人血七、大金盆、野人
血、人血草,为罂粟科人血草属植物人血草 Stylopho-
rum lasiocarpum(Oliv.)Fedde 的带根全草,具有活
血散淤、止痛止血的功效,民间用于治疗跌打损伤、
外伤出血、月经不调等症,分布于陕西、湖北及四川
等地。研究表明:人血七的主要化学成分为四氢黄
连碱、血根碱、白屈菜红碱、黄连碱、别隐品碱、原阿
片碱等生物碱类化合物。目前,关于人血七的生药
学研究资料较少,也不完善[1 - 4]。为进一步开发利
用人血七资源,制定药材质量标准,特对其来源、药
材性状、显微和理化鉴别特征作了系统研究。
1 实验部分
1. 1 仪器与材料
TU -1901 型双光束紫外可见分光光度计(北京
普析通用仪器有限责任公司);YS2 - H 型光学显微
镜、E995 型数码相机(日本 Nikon)、ZF - 501 型多功
能紫外透射仪(上海顾村电光仪器厂)。人血七于
2007 年 8 月采自湖北省十堰市伏龙山,并鉴定为罂
粟科人血草属植物人血草 Stylophorum lasiocarpum
(Oliv.)Fedde。
1. 2 方法与结果
取人血七干燥全草,用水浸泡,待软化后分部位
做徒手切片,按常规方法制成人血七根、茎、叶、叶柄
的横切片。另取全草细粉制成粉末片。将制好的切
片置带有显微照相接口的显微镜下观察,连接数码
相机,拍摄显微图像,利用图像编辑软件对所摄图像
进行裁剪、拼接等处理。
1. 2. 1 性状特征 根茎为不规则长条形,表面棕褐
色,着生多数须根,断面不平坦,暗红棕色,显纤维
性。茎呈扁平状,稍扭曲,长 30 ~ 50 cm,直径约 5
mm,棕褐色,具纵直纹理,断面中空。叶多已皱缩破
碎,灰褐色或灰绿色;用水浸泡展平后完整叶为大头
羽状深裂,裂片 4 ~ 7 对,卵状长圆形或近镰刀状,长
3 ~ 8 cm,急尖,边缘生粗牙齿,下部裂片较小,顶生
裂片最大,顶生裂片卵形,长 7 ~ 10 cm,宽 5 ~ 8 cm,
叶柄长 7. 5 ~ 10. 0 cm。伞状聚伞花序;苞片狭卵
形;萼片卵形,急尖,被微柔毛;花瓣 4,倒卵形,长约
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2010.02.029
2 cm,黄色。蒴果细圆柱形,长 5 ~ 8 cm,直径约 5
mm,有短柔毛。气微,味苦。
1. 2. 2 显微特征 根(直径 0. 2 cm)横切面观,木
栓细胞类长方形,3 ~ 10 列,排列紧密;皮层较窄,细
胞类长圆形、类圆形;韧皮部狭窄成射线状,由数列
细胞组成;形成层不明显;木质部约占根的 1 /4(图
1)。茎(直径 0. 5 cm)横切面观,表皮细胞 1 列,类
圆形或类长圆形,外侧被有角质层及非腺毛;皮层较
宽,外侧细胞类圆形、类椭圆形,壁较薄,非木化;皮
层中部细胞类多角形,排列紧密,壁木质化增厚,厚
可达 5. 2 μm;靠近内侧,壁逐渐变薄;中柱鞘纤维
15 ~ 18 束断续排列成环状,纤维木化,直径13 ~ 45
μm;维管束外韧型,韧皮部狭窄,形成层明显;导管
圆形,直径可达 60 μm,木薄壁细胞非木化;髓部中
央呈空洞状;薄壁细胞中含淀粉粒(图 2)。
木栓层
皮层
韧皮部
木质部
100 滋m
图 1 人血七根的横切面图
Fig 1 The root transverse section of Stylophorum lasiocarpum
表皮
皮层
维管束
韧皮部
木质部
髓部
髓部空洞
B
100 滋m
表皮
皮层
纤维束
中柱鞘维管束
非腺毛
髓部空洞
1 mm
A
图 2 人血七茎横切面图(A)及局部图(B)
Fig 2 The Stem transverse section(A)and location(B)of Stylo-
phorum lasiocarpum
叶柄(直径 0. 45 cm)横切面呈半圆形;表皮细胞
类长圆形或类圆形,1 列,外侧被有非腺毛;下皮细胞
1列,与表皮相似;皮层构造与茎的皮层类似。维管
束大小相间,呈 V 形断续排列,中柱鞘纤维束木化。
形成层明显;木薄壁细胞非木化;髓部中空(图 3)。
非腺毛
表皮
皮层
中柱鞘纤维束
维管束
髓部
髓部空洞
A
韧皮部
木质部
皮层
中柱鞘纤维束
髓部
B
0.5 mm 100 滋m
图 3 人血七叶柄横切面图(A)及局部图(B)
Fig 3 The petiole transverse section(A)and location(B)of Stylo-
phorum lasiocarpum
叶(过主脉)横切面观,外被覆角质层;上、下表
皮各为 1 列,上表皮细胞较下表皮细胞略大,类圆
形、类长圆形;无栅栏组织、海绵组织分化;维管束呈
V字形排列;韧皮部外韧型;中央具髓部组织或为空
洞(图 4A)。叶表面制片观,上表皮细胞垂周壁波
状弯曲,下表皮细胞不规则形,较上表皮细胞稍小,
垂周壁波状弯曲,有较多不定式气孔分布,副卫细胞
4 ~ 6 个(图 4B)。
上表皮
表本薄壁组织
下表皮
非腺毛
气孔
厚角组织
维管束
200 滋m
A B
图 4 人血七叶(过主脉)横切面图(A)及叶下表皮显微图(B)
Fig 4 The leaf transverse section(A)and location(B)of Stylopho-
rum lasiocarpum
粉末绿褐色,皮层细胞木化,细胞壁增厚。非腺
毛多,有两种,一种长 0. 5 ~ 1. 2 mm,由数个细胞组
成,细胞细长;一种长 1. 1 ~ 1. 5 mm,由 12 ~ 17 细胞
组成,细胞粗短。特异薄壁细胞非木化,壁较一般细
胞稍厚,2. 6 ~ 3. 0 μm,表面有细微的斜向交错网状
纹理。花粉粒体椭圆形,长 40 ~ 60 μm,高 39 ~ 52
μm,表面有细密颗粒状纹理;气囊类圆形,分列于体
的两侧;纤维木化或非木化,直径 17. 2 ~ 40 μm,壁
厚 10. 4 ~ 20 μm;木栓细胞类多角形;不定式气孔,
副卫细胞 4 ~ 6 个(图 5)。
1
2
3
4
1
2
56
7
1.木化皮层细胞
2.非腺毛
3.特异薄壁细胞
4.花粉粒
5.纤维
6.木栓细胞
7.叶下表皮细胞(气孔)
图 5 人血七粉末特征图
Fig 5 The powder characterization of Stylophorum lasiocarpum
1. 2. 3 理化鉴别 取人血七粉末 3 份(各 0. 5 g),
分别加入甲醇、氯仿、石油醚各 10 mL,超声提取 30
min,过滤,滤液备用。取氯仿、石油醚提取液各 2
mL,水浴中加热,挥干溶剂,加入 2 mL 甲醇溶解。
分别取这两种溶液及甲醇提取液 0. 5 mL置试管中,
稀释 6 倍。分别滴加碘化铋钾、碘化汞钾、碘 -碘化
钾试液 2 ~ 3 滴。结果显示:加碘化铋钾试液的都产
931第 2 期 朱海涛,等。人血七药材的生药学鉴别
华西药学杂志
W C J·P S 2010,25(2)∶140 ~ 143
生了橙红色沉淀,加碘化汞钾试液的产生白色沉淀,
加碘 -碘化钾试液的产生棕红色沉淀。吸取人血七
甲醇、氯仿、石油醚提取液各 10 μL,分别点于同一
以 0. 5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板
上,以氯仿 -甲醇(9∶1)为展开剂,用浓氨水饱和
30 min,展开、取出、晾干。置日光灯和荧光灯下观
察,再喷碘化铋钾试液显色,置紫外灯(365 nm)下
观察(图 6)。
绿色
黄色
橘红色
浅黄色
绿色
浅绿色
橘红色
橙黄色
1 2 3 1 2 3 1 2 3
目光下观察 荧光观察 碘化铋钾试液显色
1.甲醇提取液
2.氯仿提取液
3.石油醚
图 6 人血七薄层色谱图
Fig 6 TLC of Stylophorum lasiocarpum
2 讨论
人血七药材茎的横切面中,皮层中部细胞类多
角形,壁增厚,木化,中柱鞘纤维束断续排列成环状。
叶无栅栏组织与海绵组织的分化。粉末中特异薄壁
细胞表面有细微的斜向交错网状纹理。人血七甲醇
提取液与生物碱沉淀试剂反应产生沉淀。通过这些
典型的显微特征,结合性状特征和薄层色谱鉴别,可
以准确地鉴定人血七的真伪。作者尝试将数码显微
成像技术应用于人血七的显微鉴定,结果表明:数码
成像的显微图比人工绘制的墨线图能更真实、更直
观地反映药材的显微构造,避免了因理解不同或绘
图误差造成的失真;同时,也大大减轻了工作量,加
快了鉴定的速度,更适合作为中药材显微鉴别的
依据。
参考文献:
[1] 中华本草编委会. 中华本草[M].第 9 卷.上海:上海科学技
术出版社,1999:672.
[2] 朱海涛,涂自良,王振芬,等.武当山“七类药”资源整理[J].
时珍国医国药,2007,18(3):564 - 567.
[3] 傅书遐. 湖北植物志(二)[M].武汉:湖北科学技术出版社,
2002:3.
[4] 朱海涛,陈吉炎,陈黎.人血草的显微鉴定[J].中药材,2009,
32(4):505 - 507.
收稿日期:2009 - 09 - 10
基金项目:国家药典委员会 2010 版药典川贝母(瓦布贝母)质量标准研究(编号:Y2 - 248 付);川贝母种植恢复重建关键技术研究与示范(编
号:2009BAI84B02);国家十五重大科技专项(编号:2001BA701A54)
作者简介:李庆,男,江西新余,正攻读生药学专业的硕士学位。Email:liqqin2008006@ sina. com
* 通信作者(Correspondent author),Email:suwang571@ 126. com
川贝母复合群之间的分子生物学亲缘关系的探讨
李 庆1,陈 新2,王 曙1*
(1.四川大学华西药学院,四川 成都 610041;2.成都中医药大学,四川 成都 611137)
摘要:目的 探讨川贝母复合群之间的分子生物学亲缘关系。方法 从 40 个随机单引物里,筛选出 1 个合适的引物,对各样
品进行 RAPD扩增,同时用亲缘关系较远的浙贝母加以比对,用所得图谱分析和归纳川贝母复合群之间的亲缘关系。结果
在遗传距离为 0. 65 处,可将所有贝母分为 4 大类,与形态分类学结果比较吻合;野生瓦布贝母与栽培瓦布贝母的扩增图谱十
分接近;瓦布贝母居于川贝母复合群之间,与川贝母、暗紫贝母和康定贝母亲缘关系更加接近;川贝母 2、康定贝母 4 及梭沙贝
母产生了等级上的变动。结论 利用 DNA指纹图谱探讨川贝母复合群之间分子生物学的亲缘关系,对川贝母基源植物分类
提出了新的观点。
关键词:川贝母复合群;浙贝母;RAPD;聚类分析;亲缘关系
中图分类号:R28 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2010)02 - 0140 - 04
Study on the relative in molecular biology among Fritillariae of Sichuan species
LI Qing1,CHEN Xin2,WANG Shu1*
(1. West China School of Pharmacy,Sichuan University,Chengdu,Sichuan,610041 P. R. China;2. Chengdu University of Traditional
Chinese Medicine,Chengdu,Sichuan,611137 P. R. China)