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人血草质量标准研究



全 文 :中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
人血草质量标准研究
朱靖静 杨 进 邹 坤 * 汪鋆植 张红艳 周 媛 郭志勇
天然产物研究与利用湖北省重点实验室 (三峡大学), 湖北 宜昌 443002
【摘 要】: 目的: 研究药材人血草的显微特征、 理化鉴别、 水分、 总灰分、 酸不溶性灰分、 醇溶性浸出物, 为制定人血草药材的质量
标准提供依据。 方法: 采用 2005 年版 《中国药典》 规定方法。 结果: 人血草显微特征: 表皮细胞为多角形, 黄绿色, 垂周壁呈念珠状增
厚。 理化鉴别结果: 人血草药材醇提取物与生物碱试剂碘化铋钾反应生成桔红色沉淀; 与碘-碘化钾试剂反应生成棕红色沉淀; 与硅钨酸,
反应生成灰白色沉淀。 水分测定结果: 人血草药材水分的平均含量为 7.74%; 人血草药材的总灰分平均含量为 12.24%, 酸不溶性灰分的平
均含量为 0.49%; 人血草药材的醇溶性浸出物平均含量为 12.88%。 结论: 以上人血草药材的显微特征具有显微鉴定的意义; 生物碱特征显
色反应可作为人血草理化鉴定指标; 建议其质量标准分别控制为: 水分含量≤10.00%; 总灰分含量≤15.00%, 酸不溶性灰分含量≤1.00%;
乙醇浸提物浓度≥11.00%。
【关键词】: 人血草; 显微鉴别; 理化鉴别; 水分测定; 灰分测定; 浸出物测定
【中图分类号】 R284.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007-8517 (2009) 15-0022-03
Study of Quality Criteria on Stylophorum lasiocarpum (Oliv.) Fedde
Zhu Jing-jing, Yang Jing, Zou Kun*, Wang Jun-zhi, Zhang Hong-yan, Zhou Yuan, Guo Zhi-yong
(Hubei Key Laboratory of Natural Products Research and Development, China Three Gorges University, Yichang 443002, China)
Abstract: Objective: Studied microscopic identification, physical and chemical identification, contents of water, total ash, acid-insoluble ash and
alcohol-soluble extracts of Stylophorum lasiocarpum (Oliv.) Fedde, which provide data for the establishment of quality standard of Stylophorum lasio -
carpum (Oliv.) Fedde. Methods All methods were based on results of Pharmacopoeia of the Peoples Republic of China (2005 Edit) . Results The
microscopic observation on drug samples showed that cells of epidermis were multangular and color was green, around which the droop walls were
moniliform and incrassate. The extract of crude drug showed positive coloration reaction with Drogendorff reagent. The average content of water, total
ash, acid-insoluble ash, alcoholic extract were determined as 7.74%, 12.24%, 0.49%, 12.88%, respectively. Conclusion Based on the experimental re -
sults in this paper, the quality standard of the titled crude drug was suggested as following: microscopic characteristics were shown as above; alcoholic
extract show positive coloration with Drogendorff Reagent; the content of water is less than 10.00%; the content of total ash is less than 15.00%; the
content of acid-insoluble ash is less than 1.00%; the content of alcoholic extract is more than 11.00%.
Key words: Stylophorum lasiocarpum (Oliv.) Fedde; Alcoholic extract content; Microscopic identification; Physical and chemical identification;
Water content; Ash content; Extract content
人血草 Stylophorum lasiocarpum (Oliv.) Fedde 为多
年生草本罂粟科植物, 主要生长在湖北省巴东、 宜昌、 兴
山、 神农架、 竹溪。 生长在海拔 600~1800 m 的山坡林下
草丛中或沟边。 在四川东部、 陕西南部及甘肃东南部产有
四川人血草 Stylophorum sutchuense (Franch.) Fedde, 它与
人血草的主要区别在于: 叶片羽状深裂或全裂, 花茎 1 个,
不分枝, 花数朵排成顶生三形状。 民间药材人血草的药用
部位为全草, 可以治崩漏, 并有调经补血功效; 叶嚼碎敷
用, 治外伤出血; 全草煎水可洗治疮毒 [1-3]。
人血草作为民间药在湖北省及周边民间应用历史悠久,
范围广泛, 流通饮片较多, 但是有关药材人血草的显微特
征、 理化鉴别、 水分、 总灰分、 酸不溶性灰分、 浸出物等
质量标准方面的研究未见报道。 我们对人血草的显微形态
以及化学鉴别进行了研究, 另外对不同产地的人血草的水
分、 总灰分、 酸不溶性灰分、 醇浸出物等方面的质量进行
了分析。 以便在此基础上提出人血草药材质量的建议标准。
1 实验材料
实验用药材为罂粟科植物人血草 Stylophorum lasio-
药 物 研 究
The medicine study22· ·
中国民族民间医药
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carpum (Oliv.) Fedde, 分别采自于湖北省恩施、 神农架、 长
阳、 五峰等地, 秋季采挖, 洗净干燥。 经三峡大学化学与
生命科学学院杨进副教授鉴定, 原植物及药材标本现保存
于三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室。 其中
抱石莲 (采自恩施太庙) 标本号为: WF521; 抱石莲 (采
自神农架松柏) 标本号为: WF522; 抱石莲 (采自长阳乐
园 ) 标本号 : WF523; 抱石莲 (采自五峰后河 ) 标本号 :
WF524; 抱石莲 (采自恩施福宝山) 标本号为: WF525。
显微镜及图像分析系统: 德国莱卡仪器有限公司, 型
号 : DMR; 自动轮转切片机 : 德国美康公司 , 型号 :
HM340E。
所用试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 显微特征
采用石蜡切片和粉末制片的方法。
2.2 理化鉴别
有报道自欧洲产人血草醇浸提物中分离得到了土根碱、
血根碱等生物碱成分 [4], 故采用碘化铋钾、 硅钨酸、 碘-碘
化钾等生物碱试剂进行鉴别。
2.3 水分含量的测定 [5]
在自然干燥条件下, 水分测定按照 2005 年版 《中国药
典》 附录Ⅸ H 水分测定法第一法测定。
2.4 灰分的测定 [5]
2.4.1 总灰分
总灰分测定按照 2005 年版 《中国药典》 附录Ⅸ K 总灰
分测定法测定。
粉碎供试品, 过四号筛, 混合均匀后, 取供试品 3~5
g, 置炽灼至恒重的坩埚中, 称定重量 (准确至 0.01g), 缓
缓炽热, 至完全炭化时, 逐渐升高温度至 600℃, 使完全灰
化并至恒重。 根据残渣重量, 计算供试品中总灰分的含量
(%)。
2.4.2 酸不溶性灰分
酸不溶性灰分测定按照 2005 年版 《中国药典》 附录Ⅸ K
酸不溶性灰分测定法测定。
取 2.4.1 中所得的灰分, 在坩埚中加入稀盐酸约 10mL,
用表面皿覆盖坩埚, 置水浴上加热 10min, 表面皿用 5mL
热水冲洗, 洗液并入坩埚中, 用无灰滤纸滤过, 坩埚内的
残渣用水洗于滤纸上, 并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。
滤渣连同滤纸移至同一坩埚中, 干燥, 炽灼至恒重。 根据
残渣重量, 计算供试品中酸不溶性灰分的含量 (%)。
2.5 醇浸出物的含量测定
醇溶性浸出物的测定按照 2005 年版 《中国药典》 附录
Ⅹ A 浸出物测定法中的热浸法测定。
取供试品 2~4g (过四号筛), 准确称取, 置 100~250mL
的锥形瓶中 , 准确加入 50~100mL 50%乙醇 , 密塞 , 称
重, 静置 1h 后, 连接回流冷凝管, 加热至沸腾, 并保持微
沸 1h。 放冷后, 取下锥形瓶, 密塞, 再称重, 用 50%乙醇
补足减失的重量, 摇匀, 用干燥滤器滤过。 准确量取滤液
25.00mL, 置已干燥至恒重的蒸发皿中, 在水浴上蒸干后,
于 105℃干燥 3h, 移置干燥器中, 冷却 30min, 迅速准确称
重, 以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物百分含量 (%)。
3 实验结果
3.1 显微特征
药材人血草的显微特征结果见图 1 和图 2。
3.2 理化鉴别
由于人血草药用全草, 5%HCl-乙醇溶液提取液颜色较
深, 干扰反应现象的观察, 故将提取液进一步稀释, 稀释
图 2 人血草粉末详图 (40×)
图 1 人血草横切面简图 (40×)
1.人血草叶横切面 2. 人血草茎横切面
1.表皮细胞 2.纤维 3.导管
4.薄壁细胞 5.淀粉粒 6.非腺毛
7.腺毛 8.气孔 9.草酸钙晶体
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表 1 人血草质量标准研究结果
编号 来源
水分
(%)
总灰分
(%)
酸不溶性
灰分 (%)
醇浸出物
(%)
1 恩施 (太山庙) 7.41 12.97 0.42 12.31
3 长阳 (乐园) 7.87 11.35 0.49 13.57
2 神农架 (松柏) 7.69 13.15 0.53 12.84
4 五峰 (后河) 7.55 13.08 0.54 13.47
5 恩施 (福宝山) 8.16 10.64 0.45 12.19
后又有沉淀产生, 因此再次过滤。 取稀释一倍后过滤得到
的供试品溶液 1mL, 加入碘化铋钾试剂 (BiI3·KI), 反应生
成桔红色沉淀; 取上述供试品溶液 1 mL, 加入碘-碘化钾
试剂 (I2·KI), 反应生成棕红色沉淀 ; 取上述供试品溶液
1mL, 加入硅钨酸试剂 (SiO2·I2WO3), 反应生成灰白色沉
淀。
3.3 水分含量、 灰分以及醇浸出物测定
药材人血草的水分含量、 总灰分、 酸不溶性灰分、 醇
浸出物测定结果见表 1。
4 结果分析
4.1 显微特征
根茎为不规则的长条形, 表面凸凹不平, 棕褐色, 着
生多数须根, 断面不平坦, 暗红棕色, 有纤维性。 茎稍扭
曲, 扁平状, 棕色或棕褐色, 具纵直纹理, 断面中空。 叶
多皱缩破碎, 灰褐色或灰绿色, 完整的叶展开后呈大头羽
状深裂。
人血草粉末为墨绿色, 有香气, 表皮细胞为多角形 ,
黄绿色, 垂周壁呈念珠状增厚, 是本品的显著特征。 腺毛:
3~9 个细胞, 顶端细胞类球形。 非腺毛: 4~8 个细胞, 顶端
细胞狭长。 纤维: 狭长, 直径为 2~10μm。 导管: 多为螺旋
纹或环纹, 可见梯纹和网纹, 直径为 6~65μm。 薄壁细胞中
可见直径为 20~39μm 的圆形的排列较紧密浅黄色颗粒。 淀
粉粒呈球形, 直径 4~8μm。 草酸钙晶体呈不规则状, 早春
采摘的药材粉末中可见花粉粒, 因检出率低, 不作鉴别特
征。 表面制片可见气孔、 腺毛、 非腺毛, 因表面制片不易
撕裂得到较大面积的透明表面, 不作鉴别特征。
4.2 理化鉴别
试验结果表明, 人血草 5%HCl-乙醇溶液提取液, 与碘
化铋钾试剂 (BiI3·KI), 反应生成桔红色沉淀; 与碘-碘化钾
试剂 (I2·KI), 反应生成棕红色沉淀; 与硅钨酸试剂 (SiO2·
I2WO3), 反应生成灰白色沉淀。 说明药材人血草中含有生
物碱类物质。
4.3 水分含量
药材人血草 5 个测试样品中 , 水分含量最高的为
8.16%, 最低的为 7.41%, 平均值为 7.74%, 最高和最低的
含量相差 0.75%。 根据上述实验结果的分析, 笔者认为药材
人血草加工时应充分干燥, 储藏时也应充分保持干燥, 含
水量以不得超过 10.00%为宜。
4.4 总灰分
药材人血草的总灰分测定中 , 总灰分量最高的为
13.15%, 最低的为 10.64%, 平均值为 12.24%, 最高总灰分
量和最低总灰分量相差 2.51%。 根据上述实验结果分析, 笔
者建议药材人血草在制定质量标准时总灰分不得大于
15.00%。
4.5 酸不溶性灰分
药材人血草的酸不溶性灰分测定中, 最高的为 0.54%,
最低的为 0.42%, 平均值为 0.49%, 最高酸不溶性灰分量和
最低酸不溶性灰分量相差 0.12%。 根据实验结果分析, 笔者
建议药材人血草在制定质量标准时酸不溶性灰分不得高于
1.00%。
4.6 乙醇浸出物
本品含有的土根碱、 血根碱等生物碱成分自乙酸乙酯
部位分离 [4]。 因此选用了 95%的乙醇浓度。 乙醇浸出物最
高浓度为 13.57%, 乙醇浓度浸出物最低浓度为 12.19%, 平
均含量为 12.88%, 药材人血草的醇浸出物最高含量和最低
含量相差 1.38%。 根据上述实验结果分析, 笔者认为药材人
血草在制定质量标准时, 乙醇浸提物浓度不得少于 11.00%。
5 讨论
通过本次实验得出以下结论: 人血草显微鉴别特征为
表皮细胞多角形, 黄绿色, 垂周壁呈念珠状增厚, 这些显
微特征具有显微鉴定的意义; 生物碱的特征显色反应可作
为人血草理化鉴定指标; 建议药材人血草的质量标准分别
控制为: 水分含量≤10.00%, 总灰分含量≤15.00%, 酸不
溶性灰分含量≤1.00%, 乙醇浸提物浓度≥11.00%。
参考文献
[1] 方志先, 廖朝林.湖北恩施药用植物志 (上) [M] .武汉: 湖北科学技术出
版社, 2006: 383.
[2] 中国科学院植物研究所编 . 中国高等植物图鉴 (2) .科学出版社 ,
2002, 1.
[3] 谢宗万 . 全国中草药汇编 (第二版 ) 下册 [M] .人民卫生出版社 ,
1996: 30.
[4] Slavik, Jiri Hanus, Vladimir, et al. Alkaloids from Stylophorum lasiocarpum
(Oliv.) Fedde. Collection of Czechoslovak Chemical Communications, 1991, 56
(5): 1116-1122.
[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典 2005 年版一部 [S] .化学工业出版
社, 2005. (收稿日期: 2009.6.14)
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