全 文 ：三叶青提取物抗炎 、镇痛及解热作用的实验研究
黄　真1 ,毛庆秋1 ,魏佳平2
(1 浙江中医学院药学系 ,杭州 310053;2浙江省中医院 ,杭州 310009)
　　[ 摘要] 　目的:探讨三叶青提取物(ERT)的抗炎 、镇痛及解热作用 , 并验证其相关功效。方法:以小鼠腹腔毛细
血管通透法 、小鼠耳肿胀法及大鼠足肿胀法观察其抗炎作用;以小鼠扭体法 、热板法观察其镇痛作用;以干酵母致
热法及2 , 4-二硝基苯酚致热法观察其解热作用。结果:三叶青提取物能明显抑制小鼠腹腔毛细血管炎性渗出 , 抑
制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀及 10%蛋清致大鼠足跖肿胀;减少醋酸致小鼠扭体次数 , 提高热板法小鼠痛阈值;并降
低干酵母和 2 , 4-二硝基苯酚致大鼠发热模型的体温。结论:三叶青提取物具有较好的抗炎 、镇痛及解热作用 ,与其
相关的中医临床功效及主治相符。
[ 关键词] 　三叶青提取物;抗炎;镇痛;解热
[ 中图分类号] R285.5;R289.5　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1003-3734(2005)07-0861-04
Evaluation of anti-inflammatory , analgesic and antipyretic
actions for the extracts from Radix Tetrastigmae
HUANG Zhen
1 ,MAO Qing-qiu1 ,WEI Jia-ping2
(1 Department of Pharmacy , Zhejiang College of Traditional Chinese Medicine ,Hangzhou 310053 , China;
2 Zhejiang Hospital of Traditional Chinese Medical , Hangzhou 310009 , China)
[ Abstract] 　Objective:To study the anti-inflammatory , analgesic and antipyretic actions of the extracts
of Radix Tetrastigmae(ERT).Methods:The anti-inflammatory action was assessed by several tests including
HAc-induced peritoneal capillary permeability in mice , xylene-induced ear edema in mice and albumin-
induced paw edema in rats.The analgesic effect was verified by HAc-induced writhing response in mice and
hot-plate test.The antipyretic action was monitored by dried yeast-induced and 2 , 4-dinitrophenol-induced
pyrexia.Results:The ERT significantly inhibited the phlogistic infiltration in mice , and improved the ear
edema in mice and the paw edema in rats.The ERT mice showed fewer writhes of abdominal cavity , and
increased the pain threshold in the hot-plate test.The fever induced by dried yeast and 2 ,4-dinitrophenol was
reduced by the ERT.Conclusion:ERT has anti-inflammatory , analgesic and antipyretic actions , which is
coincident with the clinical indications of Radix Tetrastigmae in the viewpoints of the Chinese Traditional
Medicine.
[ Key words] 　extract of Radix Tetrastigmae;anti-inflammatory;analgesic;antipyretic
　　三叶青(Radix Tetrastigmae)为葡萄科植物三叶
崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)的干燥
块根 ,分布于我国浙江 、江西 、福建 、台湾 、湖北 、广
东 、广西 、四川 、贵州 、云南等省区[ 1] ,具有清热解毒 、
祛风化痰 、活血止痛的功能 ,临床用于治疗高热惊
厥 、腹痛 、肺炎 、哮喘 、肝炎等症[ 2] ,但未见现代药理
研究报道。本实验对三叶青提取物在抗炎 、镇痛及
解热等方面进行了药理学实验研究 ,为其临床应用
提供了实验依据 。
材料和方法
1　材料
1.1　药物和试剂
三叶青干品 ,购于浙江省中医院中药房 ,经浙江
中医学院资源鉴定教研室鉴定。三叶青提取物
(Extract of Radix Tetrastigmae ,ERT)的制备:将1 000 g
药材常规加工粉碎后过 20 目筛 ,用水回流提取 2
次 ,用旋转蒸发仪浓缩至相当于含生药 0.16 g·
mL
-1 ,置冰箱备用 。伊文思兰(进口分装 ,国药集团
化学试剂有限公司 ,批号 F20040213);二甲苯(分析
纯 ,江苏三木集团化工厂产品 ,批号 20000410);醋酸
(分析纯 , 浙江杭州化学试剂有限公司 , 批号
20040607);阿司匹林肠溶片(南京白敬宇制药有限
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　Chinese Journal of New Drugs 2005, Vol.14 No.7 中国新药杂志 2005年第 14卷第 7期　
责任公司 ,批号:040622);罗通定片(广东省博罗先
峰药业集团有限公司 ,批号:030601);干酵母(浙江
省富阳市杭富生物制品厂 ,批号:050121);2 ,4-二硝
基苯酚(上海试剂三厂 ,批号 950920)。
1.2　动物
昆明种小鼠 , 18 ～ 22 g , 雌雄兼用;SD 大鼠
180 ～ 200 g ,雌雄兼用。均由浙江中医学院实验动
物中心提供。
1.3　仪器
721型分光光度计(四川分析仪器厂产品);
GJ-8402型热板测痛仪[电压220V ,功率150W ,温度
(55±0.2)℃,浙江宁海白石电子医药仪器厂产品] ;
RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);半导
体体温表(上海医用仪表厂);TG-328型电子分析
天平(上海天平仪器厂);排水法测定鼠爪体积装置
(自制);TDZ5-WS低速自动平衡离心机(湖南赛特
湘仪离心机仪器有限公司)。
2　方法
2.1　ERT的抗炎作用[ 3]
2.1.1　ERT 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响　
取小鼠50只 ,雌雄各半 ,随机均分 5组 。空白对照
组给同剂量的生理氯化钠溶液(NS), ERT 高中低剂
量3组(4.8 ,2.4 , 1.2 g·kg-1)、阳性药组(阿司匹林
100 mg·kg-1)。各组均 ig 给药 , qd ,连续 4 d。于末
次给药后 1 h ,每组每只小鼠依次自尾静脉注射 5%
伊文思兰 0.1 mL·10g-1 ,同时腹腔注射0.6%醋酸溶
液0.2 mL。30 min后断头处死小鼠 ,剖开腹腔 ,每次
用5 mL 生理氯化钠溶液冲洗腹腔 ,共 3次 ,用吸管
吸取腹腔洗出液 ,离心 5 min(3 000r·min-1),取上清
液 , 721型分光光度计 590 nm测吸收度。
2.1.2　ERT 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响　
取小鼠50只 ,雌雄各半 ,随机均分 5组 ,分组情况同
2.1.1。各组均 ig 给药 ,qd ,连续4 d。于末次给药后
1 h , 各组小鼠右耳廓两面均匀涂抹二甲苯(每只
0.05 mL),4 h后脱颈椎处死小鼠 ,沿耳廓边缘剪下
左 、右两耳 ,用 8 mm打孔器在两耳相同部位取下耳
片 ,电子分析天平称重 ,用右耳片重量减去左耳片重
量 ,即得到肿胀净值 ,并计算耳肿抑制率 。
2.1.3　ERT对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响　取
雌雄大鼠 50只 ,随机均分 5 组 ,分组情况同 2.1.1。
各组均 ig 给药 ,qd ,连续 4 d。于实验当日先用排水
法测定鼠爪体积装置测量每只大鼠右后足跖正常体
积 ,给药后 60 min ,予每只大鼠右后足跖(右后足掌
心向踝关节方向)sc10%蛋清 0.1 mL。分别测量给
药后 1 ,2 , 3及 4 h 大鼠右后足跖体积 ,用致炎后体
积减去正常体积所得差值 ,即为各时间段足跖肿胀
净值。
2.2　ERT的镇痛作用[ 4]
2.2.1　扭体法　取雌雄各半小鼠 50只 ,随机均分 5
组 。分别为空白对照组(NS)、ERT 高中低剂量 3组
(4.8 ,2.4 , 1.2 g·kg-1)、阳性药组(罗通定 50 mg·
kg
-1)。各组均 ig 给药 ,qd ,连续 3 d。于末次给药后
1 h ,各组小鼠均 ip0.6%醋酸溶液 0.2 mL ,记录自注
射醋酸致痛后每只小鼠在 20 min 内出现的扭体反
应次数 ,结果作组间比较 ,并计算镇痛率。
2.2.2　热板法　取雌性小鼠若干 ,于正式实验前先
逐只用热板测痛仪进行筛选。筛选时每次取小鼠 1
只 ,记录自放入测痛仪中至出现舔后足所需时间
(s),以此作为该小鼠给药前痛阈值 ,凡是5 s内出现
舔后足或 30 s内不出现舔后足者弃之不用。将预
选合格的小鼠作正式实验 ,每组 10只 ,共 5组 ,分组
情况同 2.2.1。各组均 ig 给药 ,于给药后每隔 30
min测定各组小鼠痛阈值 ,连续测 3 次 。超过 60 s
者则按 60 s计算 。
2.3　ERT的解热作用[ 5]
2.3.1　ERT 对干酵母致热实验的影响　取雌雄大
鼠若干 ,预测体温 3 d ,bid。实验当日测定大鼠基础
体温 ,筛选体温波动小者为实验用大鼠 ,用 20%酵
母混悬 10 mg·kg-1注入大鼠背部皮下 ,6 h后测量肛
温 ,凡直肠温度上升不到 0.8℃的大鼠剔除不用 ,取
合格大鼠 50 只分为 5组 ,空白对照组(NS)、ERT 3
组(4.8 , 2.4 , 1.2 g·kg-1)、阳性药组(阿司匹林 100
mg·kg-1),均 ig 给药 ,于给药后每隔 60 min测定各
组大鼠肛温 ,连续测 3次 。
2.3.2　ERT 对 2 , 4-二硝基苯酚致热实验的影响　
取雌雄大鼠 50只 ,预测体温 3 d , bid。实验当日测
定大鼠基础体温 ,筛选体温波动小者为实验用大鼠。
随机均分5组 ,分组情况同 2.3.1 ,均 ig给药 。灌胃
给药后 60 min ,于背部皮下注射 2 ,4-二硝基苯酚 10
mL·kg-1(160 mg·kg-1)致热 ,每隔 30 min测量大鼠
体温1次 ,连续测定 3 h。
3　实验数据处理
镇痛 、抗炎及解热各实验结果数据均采用 x ±s
表示。结果统计均采用 SPSS10.0统计软件进行 。
结　　果
1　对小鼠 、大鼠急性炎症反应的影响
1.1　对毛细血管通透性的影响
结果表明 ,ERT 高 、中剂量组对小鼠毛细血管通
透性有显著的抑制作用 ,见表 1。
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　Chinese Journal of New Drugs 2005, Vol.14 No.7 中国新药杂志 2005年第 14卷第 7期　
表 1　ERT对 HAc致小鼠腹腔毛细
血管通透性的影响　 x±s , n=10
　组　别 剂量 g·kg -1 吸收度 抑制率 %
空白对照 - 0.073±0.01 -
ERT 4.8 0.042±0.015c 42.5
2.4 0.059±0.013a 19.2
1.2 0.068±0.014 6.8
阿司匹林 0.1 0.043±0.022b 41.1
　　与对照组比较 , a:P<0.05, b:P<0.01 , c:P<0.001(下同)
1.2　对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
结果表明 ,ERT 各剂量组可明显抑制二甲苯所
致小鼠耳廓急性炎症性水肿 ,与空白对照组比较差
异显著 。提示 ERT 对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明
显抑制作用 ,见表 2。
表 2　ERT对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响　 x±s , n=10
　组　别 剂量 g·kg -1 肿胀度 mg 抑制率 %
空白对照 - 0.007 93±0.001 1 -
ERT 4.8 0.004 05±0.001 7c 48.9
2.4 0.005 8±0.001 4b 26.8
1.2 0.006 1±0.001 8a 23.1
阿司匹林 0.1 0.004 5±0.002 2c 43.3
1.3　对蛋清致大鼠足肿胀的影响
结果表明 ,在蛋清致大鼠足跖致炎 4 h 的不同
时间段内 ,ERT各剂量组均有抑制肿胀作用 ,与空白
对照组比较差异显著 ,提示 ERT 对蛋清致大鼠足肿
胀有显著抑制作用 ,见表 3。
表 3　ERT对蛋清致大鼠足肿胀实验的影响　 x±s , n=10
组别 剂量 g·kg -1
致炎后不同时间足跖肿胀度 mL
1h 2h 3h 4h
空白对照 - 1.05±0.186 1.02±0.26 0.94±0.18 0.74±0.19
ERT　　 4.8 0.78±0.27a 0.73±0.22a 0.61±0.21b 0.52±0.20a
2.4 0.76±0.19b 0.59±0.18b 0.44±0.16c 0.33±0.20b
1.2 1.02±0.15 0.88±0.20 0.65±0.22b 0.53±0.18a
阿司匹林 0.1 0.73±0.21b 0.65±0.16b 0.51±0.25b 0.50±0.16a
2　对小鼠疼痛反应的影响
2.1　对小鼠扭体反应的影响
结果表明 , ERT高 、中剂量组对醋酸所致小鼠扭
体次数与空白对照组比较明显减少 ,具有显著差异 。
提示药物对醋酸所致小鼠扭体反应有明显抑制作
用 ,见表 4。
表 4　ERT对醋酸所致小鼠扭体反应的影响　 x±s , n=10
　组　别 剂量 g·kg-1 扭体次数 抑制率 %
空白对照 - 42.4±18.8 -
ERT　　 4.8 20.6±11.9a 51.40
2.4 9.5±6.6c 77.67
1.2 26.3±14.2 37.97
罗通定 0.05 18.7±4.71b 55.89
2.2　对热板反应的影响
结果表明 ,ERT 各剂量组均能提高热致痛小鼠
的痛阈率 ,提示其可抵抗热致痛对小鼠的影响 ,并使
其痛感潜伏期明显延长 ,见表 5。
表 5　ERT对热刺激小鼠痛阈值的影响　 x ±s , n=10
组别 剂量 g·kg-1
基础痛
阈值 s
致炎后不同时间痛阈值 s
30 min 60 min 90 min
空白对照 - 17.68±3.36 19.30±3.10 21.30±3.90 21.80±4.20
ERT　　 4.8 16.23±3.18 22.48±4.27a 27.60±6.34a 31.90±8.71b
2.4 17.98±5.08 25.89±15.10 27.40±5.74 29.70±5.81a
1.2 18.54±5.38 25.35±4.23 30.01±12.5 30.01±11.2a
罗通定 0.05 15.45±1.25 25.69±2.80b 29.36±5.08b 31.90±5.10c
3　解热作用
3.1　对干酵母致热实验的影响
结果表明 ,ERT 高 、中剂量组能使酵母致热的大
鼠体温下降持续时间达 180 min;而低剂量组只有在
180 min时才体现降温作用。提示 ERT 对干酵母所
致大鼠高热有解热作用 ,见表 6。
表 6　ERT对干酵母致热实验的影响　 x ±s , n=10
组别 剂量 g·kg-1
致热6h与基
础体温差值 ℃
给药后不同时间与自身基础体温的差值 ℃
60 min 90 min 180 min
空白对照 - 1.65±0.21 1.71±0.50 1.83±0.4 1.69±0.35
ERT 4.8 1.4±0.16 0.82±0.79a 0.94±0.62a 0.70±0.34b
2.4 1.4±0.33 1.06±0.24a 0.94±0.70a 0.78±0.28b
1.2 1.53±0.18 1.56±0.18 1.42±0.52 1.21±0.71a
阿司匹林 0.1 1.46±0.4 1.09±0.29a 0.59±0.32b 0.51±0.48b
3.2　对 2 ,4-二硝基苯酚致热实验的影响
ERT高 、中剂量组能使 2 ,4-二硝基苯酚致热的大
鼠体温下降 ,持续时间达180 min之久;而低剂量组于
150 min后才体现明显的降温作用。提示ERT 对 2 ,4-
二硝基苯酚所致大鼠高热有解热作用 ,见表 7。
表 7　ERT对 2 ,4-二硝基苯酚致热实验的影响　 x ±s , n=10
组　　别 剂量 g·kg -1 致热后不同时间与自身基础体温的差值 ℃
30 min 60 min 90 min 120 min 150 min 180 min
空白对照 - 0.80±0.18 1.73±0.25 2.43±0.23 2.75±0.24 2.71±0.22 2.53±0.10
ERT 4.8 0.35±0.13b 1.02±0.18b 1.56±0.17b 2.01±0.09b 1.83±0.23c 1.56±0.17c
2.4 0.55±0.14a 1.27±0.34a 1.83±0.24b 2.23±0.13b 2.19±0.2b 1.82±0.31b
1.2 0.66±0.26 1.58±0.34 2.28±0.34 2.51±0.29 2.25±0.22a 1.86±0.29b
阿司匹林 0.1 0.31±0.14b 0.99±0.13b 1.47±0.18c 1.87±0.15c 1.72±0.13c 1.45±0.16c
讨　　论
各组 ERT 能明显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细
血管通透性 ,其中以 4.8 g·kg-1作用最明显(P <
0.001);对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀有明显的抑制
作用 ,与阿司匹林作用相似(P <0.001);ERT 还可
抑制大鼠蛋清性足肿胀 ,尤其在 2.4 g·kg-1作用显
著(P <0.001),优于阿司匹林。结果提示 ERT 对急
性炎症有明显的抑制作用。
ERT 各组对醋酸所致小鼠扭体次数较空白对照
组明显减少 , 其中 2.4 g·kg-1作用最明显(P <
0.001);同时 ERT 各组还能显著提高热板法小鼠痛
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　Chinese Journal of New Drugs 2005, Vol.14 No.7 中国新药杂志 2005年第 14卷第 7期　
阈值 ,提示 ERT 有明显的镇痛作用 。
ERT 各组能显著降低干酵母和 2 ,4-二硝基苯酚
引起的大鼠发热体温 ,4.8 g·kg-1及 2.4 g·kg-1持续
时间皆能达 180 min ,4.8 g·kg-1与阿司匹林组作用
相似(P <0.001),提示 ERT有明显的解热作用。
以上药理学实验研究表明 ,ERT 具有较强抗炎 、
镇痛及抗高热作用 ,为其临床应用提供了药理学依
据。但对该药有效成分及作用机制的探讨 ,则有待
于进一步的深入研究 。
[ 作者简介] 　黄真(1963-), 女 , 副教授 , 硕士生导师 , 研究
方向:中药新药研发。联系电话:(0571)86613576 , E-mail:
zhen626@yahoo.com.cn。
[ 参 考 文 献 ]
[ 1] 　中国医学科学院药物研究所.中药志(第二册)[ M] .北京:人民
卫生出版社 , 1984.219.
[ 2] 　江苏新医学院.中药大辞典[M] .上海:上海人民出版社 , 1977.
2123.
[ 3] 　陈奇.中药药理研究方法学[M] .北京:人民卫生出版社 , 1993.
305.
[ 4] 　李仪奎.中药药理实验方法学[ M] .上海:科学技术出版社 ,
1991.350.
[ 5] 　陈奇.中药药理研究方法学[M] .北京:人民卫生出版社 , 1996.
298-300.
(接受日期:2005-05-30)
甘辛鼻腔用喷雾剂对豚鼠超敏鼻炎的治疗作用＊
陈　文 ,刘清华 ,江发寿 ,冯书晓 ,姚新成
(石河子大学药学院 ,石河子 832002)
＊基金项目:新疆兵团医药研究专项基金(NKB02SDXNK30XY)
　　[ 摘要] 　目的:观察甘辛鼻腔用喷雾剂对豚鼠超敏性鼻炎的疗效。方法:采用甲苯-2-4-二异氰酸酯(TDI)诱导
豚鼠超敏性鼻炎反应模型 ,实验一选择 30 只模型动物随机分为 2 组 , 观察给药组和空白对照组豚鼠鼻黏膜组织的
病理变化。实验二选用健康豚鼠 50只 , 随机分为 5 组 ,其中 1 个组为健康受试组 ,另外 4 组通过 TDI 诱导造成豚鼠
超敏性鼻炎反应模型。以迪通鼻炎水(市售)为阳性药物 ,观察健康受试组 、给药组(高 、低剂量组 ,每次每侧用 10 , 5
μL , bid)、阳性对照组 、空白对照组的豚鼠鼻黏膜组织病理变化。结果:实验一中给药组与空白组相比豚鼠鼻黏膜上
皮下嗜酸性粒细胞 、淋巴细胞 、浆细胞浸润显著减少 ,腺体增生也显著减少(P<0.01)。 实验二中高 、低 2 个剂量组
均使豚鼠鼻黏膜上皮下嗜酸性粒细胞 、淋巴细胞 、浆细胞和嗜中性粒细胞显著减少 , 腺体增生和分泌亢进得到有效
的抑制 ,疗效与阳性对照组相似。结论:甘辛鼻腔用喷雾剂可有效抑制超敏反应过程 , 保护鼻黏膜。
　　[ 关键词] 　甘辛喷雾剂;豚鼠;超敏性鼻炎
[ 中图分类号] R285.5;R289.5　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1003-3734(2005)07-0864-03
Effects of Gan-xin nasal spray for
the relief of hypersensitive rhinitis in guinea pigs
CHEN Wen , LIU Qing-hua , JIANG Fa-shou ,FENG Shu-xiao , YAO Xin-cheng
(School of Pharmacy , Shihezi University , Shihezi 832002 , China)
[ Abstract] 　Objective:To evaluate the therapeutic effects of the Gan-xin nasal spray on hypersensitive
rhinitis in guinea pigs.Methods:The healthy guinea pigs were administered with toluene-2 , 4-diisocyanate
(TDI)to make a hypersensitive rhinitis model.Thirty guinea pigs with hypersensitive rhinitis were equally
randomized to receive either olive oil(5μL)or Gan-xin nasal sprays(7μL)twice daily for 8 days.The nasal
mucous pathological comparisons in both groups were conducted.Additional 50 healthy guinea pig were
randomly assigned to one of the five groups(10 each):healthy guinea pigs without the rhinitis given with olive
oil(5μL , normal control), guinea pigs with the hypersensitive rhinitis given with Gan-xin nasal sprays(5 or
10 μL)or DITONG nasal drops(10μL , positive control), or guinea pigs with the hypersensitive rhinitis given
with olive oil alone (5 μL , blank control).The nasal mucous tissues stationed in 10%neutral Formalin and
then stained with HE dyes were investigated by histopathological techniques.Results:The Gan-xin-treated
guinea pigs significantly reduced the eosinophil and neutrophil infiltration , compared with the olive oil-treated
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　Chinese Journal of New Drugs 2005, Vol.14 No.7 中国新药杂志 2005年第 14卷第 7期